Neutralization of Junín virus by single domain antibodies targeted against the nucleoprotein

The syndrome viral haemorrhagic fever (VHF) designates a broad range of diseases that are caused by different viruses including members of the family Arenaviridae. Prophylaxis for Argentine Haemorrhagic Fever (AHF), caused by the arenavirus Junín (JUNV), has been achieved by the use of a live attenuated vaccine, named Candid#1. The standard treatment of AHF is transfusion of convalescent human plasma. Our aim was to develop an alternative and safer treatment for AHF based on the use of virus-neutralizing single domain antibodies (VHHs). We describe the first reported VHHs directed against an arenavirus. These VHHs could neutralize Candid#1 by altering virion binding/fusion. Surprisingly, the neutralizing VHHs appeared to be specific for the viral nucleoprotein (N) that is not known to be involved in arenavirus entry. Candid#1 VHH-escape viruses had acquired a predicted N-glycosylation site in the surface glycoprotein GP1 that is present in highly pathogenic JUNV strains. Accordingly, the Candid#1-neutralizing VHHs could not neutralize pathogenic JUNV strains, but they could still bind to cells infected with a pathogenic strain or the escape mutant viruses. These results show that the attenuated strains of JUNV can be potently neutralized by nucleoprotein-specific VHHs.Fil: Linero, Florencia Natalia. Flanders Interuniversity Institute For Biotechnology; Bélgica. University of Ghent; BélgicaFil: Sepúlveda, Claudia Soledad. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Christopoulou, Ioanna. University of Ghent; Bélgica. Flanders Interuniversity Institute For Biotechnology; BélgicaFil: Hulpiau, Paco. University of Ghent; Bélgica. Flanders Interuniversity Institute For Biotechnology; BélgicaFil: Scolaro, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; ArgentinaFil: Saelens, Xavier. University of Ghent; Bélgica. Flanders Interuniversity Institute For Biotechnology; Bélgic

Role of the ERK1/2 signaling pathway in the replication of junín and tacaribe viruses

We have previously shown that the infection of cell cultures with the arenaviruses Junín (JUNV), Tacaribe (TCRV), and Pichindé promotes the phosphorylation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) extracellular signal-regulated kinases 1 and 2 (ERK1/2) and that this activation is required for the achievement of a productive infection. Here we examined the contribution of ERK1/2 in early steps of JUNV and TCRV multiplication. JUNV adsorption, internalization, and uncoating were not affected by treatment of cultured cells with U0126, an inhibitor of the ERK1/2 signaling pathway. In contrast, U0126 caused a marked reduction in viral protein expression and RNA synthesis, while JUNV RNA synthesis was significantly augmented in the presence of an activator of the ERK1/2 pathway. Moreover, U0126 impaired the expression of a reporter gene in a TCRV-based replicon system, confirming the ability of the compound to hinder arenavirus macromolecular synthesis. By using a cell-based assay, we determined that the inhibitor did not affect the translation of a synthetic TCRV-like mRNA. No changes in the phosphorylation pattern of the translation factor eIF2α were found in U0126-treated cells. Our results indicate that U0126 impairs viral RNA synthesis, thereby leading to a subsequent reduction in viral protein expression. Thus, we conclude that ERK1/2 signaling activation is required for an efficient arenavirus RNA synthesis.Fil: Brunetti, Jesús Emanuel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; ArgentinaFil: Foscaldi, Sabrina Andrea. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Quintana, Verónica Mara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; ArgentinaFil: Lopez, Nora Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein". Fundación Pablo Cassará. Instituto de Ciencia y Tecnología "Dr. César Milstein"; ArgentinaFil: Castilla, Viviana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Regulation of Tacaribe mammarenavirus translation: Positive 5' and negative 3' elements and role of key cellular factors

Mammarenaviruses are enveloped viruses with a bisegmented negativestranded RNA genome that encodes the nucleocapsid protein (NP), the envelope glycoprotein precursor (GPC), the RNA polymerase (L), and a RING matrix protein (Z). Viral proteins are synthesized from subgenomic mRNAs bearing a capped 5' untranslated region (UTR) and lacking 3' poly(A) tail. We analyzed the translation strategy of Tacaribe virus (TCRV), a prototype of the New World mammarenaviruses. A virus-like transcript that carries a reporter gene in place of the NP open reading frame and transcripts bearing modified 5' and/or 3' UTR were evaluated in a cellbased translation assay. We found that the presence of the cap structure at the 5' end dramatically increases translation efficiency and that the viral 5' UTR comprises stimulatory signals while the 3' UTR,specifically the presence of a terminal C+G-rich sequence and/or a stem-loop structure, down-modulates translation. Additionally, translation was profoundly reduced in eukaryotic initiation factor (eIF) 4G-inactivated cells, whereas depletion of intracellular levels of eIF4E had less impact on virus-like mRNA translation than on a cell-like transcript. Translation efficiency was independent of NP expression or TCRV infection. Our results indicate that TCRV mRNAs are translated using a cap-dependent mechanism, whose efficiency relies on the interplay between stimulatory signals in the 5' UTR and a negative modulatory element in the 3' UTR. The low dependence on eIF4E suggests that viral mRNAs may engage yet-unknown noncanonical host factors for a cap-dependent initiation mechanism.Fil: Foscaldi, Sabrina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología ; ArgentinaFil: D'antuono, Alejandra Lorena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología ; ArgentinaFil: Noval, María Gabriela. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: de Prat Gay, Gonzalo. Fundación Instituto Leloir; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Lopez, Nora Mabel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Ciencia y Tecnología ; Argentin

Coronavirus and Herpes simplex virus type 1 stability in surgical masks and gowns

Introducción: Durante la actual pandemia de COVID-19 han surgido muchas controversias e interrogantes respecto de la persistencia de la actividad viral en distintas superficies. Para el área de salud, ha sido un gran desafío lograr optimizar los usos de equipos de protección personal (EPP), teniendo en cuenta la incertidumbre acerca de la estabilidad de las partículas virales sobre distintas superficies. Objetivos: Analizar la estabilidad viral en barbijos quirúrgicos y batas descartables. Materiales y métodos: Se emplearon barbijos quirúrgicos tricapa comerciales y batas aprobados por ANMAT a los cuales se los inoculó artificialmente con cantidades definidas de virus herpes simplex tipo I (HSV-1) y de coronavirus bovino (BCoV) en condiciones ambientales estrictamente establecidas, o se los expuso a pacientes COVID positivos para luego evaluar la infectividad viral residual o remanente mediante la técnica de UFP (unidad formadora de placa) y por la aparición de ECP (efecto citopático) en cultivos celulares infectados con el virus residual. Resultados: El tiempo de inactivación fue dependiente de la dosis infectiva inicial; para las dosis máximas estudiadas, los virus inoculados artificialmente permanecen viables hasta 72 horas, sin embargo, en la bata expuesta a pacientes COVID positivo, no se pudo recuperar la actividad viral luego de las 16 horas. Conclusiones: El tiempo de inactivación viral depende de la dosis infectiva inicial bajo las mismas condiciones ambientales. Mientras más alta es la dosis infectiva, más tiempo tardará en inactivarse el inóculo. Con dosis superiores a las esperadas naturalmente, el tiempo de inactivación de la actividad viral es de 72 horas.Introduction. During the current COVID-19 pandemic, many controversies and questions have arisen regarding the persistence of viral activity on different surfaces. In particular, for the health area, it has been a great challenge to optimize the uses of the personal protective equipment, even more so taking into account the uncertainty about the stability of viral particles on different surfaces. Objectives. To analyze viral stability in surgical masks and disposable gowns. Materials and methods. Commercial three-layer surgical masks and gowns approved by the Argentine Agency of Medicines, Food and Medical Technology (ANMAT) were artificially inoculated with defined amounts of herpes simplex virus type I (HSV-1) and bovine coronavirus (BCoV) under strictly established environmental conditions, or exposed to COVID-positive patients. Then, residual or remnant viral infectivity was evaluated using the PFU technique and by the appearance of cytopathic effects in cell cultures infected with residual virus. Results. The inactivation time was dependent on the initial infective dose. For the maximum doses studied, the artificially inoculated viruses remained viable for up to 72 hours. However, in the gowns exposed to COVID-positive patients, no viral activity was recovered after 4 h. Conclusions. Under the same environmental conditions, the viral inactivation time depends on the initial infective dose. The higher the infective dose, the longer it will take for the inoculum to become inactivated. With doses higher than those naturally expected, the inactivation time of viral activity is 72 hours.Fil: Ayala Peña, Victoria Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Alvarez, Vera Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Lassalle, Verónica Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; Argentin

Coronavirus and Herpes simplex virus type 1 stability in surgical masks and gowns

Introducción: Durante la actual pandemia de COVID-19 han surgido muchas controversias e interrogantes respecto de la persistencia de la actividad viral en distintas superficies. Para el área de salud, ha sido un gran desafío lograr optimizar los usos de equipos de protección personal (EPP), teniendo en cuenta la incertidumbre acerca de la estabilidad de las partículas virales sobre distintas superficies. Objetivos: Analizar la estabilidad viral en barbijos quirúrgicos y batas descartables. Materiales y métodos: Se emplearon barbijos quirúrgicos tricapa comerciales y batas aprobados por ANMAT a los cuales se los inoculó artificialmente con cantidades definidas de virus herpes simplex tipo I (HSV-1) y de coronavirus bovino (BCoV) en condiciones ambientales estrictamente establecidas, o se los expuso a pacientes COVID positivos para luego evaluar la infectividad viral residual o remanente mediante la técnica de UFP (unidad formadora de placa) y por la aparición de ECP (efecto citopático) en cultivos celulares infectados con el virus residual. Resultados: El tiempo de inactivación fue dependiente de la dosis infectiva inicial; para las dosis máximas estudiadas, los virus inoculados artificialmente permanecen viables hasta 72 horas, sin embargo, en la bata expuesta a pacientes COVID positivo, no se pudo recuperar la actividad viral luego de las 16 horas. Conclusiones: El tiempo de inactivación viral depende de la dosis infectiva inicial bajo las mismas condiciones ambientales. Mientras más alta es la dosis infectiva, más tiempo tardará en inactivarse el inóculo. Con dosis superiores a las esperadas naturalmente, el tiempo de inactivación de la actividad viral es de 72 horas.Introduction. During the current COVID-19 pandemic, many controversies and questions have arisen regarding the persistence of viral activity on different surfaces. In particular, for the health area, it has been a great challenge to optimize the uses of the personal protective equipment, even more so taking into account the uncertainty about the stability of viral particles on different surfaces. Objectives. To analyze viral stability in surgical masks and disposable gowns. Materials and methods. Commercial three-layer surgical masks and gowns approved by the Argentine Agency of Medicines, Food and Medical Technology (ANMAT) were artificially inoculated with defined amounts of herpes simplex virus type I (HSV-1) and bovine coronavirus (BCoV) under strictly established environmental conditions, or exposed to COVID-positive patients. Then, residual or remnant viral infectivity was evaluated using the PFU technique and by the appearance of cytopathic effects in cell cultures infected with residual virus. Results. The inactivation time was dependent on the initial infective dose. For the maximum doses studied, the artificially inoculated viruses remained viable for up to 72 hours. However, in the gowns exposed to COVID-positive patients, no viral activity was recovered after 4 h. Conclusions. Under the same environmental conditions, the viral inactivation time depends on the initial infective dose. The higher the infective dose, the longer it will take for the inoculum to become inactivated. With doses higher than those naturally expected, the inactivation time of viral activity is 72 hours.Fil: Ayala Peña, Victoria Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca. Universidad Nacional del Sur. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Bahía Blanca; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Alvarez, Vera Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ingeniería. Instituto de Investigaciones en Ciencia y Tecnología de Materiales; ArgentinaFil: Lassalle, Verónica Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Bahía Blanca. Instituto de Química del Sur. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Química. Instituto de Química del Sur; Argentin

Optimización y aplicación de un protocolo de desnaturalización de alta resolución en la caracterización del virus de la laringotraqueítis infecciosa aviar

En un estudio epidemiológico realizado previamente en Argentina, se analizó la secuencia de un fragmento del gen US5 del virus de la laringotraqueítis infecciosa (ILTV), lo que permitió diferenciar las cepas de campo de las vacunales. También esto permitió definir cinco haplotipos del ILTV, con variaciones específicas en las posiciones 461, 484, 832, 878 y 894 del gen US5. La caracterización de las cepas virales también puede lograrse mediante el análisis de la disociación de alta resolución o high-resolution melting analysis (HRMA), descripto como un método efectivo, rápido y sensible para detectar mutaciones en productos de PCR. En el presente estudio se desarrolló un protocolo de disociación de alta resolución con el objetivo de caracterizar cepas del ILTV circulantes en Argentina. Para ello,se confirmó la especificidad de esta herramienta en diferentes diluyentes del ADN de las muestras, sin observarse interferencias en presencia de ADN heterólogo u otros metabolitos celulares. Asimismo, la concentración de sales en el buffer de elución utilizado durante la extracción de ADN no alteró los perfiles de las curvas. Se obtuvieron perfiles bien definidos con concentraciones de ADN más elevadas (Ct ∼= 26.0), mientras que concentraciones más bajas presentaron curvas heterogéneas (Ct ∼= 32.5). El HRMA mostró una concordancia del 97.49% con la técnica de referencia, la secuenciación. El protocolo de disociación de alta resolución amplifica el ADN antes de su caracterización, por lo que esta técnica podría ser eventualmente utilizada para confirmar la presencia del ILTV y, al mismo tiempo, distinguir haplotipos, optimizando su valor como herramienta de diagnóstico. Esta característica implica una reducción significativa en el tiempo dedicado al procesamiento de muestras.A previous sequence analysis of a US5 gene fragment of infectious laryngotracheitis virus (ILTV) performed in an Argentinian epidemiological study allowed to differentiate between wild and vaccine strains. This analysis also defined five ILTV haplotypes with specific variations at positions 461, 484, 832, 878 and 894 of the US5 gene. This characterization of viral strains may also be accomplished using the High-Resolution Melting Analysis (HRMA), which has been described as an effective, fast and sensitive method to detect mutations in PCR products. In the present study, an HRM protocol was developed with the aim of characterizing the circulating ILTV strains in Argentina. The specificity of this tool was confirmed in different DNA diluents, without interference from heterologous DNA or other cellular metabolites. Additionally, the salt concentration in the elution buffer used for DNA extraction did not alter the curve profiles. Higher concentrations of DNA (Ct ∼= 26.0) displayed well-defined curve profiles, whereas lower concentrations (Ct ∼= 32.5) exhibited more heterogeneous curves. The HRMA showed 97.49% concordance with the reference technique, i.e., sequencing. The HRM protocol has the capability to perform DNA amplification prior to its characterization. Thus, eventually this technique may be used simultaneously as a diagnostic tool. This advantage implies a significant reduction in the time and effort involved in sample processing.Fil: Rojas, María Florencia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Entre Rios. Estación Experimental Agropecuaria Concepción del Uruguay. Laboratorio de Sanidad Aviar; ArgentinaFil: König, Guido Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Vagnozzi, Ariel Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Vera, Federico Sebastian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Entre Rios. Estación Experimental Agropecuaria Concepción del Uruguay. Laboratorio de Sanidad Aviar; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Craig, María Isabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentin

Involvement of heterogeneous nuclear ribonucleoproteins in viral multiplication

The study of virus-host interactions is a major goal in molecular virology and provides new effective targets for antiviral therapies. Heterogeneous nuclear ribonucleoproteins (hnRNPs) constitute a group of cellular RNA-binding proteins localized predominantly within the nucleus, which participate in gene transcription and subsequent RNA post-transcriptional modifications. The interaction between hnRNPs and viral components was extensively demonstrated, as well as the ability of virus infections to alter the intracellular localization or the level of expression of different hnRNPs. The involvement of these proteins in the replication of numerous viruses including members from the Retroviridae, Flaviviridae, Coronaviridae, Arenaviridae, Rhabdoviridae, Papillomaviridae, Orthomyxoviridae, Picornaviridae, Togaviridae and Herpesviridae families, has been reported. In order to gain an increased understanding of the interactions between virus and cell that result in the productive infection of the latter, in this review we discuss the main findings about the role of hnRNPs in different steps of viral replication, such as RNA synthesis, translation, RNA processing and egress of newly assembled progeny virus.Fil: Castilla, Viviana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentin

Caracterización biológica y bioquímica de una mutante de virus Junín atenuada para ratón lactante

Fil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Viral Musicality in Harmony with Nature

In this manuscript we describe a biological system that deals with herpes simplex virus in the context of an invitro infection in the presence of carrageenan, from a novel point of view by comparing our system to the Ligeti´ssymphonic poem of 100 metronomes. Metronomes (from ancient Greek μέτρον-métron, "measure" and νέμω-némo,"I manage", "I lead"), as a measuring instrument of ?tempo? links us with the viral replication cycle to define, throughsound, a metaphorical construction of life (as vibration and movement, impermanence and constant change). Thechanges detected in viral populations, in time and space, in a similar way to the artistically experienced in Ligeti´ssymphonic poem enable us a trans disciplinary view, creating networks of cooperation that favor the renewal of theconceptual bases of biology enriching our perception and understanding of the biology and evolution of viruses.Fil: Theaux, Clara. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; ArgentinaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; ArgentinaFil: Carlucci, Maria Josefina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Química Biológica de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentin

Participation of eIF4F complex in Junin virus infection: blockage of eIF4E does not impair virus replication

Translation efficiency of viral mRNAs is a key factor defining both cytopathogenicity and virulence of viruses, which are entirely dependent on the cellular translation machinery to synthesize their proteins. This dependence has led them to develop different translational reprogramming strategies to ensure viral mRNAs can effectively compete with cellular mRNAs. Junin virus (JUNV) is a member of the family Arenaviridae, whose mRNAs are capped but not polyadenylated. In this work we evaluated the relevance to JUNV replication of the main components of the eIF4F complex: eIF4A, eIF4GI and eIF4E. We found the viral nucleoprotein (N) of JUNV colocalized with eIF4A and eIF4GI but not with eIF4E. Moreover, N could be immunoprecipitated in association with eIF4A and eIF4GI but not with eIF4E. Accordingly, functional impairment of eIF4A as well as eIF4GI reduced JUNV multiplication. By contrast, inhibition of eIF4E did not show a significant effect on JUNV protein synthesis. A similar situation was observed for another two members of arenaviruses: Tacaribe (TCRV) and Pichinde (PICV) viruses. Finally, the nucleoproteins of JUNV, TCRV and PICV were able to interact with 7 methyl-guanosine (cap), suggesting that the independence of JUNV multiplication on eIF4E, the cap-binding protein, may be due to the replacement of this factor by N protein.Fil: Linero, Florencia Natalia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Welnowska, Ewelina. Universidad Autónoma de Madrid; EspañaFil: Carrasco, Luis. Universidad Autónoma de Madrid; EspañaFil: Scolaro, Luis Alberto. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Departamento de Química Biológica. Laboratorio de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin