Aislamiento y selección de cepas psicrotolerantes de bacterias lácticas enológicas de la región patagónica

La vinificación de varietales tintos patagónicos ocurre en abril y mayo, con bajas temperaturas ambientales que inhiben el progreso de la fermentación maloláctica (FML), por ser un factor de estrés para las bacterias lácticas (BAL) que conducen el proceso. Las bodegas deben calentar los tanques de fermentación, incrementando los costos de producción. El desarrollo de cultivos malolácticos nativos, tolerantes a bajas temperaturas, constituye una herramienta estratégica para resolver el problema y potenciar el carácter regional de los vinos. El objetivo del trabajo consistió en obtener cepas enológicas patagónicas de BAL, capaces de sobrevivir y consumir ácido L-málico en vinificaciones a bajas temperaturas (4 y 10 ºC). Los aislamientos psicrotolerantes procedieron de vino Pinot noir (bodega comercial de General Roca, Río Negro). Su identificación se realizó por secuenciación del gen 16S rRNA y la similitud genética se analizó por RAPD-PCR con el primer M13. Como primer criterio de selección se evaluó su supervivencia en vino estéril incubado a bajas temperaturas. Posteriormente, las cepas que exhibieron mejor tolerancia, UNQoE19 (O. oeni) y UNQLh1.1 (Lb. hilgardii), se inocularon en vino, a escala de laboratorio, y se evaluaron su supervivencia y sus capacidades de implantación y de consumo de ácido L-málico, con resultados promisorios

Prevalence of Lentilacobacillus hilgardii over Lactiplantibacillus plantarum in Low-Temperature Spontaneous Malolactic Fermentation of a Patagonian Pinot Noir

The spontaneous malolactic fermentation (MLF) in a centenary winery from Patagonia, Argentina, is conducted by predominantly mesophilic Oenococcus oeni and Lactiplantibacillus plantarum. In this region, MLF takes place from 14 to 4 °C, leading to heat cellars incurring in higher costs and non-sustainable practices. Previously, psychrotrophic strains of O. oeni had been obtained from a Patagonian wine. The goal of this work was to identify the Lactobacillaceae microbiota related to low-temperature MLF and assess their contribution. Nine sychrotrophicc Lentilactibacillus hilgardii strains were identified by sequencing the 16S rRNA gene, and the strains typified by RAPD-PCR. All strains consumed L-malic acid at 4 and 10 °C in sterile wine. The selected UNQLh1.1 strain revealed implantation capacity and L-malic acid consumption at 4 and 10 °C in the presence of the native microbial consortium. Furthermore, the histidine decarboxylase (hdc) gene was not detected in any of the Len. hilgardii strains. The prevalence of Len. hilgardii under low-temperature conditions represents a novelty compared to previous findings of LAB diversity in the MLF of Patagonian wines. The native Patagonian psychrotrophic Len. hilgardii strains are a new player in fermentations conducted at low temperatures with the potential to be used as a sustainable MLF starter.Fil: Manera, Camila. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Rivas, Gabriel Alejandro. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Flores, Naiquen Elizabeth. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Brizuela, Natalia Soledad. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Caballero, Adriana Carmen. Universidad Nacional del Comahue; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Valdes la Hens, Danay. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Determinação da atividade antimicrobiana do extrato purificado do cogumelo Agaricus blazei cultivado por fermentação em estado sólido

Cogumelos são fungos macroscópicos e por não possuírem clorofila, necessitam absorver nutrientes do ambiente para sobrevivência, utilizando substâncias orgânicas em decomposição para sua nutrição. Alguns cogumelos como o Agaricus blazei tem mostrado seu potencial antimicrobiano frente a bactérias, bolores e algumas doenças, pela ação de compostos bioativos encontrados no micélio e corpo de frutificação. Para um maior aproveitamento destes compostos do basidiocarpo do cogumelo, são necessárias etapas de purificação. Existem muitas formas de purificar um composto, mas as técnicas cromatográficas em geral são preferidas, por sua resolução e recuperação obtidas. Com isso, objetivou-se a extração, purificação por permeação em gel e a análise antimicrobiana do extrato do cogumelo Agaricus blazei, frente ao micro-organismo Staphylococcus aureus. A fim de avaliar a capacidade antimicrobiana do extrato, foram feitas análises de porcentagem de inibição utilizando a metodologia descrita pela NCCLS (2003), as leituras de absorvância dos poços da microplaca com as amostras, foram feitos em leitora de microplacas e após, foram realizados os cálculos de porcentagem de inibição. Os resultados de inibição obtidos foram satisfatórios para 3 frações purificadas do extrato, frente ao micro-organismo estudado, mostrando a eficiência do processo de purificação, visto que a amostra bruta do extrato do cogumelo não apresentou inibição contra o mesmo micro-organismo

Extração e purificação de antimicrobiano do cogumelo Pleurotus sajor-caju

Fungos são divididos em três classes principais, dentre elas os Basidiomycotas, que tem como principal representante fungos macroscópicos, os cogumelos, estes dividemse em espécies tóxicas, alucinógenas e comestíveis. Dentre os comestíveis apresenta-se o Pleurotus sajor-caju de origem asiática, que possui alto valor nutricional e propriedade antimicrobiana. Para extração do agente antimicrobiano utilizou-se o micélio do fungo já desenvolvido, o qual foi submetido à análise antimicrobiana e ao processo de purificação por cromatografia de permeação em gel, em que foram coletadas 11 frações, as quais foram analisadas posteriormente quanto ao seu potencial antimicrobiano através do método de microplacas. Pode-se observar nos resultados que a amostra bruta não obteve ação antimicrobiana, porém, grande parte das frações purificadas apresentaram potencial de inibição, resultando em 84% de inibição sob o Staphylococcus aureus na fração 7 e de 31% de inibição sob Escherichia coli na fração 11. Pode-se observar que a técnica de purificação utilizada foi eficiente, pois obteve-se um aumento significativo na porcentagem de inibição da microbiota testada, evidenciando que provavelmente o composto mais eficaz contra micro-organismos gram-positivos difere em sua composição química do composto inibidor de gram-negativo. Palavra

ESTUDO DE RESISTÊNCIA A CLORETO DE SÓDIO DE BACTERIOCINA DE Lactobacillus sakei

Devido à preocupação com possíveis efeitos adversos à saúde, decorrente da utilização de aditivos químicos, há uma demanda por alimentos seguros, que utilizem aditivos naturais. Neste contexto um bioconservador que tem recebido atenção são as bacteriocinas. Neste trabalho realizou-se a análise de uma bacteriocina obtida de Lactobacillus sakei, contra a micro-organismos patogênicos, como Listeria monocytogenes (Gram-positivo) e Salmonella spp. (Gram-negativo) e sua estabilidade quanto as concentrações de cloreto sódio permitidas para utilização em queijos. O extrato livre de células foi submetido a concentrações de 0; 0,5; 1,0; 1,5 e 2,0% de NaCl, onde permaneceu por 1 h a uma temperatura de 7°C, o potencial antibacteriano foi avaliado pelo método de microplacas. A bacteriocina sem nenhum tratamento apresentou inibição de 96,8±0,7% sob Salmonella spp. e 89,7±2,7% frente a Listeria monocytogenes, constatando ainda estabilidade, sem alteração estatística nas concentrações salinas testadas (0,5; 1,0; 1,5 e 2,0%), resultando em 96,3±0,6; 97,1±0,8; 90,2±6,3 e 97,6±0,6 para Salmonella spp. e 85,2±2,5; 85,1±0,6; 83,8±2,3 e 83,8±3,4 para Listeria monocytogenes. Apresentando-se uma bacteriocina com alternativa viável de bioconservante em produtos com até 2% de NaCl, máxima concentração estudada até o momento

Survival and implantation of indigenous psychrotrophic Oenococcus oeni strains during malolactic fermentation in a Patagonian Pinot noir wine

Spontaneous malolactic fermentation (MLF) in the North Patagonian region of Argentina may have to bear low environmental temperatures, an important stress factor for the lactic acid bacteria (LAB) that conduct this process. Thus, inducing MLF by inoculation of a native starter culture able to lead this biological process at low temperatures is encouraged because it would allow preserving the regional character of the wine. The goal of this work was to obtain autochthonous Oenococcus oeni strains able to consume L-malic acid when MLF takes place at temperatures lower than 15 °C. Among the psychrotrophic isolates obtained from a Pinot noir wine, sixteen O. oeni strains were identified by sequencing the 16S rRNA gene and typing by RAPD PCR, allowing the differentiation of five genotypic groups. After the evaluation of the viability and metabolic performance of the strains in sterile wine at low temperatures, strains UNQOe4 and UNQOe19 were selected to evaluate their behavior in a non-sterile wine at 4 and 10 °C. The strains selected showed good implantation capacity and were able to successfully conduct MLF, suggesting that their use as starter cultures is suitable to improve this biological process in a wine region where environmental temperatures can be low.Fil: Manera, Camila. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Olguin, Nair Temis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Bravo Ferrada, Barbara Mercedes. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Tymczyszyn, Emma Elizabeth. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Delfederico, Lucrecia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; ArgentinaFil: Bibiloni, Baltasar Horacio. No especifíca;Fil: Caballero, Adriana Catalina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Patagonia Norte. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos, Biotecnología y Energías Alternativas. Universidad Nacional del Comahue. Instituto de Investigación y Desarrollo en Ingeniería de Procesos, Biotecnología y Energías Alternativas; ArgentinaFil: Semorile, Liliana Carmen. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Valdés la Hens, Danay. Universidad Nacional de Quilmes. Departamento de Ciencia y Tecnología. Laboratorio de Microbiología Molecular; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentin