PRODUKSI FLAVAN-3-OL MELALUI KALUS CAMELLIA sinensis L : UNTUK PENGHAMBATAN DIFERENSIASI SEL ADIPOSA

Bioaktif (polifenol derivat flavan) didapat dari tanaman teh. Kendala penyediaan senyawa bioaktif sangat tergantung pada ketersediaan tanaman dalam semusim dan kadar senyawa yang relatif rendah. Maka produksi metabolit sekunder flavan-3-ol perlu dikembangkan dengan teknik kultur in vitro. Teknik ini prosesnya kontinyu, cepat, memungkinkan memasukkan precursor yang lebih efektif, ditemukan kembali dari cell line mutan yang mengarah pada produksi senyawa baru yang sebelumnya tidak terdapat pada tanaman utuh. Tujuan penelitian memperoleh metode/cara produksi bioaktif flavan-3-ol secara in vitro, berskala besar berpotensi mencegah penyakit obesitas dan degeneratif. Untuk mencapai tujuan tersebut, berbagai metode dilakukan. Metode meliputi: (1) induksi kalus secara in vitro dengan menanam kotiledon dari kecambah pada media dengan berbagai zat pengatur tumbuh, (2) isolasi dan identifikasi flavan-3-ol secara kualitatif dan kuantitatif. (3) Induksi akumulasi flavan-3-ol kultur kalus menggunakan elisitor. Hasil dari penelitian ini berupa kalus yang berisi flavan-3-ol yang akan dipakai untuk mempelajari diferensiasi sel adipose berdasar teknologi in vitro dengan dugaan adanya flavan-3-ol diuji sebagai anti obesitas

Pengaruh Leptin terhadap Kadar Interleukin 6 Serum Tikus yang Diberi Pakan Tinggi Lemak

Pada keadaan obesitas, meningkatnya jumlah sel lemak merupakan salah satu penyebab meningkatnya sitokin proinflamasi seperti IL-6. Obesitas dapat dimulai dengan terjadinya resistensi leptin. Penurunan resistensi perifer leptin akan mengembalikan fungsi leptin dalam memecah jaringan lemak sehingga kadar IL-6 dalam serum akan turun. Dalam penelitian ini leptin eksogen diberikan untuk mengatasi resistensi perifer leptin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui apakah pemberian leptin eksogen dalam jangka pendek dapat mengatasi resistensi perifer leptin. Penelitian eksperimental dengan post test only control group design. Dua puluh lima tikus jantan dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kelompok dengan pakan normal, kelompok dengan pakan tinggi lemak, kelompok pakan tinggi lemak dan pemberian leptin dosis 50 ng/ml; 100 ng/ml; dan 200 ng/ml. Tiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Setelah diberi pakan tinggi lemak enam puluh hari, tikus diberi injeksi leptin intravena sekali sehari selama 3 hari. Pada hari ke 3 setelah pemberian leptin, tikus dibedah dan diambil darahnya dari aorta. Darah disentrifus, untuk memisahkan serum dengan hematokrit, kemudian diukur kadar IL-6 dalam serum. Tikus yang diberi pakan tinggi lemak kadar IL-6 dalam serum lebih tinggi dibandingkan dengan kelompok yang diberi pakan normal. Tikus yang diberi pakan tinggi lemak dan pemberian leptin mempunyai kadar IL-6 dalam serum yang lebih rendah. Disimpulkan bahwa pemberian leptin eksogen dapat mengatasi resistensi leptin sehingga kadar IL-6 dalam serum menurun.In obesity, the increasing amount of fat cells is one among many factors that causes raise in proinflammatory cytokine such as IL-6. Obesity may begin with leptin resistance. Decline in leptin pe­ripheral resistance will return leptin function in breaking down fat tissues hence the serum concentration of IL-6 will decrease. In this study, exogenous leptin was given to overcome leptin peripheral resistance. This study aims to investigate whether short course of exogenous leptin administration can overcome leptin peripheral resistance. Experimental research with posttest only control group design. Twenty five male mouses were divided into 5 groups which are: group with normal diet, high fat diet, high fat diet with 50 ng/ml leptin administration, high fat diet with 100 ng/ml leptin administration, high fat diet with 200 ng/ ml leptin administration. Every group consists of 5 mouses. After given high fat diet for 60 days, mouses were given intravenous leptin injection once daily for 3 days. On the 3rd day after leptin administration, mice were resected and blood was taken from the aorta. The blood was centrifuged to separate the serum from the hematocrit, and then concentration of IL-6 was measured from the serum. Mouses given high fat diet had higher serum IL-6 concentration compared with control group. Mouses with high fat diet with leptin administration had lower serum IL-6 concentration. It can be concluded that exogenous leptin can overcome leptin resistance, thus serum IL-6 concentration decreases

The Analysis of Tempe Consumption Effects to Obesity in Adolescents through DNA Methylation

Obesity is a health problem worldwide, even WHO states that obesity is already a global epidemic, so obesity is a health problem that must be addressed immediately. Obesity is a nutritional problem with an increasing prevalence and sufferers not only individuals aged but also school-age children and children aged under five. This study has the objectives of 1) Knowing the level of consumption of tempe in adolescents, 2) Knowing the influence of tempe consumption on obesity in adolescents through DNA methylation.This obesity study was taken from obese population in the 2nd grade of Kediri Junior High School, while the normal weight sample was equal to the number of Obesity samples and taken from the same grade students by Simple Random Sampling. The results of the laboratory analysis of this study used primary data to amplify the leptin promoter gene region. Based on the analysis results, there is no change in the methylation area. There are samples that have mutations or even large amounts of nucleotide changes in areas that are not predictive sites of mutilation. This study has the following conclusions: 1) The samples that have mutations or even large amounts of nucleotide changes in areas that are not methylated prediction sites, 2) Changes in this promoter area are likely to affect gene expression, 3) In the sample Obesity 100% mutation, while the sample Non Obesitas 50% have mutations, 4) After re-checking, these mutations or nucleotide changes in some samples occur in areas that are transcription factors associated with leptin production and obesity conditions, 5) The teens of Junior High School in Kediri is not found methylation in genes related to leptin production, but mutation is found, 6) In children, obesity has 2x mutation is greater than non obesity child. Keywords: Obesity, DNA methylation, mutation, Simple Random Sampling

PENGEMBANGAN PRODUKSI FLAVAN-3-OL MELALUI KULTUR SUSPENSI SEL CAMELLIA sinensis L : UNTUK PENGHAMBATAN DIFERENSIASI SEL ADIPOSA

Bioaktif metabolit sekunder Flavan-3-Ol terdapat pada tanaman teh (Camellia sinensis L) dapat digunakan sebagai bahan anti obesitas. Kendala memperoleh Flavan-3-Ol dari tanaman teh diantaranya: sangat tergantung musim, memerlukan lahan yang luas, memerlukan pemeliharaan yang intensif, dan tingkat produksinya relatif rendah. Oleh karena itu produksi Flavan-3-Ol perlu dikembangkan dengan teknik kultur sel suspensi sel. Teknik ini dapat mengatasi kendala-kendala tersebut di atas. Tujuan penelitian secara umum adalah memperoleh teknik produksi Flavan-3-Ol secara in vitro melalui teknik kultur sel suspensi sel, yang efektif dan efisien (skala besar dengan waktu yang cepat). Beberapa sifat Flavan-3-Ol diantaranya: berikatan dengan matrik biologi, berikatan dengan logam berat, mengkatalis transportasi elektron (Kitamura, 2007) dan menangkap radikal bebas. Keempat sifat tersebut membuat Flavan-3-Ol bersifat bioaktif. Metode penelitian teknik kultur suspensi sel ini bersifat eksploratif menggunakan rancangan deskriptif observasional yang dibagi menjadi 3 tahap. Tahap pertama eksploratif untuk optimasi kondisi medium dengan variasi zat pengatur tumbuh (ZPT) untuk memperoleh kalus yang remah dari pucuk daun camellia sinensis L, kemudian induksi kultur suspensi sel dari hasil kultur kalus. Tahap kedua eksplorasi metode produksi induksi Flavan-3-Ol pada kultur suspensi sel dengan menggunakan elisitor Cu2+ , Mn, CO, asam sitrat dan agrobakteri. Tahap ketiga merupakan tahap pengidentifikasian dan analisis menggunakan kromatografi lapis tipis (KLT) maupun High-Performance Liquid Chromatography (HPLC). Tahap ke empat aplikasi kultur suspensi sel yang diujikan pada sel adipose. Pentingnya penelitian, mengembangkan metode produksi flavan-3-ol melalui kultur suspensi sel, adalah adanya elisitor akan menyebabkan susunan kimia DNA mengalami perubahan sehingga didapat senyawa bioktif yang dicari dan diduga akan diperoleh juga senyawa baru. Hasil dari penelitian ini berupa biomasa kultur suspensi sel yang berisi flavan-3-ol yang akan dipakai untuk mempelajari diferensiasi sel adipose sebagai kandidat anti obesita

Hubungan Faktor Kecepatan Door-To-ECG terhadap Keterlambatan Waktu Terapi Fibrinolitik pada Pasien ST-Elevation Myocardial Infarction (STEMI) di RSUD Prof.R.D. Kandou Manado

Reperfusion therapy is the main strategy in the treatment of patients with STEMI and when the reperfusion time faster, closely linked to the decrease rate of mortality. One of the deciding factors in intrahospital care system is the the speed of door-to-ECG are measured when the patient arrives at the emergency unit until being recorded ECG examination and the results can be interpreted by health personnel. This study aimed to analyze the correlation between the speed of door-to-ECG with the delay time of fibrinolytic therapy at the Emergency Department of Prof. R.D. Kandou general hospital in Manado.The method of this study was Prospective Cohort with analytic observational design. Sampling technique was consecutive sampling with 22 participant on June-July 2015 on emergency department of Prof. R.D. Kandou general hospital in Manado. Observation sheet was used as instrument. Bivariate analysis showed that there was a significant correlation between the speed of door-to-ECG with fibrinolitic therapy delay ( p value = 0.028) With rate of speed door-to-ECG is 28,59 minutes. The longer time door-to-ECG cause the longer fibrinolytic therapy that cause increasing mortality rate of STEMI patient

Optimizing Collagenase, Fetal Bovine Serum, and Insulin to Isolate, Proliferate, and Differentiate Rat Preadipocyte in vitro

BackgroundThe aim of this study is to develop a method for optimal in vitro proliferation and differentiation of rat adipocyte. MethodsPreadipocyte were isolated from omentum of Rattus norvegicus Wistar using Collagenase type I dan II (Sigma). Cells were cultured in M199 culture containing either 0%, 8% or 10% Fetal Bovine Serum (FBS). Insulin were added into the media once the cells attached to the culture plate Proliferating and differentiated cells were counted and analysed by using Oil Red O dan Hematoxylen (HE) staining. Results This study demonstrated that adipocyte could be isolated using Collagenase type I but not type II. The addition of 10% FBSsignificantly increased the number of preadipocyte and differentiation of adipocyte more than those of 8% FBS and without FBS. The timing of FBS addition was best performed on day 8 using 10% FBS. Specific adipocyte staining using Oil Red O revealed thatthere were core lipids in mature adipocyte. ConclusionsCollagenase tipe I could be used to isolate preadipocyte cells. Supplementation of culture media with 8-10% FBS could enhance the in vitro proliferation of preadipocyte. Standard media M199 containing 10% FBS and insulin may provide an environment to differentiate preadipocyte specifically into adipocyte in vitro

Perancangan Dan Pembuatan Aktuator CO2 Dan Suhu Pada Sistem Live Cell Chamber

Live Cell Chamber merupakan terobosan penting dalam bidang medical engineering. Live Cell Chamber tersusun atas 4 sensor, 2 mikrokontroler dan 4 aktuator. Penggunaan sensor berfungsi untuk membaca keadaan lingkungan chamber, mikrokontroler berfungsi mengolah data dari sensor dan aktuator berfungsi untuk pengatur kondisi chamber berdasarkan kondisi yang dibaca oleh sensor. Solenoid valve merupakan aktuator yang berfungsi mengatur kadar CO2 dalam chamber dengan metode on/off pada driver nya. Peltier merupakan aktuator yang berfungsi menjaga suhu dalam chamber dengan metode on/off pada driver nya.Hasil pengujian menunjukkan bahwa driver on/off kedua aktuator memiliki respon waktu yang singkat ketika mendapat masukan dari mikrokontroler sebesar ± 1 ms. Respon waktu aktuator suhu sebesar ± 38 menit untuk mencapai set poin suhu yaitu 36 0C dengan suhu awal chamber 26 0C. Respon waktu aktuator CO2 sebesar 23 detik untuk mencapai kadar CO2 sebesar 4,47%. Dalam uji kepresisian aktuator suhu selama 24 jam didapatkan rata-rata simpangan terhadap setpoint suhu sebesar 0,4838888890C dan simpangan terbesar yaitu 320C dan uji kepresisian aktuator CO2 rata-rata simpangan terhadap setpoint CO2 sebesar 0.149027778% dan simpangan terbesar yaitu 3,89%