Adaptive combination of SSB and SUB equipment to master complexity in clinical manufacturing in the clinical supply center

Today’s clinical manufacturing of complex monoclonal antibodies under GMP conditions needs to be highly adaptive in order to face the requirements of constant acceleration of processes. The main challenge of the clinical supply center (CSC) in Penzberg (Germany) is to successfully master the complexity of producing different products in different phases (clinical phase I – III) with different process versions. New products for clinical phase I have different requirements than older products, as well as products in later phases or resupplies. In addition, the actual change to more intensified processes will increase the complexity even more. The CSC is equipped with a variety of bioreactors in different sizes and types. Stainless steel as well as single use bioreactors, which were installed over the past 25 years. In order to face the main challenge, it is mandatory to create a framework that allows the adaptive combination of standard (SSB) and new technologies (SUB). To realize that, SUBs and SSBs are treated equally. SUBs have the advantage to be used more flexible than SSBs because of less preparation time and an easier adaption to intensified processes (like perfusion modules in the N-1 bioreactor). Furthermore, SUBs can be easily connected to every existing bioreactor type (SSB as well) via hose connections. This all offers the chance to utilize existing bioreactor racks more efficient with less slack time. An adaptive combination is also faster and more favorable than just replacing existing with new equipment. The poster shows the successful implementation of the adaptive combination in the CSC, by adding SUBs with increasing volume to the facility (starting with 250L and ending with 2000L production volume) and apply them for existing and new processes. The intensified usage of SUB equipment shortens the upgrade time to adapt to future needs (e.g. switch to perfusion technology). With this flexible setup the multi-product-GMP facility in Penzberg is perfectly prepared for actual and upcoming challenges

ATP-independent Control of Vac8 Palmitoylation by a SNARE Subcomplex on Yeast Vacuoles

Yeast vacuole fusion requires palmitoylated Vac8. We previously showed that Vac8 acylation occurs early in the fusion reaction, is blocked by antibodies against Sec18 (yeast N-ethylmaleimide-sensitive fusion protein (NSF)), and is mediated by the R-SNARE Ykt6. Here we analyzed the regulation of this reaction on purified vacuoles. We show that Vac8 acylation is restricted to a narrow time window, is independent of ATP hydrolysis by Sec18, and is stimulated by the ion chelator EDTA. Analysis of vacuole protein complexes indicated that Ykt6 is part of a complex distinct from the second R-SNARE, Nyv1. We speculate that during vacuole fusion, Nyv1 is the classical R-SNARE, whereas the Ykt6-containing complex has a novel function in Vac8 palmitoylation

Language planning in India

Die Wissenschaft der Sprachplanung kam zu relativem Ruhm in Zusammenhang mit ehemaligen Kolonialländern, in denen die neue Sprachsituation häufig ein Problem darstellte nachdem sie die Unabhängigkeit erlangt hatten. Indien war für Sprachplanung von besonderem Interesse, da es ein in hohem Maße multilinguales Land ist, in dem die Rolle des Englischen ungeklärt blieb, nachdem sich die einstige Britische Kolonialmacht zurückgezogen hatte. Das Ziel dieser Diplomarbeit besteht darin den Prozess der Sprachplanung in Indien zu analysieren, insbesondere in Bezug auf das Englische und seinen Einfluss auf das Bildungssystem und die Medien. Den Grundstein für eine ausführliche Analyse bildet ein theoretischer Hintergrund über die Wissenschaft der Sprachplanung und –politik. Erst dann wird Indien im Speziellen behandelt und die Rolle des Englischen untersucht. Die Grundlage dafür sind vergangene und aktuelle Gesetze und Verordnungen, sowie Zeitungsartikel, als auch Publikumsanalysen der jeweiligen Medien. Da Indien ein relativ großes Land ist und die einzelnen Staaten und Unionsterritorien Sprachplanung eigenständig unternehmen können, dienen zwei indische Staaten als Beispiele. Die Resultate der Arbeit zeigen, dass die Bereiche des Bildungssystems und der Medien die zwei wichtigsten Mittel sind um eine Sprache zu verbreiten, da sie ein breites Publikum ansprechen. Aus diesem Grund wurde in diesen zwei Domänen Sprachplanung besonders intensiv betrieben. Einzelne Analysepunkte weisen jedoch darauf hin, dass dies nicht immer mit Erfolg geschah. Insbesondere das Bildungssystem in Indien litt unter unklaren und missverständlichen Gesetzen, speziell unter solchen, die die Öffentlichkeit und deren Forderung nach einem erhöhten Englischunterricht missachteten. Dieses Bedürfnis basierte darauf, dass die Sprache mittlerweile eine Grundvoraussetzung für gute Arbeitsmöglichkeiten ist und somit auch ein wesentlicher Faktor für soziale Aufstiegsmöglichkeiten. Viele Schulen haben sogar gegen offizielle Gesetze verstoßen, um den Forderungen der Öffentlichkeit nachzugehen und haben widerrechtlich die Anzahl der Englischstunden erhöht. Innerhalb der letzten Jahre haben allerdings die einzelnen indischen Staaten eingelenkt, da sie erkannt haben, dass das Englische ein wichtiges Element für die zukünftige Entwicklung des Landes ist und demensprechend haben sie auch ihre Sprachpolitik zugunsten des Englischen geändert. Während Englisch eine immens wichtige Rolle im indischen Bildungssystem spielt, hat die Sprache nur eine geringe Bedeutung in den Medien. In diesem Bereich herrscht eine eindeutige Präferenz für indische Sprachen, die aufgrund dessen erklärt werden kann, dass der Gebrauch des Englischen auf bestimmte Bereiche begrenzt ist. Diese Bereiche betreffen die Wirtschaft, den Arbeitsmarkt sowie die internationale Entwicklung, die nur einen kleinen Teil von Zeitungen, Radio und Fernsehen ausmachen. Die Medien spezialisieren sich vielmehr auf regionale und lokale Themen, da diese ein großes Publikum versprechen, und die in indischen Sprachen bevorzugt werden – aufgrund von Gruppensolidarität und Gemeinschaftssinn. Englisch ist demnach nicht die Sprache, mit der sich die Inder identifizieren, und findet daher auch keinen Platz in anderen Bereichen als Bildung, Wirtschaft und dem Arbeitsmarkt.Language planning became relatively popular for newly emerged postcolonial countries, in which the use of language(s) was not clear. India was a particularly crucial area for language planning as it is a highly multilingual country within which the role of English has been rather ambiguous after the former colonial British power left. This paper has thus attempted to analyze the process of language planning in India with a particular focus on English and its influence on the educational system and the media. In order to give a profound analysis, a theoretical background of language planning and policy had been provided before turning to the case of India. The role of English was investigated on the basis of past and present language policies, various newspaper articles, as well as the input of listeners, reader- and viewership of the respective media. Since India is relatively large and the individual states and Union territories can undertake language planning according to their own needs, two states serve as case studies. The results of this thesis show that the domains of the educational system and the media are the two most important means for disseminating a language as they both reach large audiences. Language planning has therefore been energetically undertaken within these two areas but the findings suggest that it has not always been successful. The domain of education in particular suffered from vague and unclear policies, especially from those which ignored the public demand for English. The language has become a basic requirement for good job opportunities and thus enables socially upward mobility. Many schools have even violated official policies in order to meet the public need of English. However, within the past decade various states have given way and recognized that English education is crucial for the future development of India and have changed their official policies in favour of English. While English has had a major role in the educational system of India, the findings indicate that it is only of minor importance in the media. The results show a clear preference for Indian languages, which can be explained by the fact that the use of English in the media is restricted to business, economic development and jobs, which only comprise a small part of newspapers, radio and television broadcasts. The media focus rather on regional and local issues which guarantee large audiences, and which are preferred in Indian languages as they encourage group and cultural identity. English in India is not the language with which Indians identify, and has therefore no place outside education, business and the job market

Untersuchungen zum Einfluss von Phytat im Futter auf die Cadmium-Retention in der Niere beim Huehnerkueken

Cd aus Cd-Chlorid in Mais-Soja-Rationen war etwas schlechter verfuegbar als aus Cd3- und Cd6-Phytat. Ein Einfluss steigender Phytat-Gehalte im Futter war nicht mit letzter Sicherheit nachweisbar.Na-Phytat-Zusaetze schienen sich foerdernd auf die Cd-Retention in derNiere auszuwirken. Ca-Ueberschuss fuehrte zu vergleichsweise niedrigeren Cd-Werten in der Niere. Moeglicherweise haengt die Bildungeines Ca-Cd-Phytat-Komplexes im Darm hauptsaechlich von der Ca-Konzentration im Futter ab. Mit halbsynth. Diaeten konnte eine um 3-4fach hoehere Cd- Retention als mit Mais-Soja-Ration nachgewiesen werdenAvailable from: Zentralstelle fuer Agrardokumentation und -information (ZADI), Villichgasse 17, D-53177 Bonn / FIZ - Fachinformationszzentrum Karlsruhe / TIB - Technische InformationsbibliothekSIGLEDEGerman

Nanosatellite attitude control using magnetorquers

Zusammenfassung in englischer SpracheDie vorliegende Arbeit befasst sich mit dem Problem der Lageregelung eines Nanosatelliten. Dieser soll in einer definierten Orientierung in Bezug zur Erde stabilisiert werden. Die Arbeit wurde im Zuge des CubeSat Pegasus Projektes des TU Wien Space Teams durchgeführt und soll in der internationalen QB50 Mission zum Einsatz kommen. Der CubeSat Pegasus Satellit ist aus Standard-Hardware aufgebaut und mit mehreren Luftspulen ausgestattet, um durch Interaktion mit dem Erdmagnetfeld ein gewünschtes Drehmoment zu erzeugen. Diese Art der Aktuierung resultiert in einem unteraktuierten System, da nur Momente orthogonal zum lokalen Magnetfeld erzeugt werden können. Ein allgemeines mathematisches Modell zur Beschreibung der rotatorischen Bewegung des Satelliten wird hergeleitet. Um die definierte Orientierung zu berechnen, wird eine allgemeine Methode zur Trajektorienplanung für Satelliten auf das gegebene Problem angewandt. Die Umgebungsbedingungen in der Flughöhe des Satelliten werden mit Hilfe mathematischer Modelle des Erdmagnetfeldes, der Sonnenposition und erwarteten Störungen hinreichend genau abgebildet. Die Orientierung des Satelliten wird mit Hilfe von Messungen des Erdmagnetfeldes und der Sonnenposition mittels Extended Kalman Filter geschätzt. Um die Anforderungen an die Regelung zu erfüllen, wurde unter Berücksichtigung der bestehenden Hardwarelimitierungen eine sequentielle Regelungsstrategie bestehend aus zwei unabhängigen Regelgesetzen entwickelt. Zunächst wird mit einem einfachen Regelgesetz die hohe Winkelgeschwindigkeit des Satelliten nach dem Abwurf reduziert ohne dabei die aktuelle Lage zu berücksichtigen. Sobald die Winkelgeschwindigkeiten einen bestimmten Grenzwert unterschreiten, wird ein PD Regelgesetz zur Stabilisierung der Fluglage verwendet. Die Stabilität der Regelgesetze wird mittels Lyapunov Methoden und der Averaging Theory nach Khalil überprüft. Auf diese Weise kann die sogennante almost global stability nachgewiesen werden. Die theoretischen Ergebnisse werden mit einer realitätsnahen Simulation unter Berücksichtigung von fehlerhaften Messungen und Rauschen validiert. Die Simulationsergebnisse zeigen, dass die gestellten Anforderungen erfüllt werden und das Projekt erfolgreich umgesetzt werden kann.The aim of this work is to derive an attitude control system for a nanosatellite that stabilizes a defined orientation with respect to the Earth. The work is part of the CubeSat Pegasus project of the TU Wien Space Team for the international QB50 mission. The CubeSat Pegasus is built with commercial off-the-shelf hardware and uses a set of magnetic coils to generate a control torque utilizing the Earth-s magnetic field. This actuation principle results in an underactuated mechanical system, because the generated torque is restricted to be perpendicular to the local magnetic field. A mathematical framework including a general model describing the attitude dynamics of a rigid spacecraft is derived. A general formalism for satellite trajectory planning is presented and simplified for the desired task. The environment in the altitude of the satellite's orbit is described using mathematical models of the Earth's magnetic field, the Sun position, and disturbance torques. The satellite's orientation is determined using measurements of the Earth's magnetic field and the Sun's position in an Extended Kalman Filter design. In order to achieve the given requirements while considering the hardware limitations, a sequential control strategy using two different control laws is developed. In a first control phase, the high angular velocity of the satellite at tip-off is decreased without considering the attitude. When the angular velocities get small enough, a PD control law is applied to stabilize the satellite-s attitude at a pre-calculated trajectory. The stability of the control strategy is proven, using Lyapunov methods and Khalil's averaging theory. Thereby, almost global stability of the rigid spacecraft is shown. The presented theoretical results are supported with simulations of a realistic case study including expected measurement errors. The simulation results show that the given requirements are fulfilled and a realization of the project is possible.7

Comparative study for the production of MABs in single-use (SUB) vs. stainless-steel bioreactors (SSB) based on product quality and stress factorsComparative study for the production of MABs in single-use (SUB) vs. stainless-steel bioreactors (SSB) based on product quality and stress factors

Today’s clinical manufacturing of monoclonal antibodies (MABs) in a multi-product GMP facility needs to be highly flexible in order to support the R & D’s quick changing pipeline. One main challenge is to plan production in a multi-equipment GMP facility that offers a wide range of different types of bioreactor systems and scales. While stainless steel bioreactors (SSB) have been used as the standard bioreactor type for years, over the past decade, single-use bioreactors (SUB) have been installed and are well accepted in modern biopharmaceutical manufacturing facilities. SUB’s provide several advantages e.g. reduced investment costs, easy product changeover, increased productivity through shortened unit operation times and less manpower. Despite these benefits it is absolutely mandatory to ensure that the production of monoclonal antibodies in SUB’s is comparable to the production in SSB’s concerning product quality and stress indicators. The aim of this study was to analyze data of cell culture runs performed in SSBs and SUBs to make a statement regarding comparability. For that purpose data from ten different antibody projects, which are representative of former and future products from R & D’s pipeline, were considered in the analysis. The total data package comprised 75 different cell culture runs. The focus was on product quality attributes e.g. purity, charge heterogeneity as well as on stress indicators such as specific productivity, viable cell density, viability and LDH levels. Equivalence ranges, i.e. differences that are deemed acceptable, were defined prior to statistical analysis. The results demonstrate that all the investigated cell culture stress indicators and product quality attributes are comparable between the single-use and stainless-steel bioreactor systems. To sum up, either system can be used for the clinical manufacturing of monoclonal antibodies. Therefore, this study supports a highly flexible utilization of single use and stainless steel bioreactors within a multi equipment GMP facility and helps to increase production speed

The Dsl1 protein tethering complex is a resident endoplasmic reticulum complex, which interacts with five soluble NSF (N-ethylmaleimide-sensitive factor) attachment protein receptors (SNAREs) implications for fusion and fusion regulation.

Retrograde vesicular transport from the Golgi to the ER requires the Dsl1 tethering complex, which consists of the three subunits Dsl1, Dsl3, and Tip20. It forms a stable complex with the SNAREs Ufe1, Use1, and Sec20 to mediate fusion of COPI vesicles with the endoplasmic reticulum. Here, we analyze molecular interactions between five SNAREs of the ER (Ufe1, Use1, Sec20, Sec22, and Ykt6) and the Dsl1 complex in vitro and in vivo. Of the two R-SNAREs, Sec22 is preferred over Ykt6 in the Dsl-SNARE complex. The NSF homolog Sec18 can displace Ykt6 but not Sec22, suggesting a regulatory function for Ykt6. In addition, our data also reveal that subunits of the Dsl1 complex (Dsl1, Dsl3, and Tip20), as well as the SNAREs Ufe1 and Sec20, are ER-resident proteins that do not seem to move into COPII vesicles. Our data support a model, in which a tethering complex is stabilized at the organelle membrane by binding to SNAREs, recognizes the incoming vesicle via its coat and then promotes its SNARE-mediated fusion