Estudo do efeito leishmanicida da dermaseptina-01, um peptídeo antimicrobiano de Phyllomedusa azurea

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Núcleo de Medicina Tropical, 2015.A leishmaniose coloca em risco atualmente 350 milhões de pessoas em 88 países ao redor do mundo e estima-se que existam 12 milhões de pessoas infectadas no mundo. Os medicamentos utilizados no tratamento da leishmaniose são tóxicos e podem provocar resistência farmacológica. Portanto, é importante a busca por novos princípios ativos com ação leishmanicida. Entre eles, a dermaseptina-01 é um peptídeo catiônico e anfifílico que potencialmente pode ser introduzido em novas formulações terapêuticas devido a sua capacidade de interagir com as membranas das células resultando em um processo de permeabilização e rompimento da membrana do micro-organismo. No entanto, devido a sua capacidade lítica e por ser um princípio ativo novo, faz-se necessário compreender seu efeito nos macrófagos, que por um lado, são as células hospedeiras da infecção, e por outro são importantes na resposta inata contra o parasito. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da dermaseptina-01 na função e na viabilidade dos macrófagos infectados com Leishmania amazonensis. Macrófagos de camundongos Swiss coletados por lavagem peritoneal foram infectados ou não com formas amastigotas e tratados ou não com 0,06, 0,13, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 8, 16, 32 ou 64 μg/mL de dermaseptina-01 para avaliar funções celulares como aderência, formação de corpúsculos lipídicos (coloração com Óleo Vermelho), a capacidade fagocitária e a microbicida pela produção de peróxido de hidrogênio (Método de Pick) e óxido nítrico (Método de Greiss), bem como avaliar seu efeito sobre a viabilidade dos macrófagos (coloração com laranja de acridina) e células (Método de exclusão com nigrosina). Os resultados, analisados por testes pareados mostraram que a dermaseptina-01: 1) reduziu o índice de infecção de macrófagos em todas as concentrações testadas (Teste t-pareado, p0,05); 4) diminuiu a viabilidade em cultivos de macrófagos nas concentrações de 1, 4 e 16 μg/mL (p=0,009); 5) inibiu a produção de peróxido de hidrogênio na presença ou não da infecção nas concentrações de 1, 4 e 16 μg/mL (p0.05); 4) decreased viability in macrophage cultures at concentrations of 1, 4 or 16 μg/mL (p=0.009); 5) inhibit hydrogen peroxide production in the presence or absence of infection with the concentrations of 1, 4 and 16 μg/mL (p<0.05); 6) increased the nitric oxide production when concentrations 4:16 μg/mL were used (p<0.05); 7) increased in a dose-dependent pattern the corpuscular index by increasing the number of corpuscles in the cytoplasm of macrophages (p <0.05). Together, the results demonstrate that dermosseptina was able to reduce the infection by L. amazonensis, possibly due to the enhancing the microbicidal capacity and modulating macrophage functions, without however causing the death of these cells. These data indicate the potential of dermaseptina-01 againt leishmaniasis and point to future biomedical applications of this peptide

Análise descritiva das internações e óbitos por asma no nordeste do Brasil: Desafios no contexto da pandemia de COVID-19

Asthma is a chronic respiratory condition that affects millions of people around the world, being one of the main causes of hospital admissions in Brazil. The COVID-19 pandemic has not only brought with it direct challenges related to the new coronavirus but has also had significant impacts on several areas of healthcare, including the management of pre-existing conditions such as asthma. The intersection between the pandemic and hospital admissions reveals a complex dynamic, in which factors such as exposure to the virus, social distancing measures and changes in standards of care play crucial roles. Knowing this, it is important to collect pre- and post-pandemic epidemiological profiles, understand the impact of the pandemic on hospitalizations and deaths related to asthma and identify the most vulnerable population groups. The objective of this article was to analyse the prevalence and epidemiological profile of hospitalizations and deaths related to asthma in the Northeast of Brazil from 2018 to 2022. This is a quantitative and retrospective study, which analyses hospitalizations and deaths caused by asthma in the northeast region. based on public data available in the Hospital Information System (SIH) of the Unified Health System (SUS). During the period analysed, there was a 24.7% reduction in hospitalizations and a 29.2% increase in deaths. The state of Bahia had the highest number of hospitalizations and deaths, predominantly among children aged 1 to 4 years. Furthermore, there was a significant increase in hospital expenses during the COVID-19 pandemic. Understanding the epidemiological profile of the incidence of hospitalizations and deaths due to asthma is crucial to support effective prevention, treatment, and management strategies for this chronic respiratory condition.A asma é uma condição respiratória crônica que afeta milhões de pessoas em todo o mundo, sendo uma das principais causas de internações hospitalares no Brasil. A pandemia de COVID-19 trouxe consigo não apenas desafios diretos relacionados ao novo coronavírus, mas também teve impactos significativos em diversas áreas da saúde, incluindo o manejo de condições pré-existentes, como a asma. A interseção entre a pandemia e as internações hospitalares revela uma dinâmica complexa, na qual fatores como a exposição ao vírus, as medidas de distanciamento social e as mudanças nos padrões de atendimento desempenham papéis cruciais. Sabendo disso, é importante recolher perfis epidemiológicos pré e pós-pandemia, compreender o impacto da pandemia nas hospitalizações e óbitos relacionadas à asma e identificar os grupos populacionais mais vulneráveis. O objetivo deste artigo foi analisar a prevalência e o perfil epidemiológico das internações e óbitos relacionados à asma no Nordeste do Brasil de 2018 a 2022. Este é um estudo quantitativo e retrospectivo, que realiza a análise das internações e óbitos causados por asma na região nordeste a partir de dados públicos disponíveis no Sistema de Informações Hospitalares (SIH) do Sistema Único de Saúde (SUS). Durante o período analisado, houve uma redução de 24,7% nas internações e um aumento 29,2% nos óbitos. O estado da Bahia apresentou o maior número de internações e óbitos, predominando entre crianças com 1 a 4 anos. Além disso, houve um aumento expressivo nos gastos hospitalares durante a pandemia de COVID-19. A compreensão do perfil epidemiológico da incidência das internações e óbitos por asma revela-se crucial para embasar estratégias eficazes de prevenção, tratamento e gestão dessa condição respiratória crônica

ACW-02 an Acridine Triazolidine Derivative Presents Antileishmanial Activity Mediated by DNA Interaction and Immunomodulation

The present study proposed the synthesis of a novel acridine derivative not yet described in the literature, chemical characterization by NMR, MS, and IR, followed by investigations of its antileishmanial potential. In vitro assays were performed to assess its antileishmanial activity against L. amazonensis strains and cytotoxicity against macrophages through MTT assay and annexin V-FITC/PI, and the ability to perform an immunomodulatory action using CBA. To investigate possible molecular targets, its interaction with DNA in vitro and in silico targets were evaluated. As results, the compound showed good antileishmanial activity, with IC50 of 6.57 (amastigotes) and 94.97 (promastigotes) &micro;g mL&minus;1, associated with non-cytotoxicity to macrophages (CC50 &gt; 256.00 &micro;g mL&minus;1). When assessed by flow cytometry, 99.8% of macrophages remained viable. The compound induced an antileishmanial effect in infected macrophages and altered TNF-&alpha;, IL-10 and IL-6 expression, suggesting a slight immunomodulatory activity. DNA assay showed an interaction with the minor grooves due to the hyperchromic effect of 47.53% and Kb 1.17 &times; 106 M&minus;1, and was sustained by docking studies. Molecular dynamics simulations and MM-PBSA calculations propose cysteine protease B as a possible target. Therefore, this study demonstrates that the new compound is a promising molecule and contributes as a model for future works

Resumos concluídos - Ciências Biológicas

Resumos concluídos - Ciências Biológica

Guidelines for the use and interpretation of assays for monitoring autophagy (4th edition)

In 2008, we published the first set of guidelines for standardizing research in autophagy. Since then, this topic has received increasing attention, and many scientists have entered the field. Our knowledge base and relevant new technologies have also been expanding. Thus, it is important to formulate on a regular basis updated guidelines for monitoring autophagy in different organisms. Despite numerous reviews, there continues to be confusion regarding acceptable methods to evaluate autophagy, especially in multicellular eukaryotes. Here, we present a set of guidelines for investigators to select and interpret methods to examine autophagy and related processes, and for reviewers to provide realistic and reasonable critiques of reports that are focused on these processes. These guidelines are not meant to be a dogmatic set of rules, because the appropriateness of any assay largely depends on the question being asked and the system being used. Moreover, no individual assay is perfect for every situation, calling for the use of multiple techniques to properly monitor autophagy in each experimental setting. Finally, several core components of the autophagy machinery have been implicated in distinct autophagic processes (canonical and noncanonical autophagy), implying that genetic approaches to block autophagy should rely on targeting two or more autophagy-related genes that ideally participate in distinct steps of the pathway. Along similar lines, because multiple proteins involved in autophagy also regulate other cellular pathways including apoptosis, not all of them can be used as a specific marker for bona fide autophagic responses. Here, we critically discuss current methods of assessing autophagy and the information they can, or cannot, provide. Our ultimate goal is to encourage intellectual and technical innovation in the field