Diffuse low grade gliomas with secondary malignancy : immunohistochemical and cytogenetic profile study

Tese de mestrado, Oncobiologia, Universidade de Lisboa, Faculdade de Medicina, 2019Os gliomas são os tumores primários mais frequentes do Sistema Nervoso Central, representando 50% de todos os casos de tumores cerebrais. Incluem, entre outros, os astrocitomas (AT) e os oligodendrogliomas (OLG). Uma designação comum para estes tumores, quando se localizam num ou mais lobos cerebrais, na região supratentorial é a de gliomas difusos e atingem, caracteristicamente, jovens adultos. Esses dois tipos de gliomas são considerados de baixo grau e são infiltrativos, de crescimento lento. Os gliomas de baixo grau – grau II, pela Organização Mundial de Saúde – tem uma forte tendência para a progressão maligna, para gliomas anaplásicos (grau III, pela OMS) e até glioblastomas secundários (grau IV, pela OMS), o que, muitas vezes, ocorre após alguns anos, geralmente, entre cerca de 4 a 5. Muitas vezes, após uma resseção cirúrgica de gliomas de baixo grau, as células neoplásicas deixadas no cérebro podem originar um tumor recidivante, que muitas vezes se transforma em glioma de alto grau, com prognóstico variável a longo prazo e uma taxa de sobrevida de entre 5 a 8 anos. A nova classificação da OMS, no que diz respeito a Tumores do Sistema Nervoso Central, revista em 2016, introduziu parâmetros moleculares como mutações IDH, co-deleções de 1p/19q e perdas de ATRX, agrupando os tumores em categorias de acordo com seus perfis genéticos, além dos padrões histológicos usados até então. Sendo assim, é possível classificar os gliomas difusos em astrocitomas, IDH mutantes; oligodendrogliomas, IDH mutantes e 1p/19q co-deletados; astrocitomas IDH wild-type; glioblastomas IDH mutantes; glioblastomas IDH wild-type; oligodendrogliomas sem outras especificações; astrocitomas sem outras especificações; oligoastrocitomas sem outras especificações e glioblastomas sem outras especificações. Os critérios usados para definir o grau de anaplasia dos gliomas, definidos pela OMS, são polimorfismo nuclear e hipercromasia, índice mitótico, proliferação endotelial da microvascularização tumoral e necrose do parênquima tumoral. Estes critérios permitem aos patologistas classificar os gliomas difusos em diferentes graus de malignidade, desde grau II, o menos maligno, até aos graus III e IV, os mais malignos, dos quais o glioblastoma é o mais comum. As alterações moleculares no processo de tumorigénese levam à ativação de oncogenes ou à inativação de genes supressores de tumor. Alguns dos marcadores genéticos de grande relevância no processo de tumorigénese e na determinação do tipo e grau de anaplasia dos gliomas difusos são o 1p/19q (co-deleção), o EGFR, o PTEN e o CDKN2A. A presença de mutação do ATRX ajuda ao diagnóstico dos AT com IDH mutante, distinguindo-os dos OLG. Os AT anaplásicos com mutações combinadas no ATRX e no IDH têm melhor prognóstico do que os que só têm a mutação do IDH. As mutações no codão 132 do gene IDH ocorrem cedo e a uma frequência elevada em AT, OLG de graus II e III, e em glioblastomas secundários desenvolvidos a partir de AT. Os objetivos deste estudo são comparar o perfil imunohistoquímico e as alterações citogenéticas encontradas em 16 casos de doentes com cirurgia a gliomas primários de baixo grau, e a recidiva de grau mais elevado, resultando num total de 32 amostras – 18 oligodendrogliomas, 10 astrocitomas, 3 oligoastrocitomas e 1 gliossarcoma; avaliar e quantificar as alterações e identificar subpopulações baseadas em marcadores, nas amostras de tumores de ambas as cirurgias. Para isso, obtiveram-se lâminas de imunohistoquímica e fizeram-se blocos de Tissue Micro Arrays, dos quais se obtiveram lâminas para Hibridação In Situ por Fluorescência. As proteínas estudadas foram GFAP, IDH1, KI-67, ATRX e Olig-2, e os genes foram CDKN2A, p53, EGFR, PTEN, 1p e 19q. Realizou-se a técnica de imunohistoquímica para os marcadores IDH, ATRX e GFAP, posteriormente fotografados no microscópio ótico, e analisados com programa Image-J (plugin Colour Deconvolution). Às áreas de interesse foram-lhes atribuídas cores secundárias (cada uma associada a um marcador) e as imagens resultantes foram sobrepostas originando áreas de cores primárias. Foi calculado o rácio de pixéis de cada cor de interesse. Realizou-se igualmente a técnica de imunohistoquímica para os marcadores Olig-2 e KI-67, também fotografados no microscópio ótico e analisados no programa Image-J (plugin ImmunoRatio). Realizou-se ainda Hibridação in situ de fluorescência, para analisar os genes CDKN2A, p53, EGFR, PTEN, 1p e 19q, em lâminas de Tissue Micro Array, que foram fotografadas no microscópio de fluorescência e analisadas no programa Image-J (plugin Cell Counter para contagem dos núcleos). Este estudo incluiu 18 oligodendrogliomas, 10 astrocitomas, 3 oligoastrocitomas e 1 gliossarcoma. A análise foi feita inicialmente para os marcadores individuais e, em seguida, para as subpopulações definidas, baseadas na classificação actual de gliomas difusos. Nenhuma das amostras estudadas apresentou deleção do gene supressor tumoral PTEN. O estudo de EGFR mostrou amplificação em apenas 6 das 32 amostras, sendo 4 exclusivamente nas recidivas e 1 exclusivamente num tumor primário de baixo grau. O p53 estava mutado em 6 das 32 amostras estudadas, sendo que 4 desses 6 tumores com mutação eram recidivas. Analisando as alterações de primários para recidivas, encontraram-se 4 casos com p53 wild-type no primário e mutação nas recidivas e 1 caso que manteve a mutação em ambos os grupos. O CDKN2A estava deletado no primário e na recidiva em simultâneo, em apenas 1 caso. 6 casos tinham deleções nos primários e apenas 3 tinham deleções nas recidivas. A expressão de KI-67 apresentou valores mais elevados nas recidivas do que nos primários. Relativamente à expressão de Olig-2, observou-se o contrário, sendo os valores mais elevados nos primários do que nas recidivas. Não se encontraram diferenças major nas três subpopulações estudadas (IDH1mut/ATRXloss, IDH1mut/ATRX/1p/19q co-deletadas e IDH1wt) entre as amostras de tumores primários e as suas respectivas recidivas. Descobriram-se mais células tumorais IDH1mut/ATRXloss em recidivas (9799±24384) do que em primários (5053±10116), e mais células tumorais IDH1- em primários (671939±180448) do que nas recidivas (609653±284091). Contudo, estas diferenças não foram muito evidentes. Células IDH1mut/ATRX/1p/19q co-deletadas foram encontradas em apenas um dos dezasseis casos estudados. As proteínas e genes estudados cobrem a maioria das principais vias de sinalização molecular que levam ao desenvolvimento de carcinomas. Contudo, a ausência de variações muito evidentes entre os dois grupos comparados (primário e respetiva recidiva) indica que poder-se-á não estar a estudar os marcadores mais relevantes para esta evolução. Outros marcadores que poderão ser relevantes são o PDGF e o Ras. O PDGF é um agente mitogénico de células mesenquimais, incluindo células gliais e já foi associado a glioblastomas (vias PI3k/AKT e Ras-Raf-Mek-Erk). O gene Ras foi o primeiro oncogene humano a ser identificado e sabe-se que está mutado em cerca de um terço dos carcinomas. Estes são apenas dois exemplos de outras moléculas que podem ser estudadas nos gliomas. Este estudo é um passo noutra direcção, no que diz respeito aos marcadores biológicos em gliomas. Os resultados obtidos levantam variadas questões face aos marcadores estudados e oferecem uma série de sugestões de outros a considerar; e, uma vez que não há bibliografia de suporte, seria interessante continuar a estudar esta linha de progressão tumoral do primário para a recidiva. O objetivo não seria apenas caracterizar subgrupos histológicos de gliomas do ponto de vista genético e molecular mas também, e acima de tudo, tentar compreender a evolução do tumor primário e os mecanismos e ferramentas biológicas presentes no próprio, que lhe permite recidivar com um nível de malignidade superior. Se se conseguir prever estas transformações no tempo, poder-se-á tentar controlar a progressão da doença logo desde o momento do diagnóstico.The most frequent primary tumors of the Central Nervous System are gliomas, representing 50% of all brain tumor cases, which include, among others, astrocytomas and oligodendrogliomas. Those two types of gliomas, considered low-grade gliomas, are infiltrative and slow-growing. Low-grade gliomas (World Health Organization grade II) have a strong tendency for malignant progression to anaplastic gliomas (World Health Organization grade III) and even secondary glioblastomas (World Health Organization grade IV), which often takes place after a few years, usually about 4 to 5. Indeed, after a surgical resection of LGG, cancerous cells left in the brain can give rise to a recurrent tumor, often transformed in a high-grade glioma, with variable long-term prognoses and a survival rate between 5 to 8 years. The new World Health Organization Classification of Tumors of the Central Nervous System, revised in 2016, introduced molecular parameters, such as IDH mutations, 1p/19q co-deletions and ATRX losses, for grouping tumors into categories according to their genetic profiles besides the histologic patterns used until then. The aim of this study is to compare immunohistochemical profile and cytogenetic changes in 16 cases with two different surgeries from the same patient, treated for recurrences, evaluate and quantify those changes and identify marker based subpopulations in tumour samples from both surgeries. The proteins studied were GFAP, IDH1, KI-67, ATRX and Olig-2, and the genes were CDKN2A, p53, EGFR, PTEN, 1p and 19q. We did not found major differences in the populations we studied (IDH1mut/ATRXloss, IDH1mut/ATRX/1p/19q co-del and IDH1wt) between primaries and their relapses. However, differences were found in Ki-67, Olig-2, EGFR and CDKN2A between the two groups studied (primary tumors and relapses). All proteins and genes studied cover most of the main pathways that lead to cancer development, which may lead us to think that we are looking at the wrong set of markers. We found some results that suggest it should be interesting to continue this type of research of comparing primary tumors with their own relapses, and try to understand what makes tumors relapse in a much more aggressive form, in order to control the progression of the disease right in the moment of the diagnosis

Looking for a break in Spanish Inflation Data in the early eighties and assessing persistence

Using the Bai-Perron test, we look for a shift in the conditional mean of an AR representation of Spanish CPI inflation over the period: 1978-2006. It is clear that Spain, as most OECD economies, experienced an inflation slowdown in the early eithgties, which can be related to some policy measures undertook by the government coming out of the 1982 elections. It is shown, that when the break is accounted for, there are no signs of persistence in Spanish CPI inflation.inflation persistence; structural breaks; monetary policy

Pre-treatment magnetic resonance stratification of endometrial carcinoma – the role of dynamic contrast-enhanced and diffusion-weighted imaging

O carcinoma do endométrio apresenta uma taxa de incidência em Portugal de cerca de 7.2%, sendo a 5ª neoplasia mais comum na mulher. Apesar de apresentar uma prevalência relativamente elevada, o seu prognóstico global é favorável, uma vez que 75% dos casos são diagnosticados em estádio precoce. O estudo por ressonância magnética é geralmente efectuado após a realização de uma ecografia para avaliação de uma hemorragia uterina anormal e após o diagnóstico histológico por histeroscopia ou ressecção. Contudo, a ressonância magnética pode apresentar um papel determinante no diagnóstico em casos de impossibilidade de biópsia e nos quais a biópsia é inconclusiva. Além do mais, apesar de esta técnica não ser contemplada na classificação para o estadiamento do carcinoma do endométrio da International Federation of Gynecology and Obstetrics de 2009, apresenta uma função fundamental no estadiamento pré-operatório destas doentes, sendo crucial para definir a abordagem cirúrgica e terapêutica. No presente artigo, as autoras descrevem o estado da arte da ressonância magnética funcional no diagnóstico e no estadiamento do carcinoma do endométrio, chamando a atenção para o papel do estudo dinâmico após administração de contraste endovenoso e do estudo ponderado em difusão nestes cenários através da revisão da literatura mais recente sobre este tópico.Endometrial cancer incidence rate in Portugal is approximately of 7.2%, being the 5th most common malignancy in females worldwide. Despite its relatively high prevalence, the overall prognosis is generally good since 75% of endometrial cancer is diagnosed at an early stage. Magnetic resonance imaging is usually performed after an ultrasound study for the workup of an abnormal uterine bleeding and after the histologic diagnose of endometrial cancer by hysteroscopy or resection. However, it may play a role in the diagnosis of endometrial carcinoma when histology is inconclusive or when biopsy cannot be performed. Moreover, although it is not considered in the International Federation of Gynaecology and Obstetrics 2009 staging classification, it has a crucial role in pre-operative staging, being an essential tool for tailoring the surgical and therapeutic approach. The authors describe the state-of-the-art of functional magnetic resonance imaging in the diagnosis and staging of endometrial carcinoma, drawing attention to the role of dynamic contrast-enhanced and diffusion-weighted imaging in these settings and revising the current literature on this topic

Pitfalls in imaging of female pelvic masses

Purpose of Review The purpose of this review is to highlight potential magnetic resonance (MR) imaging pitfalls that may mask and simulate ovarian cancer. Recent Findings MR imaging is the standard method for evaluating female pelvic masses of indeterminate origin, especially sonographically indeterminate adnexal masses. To define the correct origin and nature of a pelvic mass has an enormous clinical impact, namely in females of child-bearing age. This is particularly true in adnexal lesions. Ovarian cancer usually requires a cytoreductive surgery in a specialized oncological centre. In contrast, a benign ovarian lesion may be treated by simple resection in a general hospital. To help preventing diagnostic errors and in order to guide appropriate therapeutic management, radiologists should be aware of potential MR pitfalls that may mask and simulate ovarian cancer. Summary The first section of this article will describe the MR imaging protocol that authors perform in their oncological centre, highlighting how imaging techniques can be optimized in order to reduce pitfalls in the characterization of an indeterminate pelvic mass. In the next section, authors will revise the main anatomic and organ-specific signs that may allow the radiologist to determine the ovarian origin of a pelvic mass. Finally, benign gynaecological masses that may simulate ovarian cancer in a non-emergency setting will be discussed, with emphasis on features that may provide important clues to their diagnosis.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

O Estado e o turismo no Brasil: análise das políticas públicas no contexto da pandemia da COVID-19

Pandemics mark periods of instability, disruptions, and complex changes in society. Today, the world is facing the pandemic of COVID-19, a disease caused by the new coronavirus. In all social dimensions, the impacts have been significant, mainly because of social isolation, a measure considered efficient to stop the spread of the disease. In Brazil, isolation was established by the government and culminated in the temporary closure of developments that provide non-essential services, in which tourism is contemplated. Therefore, the objective of this article is to discuss the role of the State in mitigating the impacts of the pandemic in the tourism sector, analyzing the public policies adopted and characteristics such as: political sphere, context, scope, content and criteria for effectiveness. It is an exploratory and descriptive research, whose methodological path consisted of searching for keywords on scientific platforms and government websites and sectorial tourism institutions, both in Brazil and worldwide. The information obtained was organized, systematized, and analyzed using the Content Analysis technique. The results show that the public policies formulated by the government are of a structural nature, with a focus on maintaining jobs and income for entrepreneurs and workers in specific segments of the production chain; conjunctural/emergency, therefore, restricted to the pandemic period; and regulatory, standardizing security and prevention protocols for COVID-19 during the economic recovery process. In general, the policies that most benefit the sector do not come from important portfolios for the activity, such as the Ministry of Tourism, but from other spheres of government.Las pandemias marcan períodos de inestabilidad, perturbaciones y cambios complejos en la sociedad. Hoy, el mundo se enfrenta a la pandemia de COVID-19, una enfermedad provocada por el nuevo coronavirus. En todas las dimensiones sociales, los impactos han sido significativos, principalmente por el aislamiento social, medida considerada eficiente para frenar la propagación de la enfermedad. En Brasil, el aislamiento fue establecido por el gobierno y culminó con el cierre temporal de desarrollos que brindan servicios no esenciales, en los que se contempla el turismo. Por tanto, el objetivo de este artículo es discutir el papel del Estado en la mitigación de los impactos de la pandemia en el sector turístico, analizando las políticas públicas adoptadas y características como: ámbito político, contexto, alcance, contenido y criterios de efectividad. Se trata de una investigación exploratoria y descriptiva, cuyo recorrido metodológico consistió en la búsqueda de palabras clave en plataformas científicas y sitios web gubernamentales e instituciones sectoriales de turismo, tanto en Brasil como en el mundo. La información obtenida fue organizada, sistematizada y analizada mediante la técnica de Análisis de Contenido. Los resultados muestran que las políticas públicas formuladas por el gobierno son de carácter estructural, con un enfoque en el mantenimiento de empleos e ingresos para empresarios y trabajadores en segmentos específicos de la cadena productiva; coyuntural/emergencia, por lo tanto, restringido al período pandémico; y protocolos regulatorios, estandarizando la seguridad y prevención de COVID-19 durante el proceso de recuperación económica. En general, las políticas que más benefician al sector no provienen de portafolios importantes para la actividad, como el Ministerio de Turismo, sino de otras esferas de gobierno.As pandemias marcam períodos de instabilidade, rupturas e mudanças complexas na sociedade. Hoje, o mundo enfrenta a pandemia da COVID-19, doença causada pelo novo coronavírus. Em todas as dimensões sociais, os impactos têm sido significativos, sobretudo, por causa do isolamento social, medida considerada eficiente para frear a disseminação da doença. No Brasil, o isolamento foi estabelecido pelo governo e culminou no fechamento temporário dos empreendimentos que prestam serviços não essenciais, no qual o turismo é contemplado. Logo, o objetivo deste artigo é discutir o papel do Estado na mitigação dos impactos da pandemia no setor turístico, analisando-se as políticas públicas adotadas e características como: esfera política, contexto, abrangência, conteúdo e critérios para efetivação. Trata-se de uma pesquisa exploratória e descritiva, cujo percurso metodológico consistiu na busca de palavras-chave em plataformas científicas e sites governamentais e de instituições setoriais de turismo, tanto no Brasil quanto no mundo. As informações obtidas foram organizadas, sistematizadas e analisadas empregando-se a técnica da Análise de Conteúdo. Os resultados mostram que as políticas públicas formuladas pelo governo são de caráter estrutural, com foco na manutenção de emprego e renda para empresários e trabalhadores de segmentos específicos da cadeia produtiva; conjuntural/emergencial, portanto, restritas ao período da pandemia; e regulatórias, normatizando protocolos de segurança e prevenção da COVID-19 durante o processo de retomada da economia. De modo geral, as políticas que mais beneficiam o setor não são oriundas de pastas importantes para a atividade, tal qual, o Ministério do Turismo, mas provenientes de outras esferas de atuação governamental

Evaluation of miR-124 expression in the human hippocampus with focus on Alzheimer’s Disease

Trabalho Final de Mestrado Integrado, Ciências Farmacêuticas, Universidade de Lisboa, Faculdade de Farmácia, 2019A Doença de Alzheimer (DA) é uma doença neurodegenerativa progressiva cujos mecanismos patológicos ainda não estão totalmente estabelecidos. A doença é caraterizada pela deposição de placas de Beta Amilóide (Aß) e tangles de proteína Tau hiperfosforilada, que geram ativação de microglia e neurodegeneração. Uma das áreas mais afetadas é o hipocampo, uma região relacionada com a memória e cognição, levando à demência e perda de memória, sintomas característicos da DA. Na DA registam-se níveis alterados de microRNA-124 (miR-124), tal como em outras doenças neurodegenerativas. Apesar de o miR- 124 ser considerado um microRNA (miRNA) principalmente neuronal, encontra-se também presente em microglia e astrócitos. Contudo, a sua expressão regional em células gliais nunca foi descrita em amostras humanas de DA. Além disso, ainda há muito para ser compreendido acerca do seu papel na DA, existindo relatos controversos no que respeita à alteração dos seus níveis ou do seu efeito na microglia. Neste contexto, estudámos a distribuição de miR- 124 em amostras de hipocampo humano provenientes de autópsias de DA, através de In Situ Hybridization (ISH). A ISH é uma técnica histológica que permite a deteção de ácidos nucleicos em tecidos, através do uso de uma sonda complementar. Neste trabalho, descrevemos em detalhe o protocolo de ISH e discutimos as suas principais vantagens e desvantagens, evidenciando a sua aplicação em amostras de hipocampo, provenientes de doentes com DA e controlos saudáveis. Especificamente, mostramos co-marcações para marcadores celulares e respetiva análise semi-quantitativa. Os resultados elucidam a presença de miR-124 em células microgliais HLA-DR/DP/DQ-positivas à volta de placas Aß num doente com DA num estadio avançado da doença. É visível co-localização em toda a matéria branca e no dentate gyrus, quer na DA como no controlo. Na DA, observámos a sua presença em astrócitos GFAP-positivos, onde parece ter uma localização nuclear preferencial. A ISH apresenta a característica singular de permitir o estudo e semi- quantificação da distribuição celular de um miRNA, sendo uma ferramenta valiosa que pode ser aplicada para elucidar a função de miRNAs na desregulação da comunicação célula-a- célula em contextos patológicos e na DA.Alzheimer’s Disease (AD) is a progressive neurodegenerative disorder whose pathological mechanisms are still not fully elucidated. The disease is characterized by the deposition of Amyloid Beta (Aß) and hyperphosphorylated Tau protein tangles, leading to microglia activation and ultimately neurodegeneration. One of the most affected areas is the hippocampus, an area related to memory and cognition, leading to dementia and memory loss which are characteristic AD symptoms. Abnormal microRNA-124 (miR-124) levels are observed in AD, as well as in other neurodegenerative disorders. Although miR-124 is regarded as a neuron-enriched microRNA (miRNA), it has been found in microglia and astrocytes. However, its regional expression in glial cells has never been identified in human AD samples. Moreover, much remains to be understood about its role in AD, with controversial reports about it being up or down regulated and scarce information on its effects on microglia. In this context, we studied the distribution of miR-124 in the human hippocampus of AD autopsy samples, by In Situ Hybridization (ISH). ISH is a histological technique that allows the detection of nucleic acids in whole tissues by use of a complementary probe. In this work, we fully describe the ISH protocol, discuss its main advantages and disadvantages and give data examples from its application on human AD and control hippocampal samples. Specifically, we show co-stainings for cell-specific markers and semi-quantitative analysis of co-staining intensity. Results elucidate the miR-124 presence in HLA-DR/DP/DQ-positive microglial cells surrounding Aß plaques in an AD patient at a late disease stage. Co-localization throughout white matter and dentate gyrus was visible in both patient and control samples. In AD, we observed its presence in GFAP-positive astrocytes, where it seems to have a strong nuclear localization. This technique has the unique characteristics of allowing the study of cell-type distribution and semi-quantification, while preserving morphological aspects, which is essential in studying complex cell-to-cell communication in pathological contexts. Thus, ISH is a valuable tool that can be used to further elucidate the role of miRNAs in AD and in cell-to-cell communication deregulation.Academisch Medisch Centrum - Universiteit van Amsterda

ERP LN implementation in an industrial context at ID6-Consultoria e Gestão

Tese de mestrado integrado. Engenharia Industrial e Gestão. Universidade do Porto. Faculdade de Engenharia. 201

I have no place that I may claim - Intersecting race, gender and class : an analysis of Amma Asante's Belle

Belle (2014), directed by Amma Asante, is a heritage style film about the life of Dido Elizabeth Belle, a late eighteenth-century aristocrat born of the illegitimate union of a black slave mother and a white English father. This dissertation aims to fill the gaps in the scarce literature about the film, which often focuses more on the history which inspired it, and less on the narrative purposes of the work. Moreover, I entail a conjunctural analysis of Belle according to theories such as Crenshaw’s Intersectionality and Bakhtin’s concept of the threshold chronotope. The latter inspired my creation of the concept of threshold identity. Crucially, identity is at the centre of my analysis as it pertains to labels like race, class and gender and, as I argue, drives the story of Belle. In conducting my study of the film, I begin by discussing the film’s genre, and particular characteristics. The bulk of this thesis is devoted to an in-depth analysis of Belle in terms of narrative, mainly through visual elements, references and techniques. What is more, representation and painting are addressed, as the film was inspired by a portrait of Dido Belle, and different paintings and other visual works are used by the filmmakers to convey the conflict in the narrative. Finally, I relate the creation of Belle with the current British context, as the film highlights central social problems of the age and provides alternate images of Englishness in a society still clinging to a nostalgic past.Belle (2014), realizado por Amma Asante, é um filme de estilo heritage sobre a vida de Dido Elizabeth Belle, uma aristocrata de final do século XVIII fruto da união ilegítima de uma mãe escrava negra e de um pai branco inglês. Esta dissertação visa preencher as lacunas da literatura escassa sobre o filme, que se costuma focar mais nos factos históricos que o inspiraram, e menos nos propósitos narrativos do mesmo. Para além disto, procedo a uma análise conjuntural de Belle, baseando-me em teorias como a da Intersecionalidade segundo Kimberlé Crenshaw (“Demarginalizing the Intersection of Race and Sex: A Black Feminist Critique of Antidiscrimination Doctrine, Feminist Theory and Antiracist Politics”) e o conceito do cronótopo do limiar de Mikhail Bakhtin (The Dialogic Imagination). Esta última noção inspirou a minha criação do conceito de identidade de limiar, que se refere a um estado complexo em que um indivíduo não consegue pertencer inteiramente a um grupo devido às suas circunstâncias identitárias. Esta noção vem no seguimento de outras noções teóricas como a de double conscioussnes de Du Bois (“Strivings of the Negro People”). A identidade está, deste modo, no centro da minha análise no que se refere a rótulos como raça, classe e género, cuja intersecção, como defendo, impulsiona a história de Belle. Ao estudar o filme, começo por discutir o seu género, e as suas características particulares. Sendo que, apesar de aparentar ser um típico filme heritage, Belle encontra-se na intersecção de diferentes tradições cinematográficas, como women’s cinema e black cinema, sendo que na literatura sobre cinema não existe sobreposição ou interseção destas diferentes categorias. Procuro então elucidar como Belle põe em causa preconceitos sobre o cinema heritage inglês, ao escolher uma heroína negra digna de uma obra de Jane Austen. Neste contexto cultural, Dido não só se encontra numa posição limiar em termos raciais, como, sendo uma herdeira, também se afasta economicamente do estereótipo feminino da época. Belle inclui igualmente o tráfico de escravos na narrativa, sendo que Lord Mansfield, o tio-avô que adotou Dido e a sua prima, encontra-se prestes a julgar o caso do navio negreiro Zong, cujo proprietários procuram obter uma compensação monetária por escravos que foram atirados ao mar por motivo de doença. A discussão sobre as implicações éticas da escravatura é por isso importante em Belle, e acaba por aproximar Dido ao seu futuro marido, John Davinier, devido às posições abolicionistas deste. Estas especificidades tornam Belle um filme de limiar. Com o objetivo de compreender a importância de Dido Belle no século XVIII e do filme Belle no século XXI, apresento uma contextualização sociocultural, de modo a elucidar, por exemplo, as atitudes de personagens como a família Ashford, que demonstram ter preconceitos raciais e de género contra Dido e a sua prima branca, Elizabeth. Inicialmente, Dido é considerada como um objeto sexual, enquanto que Elizabeth é vista como uma jovem virginal. Mais tarde, quando a herança de Dido e a pobreza de Elizabeth são reveladas, Dido torna-se cobiçada como futura esposa e Elizabeth vê-se rejeitada socialmente. Assim sendo, dou início a uma análise aprofundada de Belle em termos de narrativa, principalmente por meio de elementos visuais, referências intertextuais e técnicas cinematográficas. Baseando-me em noções de Bakhtin e Field, apresento duas trilogias de cenas em Belle, que representam a evolução da narrativa e da personagem principal (a “Mirror Trilogy”, e a “Crisis Trilogy”). Aqui relaciono a noção de necessidade dramática de Field (Screenplay 25) com a metamorfose de Bakhtin (The Dialogic Imagination 115). Field propõe que o conflito dramático, que necessitará de uma resolução, acontece quando uma personagem procurar alcançar um objetivo ao qual se apresentam obstáculos. De modo semelhante, Bakhtin afirma que a metamorfose é essencial para o “renascimento” do indivíduo, sendo que esta acontece devido a uma crise que impulsiona uma mudança. No caso de Belle, a necessidade dramática apresenta-se como o desejo de Dido de pertencer ou ser aceite. Quando confrontada com uma crise identitária, Dido terá de procurar alterar a sua perspetiva de modo a superar obstáculos. Na narrativa de Belle, destaco como obstáculos ou crises, uma repulsa de Dido em relação a si própria devido à discriminação racial que a rodeia, e as expetativas sociais de género que ditam a vida das mulheres no século XVIII. A representação e a arte também são abordadas nesta dissertação, dado que o filme foi inspirado por um retrato de Dido Belle, e diferentes pinturas e outras obras visuais são usadas pelas cineastas para transmitir o conflito na narrativa. É relevante apontar que identifico estas obras visuais e literárias inseridas em Belle, algo aparentemente inédito na literatura sobre o filme. Especificamente, identifiquei as duas pinturas de Sir Joshua Reynolds usadas no filme como referências à posição de Dido: Lady Elizabeth Keppel and a Servant (ca. 1762) e Charles Stanhope, third Earl of Harrington, and a Servant (1782). Também apontei o uso do emblema abolicionista de Josiah Wedgwood como referência visual no filme, e identifiquei o título do livro que a personagem de Dido lê como The Dying Negro: A Poetical Epistle (1773). As três referências visuais acima referidas são utilizadas em Belle como um espelho no qual Dido vê-se refletida, e graças ao qual o público observa a posição subordinada de uma mulher negra na era imperial. Ainda assim, Dido admite não saber exatamente onde se encaixa quando, ao ler The Dying Negro, revela não se sentir verdadeiramente representada na obra. O facto de Dido encontrar-se no limiar de várias categorias é também explorado em Belle graças a uma subversão de estereótipos raciais. Numa cena reminiscente de Austen, Dido toca piano numa soirée em Kenwood, a casa da sua família. Para espanto dos convidados, Dido toca uma peça clássica com grande talento, enquanto a sua prima causa menos impacto com a sua actuação. Além disto, o símbolo da rosa inglesa, associada à pureza e à castidade brancas, de acordo com a personagem James Ashford, é paradoxalemnte atribuido a Dido, estando presente no seu guarda-roupa e em seu redor. Outra escolha cinematográfica de relevância é a representação do cabelo de Dido, em contradição com o retrato original, já que na pintura original ela usa um turbante. Como demonstro através de um estudo da representação artística no século XVIII, era raro o cabelo de uma personagem feminina negra estar exposto. Devido a isto, o filme parece contrariar esta tendência ao não censurar o cabelo encaracolado de Dido, e mostrá-lo como símbolo de beleza. O fio condutor da dissertação é a exploração identitária em Belle, a qual elucido recorrendo a autores como Frantz Fanon e bell hooks. A noção de identidade limiar é assim crucial, já que esta implica um conflito causado por um sistema hegemónico baseado em categorias impermeáveis – um sistema através do qual a hierarquia social do século XVIII foi-se construindo até ao presente. Finalmente, relaciono a criação de Belle com o contexto britânico atual, ao mostrar como o filme destaca problemas sociais centrais da época e fornece imagens alternativas de Englishness numa sociedade ainda agarrada a uma nostalgia do passado. Graças à sua aparência de heritage film, Belle consegue introduzir perguntas profundas sobre a sociedade e cultura inglesas, ao explorar as consequências dum status quo pouco flexível. Em última instância, concluo que, assim como Amin Maalouf (Les Identités Meutrières) e Fanon (Peau Noire, Masques Blancs) defendem, a identidade individual, por mais complexa que seja, não se pode dividir ou amputar