Linfocitos Th1, Th17 y T regulatorios en cepas de ratones con diferente susceptibilidad al desarrollo de prostatitis autoinmune experimental : rol del Receptor

Tesis (Doctora en Ciencias Químicas) - - Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas, 2013El modelo de Prostatitis Autoinmune Experimental (PAE) es considerado una herramienta útil para el estudio de la enfermedad humana Prostatitis Crónica, Síndrome del dolor pélvico crónico (CP/CPPS), una de las enfermedades más prevalentes en la clínica urológica masculina en la que se postula una etiología autoinmune. En la presente tesis se trabajó con este modelo animal analizando en primer lugar los perfiles de activación de los linfocitos T (LT) específicos que se inducen luego de la inmunización de ratones de diferentes cepas con antígenos prostáticos. Se estudiaron cepas con distinta susceptibilidad a desarrollar PAE: las cepas NOD (alta susceptibilidad), C57Bl/6 (susceptibilidad media) y BALB/c (resistente). A pesar que las tres cepas desarrollaron una respuesta inmune celular específica hacia antígenos prostáticos luego de la inmunización, la lesión del órgano blanco se observó principalmente en la cepa NOD y en menor medida en la cepa C57Bl/6, encontrándose ausente en ratones de la cepa BALB/c. Ratones de las cepas NOD y C57Bl/6 presentaron importantes cantidades de LT infiltrando la próstata y la presencia en periferia de una respuesta celular específica asociada a un fenotipo Th1/Th17, con bajos niveles de células Tr1 y Treg (Foxp3+). La cepa resistente BALB/c, mostró muy escasa infiltración en la próstata compuesta principalmente por monocitos/macrófagos con una respuesta celular periférica específica asociada principalmente al fenotipo Th17, con frecuencias elevadas de células regulatorias Tr1 y Treg. Al inmunizar ratones de la cepa NOD deficiente en IFNγ (NOD-IFNγ-/-) se observó una ausencia de infiltrado prostático en presencia de una respuesta celular específica periférica con un perfil dominante Th17 y con una moderada frecuencia de células Tr1 y Treg. Cuando evaluamos los niveles de linfocitos Treg y LT efectores (Tef) se observaron valores de Treg similares en todas las cepas, con niveles significativamente mayores de Tef en las cepas susceptibles. La eliminación transitoria de células Treg previo a la inmunización favoreció el desarrollo de LT específicos con perfil Th1 en las tres primeras cepas, perfil que se asoció con una mayor infiltración y lesión prostática. La eliminación de células Treg en ratones NOD-IFNγ-/- , en los que el perfil Th1 no puede ser inducido, generó un aumento importante de LT específicos con un perfil Th17, sin modificar la infiltración leucocitaria y/o lesión en el tejido prostático. Cuando ratones NOD-IFNγ-/- fueron inyectados por vía intraperitoneal (i.p.) con IFNγ recombinante (rIFNγ) se observó un incremento importante en la infiltración prostática, indicando que no era necesario que los LT secreten IFNγ para infiltrar la glándula. Estos resultados sugirieron que el IFNγ podría jugar un rol importante en el control de la migración de los LT específicos hacia el tejido prostático. El análisis de la expresión de receptores de quimiocinas en LT específicos de las diferentes cepas demostró que LT de ratones NOD y C57Bl/6 tenían un alta frecuencia de células CXCR3+CCR5+, mientras que los LT provenientes de ratones BALB/c y NOD-IFNγ-/- expresaban principalmente CCR6+. Para determinar si la expresión diferencial de receptores de quimiocinas le otorgaba a los LT específicos diferentes capacidades migratorias, LT específicos de ratones NOD o NOD-IFNγ-/- fueron purificados y transferidos adoptivamente a ratones receptores NOD-SCID. Al evaluar la recirculación y la capacidad de llegar al tejido prostático se observó que sólo los LT provenientes de ratones NOD eran capaces de llegar a la glándula prostática de los animales receptores e inducir además reclutamiento de células inmunes. LT específicos de ratones NOD-IFNγ-/- re-estimulados in vitro con el autoantígeno en presencia de rIFNγ presentaron una clara inducción de los receptores CXCR3+CCR5+. Al transferir adoptivamente estos LT estimulados in vitro en presencia de rIFNγ se demostró una infiltración marcada y reclutamiento de otras células inmunes en próstata de ratones receptores. Se realizaron además transferencias adoptivas de LT específicos CD3+CXCR3- o CD3+CXCR3+ y se demostró una capacidad mayor de llegar a próstata e infiltrar en los LT CXCR3+. Además el bloqueo in vivo de los receptores CXCR3 y CCR5 mediante el uso de un péptido antagonista mimético inhibió significativamente la llegada de LT específicos a la glándula prostática. En concordancia con los hallazgos obtenidos en relación a receptores de quimiocinas involucrados en PAE, se demostró una expresión basal de quimiocinas ligandos de CXCR3 y CCR5 en próstata de la cepa susceptible y un incremento marcado de las mismas luego de la instauración de la enfermedad. Nuestros hallazgos demuestran que la expresión de los receptores CXCR3 y CCR5 en la superficie de los LT es esencial para conferirle a estos la capacidad de alcanzar el tejido prostático e inducir un microambiente que genere el reclutamiento de un mayor número de células. Estos resultados podrían ser significativos para el diseño de nuevas terapias que resulten efectivas para bloquear o favorecer la llegada de células inmunes al tejido prostático en procesos autoinmunes o infecciosos/neoplásicos.Breser, María Laura. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas; Argentina.Rivero, Virginia Elena. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica Clínica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Cervi, Laura Alejandra. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Bioquímica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina.Virgolini, Miriam Beatriz. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Farmacología. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Farmacología Experimental de Córdoba; Argentina.Nores, Gustavo Alejandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Químicas. Departamento de Química Biológica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro de Investigaciones en Química Biológica de Córdoba; Argentina.Zwirner, Norberto Walter. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Instituto de Biología y Medicina Experimental; Argentina

Interaction between bovine mammary epithelial cells and planktonic or biofilm Staphylococcus aureus: The bacterial lifestyle determines its internalization ability and the pathogen recognition

The main cause of mastitis, one of the most costly diseases in the dairy industry, is bacterial intramammary infection. Many of these bacteria are biofilm formers. Biofilms have been associated with resistance to antibiotics and to the host immune system. Here, we evaluated different experimental models representing bacterial biofilm lifestyle with the aim to study bacterial invasion into bovine mammary epithelial cells and the interaction of these cells with planktonic or biofilm Staphylococcus aureus. Staphylococcus aureus V329, its nonbiofilm-forming mutant and bovine mammary alveolar cells (MAC-T) were used. Bacterial invasion was studied using the gentamicin exclusion test, cell viability by trypan blue exclusion technique, TLR2 expression by flow cytometry, IL1β/IL6 production by ELISA and IL8/TNFα gene expression by real-time polymerase chain reaction. Biofilm and planktonic S. aureus showed differences in their invasion ability, with the biofilm mode showing a lower ability. Planktonic S. aureus reduced MAC-T viability after 6 h of co-culture, while biofilms did so at 24 h. MAC-T infected with planktonic bacteria showed increased TLR2 expression. Both lifestyles increased IL8 expression and IL1β/IL6 production but did not modify TNFα expression. Our results demonstrate that the bacterial lifestyle affects the invasion behavior, suggesting that biofilms reduce the bacteria-epithelial cell interaction. Planktonic cultures seem to induce higher cellular activation than biofilms. Further knowledge about the complex host-biofilm interaction is necessary to design more efficient therapies against bovine mastitis.Fil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Orellano, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Correa, Silvia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Córdoba. Centro de Investigaciones en Bioquímica Clínica e Inmunología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Tolosa, Nori Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Evaluación in vivo de un hidrogel combinado quitosano y cloxacilina durante el secado en bovinos de producción

Fil: Porporatto, Carina. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Bianco, Ismael D.. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Isaac, Paula. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Bohl, Luciana Paola. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Maino, Jorge. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Barrenechea, Angel. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Rampone, Alberto Oscar. Universidad Nacional Villa María; Argentina..Fil: Breser, María Laura. Universidad Nacional Villa María; Argentina.

Chitosan can improve antimicrobial treatment independently of bacterial lifestyle, biofilm biomass intensity and antibiotic resistance pattern in non-aureus staphylococci (NAS) isolated from bovine clinical mastitis

Bovine mastitis is the most frequent and costly disease that affects dairy cattle. Non-aureus staphylococci (NAS) are currently one of the main pathogens associated with difficult-to-treat intramammary infections. Biofilm is an important virulence factor that can protect bacteria against antimicrobial treatment and prevent their recognition by the host’s immune system. Previously, we found that chronic mastitis isolates which were refractory to antibiotic therapy developed strong biofilm biomass. Now, we evaluated the influence of biofilm biomass intensity on the antibiotic resistance pattern in strong and weak biofilm-forming NAS isolates from clinical mastitis. We also assessed the effect of cloxacillin (Clx) and chitosan (Ch), either alone or in combination, on NAS isolates with different lifestyles and abilities to form biofilm. The antibiotic resistance pattern was not the same in strong and weak biofilm producers, and there was a significant association (p ≤ 0.01) between biofilm biomass intensity and antibiotic resistance. Bacterial viability assays showed that a similar antibiotic concentration was effective at killing both groups when they grew planktonically. In contrast, within biofilm the concentrations needed to eliminate strong producers were 16 to 128 times those needed for weak producers, and more than 1,000 times those required for planktonic cultures. Moreover, Ch alone or combined with Clx had significant antimicrobial activity, and represented an improvement over the activity of the antibiotic on its own, independently of the bacterial lifestyle, the biofilm biomass intensity or the antibiotic resistance pattern. In conclusion, the degree of protection conferred by biofilm against antibiotics appears to be associated with the intensity of its biomass, but treatment with Ch might be able to help counteract it. These findings suggest that bacterial biomass should be considered when designing new antimicrobial therapies aimed at reducing antibiotic concentrations while improving cure rates.Fil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Tisera, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Orellano, María Soledad. Universidad del País Vasco; España. Universidad Nacional de Villa María; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; ArgentinaFil: Bianco, Ismael Dario. Provincia de Córdoba. Ministerio de Ciencia y Técnica. Centro de Excelencia en Productos y Procesos de Córdoba; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentin

A comparative study of antimicrobial activity of differently-synthesized chitosan nanoparticles against bovine mastitis pathogens

The greatest concern in dairy farming nowadays is bovine mastitis (BM), which results mainly from bacterial colonization of the mammary gland. Antibiotics are the most widely used strategy for its prevention and treatment, but overuse has led to growing antimicrobial resistance. Pathogens have also developed other mechanisms to persist in the udder, such as biofilm formation and internalization into bovine epithelial cells. New therapies are therefore needed to reduce or replace antibiotic therapies. In a previous study, we found that chitosan nanoparticles (Ch-NPs) have considerable potential for the treatment of BM. The aim of the present study was to evaluate the antimicrobial activity of differently-synthesized Ch-NPs against BM pathogens and their toxicity in bovine cellsin vitro, to further explore the attributes of Ch-NPs for the prevention and treatment of intramammary infections. We also looked into their ability to inhibit biofilm formation and prevent the internalization ofS. aureusinto mammary epithelial cells. Finally, since an interesting approach for BM prevention is to enhance the host's immune response, we studied whether Ch-NPs could promote the release of pro-inflammatory cytokines in mammary epithelial cells. The results reveal that the bactericidal effect of Ch-NPs on BM pathogens and their ability to inhibit biofilm formation are size-dependent, with smaller particles being more efficient. In contrast, their effect on the viability of the cell lines is not size-dependent and all samples tested were non-toxic. The smallest Ch-NPs successfully prevented the internalization ofS. aureusinto the cells, but did not promote the production of pro-inflammatory cytokines. These findings make it possible to conclude that Ch-NPs are a great bactericidal agent which can prevent the main mechanisms developed by BM pathogens to persist in the udder.Fil: Orellano, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Falcone, Ruben Dario. Universidad Nacional de Río Cuarto. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto para el Desarrollo Agroindustrial y de la Salud; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Commensal coagulase-negative Staphylococcus from the udder of healthy cows inhibits biofilm formation of mastitis-related pathogens

Bovine mastitis, considered the most important cause of economic losses in the dairy industry, is a major concern in veterinary medicine. Staphylococcus aureus and coagulase-negative staphylococci (CNS) are the main pathogens associated with intramammary infections, and bacterial biofilms are suspected to be responsible for the persistence of this disease. CNS from the udder are not necessarily associated with intramammary infections. In fact, some commensal CNS have been shown to have biological activities. This issue led us to screen exoproducts from commensal Staphylococcus chromogenes for anti-biofilm activity against different mastitis pathogens. The cell-free supernatant from S. chromogenes LN1 (LN1-CFS) was confirmed to display a non-biocidal inhibition of pathogenic biofilms. The supernatant was subjected to various treatments to estimate the nature of the biofilm-inhibiting compounds. The results showed that the bioactive compound >5 KDa in mass is sensitive to thermal treatment and proteinase K digestion, suggesting its protein properties. LN1-CFS was able to significantly inhibit S. aureus and CNS biofilm formation in a dose-independent manner and without affecting the viability of bovine cells. These findings reveal a new activity of the udder microflora of healthy animals. Studies are underway to purify and identify the anti-biofilm biocompound and to evaluate its biological activity in vivo.Fil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Orellano, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Conesa, Agustin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Ferrero, Marcela Alejandra. YPF - Tecnología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentin

Chitosan nanoparticles enhance the antibacterial activity of the native polymer against bovine mastitis pathogens

Staphylococcus is the most commonly isolated genus from animals with intramammary infections, and mastitis is the most prevalent disease that affects dairy cows in many countries. These pathogens can live in biofilms, a self-produced matrix, which allow them evade the innate immune system and the antibiotic therapy, thereby producing persistent infections. The aim of this study was to explore the antimicrobial potential of chitosan nanoparticles (Ch-NPs) obtained by the reverse micellar method. We found that the nanoformulation developed presents antimicrobial activity against mastitis pathogens in a dose-dependent manner. Moreover, different experiments corroborated that the antimicrobial effectiveness of Ch-NP was greater than that shown by the native polymer used in the preparation of these nanocomposites. Ch-NPs caused membrane damage to bacterial cells and inhibited bacterial biofilm formation, without affecting the viability of bovine cells. These findings show the great potential of Ch-NPs as therapeutic agent for bovine mastitis treatment.Fil: Orellano, María Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; ArgentinaFil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Conesa, Agustin. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Falcone, Ruben Dario. Universidad Nacional de Río Cuarto. Facultad de Ciencias Exactas Fisicoquímicas y Naturales. Departamento de Química; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María. Universidad Nacional de Villa María. Centro de Investigaciones y Transferencia de Villa María; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; Argentin

IFNβ produced by TLR4-activated tumor cells is involved in improving the antitumoral immune response

A

Teat-apex colonizer Bacillus from healthy cows antagonizes mastitis-causing Staphylococcus aureus biofilms

Staphylococcus aureus is the most frequent causal agent of bovine mastitis, which is largely responsible for milk production losses worldwide. The pathogen's ability to form stable biofilms facilitates intramammary colonization and may explain disease persistence. This virulence factor is also highly influential in the development of chronic intramammary infections refractory to antimicrobial therapy, which is why novel therapies that can tackle multiple targets are necessary. Since udder microbiota have important implications in mastitis pathogenesis, they offer opportunities to develop alternative prophylactic and therapeutic strategies. Here, we observed that a Bacillus strain from the teat apex of lactating cows was associated to reduce colonization by S. aureus. The strain, identified as Bacillus sp. H21, was able to antagonize in-formation or mature S. aureus biofilms associated to intramammary infections without affecting cell viability. When exploring the metabolite responsible for this activity, we found that a widespread class of Bacillus exopolysaccharide, levan, eliminated the pathogenic biofilm under evaluated conditions. Moreover, levan had no cytotoxic effects on bovine cellular lines at the biologically active concentration range, which demonstrates its potential for pathogen control. Our results indicate that commensal Bacillus may counteract S. aureus-induced mastitis, and could therefore be used in novel biotechnological strategies to prevent and/or treat this disease.Fil: Isaac, Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica - Universidad Nacional de Villa María. Instituto Multidisciplinario de Investigación y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnológica; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Bohl, Luciana Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica. - Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica.; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: Romero, Cintia Mariana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tucumán. Planta Piloto de Procesos Industriales Microbiológicos; Argentina. Universidad Nacional de Tucumán; ArgentinaFil: Rodríguez, Lucía. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica. - Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica.; ArgentinaFil: Breser, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica. - Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica.; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; ArgentinaFil: de Lillo, Maria Florencia. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica. - Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica.; ArgentinaFil: Orellano, María Soledad. Universidad Nacional de Villa María; Argentina. Universidad del País Vasco; España. Universidad del País Vasco. Polymat; España. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Calvinho, Luis Fernando. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Clínicas; ArgentinaFil: Porporatto, Carina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Cordoba. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica. - Universidad Nacional de Villa Maria. Instituto Multidisciplinario de Investigacion y Transferencia Agroalimentaria y Biotecnologica.; Argentina. Universidad Nacional de Villa María. Instituto Académico Pedagógico de Ciencias Básicas y Aplicadas; Argentin