Teste de imunofluorescência indireta para a detecção de anticorpos contra o vírus da encefalite St.Louis

An in house indirect immmunofluorescence assay ( IFA ) in relation to neutralization (NT) reference test, was assessed as a fast and cheap method to carry out serological surveys for St. Louis Encephalitis virus (SLE). Sera obtained from 213 blood donors were analyzed by both tests. The prevalence of seropositivity obtained with IFA was lower than (30.98%) that observed on NT (41.78%). The relative specificity rate of IFA was 96.77% whereas its relative sensitivity rate was 69.66%. Kappa index showed a good correlation between both tests. The results indicate that neutralization assay is still the serological test with the highest sensitivity and specificity relative rates for detecting antibodies against SLE virus. Nevertheless, the IFA could be useful as an alternative test in order to learn the circulation of the Flavivirus genus in a certain area.Com a finalidade de dispor de um método rápido e de baixo custo para realizar estudos séricos dirigidos ao virus da encefalite St.Louis (ESL), avaliamos a técnica de imunofluorescência indireta (IFI) artesanal em relação ao teste referência de neutralização (NT). Examinaram-se 213 soros de doadores de sangue. A prevalência dos anticorpos obtidas na técnica de IFI (30,98%) foi mais baixa do que a pesquisada com NT (41,78%). A taxa de especificidade relativa da IFI foi 96,77%, enquanto sua taxa de sensibilidade relativa foi 69,66%. O índice Kappa demonstrou boa concordância entre os dois testes. Os resultados achados revelam que a NT continua sendo a técnica sorológica de maior taxa de especificidade e sensibilidade relativa para a detecção de anticorpos IgG para o vírus ESL. Contudo, a IFI poderia ser o teste de escolha em estudos da circulação desta arbovirose na população humana

Seroprevalence of antibodies to Venezuelan equine encephalitis complex (subtypes IAB and VI) in humans from General Belgrano Island, Formosa, Argentina

This work presents the results of the detection of antibodies (immunoglobulin G) for subtypes I and VI of VEE viruses complex (Togaviridae family) in people from the General Belgrano island, Formosa province (Argentina). The prevalence of neutralizing (NT) antibodies for subtype VI was from 30% to 70% and the prevalence of antibodies inhibitory of hemagglutination (HI) was of 0% in the first and second inquiry respectively. For the subtype IAB the prevalence of NT antibodies was from 13% to 3.6%, similar to the prevalence total for both subtypes. HI antibodies were not detected in any inquiries for any subtype. It was observed that both subtypes circulate simultaneously, while subtype VI remains constant with some peaks, subtype I was found in low level.Este trabalho apresenta os resultados da detecção de anticorpos (imunoglobulina G) para os subtipos I e VI dos vírus do complexo EEV (Familia Togaviridae) em população da Ilha General Belgrano, província de Formosa (Argentina). A prevalência de anticorpos neutralizantes para o subtipo VI foi de 30% a 70% na primeira e segunda pesquisa respectivamente, e por inibição de hemaglutinação (IH) de 0%. Para o subtipo IAB, a prevalência foi de 13% a 3,6% por NT, enquanto anticorpos IH não foram detectados nas duas pesquisas. Observou-se que ambos subtipos circularam simultaneamente, mas enquanto o subtipo VI manteve-se constante com alguns picos de maior presença, o subtipo IAB foi encontrado em nível baixo

Viremia profiles and host competence index for West Nile virus (Flavivirus, Flaviviridae) in three autochthonous birds species from Argentina

West Nile virus (WNV) is an emerging Flavivirus dispersing throughout the American continent. It has emerged in the United States as an important medical and veterinary pathogen. It was introduced into Argentina late in 2004 with reported activity in human, wild birds and equines. Field evidence supports the hypothesis of an enzootic transmission cycle between free ranging birds and mosquitoes. The aim of this research was to analyze the role of autochthonous birds as maintenance hosts. Bay-Winged Cowbirds, Picui Ground Doves and Shiny Cowbirds were subcutaneously inoculated with an Argentinean isolate of WNV. Bay-Winged and Shiny Cowbirds developed relatively low mean peak viremias (102.7 and 103.5 PFU/mL serum, respectively). Picui Ground Doves had the highest peak viremia titers of the longest duration [104.8 log PFU/mL serum (range 102.9-6.2; 4-5 days duration)]. No mortality was observed during the study. The reservoir competence index for each species suggests that an infected Picui Ground Dove leads to ten times more infectious mosquitoes than one infected Shiny Cowbird, and that Bay-Winged Cowbird do not represent a source of infectious virus for mosquito vectors. This is the first study carried out in the region regarding the avian host of WNV in Argentina. However, additional studies, including seroprevalence and reservoir competence of resident birds as well as vector competence, are needed to shed light on the ecology of this pathogen in Argentina.Fil: Diaz, Luis Adrian. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales. Instituto de Investigaciones Biológicas y Tecnológicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentina. Ministerio de Ciencia, Tecnología e Innovación Productiva; ArgentinaFil: Flores, Fernando Sebastián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; ArgentinaFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología "Dr. J. M. Vanella"; Argentin

Estudo da prevalência para vírus da encefalite St. Louis relacionado com a idade em uma população de Córdoba, Argentina

A serological screening was performed in 615 individuals aged 0-87 years, living in the city of Cordoba, Argentina to study the relationship between antibody prevalence for the SLE virus and age. A 13.98% prevalence of neutralizing antibodies was obtained and its relation to age was significantly high (p = 0.045). The highest seroprevalence was noted on individuals over 60 years old (>;20%), whereas no subject under 10 was seropositive for this virus. Our results confirm that the agent is endemic in this area and neurological pathology studies should be performed on those individuals aged 60 since they represent the most susceptible group to SLE virus.Com a finalidade de estudar a relação entre prevalência de anticorpo para o vírus da encefalite St. Louis (ESL) e a idade, foram analisados 615 soros de indivíduos entre 0-87 anos de idade, morando na cidade de Córdoba, Argentina. Detectou-se uma prevalência de anticorpos neutralizantes de 13,98% e observou-se uma relação com a idade estatisticamente significante (p = 0,045). A soroprevalência mais alta foi encontrada em indivíduos de mais de 60 anos (>; 20%), enquanto nenhum com menos de 10 anos foi soropositivo para este vírus. Nossos resultados confirmam que o agente é endêmico nesta área. Por esse motivo os autores sugerem que deveríam se realizar estudos de patologias neurológicas nesses indivíduos de 60 anos de idade dado que eles representam o grupo mais suscetível ao vírus ESL

Virus UNA: primeiro registro de infecção em humanos na República Argentina

Una virus (UNAV), Togaviridae family, is widely distributed in South America, where infections have been detected in mosquitoes and vertebrate hosts (humans, birds and horses). We analyzed human sera from Córdoba inhabitants aged 44 to 89 years and using a neutralization test, we found a prevalence of UNAV antibodies of 3.8% (3/79). The low titers detected suggest past infections probably acquired in rural areas of the Province of Córdoba (central Argentina). None sera were found positive for MAYV neutralizing antibodies. This is the first report of human infections by UNAV in Argentina.O virus Una (Togaviridae) tem ampla distribuição na América do Sul, detectando-se infecções até hoje em mosquitos e hospedeiros vertebrados (humanos, aves e cavalos). Mediante a realização do teste de neutralização em soros humanos provenientes de indivíduos entre 44 e 89 anos, da cidade de Córdoba, foi detectada uma prevalência de 3,8% (3/79) de anticorpos para o vírus UNA. Nenhum soro apresentou anticorpos para o vírus Mayaro. Os títulos foram baixos demonstrando-se a presença de infecção passada. Dados epidemiológicos indicam que a infecção ocorreu em áreas rurais da província de Córdoba (centro da Argentina). Os dados aqui expostos representam o primeiro registro de infecção de humanos por vírus Una na República Argentina

Silent Circulation of St. Louis Encephalitis Virus Prior to an Encephalitis Outbreak in Cordoba, Argentina (2005)

St. Louis encephalitis virus is a complex zoonoses. In 2005, 47 laboratory-confirmed and probable clinical cases of SLEV infection were reported in Córdoba, Argentina. Although the causes of 2005 outbreak remain unknown, they might be related not only to virological factors, but also to ecological and environmental conditions. We hypothesized that one of the factors for SLE reemergence in Córdoba, Argentina, was the introduction of a new SLEV genotype (SLEV genotype III), with no previous activity in the area. In order to evaluate this hypothesis we carried out a molecular characterization of SLEV detections from mosquitoes collected between 2001 and 2004 in Córdoba city. A total of 315 mosquito pools (11,002 individuals) including 12 mosquitoes species were analyzed. Overall, 20 pools (8 mosquitoes species) were positive for SLEV. During this study, genotypes II, V and VII were detected. No mosquito pool infected with genotype III was detected before the 2005 outbreak. Genotype V was found every year and in the 8 sampled sites. Genotypes II and VII showed limited temporal and spatial activities. We cannot dismiss the association of genotype II and V as etiological agents during the outbreak. However, the silent circulation of other SLEV strains in Córdoba city before the 2005 outbreak suggests that the introduction of genotype III was an important factor associated to this event. Not mutually exclusive, other factors such as changes in avian hosts and mosquitoes vectors communities, driven by climatic and environmental modifications, should also be taken into consideration in further studies

Infección de macrófagos con virus encefalitis saint louis: efecto sobre el fenotipo celular y la apoptosis (Programa: enfermedades transmisibles y emergentes).

El Virus Encefalitis Saint Louis (VESL)es un virus neurotrópico que puede provocar en humanos encefalitis, meningitis y cefalea febril. Estudios epidemiológicos demostraron la circulación del virus en Argentina, reportándose el primer brote de encefalitis en Sud-América en Córdoba en el 2005. Los macrófagos tienen un rol muy importante en la patogénesis de las infecciones virales. Estas células son permisivas para la replicación y reservorio viral. Reconocen a los virus mediante receptores de reconocimiento de patrones, incluidos los receptores Toll-like, lo que genera la producción de moléculas antivirales y citoquinas pro-inflamatorias. Los macrófagos expresan diferentes fenotipos según el microambiente tisular y el estímulo externo. Se reconocen los macrófagos activados clásicamente (M1) que liberan citoquinas pro-inflamatorias y los macrófagos activados alternativamente (M2) que producen IL-10 y factor transformante del crecimiento. Como parte de la respuesta del macrófago a la infección viral, prolifera, se diferencia y muere. La apoptosis es un mecanismo de muerte que limita la actividad del macrófago activado. La interacción virus-macrófago ha sido analizada con numerosos tipos de virus. Sin embargo, existe escasa información sobre el impacto de VESL sobre la respuesta inmune innata. La emergencia de esta virosis en nuestro medio amerita abordar distintos aspectos de la respuesta inmune en esta infección. Este proyecto tiene como objetivo estudiar la interacción VESL-macrófago para esclarecer el rol del fenotipo celular y su relación con la depuración viral. Además, analizar la naturaleza y el tenor de los inmunomoduladores liberados y el papel de la apoptosis de los macrófagos en esta infección

Nordihydroguaiaretic acid: Dual behavior as pro- or antioxidant on a eukaryotic cell model (vero cells)

Since Nordihydroguaiaretic acid (NDGA), a potent natural antioxidant, can produce oxidation in several cell kinds,mainly by superoxide anion production (O2), the current study was designed to assess its capacity to produce ornot this reactive oxygen species on Vero cell line, with the aim to establish whether this lignan behaves as a pro- orantioxidant. The O2 production was determined by the Nitro Blue Tetrazolium reduction test. Results show that NDGA has a dual-face behavior on this eukaryotic cell model depending on the biological environment and itsconcentration. The NDGA behaved as a pro-oxidant when it was tested single, by means of an increase in O2 production that was directly concentration-dependent. Mixed with an antioxidant (ascorbic acid) or a moderateoxidant (glucose), the NDGA behaved as pro-oxidant at low concentrations and antioxidant at high concentrations.Fil: Konigheim, Brenda Salome. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Aguilar, Juan Javier. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Tauro, Laura Beatriz. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Ministerio de Salud. Instituto Nacional de Medicina Tropical; ArgentinaFil: Rivarola, María Elisa. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Contigiani de Minio, Marta Silvia. Universidad Nacional de Cordoba. Facultad de Medicina. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Núñez Montoya, Susana Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacia. Cátedra de Farmacognosia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Exactas Físicas y Naturales. Instituto Multidisciplinario de Biología Vegetal; Argentin

Actividad biológica de extractos etanólicos de Tagetes minuta l. (asteraceae) sobre virus de importancia para la salud humana

2 p.Tagetes minuta L. (Asteraceae) es una hierba aromática ampliamente presente en Córdoba. Posee diversos usos en medicina popular: antimicrobiano, antimicótico, antiparasitario, insecticida. Sin embargo, los antecedentes relacionados a su actividad antiviral solo se enfocan en el virus Hepatitis B. Por ello, nuestro objetivo fue evaluar la actividad antiviral de extractos de esta especie sobre otros virus de importancia sanitaria en nuestro país. A partir de material vegetal seco de partes aéreas de tres poblaciones seleccionadas según su perfil químico de T. minuta, se obtuvieron extractos etanólicos (PI, P2 y P3) y aceites esenciales (AE) de cada población, los cuales se caracterizaron por su perfil químico. Así, el AE que se corresponde con P1 fue rico en E-Ocimenona (72%), el de P2 en E-Ocimenona (60%) y una mayor proporción de Ocimeno (15%) que P1 (0.9) utilizando el método de captación del Rojo Neutro, cuyos valores fueron de 83, 64 y 34µg/ml para P1, P2 y P3 respectivamente. La actividad virucida se evaluó sobre virus Herpes Simple I (HSV-I), Encefalitis de Saint Louis (SLEV), West Nile (WNV) y Poliovirus (PV). Cada virus fue pre-incubado con cada uno de los extractos a su CC80 durante 1hora a 37°C. Se realizaron diluciones seriadas (1/10) sembradas por duplicado sobre monocapas de células Vero e incubadas a 37°C, durante 3-7 días. Se incluyeron controles de células, virus y extractos (n=4). Mediante el método de reducción de unidades formadoras de placa, se estimó el porcentaje de inhibición viral (%I). La evaluación de la actividad virucida mostró que ninguno de los extractos fue capaz de inhibir al PV. P1 inhibió a los virus SLEV y WNV (85-82%I) y en un 50% HSV-I. Por su parte, P2 también tuvo buena actividad sobre SLEV (77%I) y, al igual que P1, inhibió al HSV-I en un 50%. P3 no fue activo para ninguno de los virus evaluados. Según los resultados obtenidos se destaca el extracto P1 como más activo y menos citotóxico y el P3 sin actividad con alta toxicidad. De acuerdo a la composición química del AE la presencia de E-Ocimenona en porcentajes mayores al 50% sería importante para la actividad virucida. Se destaca que si bien la composición de P1 y P2 sería similar, solo P1 produjo inhibición sobre WNV, probablemente por la presencia de una mayor proporción de E-Ocimenona como de otros compuestos minoritarios que favorecerían la actividad. Los resultados sugieren, que T. minuta tendría compuestos con baja citotoxicidad y potenciales propiedades antivirales. Esto justifica la planificación de estudios químicos y biológicos para evaluar más exhaustivamente las actividades observadas principalmente de P1 como así también la bioactividad de los compuestos mayoritarios presentes, y sus sinergismos.http://www.aam.org.ar/ram-nueva.aspFil: Martínez, Florencia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Farías, Adrian. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Aguilar, Juan Javier. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Contigiani, Marta Silvia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Konigheim, Brenda. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Batallan, Gonzalo. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Médicas. Instituto de Virología Dr. J. M. Vanella; Argentina.Fil: Massuh, Yamile. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Cátedra de Genética; Argentina.Fil: Ojeda, Marta. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Cátedra de Genética; Argentina.Biología Celular, Microbiologí

Epidemiología y diversidad genética del virus de la hepatitis C en la región central de Argentina

El virus de la hepatitis C (HCV) es el principal agente causante de hepatitis crónica, en el mundo. Basado en la divergencia de la secuencia de nucleótidos se lo ha clasificado en 6 genotipos y varios subtipos. La distribución de genotipos ha sido asociada a vías específicas de transmisión y a los movimientos poblacionales. Esta diversidad constituye las bases del manejo clínico del paciente y provee la información decisiva para las estrategias terapéuticas. Asimismo, la heterogeneidad genética de HCV continúa siendo el mayor obstáculo para el desarrollo de vacunas y terapias efectivas. Estudios previos realizados en Argentina demuestran que la distribución de genotipos es diferente entre regiones geográficas muy cercanas. En general el genotipo 1 es el más prevalente en la región este de nuestro país y en la región central existe una particular alta prevalencia de genotipo 2 (HCV-2) (>55%), 2c, y HCV-1 en usuarios de drogas endovenosas. A fin de confirmar la existencia de dos eventos de transmisión independientes con claras implicancias clínico terapéuticas, el objetivo de este proyecto es completar y profundizar el estudio del proceso de diversificación de estos genotipos en Córdoba mediante análisis moleculares y bioinformáticos. Así, más muestras y otras regiones genómicas deberían ser analizadas (NS5B/E2) para determinar el origen y caracterizar los patrones de diversificación. En este sentido, un reciente estudio serológico, realizado por personal del ministerio de Salud, que involucró a 3782 individuos habitantes de cuatro áreas geográficas de la provincia de Córdoba reveló una alta prevalencia de HCV (>5%). Dichas muestras son la base del estudio propuesto en este pla