Estudio de la acción de una construcción peptídica dendrimérica como vacuna contra la fiebre aftosa en bovinos

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious disease of cloven-hoofed animals, and probably the most important cattle disease in terms of economic impact. Control of FMD is achieved by using vaccines containing the chemically inactivated virus; this requires the production of large volumes of the virus, the inactivation of the virus, antigen concentration and purification with the risk of virus release during vaccine production. Other vaccine problems include: (i) lack of long - term protection, (ii) thermal instability of the vaccine, etc. The use of synthetic peptides offers advantages over conventional vaccines. Dendrimeric (PD) peptides are chemically synthesized molecules with a well-defined structure, and at the same time very versatile. They consist of the union of branched structures and the presence of multiple immunogenic sites. The aim of the study was to evaluate the immunogenicity and protection induced by FMD virusderived dendrimeric peptides: B2T and B4T containing a T [3A (aa 21-35)] epitope] and two or four copies of a B epitope [site A VP1 (aa 136 to 154)] in cattle. Bovines were vaccinated with 2 mg of B4T (n = 4) or B2T (n = 4) (days 0 and 20) intramuscularly and 2 animals were used as negative control. At 38 days post-vaccination (dpv), antibody titers against FMD virus (ELISA) in B4T and B2T groups were: 3.5 ± 1.0 and 4.1 ± 1.0 respectively (the predominant isotype was IgG1). The α-peptide antibodies were also increased in both groups. The neutralization indexes were ≥ 1.8. The proliferative lymphocyte response was positive (IE ≥ 3) in animals vaccinated with B2T and B4T when the mononuclear cells were “in vitro” re-stimulated with peptides; an increase of IFNγ was also detected in the supernatant of these cells when stimulated with inactivated FMD virus. At 42 dpv the bovines were challenged with active FMDV. Two animals in the B4T group and 2 in the B2T group delayed the onset of aphthous symptoms, while only one animal in each group was fully protected. In conclusion, the protection induced by B4T and B2T was low but the highest level of protection was observed in animals that presented higher cellular and humoral responses against FMD virus.La Fiebre aftosa (FA) es una enfermedad muy contagiosa de los animales de pezuña hendida y es probablemente la enfermedad más importante en términos de impacto económico. El control se realiza mediante el uso de vacunas que contienen el virus inactivado químicamente. Esto requiere de la producción de grandes volúmenes de virus, su inactivación y posterior concentración, y de la purificación del antígeno. Por esta causa, ha aumentado la preocupación por cuestiones vinculadas a la bioseguridad, como el riesgo de que se produzca “escape” del virus durante la producción. Otros problemas de las vacunas incluyen: i) la falta de protección a largo plazo, ii) inestabilidad térmica de la vacuna, etc. El uso de péptidos sintéticos ofrece ventajas sobre las vacunas convencionales. Los péptidos dendrímeros (PD) son moléculas políméricas de síntesis química con estructuras bien definidas y muy versátiles. Consisten en la unión de estructuras ramificadas y la presencia de múltiples sitios inmunogénicos. El objetivo del estudio fue evaluar la inmunogenicidad y la protección inducida por los péptidos dendrímeros derivado del virus de la FA: B2T y B4T que contienen un epítope T [3A (aa 21-35)] y dos o cuatro copias de un epítope B [sitio A de VP1 (aa 136 a 154)] en bovinos. Se vacunaron bovinos con 2 mg de B4T (n = 4) o B2T (n = 4) (días 0 y 20) por vía intramuscular y 2 animales se usaron como controles negativos. A los 38 días postvacunación (dpv), los títulos de anticuerpos contra el virus de la FA (ELISA) en el grupo de B4T y B2T fueron de 3,5 ± 1,0 y 4,1 ± 1,0 respectivamente (el isotipo predominante fue IgG1). Los anticuerpos α–péptido también se vieron incrementados en ambos grupos. Los índices de neutralización fueron ≥ 1,8. La respuesta linfo proliferativa fue positiva (IE= o > a 3) en los animales vacunados con B2T y B4T cuando las células mononucleares fueron reestimuladas in vitro con los péptidos. También se detectó incremento de IFNγ en el sobrenadante de estas células cuando fueron estimuladas con virus de la FA inactivado. A los 42 dpv los bovinos fueron desafiados con virus de la FA activo. Dos animales en el grupo B4T y 2 en el grupo B2T retrasaron la aparición de los signos clínicos de aftosa, mientras que solo un animal de cada grupo estuvo completamente protegido. A partir de estos resultados se ha concluido que la protección inducida por B4T y B2T fue baja, pero se observó el mayor nivel de protección en los animales que presentaron mayores respuestas específicas celular y humoral frente a VFA

A New Cage-Like Particle Adjuvant Enhances Protection of Foot-and-Mouth Disease Vaccine

Foot-and-Mouth Disease (FMD) is an acute viral disease that causes important economy losses. Vaccines with new low-cost adjuvants that stimulate protective immune responses are needed and can be assayed in a mouse model to predict their effectiveness in cattle. Immunostimulant Particle Adjuvant (ISPA), also known as cage-like particle adjuvant, consisting of lipid boxes of dipalmitoyl-phosphatidylcholine, cholesterol, sterylamine, alpha-tocopherol, and QuilA saponin, was shown to enhance protection of a recombinant vaccine against Trypanosoma cruzi in a mouse model. Thus, in the present work, we studied the effects on the magnitude and type of immunity elicited in mice and cattle in response to a vaccine based on inactivated FMD virus (iFMDV) formulated with ISPA. It was demonstrated that iFMDV–ISPA induced protection in mice against challenge and elicited a specific antibody response in sera, characterized by a balanced Th1/Th2 profile. In cattle, the antibody titers reached corresponded to an expected percentage of protection (EPP) higher than 80%. EPP calculates the probability that livestock would be protected against a 10,000 bovine infectious doses challenge after vaccination. Moreover, in comparison with the non-adjuvanted iFMDV vaccine, iFMDV–ISPA elicited an increased specific T-cell response against the virus, including higher interferon gamma (IFNγ)+/CD8+ lymphocyte production in cattle. In this work, we report for first time that an inactivated FMDV serotype A vaccine adjuvanted with ISPA is capable of inducing protection against challenge in a murine model and of improving the specific immune responses against the virus in cattle.Fil: Bidart, Juan Esteban. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Kornuta, Claudia Alejandra. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Gammella, Mariela Vanesa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Gnazzo, Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Nordeste. Instituto de Biología Subtropical. Instituto de Biología Subtropical - Nodo Puerto Iguazú | Universidad Nacional de Misiones. Instituto de Biología Subtropical. Instituto de Biología Subtropical - Nodo Puerto Iguazú; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Mongini, Claudia. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Galarza, Roxana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estacion Experimental Agropecuaria Cuenca del Salado. Agencia de Extension Rural Chascomus.; ArgentinaFil: Calvinho, Luis Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Lupi, Giuliana Antonella. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Marcipar, Iván Sergio. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; Argentin

Bovine Dendritic Cell Activation, T Cell Proliferation and Antibody Responses to Foot-And-Mouth Disease, Is Similar With Inactivated Virus and Virus Like Particles

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious disease of cloven-hoofed animals that causes severe economic losses in the livestock industry. Currently available vaccines are based on the inactivated FMD virus (FMDV). Although inactivated vaccines have been effective in controlling the disease, they have some disadvantages. Because of these disadvantages, investigations are being made to produce vaccines in low containment facilities. The use of recombinant empty capsids (also referred as Virus Like Particles, VLPs) has been reported to be a promising candidate as a subunit vaccine because it avoids the use of virus in the vaccine production and conserves the conformational epitopes of the virus. Mignaqui and collaborators have produced recombinant FMDV empty capsids from serotype A/ARG/2001 using a scalable technology in mammalian cells that elicited a protective immunity against viral challenge in a mouse model. However, further evaluation of the immune response elicited by these VLPs in cattle is required. In the present work we compare the effect that VLPs or inactivated FMDV has on bovine dendritic cells and the humoral response elicited in cattle after a single vaccination.Fil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Bidart, Juan Esteban. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Mignaqui, Ana Clara. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Patagonia Norte. Estación Experimental Agropecuaria San Carlos de Bariloche. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche; ArgentinaFil: Ruiz, Vanesa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Ferella, Alejandra. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Gammella, Mariela Vanesa. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Ferraris, Sergio Raúl. Universidad Maimónides; ArgentinaFil: Carrillo, Jorge. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación de Agroindustria; ArgentinaFil: Wigdorovitz, Andrés. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; ArgentinaFil: Durocher, Yves. National Research Council; CanadáFil: Cardillo, Sabrina Beatriz. Biogenesis Bago S.a..; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Charleston, Bryan. The Pirbright Institute; Reino UnidoFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro de Investigacion En Ciencias Veterinarias y Agronomicas. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Oficina de Coordinacion Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virologia E Innovaciones Tecnologicas.; Argentin

MANα1-2MAN decorated liposomes enhance the immunogenicity induced by a DNA vaccine against BoHV-1

New technologies in the field of vaccinology arise as a necessity for the treatment and control of many diseases. Whole virus inactivated vaccines and modified live virus ones used against Bovine Herpesvirus-1 (BoHV-1) infection have several disadvantages. Previous works on DNA vaccines against BoHV-1 have demonstrated the capability to induce humoral and cellular immune responses. Nevertheless, ‘naked’ DNA induces low immunogenic response. Thus, loading of antigen encoding DNA sequences in liposomal formulations targeting dendritic cell receptors could be a promising strategy to better activate these antigen-presenting cells (APC). In this work, a DNA-based vaccine encoding the truncated version of BoHV-1 glycoprotein D (pCIgD) was evaluated alone and encapsulated in a liposomal formulation containing LPS and decorated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE (pCIgD-Man-L). The vaccinations were performed in mice and bovines. The results showed that the use of pCIgD-Man-L enhanced the immune response in both animal models. For humoral immunity, significant differences were achieved when total antibody titres and isotypes were assayed in sera. Regarding cellular immunity, a significant increase in the proliferative response against BoHV-1 was detected in animals vaccinated with pCIgD-Man-L when compared to the response induced in animals vaccinated with pCIgD. In addition, upregulation of CD40 molecules on the surface of bovine dendritic cells (DCs) was observed when cells were stimulated and activated with the vaccine formulations. When viral challenge was performed, bovines vaccinated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE elicited better protection which was evidenced by a lower viral excretion. These results demonstrate that the dendritic cell targeting using MANα1-2MAN decorated liposomes can boost the immunogenicity resulting in a long-lasting immunity. Liposomes decorated with MANα1-2MAN-PEG-DOPE were tested for the first time as a DNA vaccine nanovehicle in cattle as a preventive treatment against BoHV-1. These results open new perspectives for the design of vaccines for the control of bovine rhinotracheitis.Fil: Kornuta, Claudia Alejandra. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Bidart, Juan Esteban. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Gammella, Mariela Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Pappalardo, Juan Sebastian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Patagonia Norte. Estación Experimental Agropecuaria San Carlos de Bariloche. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche; ArgentinaFil: Salmaso, Stefano. Università di Padova; ItaliaFil: Torchilin, Vladimir P. Northeastern University; Estados UnidosFil: Cheuquepán Valenzuela, Felipe Andrés. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Hecker, Yanina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Moore, Dadin Prando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; ArgentinaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Pque. Centenario. Instituto de Virología E Innovaciones Tecnológicas; Argentin

Dendritic cell targeting in cultured fish in Argentina for vaccine development

Premio al mejor Poster presentado en la Asociación Argentina de NanomedicinasIn Argentina two main species present an important economic value, these are Pacú (Piaractus mesopotamicus, Pm) and Rainbow Trout (Oncorhynchus mykiss, Om). Due to stress and changing environmental conditions cultured fish are exposed to, the use of antibiotics has become a common solution for treatment and avoidance of disease. This practice presents several problems such as overdose, contamination and resistance generation. The development of effective and affordable vaccines is necessary for aquaculture in order to produce safe products for consumption and the environmentEstación Experimental Agropecuaria BarilocheFil: Ghersa, Federica. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Investigación Virología. Laboratorio de Inmunología e Inmunomoduladores; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Investigación Virología. Laboratorio de Inmunología e Inmunomoduladores; ArgentinaFil: Gammella, Mariela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Investigación Virología. Laboratorio de Inmunología e Inmunomoduladores; ArgentinaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Investigación Virología. Laboratorio de Inmunología e Inmunomoduladores; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Investigación Virología. Laboratorio de Inmunología e Inmunomoduladores; ArgentinaFil: Rauque, Carlos Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones en Biodiversidad y Medioambiente; ArgentinaFil: Pappalardo, Juan Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Bariloche. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Investigaciones Forestales y Agropecuarias Bariloche; Argentin

An improved DNA vaccine against bovine herpesvirus-1 using CD40L and a chemical adjuvant induces specific cytotoxicity in mici

Bovine herpesvirus-1 (BoHV-1) uses many mechanisms to elude the immune system; one of them is spreading intracellularly, even in the presence of specific antiviral antibodies. Cytotoxic T lymphocytes (CTLs) are necessary to eliminate the virus. The main preventive strategy is vaccination based on inactivated virus. These vaccines are poor inducers of cellular immune responses, and complicate serological diagnosis and determination of the real prevalence of infection. DNA vaccines are a good option because of the capacity of Differentiating Infected from Vaccinated Animals—(DIVA vaccine)—and may be the best way to induce cytotoxic responses. Although this type of vaccines leads to only weak “in vivo” expression and poor immune responses, incorporation of molecular and/or chemical adjuvants can improve the latter, both in magnitude and in direction. In this study, we have investigated the specific immune responses elicited in mice by DNA vaccines based on the BoHV-1 glycoprotein D (pCIgD) with and without two different adjuvants: a plasmid encoding for murine CD40L (pCD40L) or Montanide™ 1113101PR (101). Mice vaccinated with pCIgD+CD40L, pCIgD+101, and pCIgD+CD40L+101 developed significantly higher specific antibody titers against BoHV-1 than the pCIgD group (p < 0.01). The animals vaccinated with pCgD+pCD40L+101 raised significantly higher levels of IgG2a and IgG2b (p < 0.01 and p < 0.001, respectively) than mice vaccinated with pCIgD alone. On the contrary, when the activity of CTL against cells infected with BoHV-1 was measured, the vaccine pCgD+pCD40L+101 induced significantly higher levels of cytotoxicity activity (p < 0.001) than pCIgD alone. A significant increase in the CD4+ populations in the group receiving pCIgD+CD40L+101 in comparison with the pCIgD group was observed and, also, interferon gamma, interleukin (IL)-6, and IL-17A levels were higher. Considering the results obtained from this study for humoral and cellular responses in mice, the inclusion of pCD40L and 101 as adjuvants in a BoHV-1 DNA vaccine for cattle is highly recommendable.Instituto de VirologíaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Langellotti, Cecilia Ana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Gammella, Mariela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Gammella, Mariela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Soria, Ivana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Bellusci, Carolina. Universidad Nacional de Rio Negro. Sede Atlántica; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Quattrocchi, Valeria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Vermeulen, Elba Monica. Academia Nacional de Medicina de Buenos Aires. Instituto de Medicina Experimental (IMEX). Laboratorio de células presentadoras de antígeno y respuesta inflamatoria; ArgentinaFil: Mongini, Claudia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Mongini, Claudia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Zamorano, Patricia Ines. Universidad del Salvador. Cátedra de Inmunología Aplicada; Argentin

Bovine leukemia virus p24 antibodies reflect blood proviral load

Abstract Background Bovine leukemia virus (BLV) is worldwide distributed and highly endemic in Argentina. Among the strategies to prevent BLV dissemination, a control plan based on the selective segregation of animals according to their proviral load (PVL) is promising for our dairy productive system. The objective of this work was to study the relationship between the blood PVL and the antibody level, in order to identify whether the individual humoral response, i.e. the anti-p24 or anti-whole-BLV particle, could be used as a marker of the blood level of infection and thus help to recruit animals that may pose a lower risk of dissemination under natural conditions. Results The prevalence of p24 antibodies on the 15 farms studied was over 66%. The prevalence of p24 and whole-BLV antibodies and PVL quantification were analyzed in all the samples (n = 196) taken from herds T1 and 51. ROC analysis showed a higher AUC for p24 antibodies than whole-BLV antibodies (Zreactivity: 3.55, P titer: 2.88, P T1 = 0.7, P 51 = 0.71, P  Conclusions We found that the humoral response reflected the level of in vivo infection, and may therefore have useful epidemiological applications. Whereas the quantitative evaluation of blood proviral load using real-time PCR is expensive and technically demanding, the measurement of antibodies in blood by ELISA is relatively straightforward and could therefore constitute a cost-effective tool in a BLV control intervention strategy, especially in highly infected herds such as Argentinean dairy ones.</p

Reduced faecal shedding of Escherichia coli O157:H7 in cattle following systemic vaccination with γ-intimin C280 and EspB proteins

Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157:H7 is the most prevalent EHEC serotype that has been recovered from patients with haemolytic uremic syndrome (HUS) worldwide. Vaccination of cattle, the main reservoir of EHEC O157:H7, could be a logical strategy to fight infection in humans. This study evaluated a vaccine based on the carboxyl-terminal fragment of 280 amino acids of -intimin (-intimin C280) and EspB, two key colonization factors of E. coli O157:H7. Intramuscular immunization elicited significantly high levels of serum IgG antibodies against both proteins. Antigen-specific IgA and IgG were also induced in saliva, but only the IgA response was significant. Following experimental challenge with E. coli O157:H7, a significant reduction in bacterial shedding was observed in vaccinated calves, compared to control group. These promising results suggest that systemic immunization of cattle with intimin and EspB could be a feasible strategy to reduce EHEC O157:H7 faecal shedding in cattle.Fil: Vilte, Daniel A.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Larzabal, Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Garbaccio, Sergio. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Gammella, Mariela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Rabinovitz, Bettina Carol. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Elizondo, Ana M.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Cantet, Rodolfo Juan Carlos. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Agronomia. Departamento de Producción Animal; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Delgado, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; ArgentinaFil: Meikle, Virginia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; ArgentinaFil: Cataldi, Angel Adrian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Biotecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mercado, Elsa C.. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Patobiología; Argentin