População de Bactérias e Fungos no Solo Contaminado com Cobre nas Minas do Camaquã, RS, Brasil

The microorganisms are sensitive to the presence of copper inhigh concentration in the environment, being considered indicators of soilpollution. The aim of this study was to evaluate the effects of copper in the soil bacteria and fungi population in the contaminated copper soil, inCamaquã Minas, Caçapava do Sul, Rio Grande do Sul, Brazil. The soilsamples were collected in reject, adjacent, eucalyptus cultivation, pinus withtwo and ten years old area. The counting of bacteria and fungi soilpopulation was carried out in culture medium. The highest average for thetotal bacteria population was found in the adjacent and eucalyptuscultivation area. The soil fungi population was in the adjacent area. Thecopper concentration of 203 mg dm-3 inhibits the bacteria and the fungisoil population.Os microrganismos são sensíveis à presença de determinadas concentraçõesde cobre no solo, sendo por isso, também, considerados indicadoresde qualidade ambiental. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeitodo cobre sobre a população de fungos e bactérias do solo e identificar osgêneros de fungos encontrados em área com contaminação de cobre nasMinas do Camaquã, Caçapava do Sul, RS, Brasil. As amostras de solo foramcoletadas em área de rejeito, margem, cultivo de eucalipto, pinus com2 anos e com 10 anos de cultivo. A contagem da população de fungos ebactérias do solo foi realizada pelo método da diluição do solo em soluçãosalina e inoculação em meio de cultura. As maiores médias para a populaçãode bactérias totais foram encontradas nas áreas de margem e de cultivocom eucalipto. Para a população de fungos do solo a maior ocorrência foiem área de margem. A quantidade de 203 mg dm-3 de cobre reduz a populaçãode bactérias e fungos do solo

CARACTERIZAÇÃO E PATOGENICIDADE DE ISOLADOS DE Fusarium spp. CAUSADORES DE PODRIDÃO-DE-RAÍZES DA ERVA-MATE

Uma das principais doenças da erva-mate (Ilex paraguariensis A. St.-Hil.), em viveiro e, principalmente, a campo, é a podridão-de-raízes, causada por Fusarium spp. O controle da doença é dependente da diagnose correta de seu agente etiológico e as características moleculares e morfológicas permitem diagnosticar o patógeno. Assim, o objetivo deste trabalho foi determinar as características morfológicas e moleculares de seis isolados de Fusarium spp. oriundos de plantios de erva-mate doentes. Para isso, colônias puras cultivadas em meio BDA e FCA foram analisadas quanto à sua forma e estrutura, em microscópio óptico de luz e em microscópio binocular estereoscópico. A extração de DNA de cada isolado foi realizada a partir de micélio produzido em meio líquido BD pelo método CTAB. As amostras de DNA genômico foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) com os oligonucleotídeos iniciadores ITS1 e ITS4, e o produto gerado foi sequenciado. Entre os isolados de Fusarium analisados, encontraram-se duas espécies: F. solani e F. oxysporum, todas patogênicos e com baixa variabilidade genética dentro da espécie.One of the main diseases of erva-mate (Ilex paraguariensis A. St.-Hil.), in nursery and mainly in plantations, is the root-rot, caused by Fusarium sp. The disease control depends on correct diagnosis of causal agent and molecular and morphological characteristics allow diagnosing the pathogen. This work aims to determine morphological and molecular characteristics of six Fusarium spp. isolates from diseased erva-mate plantations. In order to that, pure colonies grown on PDA and FCA environment were analyzed in relation to form and structure, under optical and stereoscopic microscope. The DNA extraction of each isolated was performed from mycelium produced on PD liquid medium by CTAB method. The samples of DNA genomic were submitted to Polymerase Chain Reaction with the universal primers ITS1 and ITS4 and the final product was sequenced. Among the Fusarium spp. isolates analyzed two species were found: F. solani and F. oxysporum, all pathogenic and with low genetic variability within species

Performance of Peltophorum dubium (Spreng.) Taub., Parapiptadenia rigida (Benth.) Brenan and Enterolobium contortisiliquum (Vell.) Morong cultivated in copper contaminated soil

Solos contaminados por cobre podem interferir no desenvolvimento fisiol\uf3gico e no estabelecimento de plantas. Uma op\ue7\ue3o para revegeta\ue7\ue3o desses solos \ue9 a utiliza\ue7\ue3o de esp\ue9cies florestais nativas tolerantes ao cobre. Este trabalho teve como objetivo avaliar a toler\ue2ncia de tr\ueas esp\ue9cies florestais nativas ao excesso de cobre no solo. As esp\ue9cies utilizadas foram: angico \u2013 Parapiptadenia rigida , canaf\uedstula \u2013 Peltophorum dubium e timba\ufava \u2013 Enterolobium contortisiliquum . O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, num esquema 3 x 5, sendo tr\ueas esp\ue9cies florestais e cinco doses de cobre (0, 64, 128, 192 e 256 mg kg-1 de solo), com seis repeti\ue7\uf5es. Determinou-se a altura de planta, massa seca da parte a\ue9rea, comprimento e \ue1rea superficial espec\uedfica radicular, teor de cobre na parte a\ue9rea e na raiz. A timba\ufava e a canaf\uedstula apresentam tend\ueancia de armazenamento do cobre nas ra\uedzes e baixa transloca\ue7\ue3o para a parte a\ue9rea. A massa seca da parte a\ue9rea da timba\ufava e canaf\uedstula \ue9 incrementada com pequenas doses de cobre, enquanto que a massa seca da parte a\ue9rea do angico n\ue3o \ue9 afetada pelas doses testadas. A timba\ufava e o angico demonstram maior capacidade de toler\ue2ncia \ue0 contamina\ue7\ue3o de cobre no solo que a canaf\uedstula.Soils contaminated by copper may interfere with the physiological development and establishment of plants. An alternative for the revegetation of these soils is the use of native species tolerant to copper. This study aimed to evaluate the tolerance of three native forest species to excess copper in the soil. The species used were: angico - Parapiptadenia rigida , canafistula - Peltophorum dubium and timbauva - Enterolobium contortisiliquum . The experiment was completely randomized in a 3 x 5 schedule, with three tree species and five doses of copper (0, 64, 128, 192 and 256 mg kg-1 soil) with six replicates. Plant height, shoot dry weight, length and specific root surface area and copper content in shoots and roots were determined. Canafistula and timbauva species showed storage of copper in roots and low translocation to the shoot. The shoot dry weight of timbauva and canafistula increased with small doses of copper while the shoot dry mass of angico was not affected by the doses tested. The timbauva and angico showed greater capacity for tolerance to copper contamination in the soil than did canafistula

Ectomicorrização em Quatro Espécies Florestais Nativas do Rio Grande do Sul e sua Eficiência em Solo Contaminado por Cobre

Embora os fungos ectomicorrízicos possam auxiliar o estabelecimento de plantas, pouca ênfase tem se dado aos estudos relacionados à formação da simbiose micorrízica em espécies florestais nativas do Estado do Rio Grande do Sul e sua aplicação a solo contaminado por cobre. O trabalho objetivou avaliar a capacidade de formação de ectomicorrizas em plântulas de angico-vermelho, canafístula, grápia e timbaúva inoculadas in vitro e determinar a eficiência micorrízica em solo contaminado por cobre de uma das espécies que formou micorriza. Primeiramente foi estabelecida a inoculação in vitro do fungo Pisolitus microcarpus UFSC-Pt116 em plântulas das espécies arbóreas citadas, cultivadas em meio MNM. Após 35 dias avaliou-se a associação ectomicorrízica, comprimento radicular, altura de plântula e a massa fresca radicular. Posteriormente, determinou-se a eficiência micorrízica de mudas de canafístula cultivadas durante 180 dias em solo contaminado por cobre. Os resultados evidenciam colonização ectomicorrízica nas plântulas de angico-vermelho, canafístula e timbaúva. As plântulas inoculadas apresentaram redução no comprimento da raiz principal, altura e massa fresca radicular. A eficiência micorrízica para as mudas de canafístula foi de até 46% em solo contaminado por cobre

Symbiotic efficiency and genetic characteristics of Bradyrhizobium sp. strain UFSM LA 1.3 isolated from Lupinus albescens (H. et Arn)

Espécies de leguminosas pertencentes ao gênero Lupinus são plantas herbáceas anuais. A maioria é originária das Américas. Estas plantas estabelecem simbioses com bactérias do solo que realizam fixação biológica de nitrogênio coletivamente chamada de rizóbios. Caracterizou-se uma estirpe isolada de Lupinus albescens por meio de características fenotípicas, simbióticas e moleculares. A estirpe UFSM LA 1.3 foi testada in vitro de acordo com os parâmetros: tamanho de colônia; cor e taxa de crescimento; reação ácida ou básica em meio levedura manitol suplementado com azul de bromotimol; produção de goma. A caracterização molecular foi feita pela técnica de PCR usando os oligonucleotídeos BOX A1-R e seqüenciamento da região ITS. A análise da seqüência dos fragmentos da região intergênica (ITS) 16S-26S rDNA mostrou similaridade genética com Bradyrhizobium sp. O polimorfismo observado por BOX-PCR demonstrou que a estirpe difere das estirpes referência SEMIA 928 e SEMIA 938. A eficiência simbiótica de UFSM LA 1.3 foi de 94,6%, sem diferenças estatísticas comparada com o controle com fertilizante nitrogenado mineral que recebeu 400 mg de nitrato de amônio.Legume species belonging to the genus Lupinus are annual herb plants. The majority of them are indigenous to the Americas. They are known for nitrogen-fixing symbioses with soil bacteria collectively called rhizobia. The aim of this study was to characterize a rhizobium strain isolated from Lupinus albescens using phenotypic, symbiotic and molecular approaches. Strain UFSM LA 1.3 was tested in vitro according to several parameters: colony size, color and growing rate; acid or alkaline reaction in yeast mannitol media supplemented with bromothymol blue; gum production. Molecular characterization was evaluated by PCR technique using primers BOX A1-R and sequence analysis of the 16S-23S rDNA intergenic region (ITS). ITS sequencing fragments showed genetic similarity with Bradyrhizobium sp. The polymorphism observed by BOX-PCR have shown that strain differs from the reference strain SEMIA 928 and SEMIA 938. The symbiotic efficiency under axenic conditions of UFSM LA 1.3 was 94.6%, without statistical differences compared to the mineral nitrogen fertilized control, to which was applied solution of 400 mg of ammonium nitrate

RED EUGLENOID BLOOMS: A BIOMARKER OF ENVIRONMENTAL IMPACT IN FLOODED RICE FIELDS

The nutrient load introduced into flooded rice fields is one of the main factorsthat impact this type of ecosystem, contributing to the development of bloomsof pigmented euglenoids. This study was carried out to investigate thebehavior of red euglenas, a group of pigmented euglenoids, forming blooms inthis type of environment. Sedimented spores in the soil after water drainage,as well as water samples from vegetative cells in living blooms were collected.The collected material was inoculated into a culturing medium for microalgaeand incubated for three weeks. The cultures grown in nutrient medium wereused for morphometric analysis to identify the species. In order to characterizethe water environment, chemical and physical parameters were alsomonitored "in situ". The results indicated Euglena sanguinea Ehr. as thebloom-forming species and nitrogen as a key element in the behavior of thisspecies in this type of ecosystem. It was suggested, however, that more studiesare needed to indicate the use of red euglenas as biomarkers of nitrogenoverload in flooded rice fields

Trichoderma asperellum na produção de mudas contra a fusariose do pepineiro

The fusariosis of cucumber is a disease with difficult control and the use of antagonistic fungi is an alternative to the integrated management of diseases. The objective of the research was to investigate the action of T. asperellum in the development and protection of seedlings against fusariosis of cucumber. Germination and emergence tests and the development of seedlings were conducted and evaluated, with seeds treated with three isolates and mix (mixture of three isolates) of T. asperellum. To evaluate the control of fusariosis of cucumber, experiments were performed using seed treatment with isolates of T. asperellum and Rhodiaurum fungicide. It was conducted another experiment with transplanted seedlings croped in substrate or seeds treated with isolates of T. asperellum. It was not observed significant differences for germination and emergence of cucumber, but the isolate TA1 T. asperellum showed greater development of the plant. In the experiments with seed treatment isolates of T. asperellum and fungicide showed significant levels of control. But the isolate TA3 exhibited high incidence of fusariosis (87%), in one of the experiments. The microbiolization showed reduction of 30% in the incidence of fusariosis relationed with the treatment of the substrate, in the transplant of seedlings. It was concluded that isolates of T. asperellum may be indicated, especially in seed treatments against fusariosis of cucumber. The isolates of T. asperellum tested do not interfere in the germination, emergence and development of seedlings of cucumber.A fusariose no pepineiro é uma doença difícil de ser controlada e o uso de antagonistas fúngicos é uma alternativa para o manejo integrado de doenças. O objetivo dessa pesquisa foi verificar a ação de Trichoderma asperellum no desenvolvimento e na proteção de mudas contra a fusariose do pepineiro. Foram realizados e avaliados testes de germinação, emergência e desenvolvimento de mudas, com sementes tratadas por três isolados e mix (mistura dos três isolados) de T. asperellum. Para avaliar o controle da fusariose do pepineiro foram realizados experimentos utilizando-se do tratamento de sementes com os isolados de T. asperellum e o fungicida Rhodiaurum. Realizou-se outro experimento com transplante de mudas cultivadas em substrato ou sementes tratadas com isolados de T. asperellum. Observou-se que não ocorreram diferenças significativas para germinação e emergência do pepineiro, porém o isolado TA1 de T. asperellum apresentou maior desenvolvimento de parte aérea. Nos experimentos com tratamento de sementes os isolados de T. asperellum e o fungicida apresentaram níveis significativos de controle, porém o isolado TA3 apresentou índice elevado, de 87% de incidência de fusariose, em um dos experimentos. No transplante de mudas, a microbiolização de sementes apresentou redução de 30% na incidência da fusariose comparado com o tratamento de substrato. Conclui-se que isolados de T. asperellum podem ser indicados, principalmente no tratamento de sementes, contra a fusariose do pepineiro e que os isolados de T. asperellum testados não interferem na germinação, emergência e desenvolvimento de mudas do pepineiro

Comportamento de Peltophorum dubium (Spreng.) Taub., Parapiptadenia rigida (Benth.) Brenan e Enterolobium contortisiliquum (Vell.) Morong cultivadas em solo contaminado com cobre

Soils contaminated by copper may interfere with the physiological development and establishment of plants. An alternative for the revegetation of these soils is the use of native species tolerant to copper. This study aimed to evaluate the tolerance of three native forest species to excess copper in the soil. The species used were: angico - Peltophorum dubium, canafistula - P. rigida and timbauva - Enterolobium contortisiliquum. The experiment was completely randomized in a 3 x 5 schedule, with three tree species and five doses of copper (0, 64, 128, 192 and 256 mg kg-1 soil) with six replicates. Plant height, shoot dry weight, length and specific root surface area and copper content in shoots and roots were determined. Canafistula and timbauva species showed storage of copper in roots and low translocation to the shoot. The shoot dry weight of timbauva and canafistula increased with small  doses of copper while the shoot dry mass of angico was not affected by the doses tested. The timbauva and angico showed greater capacity for tolerance to copper contamination in the soil than did canafistula.Solos contaminados por cobre podem interferir no desenvolvimento fisiológico e no estabelecimento de plantas. Uma opção para revegetação desses solos é a utilização de espécies florestais nativas tolerantes ao cobre. Este trabalho teve como objetivo avaliar a tolerância de três espécies florestais nativas ao excesso de cobre no solo. As espécies utilizadas foram: angico – Parapiptadenia rigida, canafístula – Peltophorum dubium e timbaúva – Enterolobium contortisiliquum. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, num esquema 3 x 5, sendo três espécies florestais e cinco doses de cobre (0, 64, 128, 192 e 256 mg kg-1 de solo), com seis repetições. Determinou-se a altura de planta, massa seca da parte aérea, comprimento e área superficial específica radicular, teor de cobre na parte aérea e na raiz. A timbaúva e a canafístula apresentam tendência de armazenamento do cobre nas raízes e baixa translocação para a parte aérea. A massa seca da parte aérea da timbaúva e canafístula é incrementada com pequenas doses de cobre, enquanto que a massa seca da parte aérea do angico não é afetada pelas doses testadas. A timbaúva e o angico demonstram maior capacidade de tolerância à contaminação de cobre no solo que a canafístula

Efeito do cobre na população de bactérias e fungos do solo, na associação micorrízica e no cultivo de mudas de Eucalyptus grandis W. Hill ex Maiden, Pinus elliottii Engelm e Peltophorum dubium (Sprengel) Taubert

Copper is a heavy metal that can have toxic effects on microorganisms and plants. Ectomycorrhizal fungi are able to protect the plant from heavy metal toxicity, but the presence of certain metal concentrations can inhibit the growth of this fungus, damage the mycorrhizal symbiosis and also altering the development of the plants. The aim of this study was to evaluate the effect of copper on soil bacteria and fungus population, as well as the effects on the ectomycorrhizal association in the development of Eucalyptus grandis, Pinus elliottii and Peltophorum dubium seedlings. The survey of the soil microorganism population was carried out in a greenhouse during 60 days and the treatments consisted of applications of copper sulphate (0.7; 0.708; 0.716; 0.724 mg Kg-1) to the soil and to eucalyptus and pinus seedlings. Eucalyptus and Peltophorum dubium seedlings inoculated and not inoculated with Pisolithus microcarpus (Cooke and Massee) Cunn (UFSC Pt 116) received copper levels of 0, 100, 200 and 300 mg kg-1. The height, stem diameter, shoot and root fresh biomass, shoot and root dry biomass and ectomycorrhizal colonization were evaluated at 110 days. Soil bacteria and fungus population were altered by the presence of copper and the eucalyptus and pinus seedlings were not affected by copper addition. The inoculation of the eucalyptus and canafístula seedlings with isolate UFSC Pt 116 favored the height of the plants and the development of shoot and root fresh biomass. According to the results, canafístula was able to form an ectomycorrhizal association with the isolate tested. The eucalyptus and canafístula seedling development was inhibited by copper following inoculation with the UFSC Pt 116 isolate.O cobre é um metal pesado que pode exercer efeitos tóxicos para micro-organismos e plantas. Os fungos ectomicorrízicos são capazes de proteger a planta hospedeira da toxidez dos metais pesados, mas a presença de certas concentrações de metais pode inibir o crescimento destes, prejudicando a simbiose micorrízica e alterar o desenvolvimento das plantas. O objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito de doses de cobre na população de bactérias e fungos do solo, bem como seus efeitos na associação ectomicorrízica e no desenvolvimento de mudas de eucalipto, pinus e canafístula. O levantamento da população de micro-organismos do solo foi realizado em casa de vegetação durante 60 dias e os tratamentos foram doses de sulfato de cobre aplicadas ao solo (0,7; 0,708; 0,716; 0,724 mg kg-1 de solo) e mudas de eucalipto e pinus. No segundo experimento, mudas de eucalipto e canafístula inoculadas e não inoculadas com Pisolithus microcarpus (Cooke & Massee) Cunn (UFSC Pt 116) receberam doses de cobre de 0, 100, 200 e 300 mg kg-1 de solo. Aos 110 dias, avaliaram-se a massa fresca da parte aérea e radicular, massa seca da parte aérea, altura, diâmetro do colo e porcentagem de colonização ectomicorrízica. No primeiro experimento, a população total de bactérias e fungos do solo foi alterada pela presença do cobre, porém as mudas de eucalipto e pinus não mostraram efeitos da adição do cobre. No segundo experimento, a inoculação das mudas de eucalipto e canafístula com o isolado UFSC Pt 116 favoreceu o desenvolvimento da massa fresca da parte aérea e radicular e a altura das plantas. Conforme os resultados obtidos, a canafístula foi capaz de realizar associação ectomicorrízica com o isolado testado. O desenvolvimento das plântulas de eucalipto e canafístula foi inibido pelos níveis de cobre, mesmo inoculadas com o isolado UFSC Pt 116

Tolerância de mudas de canafístula (Peltophorum dubium (Spreng.) Taub.) inoculada com Pisolithus microcarpus a solo com excesso de cobre.

The ectomycorrhizal fungi symbiosis with native florestal essences may be an alternative to   revegetation of metal contaminated soils. The aim of this work was to determine canafístula seedlings behavior, inoculated to ectomycorrhizal fungi in soil with copper excess. The trial was conducted in greenhouse conditions. The ectomycorrhizal fungi used was Pisolithus microcarpus UFSC Pt116, cultivated on peat-vermiculite substrate (3:1). The canafístula seedlings were developed in washed  sand and transplanted, when showed two definitive leaves. Vase of 1L with 1 kg of soil were used as experimental unit. The inoculation was accomplished in the seedlings transplant, added 2g of inoculates for experimental unit. The experimental design was entirely casual in bi factorial scheme (2 x 4) qualitative in A, with and without fungi inoculum and quantitative in D being the control addition of 150 mg Kg -1, 300 mg Kg -1 and 450 mg Kg -1 of copper (CuSO4), with seven repetitions. Plant height, colon diameter, dry matter, copper content, mycorrhizal colonization percentage, superficial roots area and roots length were assessed. The increase of soil copper levels reduced roots length, specific superficial roots area, height and plant diameter of canafístula. Canafistula seedlings inoculated to ectomycorrhizal fungi showed low cooper amounts in their tissue and copper absortion reduced in high copper doses.A associação de fungos ectomicorrízicos com essências florestais nativas pode ser uma alternativa para revegetação de solos contaminados por metais pesados. O objetivo do trabalho foi determinar o comportamento de mudas de canafístula inoculadas com fungo ectomicorrízico em solo contaminado por cobre. O fungo ectomicorrízico utilizado foi o Pisolithus microcarpus UFSC Pt116, produzido em substrato composto por turfa-vermiculita (3:1). As mudas de canafístula foram desenvolvidas em areia lavada e transplantada para unidades experimentais quando apresentaram duas folhas definitivas. Como unidade experimental foi utilizado vaso com capacidade de 1 L contendo 1 kg de solo. A inoculação foi realizada no momento do transplante das mudas, sendo adicionado 2 g de inoculante por unidade experimental. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado, num esquema bifatorial (2 x 4) qualitativo em A, com e sem inoculante do fungo, e quantitativo em D, sendo o controle, adição de 150 mg kg-1, 300 mg kg-1 e 450 mg kg-1 de cobre (CuSO4), com sete repetições. Determinou-se altura de planta, diâmetro do colo, massa seca da parte aérea, teor de cobre na planta, porcentagem de colonização micorrízica, área superficial específica radicular e comprimento radicular. O incremento das doses de cobre no solo reduziu o comprimento radicular, área superficial específica radicular, altura e diâmetro das plantas de canafístula. As mudas de canafístula inoculadas com fungo ectomicorrízico apresentam menor teor de cobre em seu tecido e reduzem a absorção de cobre na dose mais elevada