Investigação de vírus entéricos de interesse em saúde pública (Rotavirus A, B e C, Norovírus e Sapovírus) em primatas não humanos em localidades do Sul do Brasil

Orientadora : Profa. Dra. Eliane C. GomesCoorientadores : Prof. Dr. Walfrido K. SvobodaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba,20/12/2011Bibliografia: fls. 109-126Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: As gastroenterites agudas estão entre uma das causas de maior morbi-mortalidade em todo o mundo, tanto em humanos como em animais, sendo as crianças as mais afetadas. Os principais vírus causadores de gastroenterites são: rotavírus (RV), pertencentes à famíllia Reoviridae, e os norovírus (NoV) e sapovírus (SaV), pertencentes à família Caliciviridae. Em todo o mundo, anualmente, ocorrem milhões de casos de diarréia induzidos por RV, NoV ou SaV em humanos. Além disso, há evidências de que estes vírus possuam potencial zoonótico, ou seja, a capacidade de infectar humanos e animais. Como os seres humanos e primatas não humanos (PNH) compartilham características genéticas e fisiológicas semelhantes, vírus entéricos isolados de PNH têm recebido atenção especial, sendo amplamente utilizados tanto em pesquisas básicas quanto aplicadas. Há escassos estudos sobre RV, NoV e SaV em PNH e pesquisas relacionando a circulação destes vírus com a saúde humana. Portanto, investigar a possível distribuição de vírus entéricos entre as diferentes espécies de PNH é importante para a compreensão da incidência destes vírus e o possível rompimento das barreiras entre espécies. Desta forma, o presente trabalho visou investigar a circulação de vírus entéricos em grupos de PNH que viviam próximos de populações humanas e, ainda, contribuir com informações para o aprimoramento de medidas de prevenção e controle destas viroses de importância em Saúde Pública. Para a pesquisa de RV, NoV e SaV foram utilizadas 62 amostras de fezes de 5 espécies de PNH (saguis - Callithrix spp., Callithrix penicillata; micos-leões-da-cara-preta - Leontopithecus caissara; bugio-ruivo - Alouatta guariba clamitans; bugio - Alouatta caraya) que viviam em localidades próximas a populações humanas nos estados do Paraná e Santa Catarina. As amostras foram coletadas e analisadas no período de maio de 2010 a junho de 2011. As técnicas utilizadas no estudo foram: extração do RNA viral pela associação dos métodos de fenol/clorofórmio/álcool isoamilico e sílica/isotiocianato de guanidina; eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) e semi nested PCR, seguido de eletroforese em gel de agarose; seqüenciamento quando necessário. Apesar da dificuldade, foram obtidas 62 amostras de fezes de PNH (43 provenientes de animais de vida livre). Porém estas amostras não apresentavam aspecto diarréico e não foi evidenciada a presença de RV (grupos A, B e C), SaV e NoV nas 5 espécies de PNH estudadas. Os resultados indicaram que não houve circulação destes vírus nos grupos de PNH no período analisado, sugerindo a necessidade de investigações contemplando maior número de PNH e outras espécies animais. Além disso, a pesquisa de vírus entéricos em grupos de PNH próximos à populações humanas pode auxiliar nos serviços de Saúde Pública na elaboração de planos e/ou programas de controle e prevenção destas viroses.Abstract: The acute gastroenteritis are one of the biggest causes of morbidity worldwide, both in humans and in animals. The children are most affected. The main viruses that cause gastroenteritis are rotavirus (RV), Family Reoviridae, and norovirus (NoV) and sapovírus (SaV), Family Caliciviridae. Each year, worldwide, occur million cases of diarrhea induced by RV, NoV or SaV in humans. In addition, there is evidence that these viruses have zoonotic potential, it is, the ability to infect humans and animals. As humans and nonhuman primates (NHP) have genetic characteristics and physiological similar, enteric viruses isolated from NHP have received special attention and is widely employee both in basic and applied research. There are few studies on RV, NoV and SaV in NHP and research related to circulation of these viruses to human health. Therefore, investigate the possible distribution of enteric viruses between different species of NHP is important for understanding the ecology of these viruses and can break down barriers between species. Thus, this study aimed to survey the circulation of enteric viruses in NHP groups living close to human populations, and also contribute information to improve the prevention and control of these viruses of importance in public health. The research of RV, NoV and SaV were used 62 stool samples from five species of NHP (marmosets - Callithrix spp. Callithrix penicillata; black-faced lion tamarins - Leontopithecus caissara; red howler - Alouatta guariba clamitans; howler - Alouatta caraya) living in locations close to human populations in the states of Parana and Santa Catarina, Brazil. The samples were collected and analyzed from May 2010 to June 2011. The techniques used in the study were: viral RNA extraction methods for the association of the phenol / chloroform / isoamyl alcohol and silica / guanidine isothiocyanate, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), reverse transcription followed polymerase chain reaction (RT-PCR) and semi-nested PCR followed by agarose gel electrophoresis, sequencing when needed. Despite of the difficulty, we obtained 62 samples of feces from NHP (43from free-living animals). But these samples did not show appearance of diarrhea and there was no evidence the presence of RV (groups A, B and C), SAV and NoV in five species studied NHP. The results indicated that there was no circulation of these viruses in NHP groups in the analyzed period, suggesting the need for more research looking at NHP and other animal species. In addition, the research of enteric viruses in NPH groups close human populations can help the public health services to prepare plans and/or control programs and prevention of these viruses

AVALIAÇÃO DA QUALIDADE BACTERIOLÓGICA DA ÁGUA CONSUMIDA NO CAMPUS III (JARDIM BOTÂNICO) DA UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARANÁ, CURITIBA, BRASIL.

The present paper aims at evaluating bacteriological quality of water destined to human consumption supplied by Companhia de Saneamento do Paraná (SANEPAR) in the Health Sciences, Applied Social Sciences and Agrarian Sciences Sectors (Botânico Branch) as well as analyzing the water supplied by the only artesian. The technique used was to fermentation of multiple tubes that determines the most probable number (MPN) of coliform bacteria in 100 ml of water. The results for all points of collection of water not recorded the presence of total coliform bacteria and thermotolerant in 100 ml of water examined. It was concluded that from the point of view bacteriological, this water is suitable for human consumption, according to Ordinance 518, March 25, 2004 the Ministry of Health Analyses were performed in the laboratory of Public Health and Environmental Health of Course of Pharmacy, Federal University of Paraná.O presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade bacteriológica da água, destinada ao consumo humano, dos Setores de Ciências da Saúde, Ciências Sociais e Aplicadas e Ciências Agrárias (Sede Botânico), fornecida pela Companhia de Saneamento do Paraná (SANEPAR), e pelo único poço artesiano. A técnica utilizada foi a de fermentação de tubos múltiplos que determina o número mais provável (NMP) de bactérias coliformes em 100 mL de água. Os resultados obtidos para todos os pontos de coleta de água não registraram a presença de bactérias coliformes totais e termotolerantes em 100 mL de água analisada. Concluiu-se que sob o ponto de vista bacteriológico, esta água é adequada para o consumo humano, de acordo com a Portaria 518 de 25 de Março de 2004 do Ministério da Saúde. As análises foram realizadas no laboratório de Saúde Pública e Saúde Ambiental do Curso de Farmácia da Universidade Federal do Paraná

SEROLOGICAL DETECTION OF HEPATITIS A VIRUS IN FREE-RANGING NEOTROPICAL PRIMATES (Sapajus spp., Alouatta caraya) FROM THE PARANÁ RIVER BASIN, BRAZIL

Nonhuman primates are considered as the natural hosts of Hepatitis A virus (HAV), as well as other pathogens, and can serve as natural sentinels to investigate epizootics and endemic diseases that are of public health importance. During this study, blood samples were collected from 112 Neotropical primates (NTPs) (Sapajus nigritus and S. cay, n = 75; Alouatta caraya, n = 37) trap-captured at the Paraná River basin, Brazil, located between the States of Paraná and Mato Grosso do Sul. Anti-HAV IgG antibodies were detected in 4.5% (5/112) of NTPs, specifically in 6.7% (5/75) of Sapajus spp. and 0% (0/37) of A. caraya. In addition, all samples were negative for the presence of IgM anti-HAV antibodies. These results suggest that free-ranging NTPs were exposed to HAV within the geographical regions evaluated

SEROLOGICAL DETECTION OF HEPATITIS A VIRUS IN FREE-RANGING NEOTROPICAL PRIMATES (Sapajus spp., Alouatta caraya) FROM THE PARANÁ RIVER BASIN, BRAZIL

Nonhuman primates are considered as the natural hosts of Hepatitis A virus (HAV), as well as other pathogens, and can serve as natural sentinels to investigate epizootics and endemic diseases that are of public health importance. During this study, blood samples were collected from 112 Neotropical primates (NTPs) (Sapajus nigritus and S. cay, n = 75; Alouatta caraya, n = 37) trap-captured at the Paraná River basin, Brazil, located between the States of Paraná and Mato Grosso do Sul. Anti-HAV IgG antibodies were detected in 4.5% (5/112) of NTPs, specifically in 6.7% (5/75) of Sapajus spp. and 0% (0/37) of A. caraya. In addition, all samples were negative for the presence of IgM anti-HAV antibodies. These results suggest that free-ranging NTPs were exposed to HAV within the geographical regions evaluated

Investigação de vírus entéricos de interesse em saúde pública (Rotavirus A, B e C, Norovírus e Sapovírus) em primatas não humanos em localidades do Sul do Brasil

Orientadora : Profa. Dra. Eliane C. GomesCoorientadores : Prof. Dr. Walfrido K. SvobodaDissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências Farmacêuticas. Defesa: Curitiba,20/12/2011Bibliografia: fls. 109-126Área de concentração: Insumos, medicamentos e correlatosResumo: As gastroenterites agudas estão entre uma das causas de maior morbi-mortalidade em todo o mundo, tanto em humanos como em animais, sendo as crianças as mais afetadas. Os principais vírus causadores de gastroenterites são: rotavírus (RV), pertencentes à famíllia Reoviridae, e os norovírus (NoV) e sapovírus (SaV), pertencentes à família Caliciviridae. Em todo o mundo, anualmente, ocorrem milhões de casos de diarréia induzidos por RV, NoV ou SaV em humanos. Além disso, há evidências de que estes vírus possuam potencial zoonótico, ou seja, a capacidade de infectar humanos e animais. Como os seres humanos e primatas não humanos (PNH) compartilham características genéticas e fisiológicas semelhantes, vírus entéricos isolados de PNH têm recebido atenção especial, sendo amplamente utilizados tanto em pesquisas básicas quanto aplicadas. Há escassos estudos sobre RV, NoV e SaV em PNH e pesquisas relacionando a circulação destes vírus com a saúde humana. Portanto, investigar a possível distribuição de vírus entéricos entre as diferentes espécies de PNH é importante para a compreensão da incidência destes vírus e o possível rompimento das barreiras entre espécies. Desta forma, o presente trabalho visou investigar a circulação de vírus entéricos em grupos de PNH que viviam próximos de populações humanas e, ainda, contribuir com informações para o aprimoramento de medidas de prevenção e controle destas viroses de importância em Saúde Pública. Para a pesquisa de RV, NoV e SaV foram utilizadas 62 amostras de fezes de 5 espécies de PNH (saguis - Callithrix spp., Callithrix penicillata; micos-leões-da-cara-preta - Leontopithecus caissara; bugio-ruivo - Alouatta guariba clamitans; bugio - Alouatta caraya) que viviam em localidades próximas a populações humanas nos estados do Paraná e Santa Catarina. As amostras foram coletadas e analisadas no período de maio de 2010 a junho de 2011. As técnicas utilizadas no estudo foram: extração do RNA viral pela associação dos métodos de fenol/clorofórmio/álcool isoamilico e sílica/isotiocianato de guanidina; eletroforese em gel de poliacrilamida (EGPA), transcrição reversa seguida de reação em cadeia da polimerase (RT-PCR) e semi nested PCR, seguido de eletroforese em gel de agarose; seqüenciamento quando necessário. Apesar da dificuldade, foram obtidas 62 amostras de fezes de PNH (43 provenientes de animais de vida livre). Porém estas amostras não apresentavam aspecto diarréico e não foi evidenciada a presença de RV (grupos A, B e C), SaV e NoV nas 5 espécies de PNH estudadas. Os resultados indicaram que não houve circulação destes vírus nos grupos de PNH no período analisado, sugerindo a necessidade de investigações contemplando maior número de PNH e outras espécies animais. Além disso, a pesquisa de vírus entéricos em grupos de PNH próximos à populações humanas pode auxiliar nos serviços de Saúde Pública na elaboração de planos e/ou programas de controle e prevenção destas viroses.Abstract: The acute gastroenteritis are one of the biggest causes of morbidity worldwide, both in humans and in animals. The children are most affected. The main viruses that cause gastroenteritis are rotavirus (RV), Family Reoviridae, and norovirus (NoV) and sapovírus (SaV), Family Caliciviridae. Each year, worldwide, occur million cases of diarrhea induced by RV, NoV or SaV in humans. In addition, there is evidence that these viruses have zoonotic potential, it is, the ability to infect humans and animals. As humans and nonhuman primates (NHP) have genetic characteristics and physiological similar, enteric viruses isolated from NHP have received special attention and is widely employee both in basic and applied research. There are few studies on RV, NoV and SaV in NHP and research related to circulation of these viruses to human health. Therefore, investigate the possible distribution of enteric viruses between different species of NHP is important for understanding the ecology of these viruses and can break down barriers between species. Thus, this study aimed to survey the circulation of enteric viruses in NHP groups living close to human populations, and also contribute information to improve the prevention and control of these viruses of importance in public health. The research of RV, NoV and SaV were used 62 stool samples from five species of NHP (marmosets - Callithrix spp. Callithrix penicillata; black-faced lion tamarins - Leontopithecus caissara; red howler - Alouatta guariba clamitans; howler - Alouatta caraya) living in locations close to human populations in the states of Parana and Santa Catarina, Brazil. The samples were collected and analyzed from May 2010 to June 2011. The techniques used in the study were: viral RNA extraction methods for the association of the phenol / chloroform / isoamyl alcohol and silica / guanidine isothiocyanate, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE), reverse transcription followed polymerase chain reaction (RT-PCR) and semi-nested PCR followed by agarose gel electrophoresis, sequencing when needed. Despite of the difficulty, we obtained 62 samples of feces from NHP (43from free-living animals). But these samples did not show appearance of diarrhea and there was no evidence the presence of RV (groups A, B and C), SAV and NoV in five species studied NHP. The results indicated that there was no circulation of these viruses in NHP groups in the analyzed period, suggesting the need for more research looking at NHP and other animal species. In addition, the research of enteric viruses in NPH groups close human populations can help the public health services to prepare plans and/or control programs and prevention of these viruses