Avaliaçăo das glicoproteínas plaquetárias na Síndrome de Bernard-Soulier e trombastenia de Glanzmann /

Orientador: José Zanis NetoCo-orientadora: Marister MalvezziInclui apęndiceDissertaçăo (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Cięncias da Saúde, Programa de Pós-Graduaçăo em Medicina Interna. Defesa: Curitiba, 2004Inclui bibliografi

Cooperación Universitaria y DDHH: formación en oficios para la democratización de derechos y el desarrollo de competencias laborales de las/os jóvenes en contexto de tránsito por el Sistema Penal

El objetivo de esta presentación es describir la experiencia del Proyecto de Cooperación -actualmente en curso- titulado “Formación en Oficios para la democratización de derechos y el desarrollo de competencias laborales de las/los jóvenes en contexto de tránsito por el Sistema Penal Juvenil” y desarrollado entre la Defensoría General de Lomas de Zamora, el Instituto de Justicia y Derechos Humanos Eduardo Duhalde y la Escuela de Oficios Felipe Vallese (UNLa). El objetivo principal del proyecto consiste en “Brindar Formación Profesional en Oficios, desde una perspectiva de inclusión y derechos humanos, para jóvenes en situación de tránsito por el sistema penal en la jurisdicción de Lomas de Zamora”. Para ello, se trabajó de forma articulada con el Área de Mediación y Justicia Restaurativa de Adultos, Jóvenes en Conflicto con la Ley e Inimputables del Departamento Judicial de Lomas de Zamora y, a través de diversas actividades informativas y de vinculación, se logró establecer lazos con las/los jóvenes que transitaban o habían transitado por los dispositivos de justicia restaurativa.Universidad Nacional de La Plat

Why not "do simple things in a simple way": Use of the Pap test as the first step in screening genetic stability for human cultured stem cell therapy?

The aim of this study was to analyze adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (AT-MSCs) using the Pap test as a first screening step to evaluate genetic stability. Human adipose tissue from six healthy female donors was obtained from elective liposuction procedures. The cells were isolated, cultivated at P2/P3, characterized by flow cytometric analysis, and differentiation induced. The AT-MSCs were stained by Papanicolaou staining and analyzed according to the Bethesda classification, and viability-apoptosis relationships were evaluated. The results of the Pap test for Sample I indicated high-grade alterations consistent with genetic instability; for Samples II-V, atypical cells of undetermined significance; and for Sample VI, normal cells. These results demonstrate the potential of using the Pap test as an initial screening step to evaluate the genetic stability of cultured AT-MSCs and also suggest its use for other adherent cells such as embryonic stem cells or induced pluripotent stem cells

Avaliação das glicoproteínas plaquetárias na síndrome de Bernard-Soulier e trombastenia de Glanzmann

Orientador: José Zanis NetoCo-orientadora: Marister MalvezziInclui apendiceDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde, Programa de Pós-Graduaçao em Medicina Interna. Defesa: Curitiba, 2004Inclui bibliografiaResumo: Dentro das doenças hemorrágicas hereditárias autossômicas recessivas, a Síndrome de Bernard-Soulier e a Trombastenia de Glanzmann são as mais comuns. A Síndrome de Bernard-Soulier (SBS) é uma doença causada pela deficiência ou diminuição do complexo GPIb /GPIX (CD42b/CD42a), que neste estudo revelou ter padrões de expressões diferentes. O objetivo deste estudo foi avaliar o grau de expressão das glicoproteínas GpIb, GpIIb, GpIIIa e GpIX., por citometria de fluxo. No grupo dos adultos, dos nove pacientes, dois mostraram ausência de CD42b e CD42a; um apresentou diminuição no grau de expressão apenas do CD42b; um mostrou diminuição no grau de expressão dos CD42a e CD42b e cinco pacientes foram normais, quando comparado ao grupo controle. No grupo das crianças, dos seis pacientes; um mostrou ausência de CD42a e CD42b; dois apresentaram diminuição da intensidade de fluorescência de CD42b; um mostrou diminuição do percentual de positividade com os marcadores CD42a e CD42b, porém com fluorescências normais; um apresentou diminuição do percentual de positividade com o marcador CD42a e fluorescências normais e um paciente foi normal, quando comparado ao grupo controle. Assim, anormalidade de um único componente (GPIb ou GPIX) altera a expressão do complexo e causa heterogeneidade na expressão destas glicoproteínas. A Trombastenia de Glanzmann (TG), causada pela deficiência ou diminuição do complexo GPIIb/GPIIIa. As análises de cinco pacientes adultos revelaram padrões de expressões diferentes. Quatro pacientes foram anormais; um paciente mostrou ausência de CD61 e CD41; um paciente apresentou deficiência de CD61; dois pacientes mostraram deficiência de CD41a e um paciente apresentou expressão normal de CD41 e CD61, quando comparado ao grupo controle. Os achados indicam que os efeitos causados pelas alterações das glicoproteínas da membrana plaquetária, mostrados pelos diferentes graus de fluorescência através da citometria fluxo, são responsáveis pelos fenótipos diferenciados nas doenças Bernard-Soulier e Trombastenia de Glanzmann.Abstract: Among the autossomal recessive bleeding disorder, the Syndrome of Bernard-Soulier and Glanzmann.s Thrombasthenia are most common. The Syndrome of Bernard- Soulier (SBS) is caused by a deficiency or reduction of the GPIba/GPIX complex (CD42b/CD42a), which in this study we observed to be expressed in different patterns in SBS patients. The purpose of this study was to evaluate the degree of the expression of the glycoproteins GPIb , GPIIb, GPIIIa and GPIX, by flow cytometry. In the group of adults, when CD42b/CD42a was analyzed by flow cytometry, from a total of nine patients, two showed absence of CD42b and CD42a; one presented reduction in the level of expression only for CD42b; one showed reduction at the levels of expression of both CD42a and CD42b and five patients were normal, when compared to controls. In the group of children, from a total of six patients; one showed absence of CD42a and CD42b; two presented reduction of the intensity of fluorescence of CD42b; one showed reduction of the percentage of positive cells for CD42a and CD42b while presenting normal fluorescence; one presented reduction of the percentage of positive cells for the CD42a marker and normal fluorescence and one patient was normal, when compared with the control group. Thus, abnormality of an only component (GPIb or GPIX) modifies the expression of the complex and results in heterogeneity in the expression of these glycoproteins. The Trombastenia of Glanzmann (GT) is caused by a deficiency or reduction of the GPIIb/GPIIIa complex. The analyses of five adult patients also demonstrated expression in different patterns. Four patients were abnormal; one patient showed absence of CD61 and CD41; one patient presented CD61 deficiency; two patients had shown deficiency of CD41a and one patient presented normal expression of CD41 and CD61, when compared to controls. These findings indicate that the effect caused by the alterations of glycoproteins on the membrane of platelets, shown here by the different degrees of fluorescence through flow cytometry analyses, are responsible for the differentiated phenotypes in Bernard- Soulier and Glanzmann.s Thrombasthenia diseases

Avaliaçăo das glicoproteínas plaquetárias na Síndrome de Bernard-Soulier e trombastenia de Glanzmann /

Orientador: José Zanis NetoCo-orientadora: Marister MalvezziInclui apęndiceDissertaçăo (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Cięncias da Saúde, Programa de Pós-Graduaçăo em Medicina Interna. Defesa: Curitiba, 2004Inclui bibliografi

Recuperação imune em pacientes com Anemia de Fanconi após transplante de Medula Óssea Alogênico

Resumo: A Anemia de Fanconi (AF) é uma doença hereditária autossômica recessiva, caracterizada pela falha/aplasia de medula óssea (MO). A falha da hematopoese resulta na depleção do reservatório de células estaminais da medula óssea, o que leva à anemia grave, neutropenia e trombocitopenia, e o paciente necessita de intervenções terapêuticas frequentemente, incluindo o transplante de células-tronco hematopoéticas (HSCT), com o objetivo da reconstituição celular normal. Método. Neste estudo, foi realizado uma análise detalhada da distribuição das subpopulacões linfocitárias T, B e NK no sangue periférico, por citometria de fluxo, de 23 pacientes com Anemia de Fanconi, antes e após o transplante de medula óssea (TMO), nos dias D+30, D+60, D+100, D+180, D+270 e D+360. Em pararelo, foram comparados os dados dos pacientes no pré e pós transplante (D+360) com o grupo controle. Além disso, foram comparados os grupos de pacientes que receberam medula óssea doadores relacionados e não relacionados, pré e pós-TMO, nos períodos descritos acima. Resultados. Após o transplante, foram observadas diferentes cinéticas de recuperação para as distintas subpopulações de linfócitos, quando comparados com os parâmetros de prétransplante. As células NK foram as primeiras a recuperar, seguidas pelos linfócitos T citotóxicos CD8+, linfócitos B e, finalmente os linfócitos T auxiliares CD4+. A recuperação inicial foi às custas dos linfócitos T de memória que seriam, portanto, potencialmente derivados do enxerto, enquanto que, os linfócitos T virgens, recém emigrados do timo, de fenótipo CD31+CD45RA+, CD4+ ou CD8+, aumentaram somente seis meses após do transplante, na presença de profilaxia imunossupressiva para doença do enxerto contra o hospedeiro (DECH). Enquanto que pequenas diferenças foram observadas na recuperação precoce dos linfócitos T citotóxicos CD8+ entre os pacientes que receberam TMO aparentado e não aparentado, casos com DECH mostraram diferenças marcantes quando comparados com outros pacientes. Conclusões. Os resultados enfatizam a importância da quantificação das subpopulações linfocitárias no sangue periférico, para melhorar a monitoração e seguimento de pacientes com Anemia de Fanconi que receberam transplante de medula óssea

Avaliação das glicoproteínas plaquetárias na síndrome de Bernard-Soulier e trombastenia de Glanzmann

Orientador: José Zanis NetoCo-orientadora: Marister MalvezziInclui apendiceDissertaçao (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciencias da Saúde, Programa de Pós-Graduaçao em Medicina Interna. Defesa: Curitiba, 2004Inclui bibliografiaResumo: Dentro das doenças hemorrágicas hereditárias autossômicas recessivas, a Síndrome de Bernard-Soulier e a Trombastenia de Glanzmann são as mais comuns. A Síndrome de Bernard-Soulier (SBS) é uma doença causada pela deficiência ou diminuição do complexo GPIb /GPIX (CD42b/CD42a), que neste estudo revelou ter padrões de expressões diferentes. O objetivo deste estudo foi avaliar o grau de expressão das glicoproteínas GpIb, GpIIb, GpIIIa e GpIX., por citometria de fluxo. No grupo dos adultos, dos nove pacientes, dois mostraram ausência de CD42b e CD42a; um apresentou diminuição no grau de expressão apenas do CD42b; um mostrou diminuição no grau de expressão dos CD42a e CD42b e cinco pacientes foram normais, quando comparado ao grupo controle. No grupo das crianças, dos seis pacientes; um mostrou ausência de CD42a e CD42b; dois apresentaram diminuição da intensidade de fluorescência de CD42b; um mostrou diminuição do percentual de positividade com os marcadores CD42a e CD42b, porém com fluorescências normais; um apresentou diminuição do percentual de positividade com o marcador CD42a e fluorescências normais e um paciente foi normal, quando comparado ao grupo controle. Assim, anormalidade de um único componente (GPIb ou GPIX) altera a expressão do complexo e causa heterogeneidade na expressão destas glicoproteínas. A Trombastenia de Glanzmann (TG), causada pela deficiência ou diminuição do complexo GPIIb/GPIIIa. As análises de cinco pacientes adultos revelaram padrões de expressões diferentes. Quatro pacientes foram anormais; um paciente mostrou ausência de CD61 e CD41; um paciente apresentou deficiência de CD61; dois pacientes mostraram deficiência de CD41a e um paciente apresentou expressão normal de CD41 e CD61, quando comparado ao grupo controle. Os achados indicam que os efeitos causados pelas alterações das glicoproteínas da membrana plaquetária, mostrados pelos diferentes graus de fluorescência através da citometria fluxo, são responsáveis pelos fenótipos diferenciados nas doenças Bernard-Soulier e Trombastenia de Glanzmann.Abstract: Among the autossomal recessive bleeding disorder, the Syndrome of Bernard-Soulier and Glanzmann.s Thrombasthenia are most common. The Syndrome of Bernard- Soulier (SBS) is caused by a deficiency or reduction of the GPIba/GPIX complex (CD42b/CD42a), which in this study we observed to be expressed in different patterns in SBS patients. The purpose of this study was to evaluate the degree of the expression of the glycoproteins GPIb , GPIIb, GPIIIa and GPIX, by flow cytometry. In the group of adults, when CD42b/CD42a was analyzed by flow cytometry, from a total of nine patients, two showed absence of CD42b and CD42a; one presented reduction in the level of expression only for CD42b; one showed reduction at the levels of expression of both CD42a and CD42b and five patients were normal, when compared to controls. In the group of children, from a total of six patients; one showed absence of CD42a and CD42b; two presented reduction of the intensity of fluorescence of CD42b; one showed reduction of the percentage of positive cells for CD42a and CD42b while presenting normal fluorescence; one presented reduction of the percentage of positive cells for the CD42a marker and normal fluorescence and one patient was normal, when compared with the control group. Thus, abnormality of an only component (GPIb or GPIX) modifies the expression of the complex and results in heterogeneity in the expression of these glycoproteins. The Trombastenia of Glanzmann (GT) is caused by a deficiency or reduction of the GPIIb/GPIIIa complex. The analyses of five adult patients also demonstrated expression in different patterns. Four patients were abnormal; one patient showed absence of CD61 and CD41; one patient presented CD61 deficiency; two patients had shown deficiency of CD41a and one patient presented normal expression of CD41 and CD61, when compared to controls. These findings indicate that the effect caused by the alterations of glycoproteins on the membrane of platelets, shown here by the different degrees of fluorescence through flow cytometry analyses, are responsible for the differentiated phenotypes in Bernard- Soulier and Glanzmann.s Thrombasthenia diseases

Immune reconstitution in patients with Fanconi anemia after allogeneic bone marrow transplantation

[Background aims]: Fanconi anemia is an autosomal recessive or X-linked genetic disorder characterized by bone marrow (BM) failure/aplasia. Failure of hematopoiesis results in depletion of the BM stem cell reservoir, which leads to severe anemia, neutropenia and thrombocytopenia, frequently requiring therapeutic interventions, including hematopoietic stem cell transplantation (HSCT). Successful BM transplantation (BMT) requires reconstitution of normal immunity. [Methods]: In the present study, we performed a detailed analysis of the distribution of peripheral blood subsets of T, B andnatural killer (NK) lymphocytes in 23 patients with Fanconi anemia before and after BMT on days+30,+60,+100,+180,+270 and+360. In parallel, we evaluated the effect of related versus unrelated donor marrow as well as the presence of graft-versus-host disease (GVHD). [Results]: After transplantation, we found different kinetics of recovery for the distinct major subsets of lymphocytes. NK cells were the first to recover, followed by cytotoxic CD8+ T cells and B cells, and finally CD4+ helper T cells. Early lymphocyte recovery was at the expense of memory cells, potentially derived from the graft, whereas recent thymic emigrant (CD31+ CD45RA+) and naive CD4+ or CD8+ T cells rose only at 6 months after HSCT, in the presence of immunosuppressive GVHD prophylactic agents. Only slight differences were observed in the early recovery of cytotoxic CD8+ T cells among those cases receiving a graft from a related donor versus an unrelated donor. Patients with GVHD displayed a markedly delayed recovery of NK cells and B cells as well as of regulatory T cells and both early thymic emigrant and total CD4+ T cells. [Conclusions]: Our results support the utility of post-transplant monitoring of a peripheral blood lymphocyte subset for improved follow-up of patients with Fanconi anemia undergoing BMT.Peer Reviewe