Caracterização molecular de isolados da família Enterobacteriaceae produtores da β-Lactamase OXA-370

Base teórica: As carbapenemases são β-lactamases capazes de hidrolisar os carbapenêmicos, importante opção terapêutica nas infecções causadas por enterobactérias. A carbapenemase OXA-48 e suas variantes estão entre as principais carbapenemases encontradas em Enterobacteriaceae disseminadas em todo o mundo. A OXA-370, que difere da OXA-48 por um único aminoácido, foi detectada pela primeira vez em 2013 na cidade de Porto Alegre, e até o momento só há relatos de sua detecção no Brasil. Objetivos: Caracterizar isolados produtores de OXA-370 quanto ao perfil de sensibilidade aos β-lactâmicos, sobretudo carbapenêmicos, e investigar o contexto genético em que o gene blaOXA-370 está inserido. Métodos: Foram avaliados isolados obtidos a partir de um estudo de vigilância para o monitoramento de enterobactérias com sensibilidade reduzida aos carbapenêmicos. A detecção dos genes de carbapenemases (blaIMP, blaKPC, blaGES, blaNDM, blaOXA-48-like e blaVIM) foi realizada por PCR Real Time HRM. Os isolados positivos para blaOXA-48-like foram confirmados por PCR convencional e os produtos foram purificados e sequenciados. A relação clonal dos isolados produtores de OXA-370 foi avaliada pela técnica de macrorrestrição do DNA seguido de PFGE e as concentrações inibitórias mínimas (CIMs) foram analisadas por E-test® e/ou microdiluição em caldo. Os plasmídeos foram extraídos por lise alcalina e inseridos em Escherichia coli TOP10 por eletroporação. Bibliotecas de DNA plasmidial foram preparadas utilizando-se o kit Nextera DNA e a seguir foram sequenciadas no sistema MiSeq. As sequências foram montadas utilizando-se o programa SeqMan NGen e os contigs foram alinhados utilizando-se o SeqMan Pro. A plataforma RAST foi utilizada para anotação automática das sequências e a curadoria manual foi realizada utilizando-se o programa ARTEMIS. As sequências completas dos plasmídeos foram comparadas as disponíveis no GenBank utilizando-se o BLAST. As sequências de nucleotídicas dos plasmídeos foram alinhadas utilizando-se o BioEdit. Resultados: Um total de 4.451 enterobactérias foram avaliadas, provenientes de 28 hospitais do Rio Grande do Sul no período de abril de 2013 a abril de 2015. O gene blaOXA-48-like foi detectado em 74 (2,5%) isolados não sensíveis a pelo menos um dos carbapenêmicos. Quanto à distribuição segundo a gênero e/ou espécie, o gene foi detectado em Enterobacter spp. (44,6% complexo E. cloacae e 2,7% E. aerogenes) e 7 Klebsiella spp. (31,1% K. pneumoniae e 6,7% K. oxytoca), seguido por Escherichia coli, (6,7%), Morganella morganii, (2,7%), Citrobacter freundii (1,3%), Proteus mirabilis (1,3%), Providencia stuartii (1,3 %) e Serratia spp. (1,3%). Estes isolados foram provenientes de cinco hospitais, sendo 67 (90,5%) do hospital onde o gene blaOXA-370 foi detectado pela primeira vez. O sequenciamento de blaOXA-48-like foi realizado em 52 isolados, incluindo E. cloacae, E. aerogenes, K. pneumoniae, K. oxytoca, E. coli e C. freundii; todos apresentando 100% de identidade com blaOXA-370. A PFGE revelou a presença de clones distintos entre K. pneumoniae, E. cloacae, K. oxytoca e E. coli. As taxas de susceptibilidade ao meropenem, imipenem e ertapenem entre os isolados produtores de OXA-370 foram 92,3%, 78,8% e 7,7%, respectivamente; a CIM50/CIM90 foram 0,38/2 mg/L e 1/3 mg/L para meropenem e imipenem, respectivamente. Um total de seis plasmídeos tiveram suas sequências nucleotídicas completas determinadas. Todos eram circulares e o conteúdo de GC variou entre 46,7 e 47,2%. Os plasmídeos sequenciados pertencem ao grupo de incompatibilidade IncX e apresentam tamanho aproximado a 70kbp. Além de blaOXA-370 e genes de mobilização, os plasmídeos albergavam também blaCTX-M-8. A análise das sequências mostrou que blaOXA-370 está localizado em um transpóson composto, contendo quatro genes que codificam transposases, designado Tn6435. Conclusão: Em geral, a análise de susceptibilidade antimicrobiana sugere que a presença de OXA-370 não acarreta impacto significativo no perfil de sensibilidade aos carbapenêmicos meropenem e imipenem nos isolados de enterobactérias avaliados neste estudo. Além disso, foi possível observar que o gene blaOXA-370 está disseminado entre diversas espécies e clones de Enterobacteriaceae, indicando um alto potencial de disseminação. Por meio da análise da sequência de plasmídeos carreadores de blaOXA-370 foi possível identificar um novo elemento genético móvel, designado transpóson Tn6435, o qual está associado a disseminação de OXA-370 em isolados de enterobactérias no Rio Grande do Sul.Background: Carbapenemases are β-lactamases capable of hydrolyzing carbapenems, an important therapeutic option in infections caused by enterobacteria. OXA-48 carbapenemase and its variants are among the major carbapenemases found in Enterobacteriaceae worldwide. OXA-370, which differs from OXA-48 by a single amino acid, was detected for the first time in 2013 in the city of Porto Alegre, and until the moment there are only reports of its detection in Brazil. Objectives: To characterize OXA-370 isolates in relation to the β-lactam susceptibility profile, especially carbapenems, and to investigate the genetic context in which the blaOXA-370 gene is inserted. Methods: Isolates obtained from a surveillance study for the monitoring of enterobacteria with reduced sensitivity to carbapenems were evaluated. Detection of the carbapenemases genes (blaIMP, blaKPC, blaGES, blaNDM, blaOXA-48-like and blaVIM) was performed by Real Time HRM PCR. blaOXA-48-like positive isolates were confirmed by standard PCR and the products were purified and sequenced. The clonality of OXA-370-producing isolates was evaluated by the DNA macrorestriction followed by PFGE and the minimum inhibitory concentrations (MICs) were analyzed by E-test® and / or broth microdilution. Plasmids were extracted by alkaline lysis and inserted into Escherichia coli TOP10 by electroporation. Plasmid DNA libraries were prepared using the Nextera DNA kit and then sequenced in the MiSeq system. Sequences were assembled using the SeqMan NGen program and the contigs were aligned using SeqMan Pro. The RAST platform was used for automatic annotation of sequences and manual curation was performed using the ARTEMIS program. The complete sequences of the plasmids were compared to those available on GenBank using BLAST. The nucleotide sequences of the plasmids were aligned using BioEdit. Results: A total of 4,451 enterobacteria from 28 hospitals in Rio Grande do Sul were evaluated from April 2013 to April 2015. The blaOXA-48-like gene was detected in 74 (2.5%) isolates non-susceptible to at least one of the carbapenems. Regarding the distribution according to genus and / or species, the gene was detected in Enterobacter spp. (44.6% E. cloacae complex and 2.7% E. aerogenes) and Klebsiella spp. (31.1% K. pneumoniae and 6.7% K. oxytoca), followed by Escherichia coli (6.7%), Morganella morganii (2.7%), Citrobacter freundii (1.3%), Proteus mirabilis (1.3%), Providencia stuartii (1.3%) and Serratia spp. (1.3%)

SIXTEEN YEARS OF DERMATOMYCOSIS CAUSED BY Candida spp. IN THE METROPOLITAN AREA OF PORTO ALEGRE, SOUTHERN BRAZIL

The yeasts of the genus Candida infect skin, nails, and mucous membranes of the gastrointestinal and the genitourinary tract. The aim of this study was to determine the prevalence of dermatomycoses caused by Candida spp., and their etiological aspects in the metropolitan area of Porto Alegre, Brazil. A retrospective study with data obtained from tertiary hospital patients, from 1996 to 2011, was performed. The analyzed parameters were date, age, gender, ethnicity, anatomical region of lesions, and the direct examination results. For all the statistical analyses, a = 0.05 was considered. Among positive results in the direct mycological examination, 12.5% of the total of 4,815 cases were positive for Candida spp. The angular coefficient (B) was -0.7%/ year, showing a decrease over the years. The genus Candida was more prevalent in women (15.9% of women versus 5.84% of men), and in addition, women were older than men (54 versus 47 years old, respectively). There was no difference between ethnic groups. The nails were more affected than the skin, with 80.37% of the infections in the nails (72.9% in fingernails and 7.47% in toenails). Our study corroborates the literature regarding the preference for gender, age, and place of injury. Moreover, we found a decrease in infection over the studied period

Performance of polymyxin B Etest in a setting of high prevalence of KPC-producing Klebsiella pneumoniae

Objectives: Polymyxin resistance has been increasing in many regions, and appropriate determination ofpolymyxin susceptibility is now a major challenge worldwide. Many clinical laboratories rely on gradientdiffusion methods to assess polymyxin susceptibility, although broth microdilution (BMD) is the onlymethod currently recommended by the CLSI and EUCAST. The aim of this study was to assess theperformance of the polymyxin B (PMB) Etest in a setting with a high prevalence of KPC-producingKlebsiella pneumoniae (KPC-KP).Methods: A commercial Etest susceptibility testing method was evaluated and compared with thereference BMD method, considering isolates with a minimum inhibitory concentration (MIC) 2 mg/L forPMB as susceptible to this drug. A total of 310 clinical KPC-KP isolates were evaluated.Results: Susceptibility was significantly higher by Etest compared with BMD (82.6% vs. 75.8%). The MIC50,MIC90and modal MICs for PMB were 0.25, 32 and 0.25 mg/L (27.1%) by BMD and 0.5, 16 and 0.5 mg/L(49.7%) by Etest, respectively. Although categorical agreement was 90.0%, there was poor essentialagreement (50.6%). A high rate (34.7%) of very major errors (VMEs) and a relatively low rate (2.1%) ofmajor errors were found.Conclusion: The considerable number of resistant isolates in this study allowed an accurate estimation ofVME rates and, consequently, a more comprehensive assessment of susceptibility testing for polymyxins.Etest did not meet fully the acceptance criteria for US FDA requirements. These data do not support theuse of this commercial method for determining PMB MICs in carbapenem-resistant Enterobacterales populations

Caracterização fenotípica e genotípica de isolados clínicos de trichophyton sp. do estado do Rio Grande do Sul

As dermatofitoses apresentam alta prevalência na população em geral, sendo Trichophyton interdigitale (Trichophyton mentagrophytes) a segunda espécie mais frequentemente relatada como causadora de infecção em humanos. O objetivo do trabalho foi determinar a identidade genética, o perfil enzimático e de assimilação de açúcares e a suscetibilidade a antifúngicos de isolados clínicos do gênero Trichopyton. Os isolados foram avaliados por de ensaios enzimáticos, assimilação de fontes de carbono e da atividade antifúngica in vitro. A caracterização genotípica foi realizada através da amplificação e do sequenciamento da região do gene que codifica a região interna do gene DNA ribossomal dos isolados testados. No estudo, todos os isolados secretaram DNase, mas nenhum deles foi capaz de secretar fosfolipase e proteinase. Por outro lado, urease e lipase foram produzidas pela maioria dos isolados testados. Entre os antifúngicos avaliados, a terbinafina e o itraconazol demonstraram melhores resultados de sensibilidade, enquanto o fluconazol apresentou baixa atividade para as amostras. A anfotericina B, apesar de menos eficaz que a terbinafina e o itraconazol, também demonstrou resultados satisfatórios. A combinação entre os antifúngicos tioconazol e terbinafina demonstrou ter atividade antagônica em todos os isolados. Todos os dermatófitos testados assimilaram inulina, sorbitol, manose, glicose e trealose. Os demais carboidratos tiveram assimilação variável entre os isolados. Genotipicamente, todos os isolados do estudo foram identificados como pertencentes à espécie T. interdigitale. Os ensaios enzimáticos e de assimilação de carboidratos apresentaram resultados variáveis entre os isolados testados, inferindo variação intraespecífica entre as amostras de T. interdigitale. O perfil de sensibilidade aos antimicóticos testados seguiu o padrão de resultados observado em estudos anteriores. A identificação genotípica através da amplificação e do sequenciamento da região ITS permitiu garantir a identidade entre os isolados testados.The prevalence of dermatophytosis among population is high, and Trichophyton interdigitale (Trichophyton mentagrophytes) is the second most frequently reported species to cause infection in humans. This study objective was to evaluate the genetic identity, the enzymatic profile and the assimilation of carbon sources, as well as the antifungal susceptibility of clinical isolates of Trichophyton sp. The isolates were analyzed phenotypically by enzymatic assays, assimilation of carbon sources and antifungal activity in vitro. The genotypic characterization was performed by amplification and sequencing the gene region encoding the internal region of the DNA ribosomal gene of the isolates tested. In our study, all isolates secreted DNase, while none of them was capable of secreting phospholipase, keratinase and proteinase. On the other hand, lipase and urease were secreted by most of the isolates. Of the antifungal agents tested, the best results in terms of sensitivity were found with terbinafine and itraconazole, while the antifungal activity of fluconazole was found to be weak. Amphotericin B, although less effective than terbinafine and itraconazole, also yielded satisfactory results. Evaluation of the drug combination of tioconazole and terbinafine revealed an antagonistic effect for all tested isolates. All isolates assimilated inulin, sorbitol, glucose, trehalose and mannose. Arabinose, dulcitol, galactose and xylose were assimilated by some of the isolates, whereas the most isolates assimilated cellobiose, dulcitol, erytritol and mannitol. Genotypically, all isolates in the study were identified as belonging to Trichophyton interdigitale species. In general, enzyme assays and assimilation of carbohydrates showed variable results among the isolates tested, inferring intraspecific variation between Trichophyton interdigitale samples. The sensitivity profile of the antifungal agents tested in this study was similar to results obtained in previous studies. The genotypic identification, by amplification and sequencing of the ITS region, has ensured the identity of the isolates tested

Caracterização molecular de isolados da família Enterobacteriaceae produtores da β-Lactamase OXA-370

Base teórica: As carbapenemases são β-lactamases capazes de hidrolisar os carbapenêmicos, importante opção terapêutica nas infecções causadas por enterobactérias. A carbapenemase OXA-48 e suas variantes estão entre as principais carbapenemases encontradas em Enterobacteriaceae disseminadas em todo o mundo. A OXA-370, que difere da OXA-48 por um único aminoácido, foi detectada pela primeira vez em 2013 na cidade de Porto Alegre, e até o momento só há relatos de sua detecção no Brasil. Objetivos: Caracterizar isolados produtores de OXA-370 quanto ao perfil de sensibilidade aos β-lactâmicos, sobretudo carbapenêmicos, e investigar o contexto genético em que o gene blaOXA-370 está inserido. Métodos: Foram avaliados isolados obtidos a partir de um estudo de vigilância para o monitoramento de enterobactérias com sensibilidade reduzida aos carbapenêmicos. A detecção dos genes de carbapenemases (blaIMP, blaKPC, blaGES, blaNDM, blaOXA-48-like e blaVIM) foi realizada por PCR Real Time HRM. Os isolados positivos para blaOXA-48-like foram confirmados por PCR convencional e os produtos foram purificados e sequenciados. A relação clonal dos isolados produtores de OXA-370 foi avaliada pela técnica de macrorrestrição do DNA seguido de PFGE e as concentrações inibitórias mínimas (CIMs) foram analisadas por E-test® e/ou microdiluição em caldo. Os plasmídeos foram extraídos por lise alcalina e inseridos em Escherichia coli TOP10 por eletroporação. Bibliotecas de DNA plasmidial foram preparadas utilizando-se o kit Nextera DNA e a seguir foram sequenciadas no sistema MiSeq. As sequências foram montadas utilizando-se o programa SeqMan NGen e os contigs foram alinhados utilizando-se o SeqMan Pro. A plataforma RAST foi utilizada para anotação automática das sequências e a curadoria manual foi realizada utilizando-se o programa ARTEMIS. As sequências completas dos plasmídeos foram comparadas as disponíveis no GenBank utilizando-se o BLAST. As sequências de nucleotídicas dos plasmídeos foram alinhadas utilizando-se o BioEdit. Resultados: Um total de 4.451 enterobactérias foram avaliadas, provenientes de 28 hospitais do Rio Grande do Sul no período de abril de 2013 a abril de 2015. O gene blaOXA-48-like foi detectado em 74 (2,5%) isolados não sensíveis a pelo menos um dos carbapenêmicos. Quanto à distribuição segundo a gênero e/ou espécie, o gene foi detectado em Enterobacter spp. (44,6% complexo E. cloacae e 2,7% E. aerogenes) e 7 Klebsiella spp. (31,1% K. pneumoniae e 6,7% K. oxytoca), seguido por Escherichia coli, (6,7%), Morganella morganii, (2,7%), Citrobacter freundii (1,3%), Proteus mirabilis (1,3%), Providencia stuartii (1,3 %) e Serratia spp. (1,3%). Estes isolados foram provenientes de cinco hospitais, sendo 67 (90,5%) do hospital onde o gene blaOXA-370 foi detectado pela primeira vez. O sequenciamento de blaOXA-48-like foi realizado em 52 isolados, incluindo E. cloacae, E. aerogenes, K. pneumoniae, K. oxytoca, E. coli e C. freundii; todos apresentando 100% de identidade com blaOXA-370. A PFGE revelou a presença de clones distintos entre K. pneumoniae, E. cloacae, K. oxytoca e E. coli. As taxas de susceptibilidade ao meropenem, imipenem e ertapenem entre os isolados produtores de OXA-370 foram 92,3%, 78,8% e 7,7%, respectivamente; a CIM50/CIM90 foram 0,38/2 mg/L e 1/3 mg/L para meropenem e imipenem, respectivamente. Um total de seis plasmídeos tiveram suas sequências nucleotídicas completas determinadas. Todos eram circulares e o conteúdo de GC variou entre 46,7 e 47,2%. Os plasmídeos sequenciados pertencem ao grupo de incompatibilidade IncX e apresentam tamanho aproximado a 70kbp. Além de blaOXA-370 e genes de mobilização, os plasmídeos albergavam também blaCTX-M-8. A análise das sequências mostrou que blaOXA-370 está localizado em um transpóson composto, contendo quatro genes que codificam transposases, designado Tn6435. Conclusão: Em geral, a análise de susceptibilidade antimicrobiana sugere que a presença de OXA-370 não acarreta impacto significativo no perfil de sensibilidade aos carbapenêmicos meropenem e imipenem nos isolados de enterobactérias avaliados neste estudo. Além disso, foi possível observar que o gene blaOXA-370 está disseminado entre diversas espécies e clones de Enterobacteriaceae, indicando um alto potencial de disseminação. Por meio da análise da sequência de plasmídeos carreadores de blaOXA-370 foi possível identificar um novo elemento genético móvel, designado transpóson Tn6435, o qual está associado a disseminação de OXA-370 em isolados de enterobactérias no Rio Grande do Sul.Background: Carbapenemases are β-lactamases capable of hydrolyzing carbapenems, an important therapeutic option in infections caused by enterobacteria. OXA-48 carbapenemase and its variants are among the major carbapenemases found in Enterobacteriaceae worldwide. OXA-370, which differs from OXA-48 by a single amino acid, was detected for the first time in 2013 in the city of Porto Alegre, and until the moment there are only reports of its detection in Brazil. Objectives: To characterize OXA-370 isolates in relation to the β-lactam susceptibility profile, especially carbapenems, and to investigate the genetic context in which the blaOXA-370 gene is inserted. Methods: Isolates obtained from a surveillance study for the monitoring of enterobacteria with reduced sensitivity to carbapenems were evaluated. Detection of the carbapenemases genes (blaIMP, blaKPC, blaGES, blaNDM, blaOXA-48-like and blaVIM) was performed by Real Time HRM PCR. blaOXA-48-like positive isolates were confirmed by standard PCR and the products were purified and sequenced. The clonality of OXA-370-producing isolates was evaluated by the DNA macrorestriction followed by PFGE and the minimum inhibitory concentrations (MICs) were analyzed by E-test® and / or broth microdilution. Plasmids were extracted by alkaline lysis and inserted into Escherichia coli TOP10 by electroporation. Plasmid DNA libraries were prepared using the Nextera DNA kit and then sequenced in the MiSeq system. Sequences were assembled using the SeqMan NGen program and the contigs were aligned using SeqMan Pro. The RAST platform was used for automatic annotation of sequences and manual curation was performed using the ARTEMIS program. The complete sequences of the plasmids were compared to those available on GenBank using BLAST. The nucleotide sequences of the plasmids were aligned using BioEdit. Results: A total of 4,451 enterobacteria from 28 hospitals in Rio Grande do Sul were evaluated from April 2013 to April 2015. The blaOXA-48-like gene was detected in 74 (2.5%) isolates non-susceptible to at least one of the carbapenems. Regarding the distribution according to genus and / or species, the gene was detected in Enterobacter spp. (44.6% E. cloacae complex and 2.7% E. aerogenes) and Klebsiella spp. (31.1% K. pneumoniae and 6.7% K. oxytoca), followed by Escherichia coli (6.7%), Morganella morganii (2.7%), Citrobacter freundii (1.3%), Proteus mirabilis (1.3%), Providencia stuartii (1.3%) and Serratia spp. (1.3%)

Caracterização fenotípica e genotípica de isolados clínicos de trichophyton sp. do estado do Rio Grande do Sul

As dermatofitoses apresentam alta prevalência na população em geral, sendo Trichophyton interdigitale (Trichophyton mentagrophytes) a segunda espécie mais frequentemente relatada como causadora de infecção em humanos. O objetivo do trabalho foi determinar a identidade genética, o perfil enzimático e de assimilação de açúcares e a suscetibilidade a antifúngicos de isolados clínicos do gênero Trichopyton. Os isolados foram avaliados por de ensaios enzimáticos, assimilação de fontes de carbono e da atividade antifúngica in vitro. A caracterização genotípica foi realizada através da amplificação e do sequenciamento da região do gene que codifica a região interna do gene DNA ribossomal dos isolados testados. No estudo, todos os isolados secretaram DNase, mas nenhum deles foi capaz de secretar fosfolipase e proteinase. Por outro lado, urease e lipase foram produzidas pela maioria dos isolados testados. Entre os antifúngicos avaliados, a terbinafina e o itraconazol demonstraram melhores resultados de sensibilidade, enquanto o fluconazol apresentou baixa atividade para as amostras. A anfotericina B, apesar de menos eficaz que a terbinafina e o itraconazol, também demonstrou resultados satisfatórios. A combinação entre os antifúngicos tioconazol e terbinafina demonstrou ter atividade antagônica em todos os isolados. Todos os dermatófitos testados assimilaram inulina, sorbitol, manose, glicose e trealose. Os demais carboidratos tiveram assimilação variável entre os isolados. Genotipicamente, todos os isolados do estudo foram identificados como pertencentes à espécie T. interdigitale. Os ensaios enzimáticos e de assimilação de carboidratos apresentaram resultados variáveis entre os isolados testados, inferindo variação intraespecífica entre as amostras de T. interdigitale. O perfil de sensibilidade aos antimicóticos testados seguiu o padrão de resultados observado em estudos anteriores. A identificação genotípica através da amplificação e do sequenciamento da região ITS permitiu garantir a identidade entre os isolados testados.The prevalence of dermatophytosis among population is high, and Trichophyton interdigitale (Trichophyton mentagrophytes) is the second most frequently reported species to cause infection in humans. This study objective was to evaluate the genetic identity, the enzymatic profile and the assimilation of carbon sources, as well as the antifungal susceptibility of clinical isolates of Trichophyton sp. The isolates were analyzed phenotypically by enzymatic assays, assimilation of carbon sources and antifungal activity in vitro. The genotypic characterization was performed by amplification and sequencing the gene region encoding the internal region of the DNA ribosomal gene of the isolates tested. In our study, all isolates secreted DNase, while none of them was capable of secreting phospholipase, keratinase and proteinase. On the other hand, lipase and urease were secreted by most of the isolates. Of the antifungal agents tested, the best results in terms of sensitivity were found with terbinafine and itraconazole, while the antifungal activity of fluconazole was found to be weak. Amphotericin B, although less effective than terbinafine and itraconazole, also yielded satisfactory results. Evaluation of the drug combination of tioconazole and terbinafine revealed an antagonistic effect for all tested isolates. All isolates assimilated inulin, sorbitol, glucose, trehalose and mannose. Arabinose, dulcitol, galactose and xylose were assimilated by some of the isolates, whereas the most isolates assimilated cellobiose, dulcitol, erytritol and mannitol. Genotypically, all isolates in the study were identified as belonging to Trichophyton interdigitale species. In general, enzyme assays and assimilation of carbohydrates showed variable results among the isolates tested, inferring intraspecific variation between Trichophyton interdigitale samples. The sensitivity profile of the antifungal agents tested in this study was similar to results obtained in previous studies. The genotypic identification, by amplification and sequencing of the ITS region, has ensured the identity of the isolates tested