Aplicación de la técnica MALDI-TOF en la identificación microbiana a partir de mestra directa de orina y de frasco de hemocultivo crecido

La introducción de la identificación microbiana basada en el análisis de proteínas mediante espectrometría de masas MALDI‐TOF (de su nombre en inglés que describe el tipo de ionización y el analizador utilizado: Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization‐Time of Flight) ha permitido mejoras importantes en la rutina de trabajo de los laboratorios de Microbiología Clínica. Entre estas mejoras cabe destacar un ahorro significativo del tiempo necesario para llevar a cabo las identificaciones microbianas a partir de colonias. En este sentido, una de las posibles aplicaciones de la técnica MALDI‐TOF en la rutina de trabajo del laboratorio es lograr identificaciones microbianas a partir de diferentes muestras, como pueden ser las orinas y los frascos de hemocultivo crecidos, adelantando en 48/72 horas el resultado de la identificación microbiana si se compara con la identificación bioquímica clásica y en 24 horas si se compara con la identificación mediante MALDI‐TOF a partir de colonias.Departamento de Biología Celular, Histología y FarmacologíaMáster en Investigación en Ciencias de la Salu

Nuevos protocolos basados en espectrometría de masas y citometría de flujo para un diagnóstico microbiológico rápido

En esta tesis se proponen y se validan procedimientos diagnósticos microbiológicos llevados a cabo mediante el sistema MALDI-TOF a partir de muestra directa de orina, frasco de hemocultivo crecido y medio de enriquecimiento. Por otra parte se propone y valida un antibiograma rápido a partir del frasco de hemocultivo crecido mediante citometría de flujo.Departamento de Anatomía Patológica, Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública, Medicina Legal y Forens

Eye Movement Desensitization and Reprocessing for Adolescent Depression

While cognitive behavior therapy is considered to be the first-line therapy for adolescent depression, there are limited data on whether other psychotherapeutic techniques are also effective in treating adolescents with depression. This report suggests the potential application of eye movement desensitization and reprocessing (EMDR) for treatment of depressive disorder related, not to trauma, but to stressful life events. At present, EMDR has only been empirically validated for only trauma-related disorders such as posttraumatic stress disorder. Two teenagers with major depressive disorder (MDD) underwent three and seven sessions of EMDR aimed at memories of stressful life events. After treatment, their depressive symptoms decreased to the level of full remission, and the therapeutic gains were maintained after two and three months of follow up. The effectiveness of EMDR for depression is explained by the model of adaptive information processing. Given the powerful effects observed within a brief period of time, the authors suggest that further investigation of EMDR for depressive disorders is warranted

IRE1α-XBP1 Activation Elicited by Viral Singled Stranded RNA via TLR8 May Modulate Lung Cytokine Induction in SARS-CoV-2 Pneumonia

Initial symptoms of COVID-19 infection depend on viral replication, while hyperinflammation is a hallmark of critical illness and may drive severe pneumonia and death. Among the mechanisms potentially involved in the hyperinflammatory state, we focused on the unfolded protein response, because the IRE1α-XBP1 branch can be activated as result of the endoplasmic reticulum stress produced by the overwhelming synthesis of viral components and synergizes with Toll-like receptor signaling to induce cytokine expression. Viral RNA may trigger the IRE1α-XBP1 branch via TLR7/8 activation and like TLR2 and TLR4 may underpin cytokine expression trough XBP1 splicing (sXBP1). The expression of IL1B, IL6, and TNF mRNA in bronchoalveolar aspirates (BAAs) were higher in COVID-19 patients under mechanical ventilation and intubation who showed sXBP1. The scrutiny of monocytic/macrophagic markers during active infection showed a reduction of those involved in antigen presentation and survival, as well as the IFN stimulated gene MX1. These changes reverted after infection tests turned negative. In contrast, the expression of the mRNA of the serine protease TMPRSS2 involved in S protein priming showed a high expression during active infection. TLR8 mRNA showed an overwhelming expression as compared to TLR7 mRNA, which suggests the presence of monocyte-derived dendritic cells (MDDCs). In vitro experiments in MDDCs activated with ssRNA40, a positive-sense, single-stranded RNA (+ssRNA) like SARS-CoV-2 RNA, induced sXBP1 and the expression of IL-1β, IL-6, and TNFα at mRNA and protein levels. These responses were blunted by the IRE1α ribonuclease inhibitor MKC8866. Given the analogies between the results observed in BAAs and the effects induced by +ssRNA in MDDCs, IRE1α ribonuclease inhibition might be a druggable target in severe COVID-19 disease.This study was funded by Fondo COVID-19 del Instituto de Salud Carlos III/Junta de Castilla y Leon (N.F.). European Commission-NextGenerationEU, through CSIC's Global Health Platform (PTI Salud Global) (project SGL2103016) (M.S.C.). Plan Nacional de Salud y Farmacia Grant SAF2017-83079-R and Grant PID2020-113751RB-I00 funded by MCIN/AEI/ 10.13039/501100011033 (M.S.C.). Junta de Castilla y Leon/Fondo Social Europeo Grants CSI035P17 (M.S.C.) and VA175P20 (N.F.). Proyecto SEAHORSE INFRARED: IR2020-1-UVA05 (JCyL).N

Cambios recientes en la demanda turística en las Illes Balears

A raíz de la gran importancia del turismo en las Illes Balears, es esencial comprender los diferentes indicadores que miden la demanda turística, para ello se analizan los cambios que se han producido en los últimos años, en el comportamiento del turismo, especialmente desde el año 2010 hasta la actualidad. Se explican dos fenómenos recientes que están redefiniendo la demanda turística, como son, el todo incluido en las Islas Baleares, y la nueva forma de alquiler turístico vacacionalABSTRACT: Due to the great importance of tourism has in the Balearic Islands, it is essential to understand the different indicators that measure the tourism demand, thus, changes that hav e occurred in recent years, especially from 2010 to nowadays have been analyzed. Two news phenomena as are all - inclusive and the new way of house rental Peer To Peer, are explaine

Un procedimiento de dos horas para determinar la sensibilidad de estaficolococos y enterococos a los antibióticos en dos horas mediante un método colorimétrico

[EN]: [Introduction]: Rapid determination of the antibiotic susceptibility test in bacteria remains a challenge for Clinical Microbiology laboratories. [Methods]: An improvement in the colorimetric antimicrobial susceptibility testing performed with resazurin in enterococci and staphylococci has been carried out. The design of method was performed using two collection strains, which have a known susceptibility. This procedure was then validated against standard commercial methods on 15 strains of staphylococci and 15 strains of enterococci from patients. [Results]: The essential agreement between the colorimetric method and commercial methods (E-test, MicroScan and VITEK2) was 100%. [Conclusion]: Resazurin allows us to obtain a reliable antibiotic susceptibility test in staphylococci and enterococci in less than two hours.[ES]: [Introducción]: La realización de un antibiograma rápido sigue siendo un reto para los laboratorios de Microbiología Clínica. [Métodos]: Se ha realizado una mejora en el antibiograma colorimétrico realizado mediante resazurina en estafilococos y enterococos. El diseño del método se realizó mediante el uso de dos cepas de colección que presentan una sensibilidad conocida. Este procedimiento se validó posteriormente frente a los métodos comerciales mediante el procesamiento de 15 cepas de estafilococos y 15 de enterococos aisladas de pacientes. [Resultados]: Se ha obtenido un 100% de concordancia entre la sensibilidad obtenida mediante resazurina y la obtenida mediante los métodos comerciales (E-test, MicroScan and VITEK2). [Conclusión]: Mediante el uso de resazurina es posible obtener un antibiograma en estafilococos y enterococos en menos de dos horas de forma fiable.This work was supported by a grant from the Fundación Francisco Soria Melguizo, Spain.Peer Reviewe

Antibiograma rápido en enterobacterias mediante un método colorimétrico

Resumen del póster presentado al XIX Congreso de la Sociedad Española de Enfermedades Infecciosas y Microbiología Clínica, celebrado en Sevilla del 28 al 30 de mayo de 2015.[Introducción]: La rapidez en la emisión del antibiograma es una de las prioridades del laboratorio de Microbiología Clínica. La resazurina es un indicador REDOX cuya la forma oxidada es de color azul. Cuando se incuban células no viables en presencia de resazurina, ésta no se reduce y mantiene su color azul; en cambio, las células viables la reducen a resorufina, que es de color rojo. Este cambio de color puede ser detectado a simple vista o mediante espectrofotometría. [Objetivos]: Realizar un antibiograma en enterobacterias mediante el uso de resazurina. [Material y métodos]: Se prepararon suspensiones de Escherichia coli ATCC 35218 a concentraciones de 106, 107 and 108 UFC/ml en 3 ml de caldo Mueller Hinton con los cationes ajustados. La ampicilina se ensayó a las concentraciones críticas de sensibilidad y resistencia propuestos por el EUCAST. Del mismo modo, Escherichia coli ATCC 25922 se testó frente a amicacina, cefotaxima y ciprofloxacino. En todos los casos, se preparó un tubo sin antibiótico como control positivo y otro sin inóculo bacteriano como control negativo. Se observó el color del medio cada 15 minutos de incubación. El cambio de color del medio de azul a rojo indicó crecimiento bacteriano. Además, se calculó el porcentaje de la forma reducida de resazurina a partir de las absorbancias a 570 y 600 nm (Smart Spec™ Plus, Bio‑Rad). [Resultados]: Inóculos de 106, 107 y 108 UFC/ml de Escherichia coli ATCC 35218, resistente a ampicilina, viraron el color del medio, indicando crecimiento bacteriano, durante la tercera, segunda y primera hora de incubación respectivamente, tanto incubados en presencia del antibiótico como sin él. Inóculos 106 UFC/ml de Escherichia coli ATCC 25922, sensible a los antibióticos estudiados, viraron el color del medio durante la tercera hora de incubación sin antibiótico y las cepas incubadas con antibiótico no lo viraron. Del mismo modo, inóculos de 107 UFC/ml viraron el color del medio durante la segunda hora de incubación sin antibiótico y las cepas incubadas con antibiótico no. Finalmente, inóculos de 108 UFC/ml viraron el indicador durante la primera hora de incubación tanto en presencia del antibiótico como sin él. En todos los casos, cuando se observó el viraje del indicador, el porcentaje de reducción de la resazurina, calculado mediante las lecturas espectrofotométricas, fue superior al 17%. [Conclusiones]: En dos horas se puede determinar la sensibilidad de las enterobacterias a los antibióticos mediante el uso de resazurina.Este trabajo ha sido financiado por una subvención de la Fundación Francisco Soria Melguizo.Peer Reviewe

Antibiograma en dos horas mediante la medición de ATP por bioluminiscencia

[EN]: The antibiotic susceptibility test (AST) in Clinical Microbiology laboratories is still time-consuming, and most procedures take 24 h to yield results. In this study, a rapid antimicrobial susceptibility test using ATP-bioluminescence has been developed. The design of method was performed using five ATCC collection strains of known susceptibility. This procedure was then validated against standard commercial methods on 10 strains of enterococci, 10 staphylococci, 10 non-fermenting gram negative bacilli, and 13 Enterobacteriaceae from patients. The agreement obtained in the sensitivity between the ATP-bioluminescence method and commercial methods (E-test, MicroScan and VITEK2) was 100%. In summary, the preliminary results obtained in this work show that the ATP-bioluminescence method could provide a fast and reliable AST in two hours.[ES]: La mayoría de procedimientos diagnósticos para el estudio de la sensibilidad de las bacterias a los antibióticos en Microbiología Clínica requieren unas 24 horas para la obtención de resultados. En este estudio se propone una metodología para llevar a cabo un antibiograma rápido mediante la medición de ATP por bioluminiscencia. El diseño del antibiograma se realizó mediante el uso de cinco cepas de colección ATCC, las cuales presentan una sensibilidad conocida. Este diseño fue posteriormente validado frente a los métodos comerciales de antibiograma mediante el procesamiento de 10 cepas de enterococos, 10 de estafilococos, 10 de bacilos gramnegativos no fermentadores y 13 de Enterobacteriaceae aisladas de pacientes. El acuerdo obtenido entre la sensibilidad obtenida mediante bioluminiscencia y la obtenida mediante los métodos comerciales (E-test, MicroScan and VITEK2) fue del 100%. Por lo tanto, los resultados preliminares obtenidos en este trabajo indican que las medidas de ATP mediante bioluminiscencia podrían proporcionar, en dos horas, un antibiograma rápido y seguro.This work was supported by a grant (060/132421) from the Fundación Francisco Soria Melguizo, Spain.Peer Reviewe