The hypoxic microenvironment induces stearoyl-coa desaturase-1 overexpression and lipidomic profile changes in clear cell renal cell carcinoma

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is the most common histological subtype of renal cell carcinoma (RCC). It is characterized by a high cell proliferation and the ability to store lipids. Previous studies have demonstrated the overexpression of enzymes associated with lipid metabolism, including stearoyl-CoA desaturase-1 (SCD-1), which increases the concentration of unsaturated fatty acids in tumor cells. In this work, we studied the expression of SCD-1 in primary ccRCC tumors, as well as in cell lines, to determine its influence on the tumor lipid composition and its role in cell proliferation. The lipidomic analyses of patient tumors showed that oleic acid (18:1n-9) is one of the major fatty acids, and it is particularly abundant in the neutral lipid fraction of the tumor core. Using a ccRCC cell line model and in vitro-generated chemical hypoxia, we show that SCD-1 is highly upregulated (up to 200-fold), and this causes an increase in the cellular level of 18:1n-9, which, in turn, accumulates in the neutral lipid fraction. The pharmacological inhibition of SCD-1 blocks 18:1n-9 synthesis and compromises the proliferation. The addition of exogenous 18:1n-9 to the cells reverses the effects of SCD-1 inhibition on cell proliferation. These data reinforce the role of SCD-1 as a possible therapeutic target.Fil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Mignolli, Francesco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Stoyanoff, Tania Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Aguirre, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Balboa, María A.. Consejo Superior de Investigaciones Científicas; España. Universidad de Valladolid; EspañaFil: Balsinde Rodríguez, Jesús. Consejo Superior de Investigaciones Científicas; España. Universidad de Valladolid; EspañaFil: Rodríguez, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentin

Tumor biology of non-metastatic stages of clear cell renal cell carcinoma; overexpression of stearoyl desaturase-1, EPO/EPO-R system and hypoxia-related proteins

Clear cell renal cell carcinoma (ccRCC) is the most common subtype of renal carcinomas. There is great interest to know the molecular basis of the tumor biology of ccRCC that might contribute to a better understanding of the aggressive biological behavior of this cancer and to identify early biomarkers of disease. This study describes the relationship among proliferation, survival, and apoptosis with the expression of key molecules related to tumoral hypoxia (hypoxia-inducible factor (HIF)-1α, erythropoietin (EPO), vascular endothelial growth factor (VEGF)), their receptors (EPO-R, VEGFR-2), and stearoyl desaturase-1 (SCD-1) in early stages of ccRCC. Tissue samples were obtained at the Urology Unit of the J.R. Vidal Hospital (Corrientes, Argentina), from patients who underwent radical nephrectomy for renal cancer between 2011 and 2014. Four experimental groups according to pathological stage and nuclear grade were organized: T1G1 (n = 6), T2G1 (n = 4), T1G2 (n = 7), and T2G2 (n = 7). The expression of HIF-1α, EPO, EPO-R, VEGF, VEGFR-2, Bcl-xL, and SCD-1 were evaluated by immunohistochemistry, Western blotting, and/or RT-PCR. Apoptosis was assessed by the TUNEL in situ assay, and tumor proliferation was determined by Ki-67 immunohistochemistry. Data revealed that HIF-1α, EPO, EPO-R, VEGF, and VEGF-R2 were overexpressed in most samples. The T1G1 group showed the highest EPO levels, approximately 200 % compared with distal renal tissue. Bcl-xL overexpression was concomitant with the enhancement of proliferative indexes. SCD-1 expression increased with the tumor size and nuclear grade. Moreover, the direct correlations observed between SCD-1/HIF-1α and SCD-1/Ki-67 increments suggest a link among these molecules, which would determine tumor progression in early stages of ccRCC. Our results demonstrate the relationship among proliferation, survival, and apoptosis with the expression of key molecules related to tumoral hypoxia (HIF-1α, EPO, VEGF), their receptors (EPO-R, VEGFR-2), and SCD-1 in early stages of ccRCC.Fil: Stoyanoff, Tania Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Rodríguez, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Todaro, Juan Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Espada, Joaquin Diego. Hospital Vidal. Dpto. de Urología. Corrientes; ArgentinaFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Brandan, Nora Cristina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina; ArgentinaFil: Torres, Adriana Monica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Química Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Química Rosario; ArgentinaFil: Aguirre, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentin

Evaluación in vitro de la actividad proteolítica de células de carcinoma renal de células claras (Caki-1) en condiciones de hipoxia

La proteólisis extracelular es uno de los principales mecanismos por lo que la transformación de la matriz intercelular se desarrolla, y facilita la metástasis tumoral. Las enzimas que la catalizan se denominan metaloproteinasas de la matriz (MMPs); son proteinasas pertenecientes a una amplia familia, que se asocian con tumorigénesis, renovación de la matriz extracelular y la migración de células cancerosas, control del crecimiento, inflamación y angiogénesis. Dados estos roles tan centrales en la biología del cáncer, desde hace tiempo vienen siendo estudiadas, pero son prácticamente inexistentes los trabajos que las relacionan con su expresión en condiciones hipóxicas y más aún en Carcinoma Renal de Células Claras (CRCC). Por tal motivo, en el presente trabajo, se inició la caracterización de la expresión de MMPs secretadas por células Caki-1, modelo celular ampliamente validado para el CRCC. Utilizando un modelo in vitro de cultivo celular se generó hipoxia con el agregado de CoCl2 (100, 200 y 300 μM) y se evaluó si la hipoxia influye en la actividad proteolítica del sobrenadante celular. Se utilizó SDS-PAGE para analizar el perfil proteico y la técnica de zimografía para determinar la actividad gelatinolítica. Asimismo, se estudió la expresión de las MMPs (2, 9 y 13) por Dot-Blott. Los resultados hallados muestran que la hipoxia exacerba la actividad proteolítica de estas células, y que en dicha actividad están implicadas las enzimas MMP-2 y MMP-13, principalmente y en menor grado MMP-9, secretadas al medio extracelular. Actualmente, se está expandiendo la búsqueda de otras isoformas de MMPs (tales como MMP1, MMP8, MMP 21) y evaluando su expresión en el otro modelo validado de CRCC, las células Caki-2Fil: Palomar, Lucas Sebastián. Universidad Nacional del NordesteFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Universidad Nacional del NordesteFil: Aguirre, María Victoria. Universidad Nacional del NordesteFil: Gay, Claudia Carolina. Universidad Nacional del NordesteFil: Rodríguez, Juan Pablo. Universidad Nacional del Nordest

Irrigantes usados en dientes deciduos y su impacto citotóxico en fibroblastos de ratón

La atención odontopedlátrica se encuentra limitada a tiempos de ejecución cortos necesitando mayor dependencia a agentes antimicrobianos de rápida eficacia para eliminar y prevenir cualquier desarrollo de microorganismos. Un gran número de irrigantes químicos son utilizados para la limpieza de los conductos radiculares. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la citotoxicidad de irrigantes utilizados para la irrigación de conductos en piezas dentarias primarias y determinar la viabilidad, in vitro, en cultivo de fibroblastos de ratón (L-929), mediante el bioensayo de colorimetría rápida de MTT, a diferentes tiempos de incubación. Los irrigantes ensayados fueron: Hidróxido de Calcio (Ca (OH)2), Hipoclorito de sodio (NaCIO) y Fluoruro de Diamino Plata (FDP). La viabilidad de los fibroblastos a las drogas irrigantes se evaluó con diferentes dosis de los mismos y a diferentes tiempos, en función de la adherencia celular. Los ensayos fueron llevados a cabo por triplicado. Las células fueron fotografiadas y contabilizadas bajo microscopio óptico invertido. Los datos obtenidos, fueron analizados y graficados en manera descriptiva. Estos resultados mostraron que las células del grupo control se mantuvieron viables y sin modificaciones pertinentes. No obstante, se observó citotoxicidad celular y reducción de la viabilidad con los diferentes tratamientos dependiendo de las dosis y tiempos de exposición a los mismos. Cuando los fibroblastos se incubaron, durante I0 minutos, con las diferentes drogas (Ca (OH)2 FDP y NaCIO) y disoluciones, la viabilidad se vio afectada a la mayor concentración de cada droga; en la mayor concentración de NaCIO y Ca (OH)2 se produjeron los mayores porcentajes de alteración celular, sin embargo, solo con el NaCIO, hasta en las mínimas diluciones se registraron viabilidades inferiores a las registradas en el control

Maintenance of photosynthetic capacity in flooded tomato plants with reduced ethylene sensitivity

Ethylene is considered one of the most important plant hormones orchestrating plant responses to flooding stress. However, ethylene may induce deleterious effects on plants, especially when produced at high rates in response to stress. In this paper, we explored the effect of attenuated ethylene sensitivity in the Never ripe (Nr) mutant on leaf photosynthetic capacity of flooded tomato plants. We found out that reduced ethylene perception in Nr plants was associated with a more efficient photochemical and non-photochemical radiative energy dissipation capability in response to flooding. The data correlated with the retention of chlorophyll and carotenoids content in flooded Nr leaves. Moreover, leaf area and specific leaf area were higher in Nr, indicating that ethylene would exert a negative role in leaf growth and expansion under flooded conditions. Although stomatal conductance was hampered in flooded Nr plants, carboxylation activity was not affected by flooding in the mutant, suggesting that ethylene is responsible for inducing non-stomatal limitations to photosynthetic CO2 uptake. Upregulation of several cysteine protease genes and high protease activity led to Rubisco protein loss in response to ethylene under flooding. Reduction of Rubisco content would, at least in part, account for the reduction of its carboxylation efficiency in response to ethylene in flooded plants. Therefore, besides its role as a trigger of many adaptive responses, perception of ethylene entails limitations in light and dark photosynthetic reactions by speeding up the senescence process that leads to a progressive disassembly of the photosynthetic machinery in leaves of flooded tomato plants.Fil: de Pedro, Leandro Federico. Universidad Nacional de Formosa. Facultad de la Producción y El Medioambiente; ArgentinaFil: Mignolli, Francesco. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; ArgentinaFil: Scartazza, Andrea. Consiglio Nazionale delle Ricerche; ItaliaFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Bouzo, Carlos Alberto. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Vidoz, María Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Botánica del Nordeste. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Agrarias. Instituto de Botánica del Nordeste; Argentin

Optimización de cultivos primarios de células de carcinoma renal de células claras como modelo “in vitro” para estudios metabólicos y determinantes de progresión neoplásica

El objetivo del presente estudio fue optimizar la implementación de cultivos primarios a partir de muestras de carcinoma renal de células claras (CRCC) para comprobar la conservación del fenotipo lipogénico contra cortes fijados del mismo origen.Se utilizaron muestras de pacientes con CRCC, evaluándose diversas metodologías y condiciones experimentales de digestión de muestras, adherencia y despegue celular, fenotipo lipogénico, potencial de clonación, proliferación y capacidad de migración. El mayor rendimiento y viabilidad celular se verificó mediante digestión con colagenasa. La adherencia inicial se logró a las 24 hs de incubación, utilizando placas plásticas de cultivo, recubiertas con colágeno comercial y gelatina 0,2% en la mayoría de las muestras analizadas (60% de los casos). Se obtuvieron monocapas, con potencial de migración, en un 40% de los casos, tras 5 ± 1 días de incubación. El promedio de subcultivos fue de 3 ± 1. Este estudio permitió estandarizar cultivos primarios de CRCC comprobándose la conservación de la fenotipia lipogénica, logrando de dicha manera una herramienta importante y útil para el estudio de la biología tumoral y el ensayo de nuevas terapéuticas.O objetivo deste trabalho foi otimizar a implementação de culturas primárias de amostras de carcinoma de células claras renal (CRCC) para verificar conservação fenótipo lipogenic contra os cortes previstos a mesma origem. As amostras dos pacientes foram utilizados CRCC, avaliando diferentes metodologias e as condições experimentais da digestão de amostras, adesão celular e fenótipo clonagem potencial take-lipogenic, proliferação e capacidade de migração. O maior rendimento e a viabilidade celular foi avaliada por digestão com colagenase. A adesão inicial foi obtida após 24 horas de incubação com colagénio e gelatina comercial 0,2% em 60% dos casos. As monocamadas foram obtidos em 40% após 5 ± 1 dias de incubação com o potencial de migração. As subculturas média foi de 3 ± 1. Este estudo nos permitiu padronizar culturas primárias de CRCC são verificados quanto à conservação da fenotipagem lipogenic, conseguindo desta forma um importante e útil para o estudo da biologia do tumor e teste de nova ferramenta terapêutica.The aim of this study was to optimize the implementation of primary cultures from samples of renal clear cell carcinoma (CRCC) to check the conservation of the lipogenic phenotype. CRCC Patient samples were used, in order to evaluate different methodologies and the experimental conditions of sample digestion, cell adhesion and lipogenic phenotype, proliferation and migration ability. The highest yield in cell number and viability was assessed using collagenase digestion. The initial adhesion was achieved after 24 hours of incubation in plastic plates recoverd with commercial collagen or 0.2% gelatin (60% of cases). Monolayers, with migration potential, were obtained in 40% of all cases, after 5 ± 1 days of incubation. The subcultures average was 3 ± 1. This study allowed us to standardize primary cultures of CRCC and check the conservation of the lipogenic phenotyping, achieving in this way an important and useful tool to study the tumor biology.Fil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; ArgentinaFil: Rodriguez, J. P.. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; ArgentinaFil: Stoyanoff, Tania Romina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Espada, Joaquin Diego. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; ArgentinaFil: Todaro, Juan Santiago. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; ArgentinaFil: Aguirre, María Victoria. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; Argentin

Optimización de cultivos primarios de células de carcinoma renal de células claras como modelo “in vitro” para estudios metabólicos y determinantes de progresión neoplásica

El objetivo del presente estudio fue optimizar la implementación de cultivos primarios a partir de muestras de carcinoma renal de células claras (CRCC) para comprobar la conservación del fenotipo lipogénico contra cortes fijados del mismo origen. Se utilizaron muestras de pacientes con CRCC, evaluándose diversas metodologías y condiciones experimentales de digestión de muestras, adherencia y despegue celular, fenotipo lipogénico, potencial de clonación, proliferación y capacidad de migración. El mayor rendimiento y viabilidad celular se verificó mediante digestión con colagenasa. La adherencia inicial se logró a las 24 hs de incubación, utilizando placas plásticas de cultivo, recubiertas con colágeno comercial y gelatina 0,2% en la mayoría de las muestras analizadas (60% de los casos). Se obtuvieron monocapas, con potencial de migración, en un 40% de los casos, tras 5 ± 1 días de incubación. El promedio de subcultivos fue de 3 ± 1. Este estudio permitió estandarizar cultivos primarios de CRCC comprobándose la conservación de la fenotipia lipogénica, logrando de dicha manera una herramienta importante y útil para el estudio de la biología tumoral y el ensayo de nuevas terapéuticas

Cultivo de microesferoides 3D para estudios de pluripotencialidad tumoral en líneas renales humanas

El carcinoma de células renales (CCR) constituye el cáncer urológico más letal, representa el 2-3% de todos los tumores y es la lesión sólida más frecuente en el riñón adulto. Dentro del grupo heterogéneo que engloba el CCR un 70-80% de éstos incluye el Carcinoma Renal de Células Claras (CRCC). Reciente evidencia sugiere que muchas enfermedades malignas son impulsadas por un compartimiento celular que muestra las propiedades de las células madre que se denominan células madre cancerígenas (CSC). Para lograr la identificación de esta subpoblación celular se ha desarrollado una metodología fenotípica alternativa basada en la formación de esferas in vitro. En este estudio, cómo análisis preliminar, se seleccionaron varias líneas celulares de RCC (Caki-2, Caki-1 y ACHN) y el control fue de células renales de origen embrionario (HEK-293). En la línea embrionaria renal HEK-293 formaron estructuras 3D exitosamente con aumento progresivo de tamaño durante todo el tiempo de ensayo pero de las tres líneas tumorales renales ensayadas (Caki-1, Caki-2 y ACHN), solo Caki-1 pudo formar esferas 3D estables, aunque sin crecimiento tridimensional a largo plazo. Basándonos en este análisis, se pudo determinar que se requieren estudios complementarios adicionales sobre al menos 2 de las 4 líneas celulares renales estudiadas para comprobar su carácter pluripotencial.Fil: Barnes, Tamara Eliana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Rodríguez, Juan Pablo. Universidad Nacional del Nordeste; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Olea, Gabriela Beatriz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Aguirre, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaJornadas de comunicaciones cientificas en ciencias de la saludCorrientesArgentinaUniversidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicin

Erythropoietin attenuates LPS-induced microvascular damage in a murine model of septic acute kidney injury

Acute kidney injury (AKI) is a frequent complication of sepsis, with a high mortality. Hallmarks of septic-AKI include inflammation, endothelial injury, and tissue hypoxia. Therefore, it would be of interest to develop therapeutic approaches for improving the microvascular damage in septic-AKI. Erythropoietin (EPO) is a well-known cytoprotective multifunctional hormone. Thus, the aim of this study was to evaluate the protective effects of EPO on microvascular injury in a murine model of endotoxemic AKI. Male Balb/c mice were divided into four groups: control, LPS (8 mg/kg, ip.), EPO (3000 IU / kg, sc.) and LPS + EPO. A time course study (0–48 h) was designed. Experiments include, among others, immunohistochemistry and Western blottings of hypoxia-inducible transcription factor (HIF-1α), erythropoietin receptor (EPO-R), vascular endothelial growth factor system (VEGF/VEGFR-2), platelet and endothelial adhesion molecule-1 (PeCAM-1), inducible nitric oxide synthase (iNOS) and phosphorylated nuclear factor kappa B p65 (NF-κB). Data showed that EPO attenuates renal microvascular damage during septic-AKI progression through a) the decrease of HIF-1 alpha, iNOS, and NF-κB and b) the enhancement of EPO-R, PeCAM-1, VEGF, and VEGFR-2 expression. In summary, EPO renoprotection involves the attenuation of septic-induced renal hypoxia and inflammation as well as ameliorates the endotoxemic microvascular injury.Fil: Stoyanoff, Tania Romina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Rodríguez, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Todaro, Juan Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Torres, Adriana Monica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario; Argentina. Universidad Nacional de Rosario; ArgentinaFil: Aguirre, María Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; Argentin

Irrigantes usados em dentes temporários e seu impacto citotóxico em fibroblastos de camundongos

La atención odontopedlátrica se encuentra limitada a tiempos de ejecución cortos necesitando mayor dependencia a agentes antimicrobianos de rápida eficacia para eliminar y prevenir cualquier desarrollo de microorganismos. Un gran número de irrigantes químicos son utilizados para la limpieza de los conductos radiculares. El objetivo del presente trabajo fue evaluar la citotoxicidad de irrigantes utilizados para la irrigación de conductos en piezas dentarias primarias y determinar la viabilidad, in vitro, en cultivo de fibroblastos de ratón (L-929), mediante el bioensayo de colorimetría rápida de MTT, a diferentes tiempos de incubación. Los irrigantes ensayados fueron: Hidróxido de Calcio (Ca (OH)2), Hipoclorito de sodio (NaCIO) y Fluoruro de Diamino Plata (FDP). La viabilidad de los fibroblastos a las drogas irrigantes se evaluó con diferentes dosis de los mismos y a diferentes tiempos, en función de la adherencia celular. Los ensayos fueron llevados a cabo por triplicado. Las células fueron fotografiadas y contabilizadas bajo microscopio óptico invertido. Los datos obtenidos, fueron analizados y graficados en manera descriptiva. Estos resultados mostraron que las células del grupo control se mantuvieron viables y sin modificaciones pertinentes. No obstante, se observó citotoxicidad celular y reducción de la viabilidad con los diferentes tratamientos dependiendo de las dosis y tiempos de exposición a los mismos. Cuando los fibroblastos se incubaron, durante I0 minutos, con las diferentes drogas (Ca (OH)2 FDP y NaCIO) y disoluciones, la viabilidad se vio afectada a la mayor concentración de cada droga; en la mayor concentración de NaCIO y Ca (OH)2 se produjeron los mayores porcentajes de alteración celular, sin embargo, solo con el NaCIO, hasta en las mínimas diluciones se registraron viabilidades inferiores a las registradas en el control.Odontopediatric care is limited to short execution times. It requires greater dependence on antimicrobial agents of rapid efficacy to eliminate and prevent any development of microorganisms. A large number of chemical irrigants are used to clean the root canals. The aim of the present work was to evaluate the cytotoxicity of irrigants used for the irrigation of the root canals in primary dental pieces and to determine the viability, in vitro, in culture of mouse fibroblasts (L-929), by means of the rapid MTT colorimetry bioassay, at different incubation times. The irrigants tested were: Calcium Hydroxide Ca (OH)2, Sodium Hypochlorite (NaCIO) and Diamine Silver Fluoride (FDP). The viability of fibroblasts to irrigating drugs was evaluated with different doses of them and at different times, depending on cell adhesion. The tests were carried out in triplicate. The cells were photographed and counted under an inverted optical microscope. The data obtained was analyzed and graphed in a descriptive way. These results showed that the cells of the control group remained viable and without relevant modifications. Nevertheless, cellular cytotoxicity and reduction of viability were observed with the different treatments depending on the doses and times of exposure to them. When the fibroblasts were incubated, for I0 minutes, with the different drugs Ca (OH)2, FDP and NaCIO) and solutions, the viability was affected at the highest concentration of each drug; in the highest concentration of NaCIO and Ca (OH)2, the highest percentages of cellular alteration were produced, however only with NaCIO, even in http://dx.doi.org/10.30972/rfo. 1213870 the lowest dilutions there were lower viabilities than those recorded in the control.O atendimento o do nto pedi àtri co é limitado a tempos de execudo curtos, exigindo maior dependència de agentes antimicrobianos de efìcàcia ràpida para eliminar e prevenir qualquer des envolví mento de microorganismos. Um grande número de Irrigantes químicos é usado para limpar os canals radiculares. O objetivo do presente traballio foi determinar a citotoxlcidade de irrigantes utilizados na irrig a lo de ductos em pe^as primárias odontológicas e determinar a viabilidade, in vitro, da cultura de fibroblastos de camundongos (L-929), por meio da colorimetria rápida de MTT. bioensaio, em diferentes tempos de incubalo. Os irrigantes testados foram: Hidróxido de Càlcio Ca (OH) , Hipoclorito de Sòdio (NaCIO) e Diamine Silver Fluoride (FDP). A viabilidade de fibroblastos para irrigar drogas foi avaliada com diferentes doses e em diferentes tempos, dependendo da adesào celular. Os testes foram realizados em triplicado. As células foram fotografadas e contadas sob um microscopio óptico invertido. Os dados obtidos foram analisados e representados graficamente de forma descritiva. Esses resultados mostraram que as células do grupo controle permaneceram viáveis e sem modificares relevantes. Entretanto, a citotoxicidade celular e a redudo da viabilidade foram observadas com os diferentes tratamientos, dependendo das doses e tempos de exposifáo a elas. Quando os fibroblastos foram incubados, por 10 minutos, com os diferentes fármacos Ca (OH)2, FDP e NaCIO) e solu^óos, a viabilidade foi afetada na maior concentrado de cada fármaco; na maior concentrado de NaCIO e Ca (OH)2, os maiores percentuais de alterado celular foram produzidos, porém apenas com NaCIO, mesmo ñas menores diluidos foram menores as viabilidades que as registradas no controle.Fil: Burlli, Yanina Daniela. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Odontologia; ArgentinaFil: Cardoso, María Lorena. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Odontologia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; ArgentinaFil: Todaro, Juan Santiago. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; ArgentinaFil: Barnes, Tamara Eliana. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Ciencias Exactas Naturales y Agrimensura. Instituto de Química Básica y Aplicada del Nordeste Argentino; ArgentinaFil: Melana Colavita, Juan Pablo. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Medicina. Cátedra de Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste; Argentina. Universidad Nacional del Nordeste. Facultad de Odontologia; Argentin