Sensitivity and specificity of a competitive enzyme immunoassay in the serodiagnosis of bovine brucellosis

O trabalho teve por objetivo avaliar a sensibilidade e a especificidade de um teste imunoenzimático competitivo, empregando como conjugado os anticorpos monoclonais BM-38 e BM-40, no diagnóstico sorológico da brucelose bovina. Foram examinados 74 soros de bovinos dos quais havia sido isolada Brucella abortus e 2.118 soros de bovinos procedentes de rebanhos livres de brucelose e que apresentaram resultado negativo quando submetidos ao teste Rosa Bengala. O teste imunoenzimático competitivo, usando qualquer dos dois conjugados, foi capaz de revelar a presença de anticorpos contra o lipopolissacáride bacteriano em todos os soros de bovinos infectados, o que resulta em uma sensibilidade de 100%. A especificidade do teste usando o conjugado BM-38 foi de 98.82% e usando o conjugado BM-40 foi de 99,95%. Estes resultados indicam que o teste imunoenzimático competitivo, principalmente ao se empregar o conjugado BM-40, consiste em um método bastante útil para ser usado como teste confirmatório no diagnóstico sorológico da brucelose bovina.The purpose of this work was to evaluate the sensitivity and the specificity of a competitive enzyme immunoassay, using as conjugate the monoclonal antibodies BM-38 and BM-40, in the serodiagnosis of bovine brucellosis. Seventy-four sera from culture-positive cattle and 2,118 cattle sera from herds free from brucellosis and negative to the Rose Bengal plate test were examined. The competitive enzyme immunoassay, using any of the two conjugates, was able to reveal the presence of antibodies to Brucella lipopolysaccharide in all of the 74 sera of the infected cattle, resulting in a sensitivity of 100%. The specificity of the test using the conjugate BM-38 was 98.82% and using the conjugate BM-40 was 99.95%. These results indicated that the competitive enzyme immunoassay, mainly when using the conjugate BM-40, consists in a technique very useful in the confirmation of the serological diagnosis of bovine brucellosis

Isolation of Leptospira spp. from a man living in a rural area of the Municipality of Cruz Alta, RS, Brazil

The aim of this study wasto describe the isolation of a pathogenic strain of Leptospira interrogans from the urine sample of a male human living in the rural area of the County of Cruz Alta, Rio Grande do Sul. An aliquot of each urine sample was sown in a Fletcher and Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH) media. Samples in which there was growth of spirochetes were sent to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were typified by the Multiple Locus of Variable Number Tandem Repeat technique (MLVA). Leptospira interrogans serovar Copenhageni strain Fiocruz L1-130 was isolated, and this is a very important finding that serves as a warning to characterize risk situation of leptospirosis epidemic by a pathogenic strain. Health professionals need to be more committed to the primary health care in Brazil and routinely apply actions of preventive medicine in rural communities in order to get success in the control of leptospirosis and other important zoonoses.O objetivo do presente estudo foi descrever um caso de isolamento de espécie patogênica de Leptospira interrogans em amostra de urina de um humano morador da zona rural do Município de Cruz Alta, Estado do Rio Grande do Sul. De cada amostra de urina, uma alíquota foi semeada nos meios Fletcher e Ellinghausen - McCullough - Johnson - Harris (EMJH). As amostras, nas quais houve crescimento de espiroquetas, foram encaminhadas para o Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia do Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuária Buenos Aires, Argentina e foram tipificadas pela técnica Multiple Locus ofVariableNumber Tandem Repeat(MLVA).De um residente do sexo masculino da área rural do município de Cruz Alta, foi isolada Leptospira interrogans sorovariedade Copenhageni cepa Fiocruz L1-130, uma descoberta muito importante e que serve como um alerta por caracterizar uma situação de risco de epidemia de leptospirose por uma cepa patogênica. Os profissionais de saúde precisam ser mais comprometidos com a atenção primária à saúde no Brasil e rotineiramente aplicar ações de medicina preventiva nas comunidades rurais, a fim de obter sucesso no controle da leptospirose e de outras importantes zoonoses.Fil: da Silva, Felipe Jorge. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Pinheiro Silva, Glaucenyra Cecília. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Samartino, Luis Ernesto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Fernandez Alarcon, Miguel Frederico. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Pereira dos Santos, Carlos Eduardo. Universidade Federal do Mato Grosso do Sul; BrasilFil: Mathias , Luis Antonio. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; Brasi

Isolation of Leptospira borgpetersenii in synanthropic Didelphis albiventris in Jaboticabal, São Paulo, Brazil

A leptospirose é uma zoonose de veiculação hídrica e, portanto, se destaca pela possibilidade de contaminação ambiental, o que facilita a transmissão cruzada entre animais domésticos, selvagens e humanos. Espécies de gambás são importantes reservatórios dessa enfermidade, tornando-os potenciais disseminadores do agente. Com o objetivo de verificar a presença de Leptospira spp. e de anticorpos contra Leptospira spp. no Campus da Universidade Estadual Paulista, em Jaboticabal, foram capturados gambás (Didelphis albiventris) de vida livre para a colheita de amostras de sangue e de urina. As análises sorológicas foram efetuadas pela técnica de Soroaglutinação Microscópica (SAM). Alíquotas de urina foram semeadas nos meios Ellinghausen-McCullough-Johnson-Harris (EMJH) e Fletcher sem antibióticos. As amostras que apresentaram crescimento de espiroquetas foram levadas ao Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia, no Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria, Buenos Aires, Argentina e foram genotipadas com a técnica de Múltiplos Locus de Números Variáveis de Repetição em Tandem (MLVA). Dos 15 animais examinados pela SAM, nove (60,0%) foram reagentes à sorovariedade Patoc. Foi isolada e identificada a espécie patogênica Leptospira bosrpetersenii de três Didelphis albiventris. Os achados de isolamento da espécie patogênica Leptospira borgpetersenii na cultura de urina de três Didelphis albiventris são um grande descobrimento para as áreas da medicina veterinária preventiva e da saúde pública e reforçam a discussão sobre o importante papel dos animais selvagens de vida livre como reservatórios desse agente para animais domésticos e seres humanos, situação que serve de alerta para melhorias nas práticas sanitárias.Leptospirosis is a waterborne disease and, therefore, stands out for the possibility of environmental contamination, the cross transmission between domestic and wild animals and humans. Opossum species are important reservoirs of this disease making them potential pathogen spreaders. Aiming to verify the presence of Leptospira spp. and the antibodies against Leptospira spp. in the Campus of São Paulo State University, in Jaboticabal, São Paulo, Brazil, freeliving wild life opossum (Didelphis albiventris) were captured for blood and urine sampling. Serological analysis was performed Microscopic Agglutination Test (MAT). Aliquots of urine were seeded in media Ellinghausen-McCullough- Johnson-Harris (EMJH) and Fletcher without antibiotics. The samples in which there was growth of leptospires were forwarded to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology in the National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and were genotyped using Multiple Locus Variable number tandem repeat Analysis (MLVA). Of the 15 analyzed animals, nine (60.0%) were reactant to Patoc serovar. The pathogenic specie Leptospira borgpetersenii was isolated and identified in three Didelphis albiventris. The isolation findings of pathogenic specie Leptopsira borgpetersenii in the urine culture of three Didelphis albiventris in a university campus are a major discovery in the area of preventive veterinary medicine and public health and open a discussion about the important role of free-living wild animals as reservoirs of this agent to domestic animals and humans, a condition that serves as a warning for the improvement of health practices

Epidemiological characteristics of Leptospira spp. infection in bovine herds in Mato Grosso do Sul, Brazil

Foi realizado um inquérito epidemiológico da leptospirose em bovinos de rebanhos de corte do estado de Mato Grosso do Sul, de modo a determinar a frequência e as sorovariedades reagentes. Para isso, foram examinados 4.629 bovinos de corte, com uma coleção de 33 sorovariedades de Leptospira, por meio da prova de Soroaglutinação Microscópica (MAT). Dos 4.629 animais examinados, 3.814 (82,39%) foram reagentes com reações predominates para o sorogrupo Sejroe, sorovar Wolffi (36,49%). Assim, a alta frequência de animais reagentes encontrada justifica a implantação de medidas gerais e específicas para conter e/ou prevenir a infecção nos animais dessa região.The epidemiological characteristics of bovine leptospirosis in animals and herds in Mato Grosso do Sul were investigated to determine parameters such as disease frequency and the serovars reactant in beef cattle herds. A total of 4,629 beef cattle herds were examined against 33 Leptospira spp. serovars. The serum samples were submitted to the microscopic agglutination test (MAT) for the serological diagnosis of leptospirosis. The MAT results showed that 3,814 (82.39%) of the 4,629 animals evaluated were seropositive for the bacterium, with serological reactions mainly to serogroup Sejroe, serovar Wolffi (36.49%). The observed high frequency of reactive animals demonstrates the relevance of the infection. Therefore, general and specific measures should be implemented to contain and/or prevent infection of the animals in the studied region

Efficiency of Different Disinfectants on Bacillus cereus Sensu Stricto Biofilms on Stainless-Steel Surfaces in Contact With Milk

The species of the Bacillus cereus group have the ability to adhere to and form biofilms on solid surfaces, including stainless steel, a material widely used in food industries. Biofilms allow for recontamination during food processing, and the “clean-in-place” (CIP) system is largely used by industries to control them. This study thus proposes to evaluate the efficacy of peracetic acid and sodium hypochlorite against biofilms induced on stainless-steel surfaces. The SAMN07414939 isolate (BioProject PRJNA390851), a recognized biofilm producer, was selected for biofilm induction on AISI 304 stainless steel. Biofilm induction was performed and classified into three categories: TCP (Tindalized, Contaminated, and Pasteurized milk), TCS (Tindalized milk Contaminated with Spores), and TCV (Tindalized milk Contaminated with Vegetative cells). Subsequently, the coupons were sanitized simulating a CIP procedure, on a pilot scale, using alkaline and acid solutions followed by disinfectants (peracetic acid and sodium hypochlorite). Microorganism adhesion on the surfaces reached 6.3 × 105 to 3.1 × 107 CFU/cm-2. Results did not show significant differences (p > 0.05) for surface adhesion between the three tested categories (TCP, TCS, and TCV) or (p > 0.05) between the two disinfectants (peracetic acid and sodium hypochlorite). Microbial populations adhered to the stainless-steel coupons are equally reduced after treatment with peracetic acid and sodium hypochlorite, with no differences in the control of B. cereuss.s. biofilms on AISI 304 stainless-steel surfaces

Search of leptospires and of antibodies against leptospires in animals and human beings in farms in Pantanal and Caatinga Brazilian biomes

Foi investigada a ocorrência de leptospiras e de sororreatividade para leptospiras em animais e seres humanos de seis propriedades rurais localizadas em dois biomas brasileiros que apresentam condições geoclimáticas distintas: Pantanal – municípios de Miranda (MS), Itiquira (MT) e Poconé (MT) e Caatinga – municípios de Sobradinho (CE), Garanhuns (PE) e Sobral (BA). Em cada uma das propriedades, foram realizadas colheitas de sangue e de urina de animais selvagens de vida livre, animais domésticos e de seres humanos. As colheitas de materiais foram realizadas no período de fevereiro a abril de 2012 no bioma Caatinga e no período de julho a setembro de 2012 no bioma Pantanal. A reatividade sorológica contra Leptospira spp. foi verificada pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM) efetuada com uma coleção de antígenos constituída por 24 sorovares de Leptospira spp. A pesquisa de leptospiras foi efetuada por cultivos de amostras de urina semeadas nos meios Fletcher e de Ellinghausen – McCullough – Johnson – Harris (EMJH). Os cultivos em que houve crescimento de leptospiras foram encaminhados ao Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia, Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuária, Buenos Aires, Argentina e as estirpes de leptospiras isoladas foram genotipadas com o emprego da técnica de Multiple Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA). O procedimento de tipificação empregou os VNTR 4, 7, 9, 10, 19, 23, 31, Lb4 e Lb5, que discriminam estirpes de L. interrogans e L. borgpetersenii. No Pantanal, foram examinados 17 animais selvagens, 65 animais domésticos e dois humanos. Na Caatinga, foram examinados sete animais selvagens, 100 animais domésticos e 26 humanos. Das 84 amostras de sangue examinadas no Pantanal, 47 (55,95%) foram reagentes e, das 133 da Caatinga, 59 (44,36%) foram reagentes. Pelo teste exato de Fisher, considerando-se um nível de significância de 0,05, não houve diferença entre as proporções de animais sororreagentes para Leptospira spp. nos dois biomas avaliados (p = 0,063). Os sorovares predominantes nas reações de SAM foram: 1) Pantanal – Bratislava (animais selvagens, cães e humanos); Grippotyphosa (equinos e bovinos); 2) Caatinga – Copenhageni (humanos e cães), Patoc (equinos e bovinos), Panama (ovinos e caprinos), Patoc, Copenhageni e Australis (animais selvagens). Houve isolamento de quatro estirpes de leptospiras: duas em Sobradinho, BA, L. interrogans sorogrupo Pomona em Cavea aperea e L. interrogans em Euphractus sexcinctus; e duas em Sobral, CE, L. interrogans em Cerdocyon thous e L. interrogans sorogrupo Pomona em Euphractus sexcinctus.The occurrence of Leptospira and of seroreactivity against Leptospira was investigated in animals and humans from six farms located in two Brazilian biomes that have different geoclimatic conditions: Pantanal – municipalities of Miranda (MS), Itiquira (MT) and Poconé (MT) and Caatinga – municipalities of Sobradinho (BA), Garanhuns (PE) and Sobral (BA). Blood and urine samples of wildlife, domestic animals and humans were collected at each property. The samples were collected from February to April 2012 in Caatinga and from July to September 2012 in Pantanal. The serological reactivity against Leptospira spp. was verified by microscopic agglutination technique (MAT) made with a collection consisting by 24 antigens of Leptospira spp. The leptospires research was carried out by urine samples crop sown in Fletcher resources and Ellinghausen – McCullough – Johnson – Harris (EMJH). Crops with growth of leptospires were referred to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology, National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and isolated Leptospira strains were genotyped with the technique of Multiple Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA). The classification procedure employed the VNTR 4, 7, 9, 10, 19, 23, 31, LB4 and LB5, which discriminate strains of L. interrogans and L. borgpetersenii. In Pantanal, 17 wildlife, 65 domestic animals and two humans were examined. In Caatinga, seven wild animals were examined, along with 100 domestic animals and 26 humans. Of 84 blood samples tested in Pantanal, 47 (55.95%) were positive and, of 133 in Caatinga, 59 (44.36%) were reactant. By Fisher’s exact test, considering a 0.05 significance level, there was no difference between the proportions of serum reagent animals against Leptospira spp. in two biome reviews (p = 0.063). The predominant serovars in SAM reactions were: 1) Pantanal – Bratislava (wildlife, dogs and humans), Grippotyphosa (horses and cattle); 2) Caatinga – Copenhageni (humans and dogs), Patoc (horses and cattle), Panama (sheep and goats), Patoc, Copenhageni and Australis (wildlife). Four strains of Leptospira were isolated: two in Sobradinho, BA, L. interrogans serogroup Pomona in Cavea aperea and L. interrogans in Euphractus sexcinctus; and two in Sobral, CE, L. interrogans in Cerdocyon thous and L. interrogans serogroup Pomona in Euphractus sexcinctus.Fil: Silva, Felipe Jorge da. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Santos, Carlos Eduardo Pereira dos. Universidade Federal do Mato Grosso do Sul; BrasilFil: Silva, Talita Ribeiro. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Silva, Glaucenyra Cecília Pinheiro. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Grune Loffler, Sylvia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Brihuega, Bibiana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Alarcon, Miguel Frederico Fernandez. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; BrasilFil: Curci, Vera Cláudia Magalhães. Agência Paulista de Tecnologia dos Agronegócios; BrasilFil: Mathias, Luis Antonio. Universidade Estadual Paulista Julio de Mesquita Filho; Brasi

Pesquisa de leptospiras e de anticorpos contra leptospiras em animais e humanos de propriedades rurais nos biomas brasileiros Pantanal e Caatinga

Foi investigada a ocorrência de leptospiras e de sororreatividade para leptospiras em animais e seres humanos de seis propriedades rurais localizadas em dois biomas brasileiros que apresentam condições geoclimáticas distintas: Pantanal – municípios de Miranda (MS), Itiquira (MT) e Poconé (MT) e Caatinga – municípios de Sobradinho (CE), Garanhuns (PE) e Sobral (BA). Em cada uma das propriedades, foram realizadas colheitas de sangue e de urina de animais selvagens de vida livre, animais domésticos e de seres humanos. As colheitas de materiais foram realizadas no período de fevereiro a abril de 2012 no bioma Caatinga e no período de julho a setembro de 2012 no bioma Pantanal. A reatividade sorológica contra Leptospira spp. foi verificada pela técnica de soroaglutinação microscópica (SAM) efetuada com uma coleção de antígenos constituída por 24 sorovares de Leptospira spp. A pesquisa de leptospiras foi efetuada por cultivos de amostras de urina semeadas nos meios Fletcher e de Ellinghausen – McCullough – Johnson – Harris (EMJH). Os cultivos em que houve crescimento de leptospiras foram encaminhados ao Laboratório de Leptospirose do Instituto de Patobiologia, Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuária, Buenos Aires, Argentina e as estirpes de leptospiras isoladas foram genotipadas com o emprego da técnica de Multiple Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA). O procedimento de tipificação empregou os VNTR 4, 7, 9, 10, 19, 23, 31, Lb4 e Lb5, que discriminam estirpes de L. interrogans e L. borgpetersenii. No Pantanal, foram examinados 17 animais selvagens, 65 animais domésticos e dois humanos. Na Caatinga, foram examinados sete animais selvagens, 100 animais domésticos e 26 humanos. Das 84 amostras de sangue examinadas no Pantanal, 47 (55,95%) foram reagentes e, das 133 da Caatinga, 59 (44,36%) foram reagentes. Pelo teste exato de Fisher, considerando-se um nível de significância de 0,05, não houve diferença entre as proporções de animais sororreagentes para Leptospira spp. nos dois biomas avaliados (p = 0,063). Os sorovares predominantes nas reações de SAM foram: 1) Pantanal – Bratislava (animais selvagens, cães e humanos); Grippotyphosa (equinos e bovinos); 2) Caatinga – Copenhageni (humanos e cães), Patoc (equinos e bovinos), Panama (ovinos e caprinos), Patoc, Copenhageni e Australis (animais selvagens). Houve isolamento de quatro estirpes de leptospiras: duas em Sobradinho, BA, L. interrogans sorogrupo Pomona em Cavea aperea e L. interrogans em Euphractus sexcinctus; e duas em Sobral, CE, L. interrogans em Cerdocyon thous e L. interrogans sorogrupo Pomona em Euphractus sexcinctus.The occurrence of Leptospira and of seroreactivity against Leptospira was investigated in animals and humans from six farms located in two Brazilian biomes that have different geoclimatic conditions: Pantanal – municipalities of Miranda (MS), Itiquira (MT) and Pocone (MT) and Caatinga – municipalities of Sobradinho (BA), Garanhuns (PE) and Sobral (BA). Blood and urine samples of wildlife, domestic animals and humans were collected at each property. The samples were collected from February to April 2012 in Caatinga and from July to September 2012 in Pantanal. The serological reactivity against Leptospira spp. was verified by microscopic agglutination technique (MAT) made with a collection consisting by 24 antigens of Leptospira spp. The leptospires research was carried out by urine samples crop sown in Fletcher resources and Ellinghausen – McCullough – Johnson – Harris (EMJH). Crops with growth of leptospires were referred to the Leptospirosis Laboratory of the Institute of Pathobiology, National Institute of Agricultural Technology, Buenos Aires, Argentina and isolated Leptospira strains were genotyped with the technique of Multiple Locus Variable Number Tandem Repeat Analysis (MLVA). The classification procedure employed the VNTR 4, 7, 9, 10, 19, 23, 31, LB4 and LB5, which discriminate strains of L. interrogans and L. borgpetersenii. In Pantanal, 17 wildlife, 65 domestic animals and two humans were examined. In Caatinga, seven wild animals were examined, along with 100 domestic animals and 26 humans. Of 84 blood samples tested in Pantanal, 47 (55.95%) were positive and, of 133 in Caatinga, 59 (44.36%) were reactant. By Fisher’s exact test, considering a 0.05 significance level, there was no difference between the proportions of serum reagent animals against Leptospira spp. in two biome reviews (p = 0.063). The predominant serovars in SAM reactions were: 1) Pantanal – Bratislava (wildlife, dogs and humans), Grippotyphosa (horses and cattle); 2) Caatinga – Copenhageni (humans and dogs), Patoc (horses and cattle), Panama (sheep and goats), Patoc, Copenhageni and Australis (wildlife). Four strains of Leptospira were isolated: two in Sobradinho, BA, L. interrogans serogroup Pomona in Cavea aperea and L. interrogans in Euphractus sexcinctus; and two in Sobral, CE, L. interrogans in Cerdocyon thous and L. interrogans serogroup Pomona in Euphractus sexcinctus

Comparative genomic survey of Bacillus cereus sensu stricto isolates from the dairy production chain in Brazil

Made available in DSpace on 2018-11-26T17:48:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-02-01Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)The genomes of 262 Bacillus cereus isolates were analyzed including 69 isolates sampled from equipment, raw milk and dairy products from Brazil. The population structure of isolates showed strains belonging to known phylogenetic groups II, III, IV, V and VI. Almost all the isolates obtained from dairy products belonged to group III. Investigation of specific alleles revealed high numbers of isolates carrying toxin-associated genes including cytK (53.62%), hblA (59.42%), hblC (44.93%), hblD ( 53.62%), nheA (84.06%), nheB (89.86%) and nheC (84.06%) with isolates belonging to groups IV and V having significant higher prevalence of hblACD and group IV of CytK genes. Strains from dairy products had significantly lower prevalence of CytK and hblACD genes compared to isolates from equipment and raw milk/bulk tanks. Genes related to sucrose metabolism were detected at higher frequency in isolates obtained from raw milk compared to strains from equipment and utensils. The population genomic analysis demonstrated the diversity of strains and variability of putative function among B. cereus group isolates in Brazilian dairy production, with large numbers of strains potentially able to cause foodborne illness. This detailed information will contribute to targeted interventions to reduce milk contamination and spoilage associated with B. cereus in Brazil.Univ Estadual Paulista, UNESP, Dept Med Vet Prevent & Reprod Anim, FCAV, Via Acesso Paulo Castellane S-N, BR-14884900 Sao Paulo, BrazilUniv Sao Paulo, Dept Med Vet, FZEA, Ave Duque de Caxias Norte 225, BR-13635900 Sao Paulo, BrazilUniv Bath, Dept Biol & Biochem, Milner Ctr Evolut, 4 South,Lab 0-39, Bath BA2 7AY, Avon, EnglandSwansea Univ, Med Sch, Swansea SA2 8PP, W Glam, WalesUniv Estadual Paulista, UNESP, Dept Med Vet Prevent & Reprod Anim, FCAV, Via Acesso Paulo Castellane S-N, BR-14884900 Sao Paulo, BrazilFAPESP: 2014/13104-1FAPESP: 2015/20874-0FAPESP: 2016/19214-