Atividade inseticida de extratos de Annona Foetida Mart. (Annonaceae) sobre imaturos de Aedes Aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera : Culicidae)

Resumo: A intensiva utilização de inseticidas sintéticos contra vetores de arboviroses tem selecionado populações de mosquitos resistentes aos princípios ativos que compõem estes produtos, incluindo opulações de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762). O controle dessa espécie baseia-se principalmente na utilização de inseticidas químicos organofosforados e piretróides. Há vários estudos utilizando extratos de plantas ou seus derivados como uma alternativa a esses inseticidas sintéticos, a fim de diminuir a velocidade de seleção de populações resistentes aos inseticidas químicos. Annona foetida Mart. é uma planta Amazônica da família Annonaceae conhecida por apresentar diversas atividades biológicas como leishmanicida e antimicrobiana, entretanto até o momento não existem investigações sobre sua atividade inseticida. Outras espécies de Annonaceae apresentam uma classe de substância com atividade inseticida já reportada para Culicidae. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade larvicida de extratos de emente de Annona foetida sobre imaturos de A. aegypti em condições de laboratório e identificar seus constituintes químicos, contribuindo assim para gerar uma alternativa de controle desse vetor. A análise química foi feita através de Ressonância Magnética Nuclear (RMN). A susceptibilidade aos extratos metanólico, hexânico e diclorometano foi analisada para determinar as CL50, CL95 e CL99 utilizando mosquitos da colônia Rockefeller mantidas sob condições de laboratório. Foram estabelecidas seis concentrações para cada extrato, com quatro réplicas cada e realizado os bioensaios em quatro dias diferentes para os extratos hexânico e diclorometano e em um dia para o metanólico, sob temperatura de 25ºC. O período de atividade larvicida e o efeito de concentrações subletais foram analisados para os extratos hexânico e diclorometano, para esse último também foi avaliada a persistência residual. Além disso, calibrou-se o solvente utilizado dimetilsulfóxido (DMSO) para verificar se este apresentava ação larvicida complementar. Para o DMSO foram utilizadas cinco concentrações em quatro dias diferentes, mostrando que a utilização de 1% do mesmo em 200 ml finais de solução não provoca mortalidade das larvas. Todos os extratos apresentaram atividade larvicida em intervalo de concentrações dose-resposta. O extrato mais eficiente foi o diclorometano, seguido pelo hexânico e metanólico. A atividade encontrada pelo extrato diclorometano pode ser devido à alta quantidade de acetogeninas encontradas nele por RMN, provavelmente pelas acetogeninas Muricina A e Muricina F. Para os outros dois extratos não foi possível definir qual classe de substâncias estava presente devido à alta quantidade de impurezas. A persistência larvicida do extrato diclorometano evidenciou a eficácia deste durante um período de 18 dias. Foram observadas alterações orfológicas em larvas e pupas de Aedes aegypti submetidas ao tratamento que inviabilizaram a emergência de adultos, entretanto os poucos adultos que emergiram não apresentaram alterações morfológicas visíveis. Assim, os extratos de Annona foetida demonstraram-se eficazes no controle de Aedes aegypti tanto como larvicida quanto sob efeito de doses subletais, provavelmente devido à presença das cetogeninas

Alphaviruses Detected in Mosquitoes in the North-Eastern Regions of South Africa, 2014 to 2018

The prevalence and distribution of African alphaviruses such as chikungunya have increased in recent years. Therefore, a better understanding of the local distribution of alphaviruses in vectors across the African continent is important. Here, entomological surveillance was performed from 2014 to 2018 at selected sites in north-eastern parts of South Africa where alphaviruses have been identified during outbreaks in humans and animals in the past. Mosquitoes were collected using a net, CDC-light, and BG-traps. An alphavirus genus-specific nested RT-PCR was used for screening, and positive pools were confirmed by sequencing and phylogenetic analysis. We collected 64,603 mosquitoes from 11 genera, of which 39,035 females were tested. Overall, 1462 mosquito pools were tested, of which 21 were positive for alphaviruses. Sindbis (61.9%, N = 13) and Middelburg (28.6%, N = 6) viruses were the most prevalent. Ndumu virus was detected in two pools (9.5%, N = 2). No chikungunya positive pools were identified. Arboviral activity was concentrated in peri-urban, rural, and conservation areas. A range of Culicidae species, including Culex univittatus, Cx. pipiens s.l., Aedes durbanensis, and the Ae. dentatus group, were identified as potential vectors. These findings confirm the active circulation and distribution of alphaviruses in regions where human or animal infections were identified in South Africa.publishersversionpublishe

Morphological and Molecular Characterization Using Genitalia and CoxI Barcode Sequence Analysis of Afrotropical Mosquitoes with Arbovirus Vector Potential

Funding Information: Eddyson Montalvo-Sabino was recipient of a grant from “Programa Nacional de Becas y Crédito Educativo” (PRONABEC), 2019—Beca Generacion del Bicentenario, from the “Ministerio de Educación” of Peru. A.P. Abilio was a recipient of a grant from Wellcome Trust (Grant WT087546MA) through SACIDS RVF and NPHI-Phase-II from the National Institute for Health of Mozambique through a cooperative agreement number [5NU14GH001237-03-00]. Marietjie Venter was a recipient of a sub-award from the Global Disease Detection Program, US-CDC award 5U19GH000571-02 with the NICD and University of Pretoria that funded vector surveillance in South Africa (2012–2015) and by the Cooperative Agreement Number (5 NU2GGH001874-02-00) with the University of Pretoria (2014–2017). Milehna M. Guarido received a studentship through this grant. A.P.G. Almeida has been a recipient of the Visiting Professor Programme by the University of Pretoria for the work in South Africa. This work received financial support from the Global Health and Tropical Medicine Center (GHTM|IHMT|NOVA), which is funded through FCT contract UID/Multi/04413/2013, Portugal. The findings and conclusions expressed in this manuscript are those of the author(s) and do not necessarily represent the official position of the funding agencies. Publisher Copyright: © 2022 by the authors.Potential arboviral Afrotropical mosquito vectors are underrepresented in public databases of CoxI barcode sequences. Furthermore, available CoxI sequences for many species are often not associated with voucher specimens to match the corresponding fine morphological characterization of specimens. Hence, this study focused on the characterization of Culicine mosquitoes from South Africa, Mozambique, and Angola and their classification using a complementary approach including a morphological analysis of specimens’ genitalia and phylogenetic study based on the analysis of CoxI barcode sequences using maximum likelihood and Bayesian phylogenetic inference methods, alongside Median-Joining Network and PCOORD analyses. Overall, 800 mosquitoes (652 males and 148 females) from 67 species, were analyzed. Genitalia from 663 specimens allowed the identification of 55 species of 10 genera. A total of 247 CoxI partial gene sequences corresponding to 65 species were obtained, 11 of which (Aedes capensis, Ae. mucidus, Culex andersoni, Cx. telesilla, Cx. inconspicuosus, Eretmapodites subsimplicipes, Er. quinquevittatus, Ficalbia uniformis, Mimomyia hispida, Uranotaenia alboabdominalis, and Ur. mashonaensis) are, to the best of our knowledge, provided here for the first time. The presence of Cx. pipiens ecotypes molestus and pipiens and their hybrids, as well as Cx. infula, is newly reported in the Afrotropical region. The rates of correct sequence identification using BOLD and BLASTn (≥95% identity) were 64% and 53%, respectively. Phylogenetic analysis revealed that, except for subgenus Eumelanomyia of Culex, there was support for tribes Aedini, Culicini, Ficalbiini, and Mansoniini. A divergence >2% was observed in conspecific sequences, e.g., Aedeomyia africana, Ae. cumminsii, Ae. unilineatus, Ae. metallicus, Ae. furcifer, Ae. caballus, and Mansonia uniformis. Conversely, sequences from groups and species complexes, namely, Ae. simpsoni, Ae. mcintoshi, Cx. bitaeniorhynchus, Cx. simpsoni, and Cx. pipiens were insufficiently separated. A contribution has been made to the barcode library of Afrotropical mosquitoes with associated genitalia morphological identifications.publishersversionpublishe

Potential mosquito vectors for Shuni virus, South Africa, 2014–2018

Shuni virus is associated with neurologic and febrile illness in animals and humans. To determine potential vectors, we collected mosquitoes in South Africa and detected the virus in species of the genera Mansonia, Culex, Aedes, and Anopheles. These mosquitoes may be associated with Shuni virus outbreaks in Africa and emergence in other regions

Atividade inseticida de extratos de Annona Foetida Mart. (Annonaceae) sobre imaturos de Aedes Aegypti (Linnaeus, 1762) (Diptera : Culicidae)

Resumo: A intensiva utilização de inseticidas sintéticos contra vetores de arboviroses tem selecionado populações de mosquitos resistentes aos princípios ativos que compõem estes produtos, incluindo opulações de Aedes aegypti (Linnaeus, 1762). O controle dessa espécie baseia-se principalmente na utilização de inseticidas químicos organofosforados e piretróides. Há vários estudos utilizando extratos de plantas ou seus derivados como uma alternativa a esses inseticidas sintéticos, a fim de diminuir a velocidade de seleção de populações resistentes aos inseticidas químicos. Annona foetida Mart. é uma planta Amazônica da família Annonaceae conhecida por apresentar diversas atividades biológicas como leishmanicida e antimicrobiana, entretanto até o momento não existem investigações sobre sua atividade inseticida. Outras espécies de Annonaceae apresentam uma classe de substância com atividade inseticida já reportada para Culicidae. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade larvicida de extratos de emente de Annona foetida sobre imaturos de A. aegypti em condições de laboratório e identificar seus constituintes químicos, contribuindo assim para gerar uma alternativa de controle desse vetor. A análise química foi feita através de Ressonância Magnética Nuclear (RMN). A susceptibilidade aos extratos metanólico, hexânico e diclorometano foi analisada para determinar as CL50, CL95 e CL99 utilizando mosquitos da colônia Rockefeller mantidas sob condições de laboratório. Foram estabelecidas seis concentrações para cada extrato, com quatro réplicas cada e realizado os bioensaios em quatro dias diferentes para os extratos hexânico e diclorometano e em um dia para o metanólico, sob temperatura de 25ºC. O período de atividade larvicida e o efeito de concentrações subletais foram analisados para os extratos hexânico e diclorometano, para esse último também foi avaliada a persistência residual. Além disso, calibrou-se o solvente utilizado dimetilsulfóxido (DMSO) para verificar se este apresentava ação larvicida complementar. Para o DMSO foram utilizadas cinco concentrações em quatro dias diferentes, mostrando que a utilização de 1% do mesmo em 200 ml finais de solução não provoca mortalidade das larvas. Todos os extratos apresentaram atividade larvicida em intervalo de concentrações dose-resposta. O extrato mais eficiente foi o diclorometano, seguido pelo hexânico e metanólico. A atividade encontrada pelo extrato diclorometano pode ser devido à alta quantidade de acetogeninas encontradas nele por RMN, provavelmente pelas acetogeninas Muricina A e Muricina F. Para os outros dois extratos não foi possível definir qual classe de substâncias estava presente devido à alta quantidade de impurezas. A persistência larvicida do extrato diclorometano evidenciou a eficácia deste durante um período de 18 dias. Foram observadas alterações orfológicas em larvas e pupas de Aedes aegypti submetidas ao tratamento que inviabilizaram a emergência de adultos, entretanto os poucos adultos que emergiram não apresentaram alterações morfológicas visíveis. Assim, os extratos de Annona foetida demonstraram-se eficazes no controle de Aedes aegypti tanto como larvicida quanto sob efeito de doses subletais, provavelmente devido à presença das cetogeninas

Survey of West Nile and Banzi Viruses in Mosquitoes, South Africa, 2011–2018

We collected >40,000 mosquitoes from 5 provinces in South Africa during 2011–2018 and screened for zoonotic flaviviruses. We detected West Nile virus in mosquitoes from conservation and periurban sites and potential new mosquito vectors; Banzi virus was rare. Our results suggest flavivirus transmission risks are increasing in South Africa