Absence of spermatozoal CD46 protein expression and associated rapid acrosome reaction rate in striped field mice (Apodemus agrarius)

<p>Abstract</p> <p>Background</p> <p>In rodents, the cell surface complement regulatory protein CD46 is expressed solely on the spermatozoal acrosome membrane. Ablation of the CD46 gene is associated with a faster acrosome reaction. Sperm from Apodemus flavicollis (yellow-necked field mice), A. microps (pygmy field mice) and A. sylvaticus (European wood mice) fail to express CD46 protein and exhibit a more rapid acrosome reaction rate than Mus (house mice) or BALB/c mice. A. agrarius (striped field mice) belong to a different Apodemus subgenus and have pronounced promiscuity and large relative testis size. The aim of this study was to determine whether A. agrarius sperm fail to express CD46 protein and, if so, whether A. agrarius have a faster acrosome reaction than Mus.</p> <p>Methods</p> <p>Reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to assess whether A. agrarius transcribe testicular CD46 mRNA. RT-PCR was supplemented with 3'- and 5'-rapid amplification of cDNA ends to determine the complete nucleotide sequence of A. agrarius CD46. Fluorescence microscopy was used to assess whether CD46 protein is expressed by A. agrarius sperm. The acrosome status of A. agrarius sperm was calculated over time by immunocytochemistry using peanut agglutinin lectin.</p> <p>Results</p> <p>We demonstrate that A. agrarius mice transcribe two unique alternatively spliced testicular CD46 mRNA transcripts, both lacking exon 7, which differ from those described previously in other Apodemus species. The larger A. agrarius CD46 transcript has an insert between exons 10 and 11 which, if translated, would result in a novel cytoplasmic tail. In addition, A. agrarius CD46 transcripts have an extended AU-rich 3'-untranslated region (UTR) and a truncated 5'-UTR, resulting in failure to express spermatozoal CD46 protein. We show that A. agrarius has a significantly faster spontaneous acrosome reaction rate than A. sylvaticus and Mus.</p> <p>Conclusion</p> <p>Absence of CD46 protein expression is associated with acrosomal instability in rodents. A. agrarius mice express novel CD46 transcripts, resulting in the trade of spermatozoal CD46 protein expression for a rapid acrosome reaction rate, in common with other species of field mice. This provides a strategy to increase competitive sperm advantage for individuals, leading to faster fertilisation in this highly promiscuous genus.</p

The Tetraspanins CD9 and CD81 Regulate CD9P1-Induced Effects on Cell Migration

CD9P-1 is a cell surface protein with immunoglobulin domains and an unknown function that specifically associates with tetraspanins CD9 and CD81. Overexpression of CD9P-1 in HEK-293 cells induces dramatic changes in cell spreading and migration on various matrices. Experiments using time-lapse videomicroscopy revealed that CD9P-1 expression has led to higher cell motility on collagen I but lower motility on fibronectin through a β1-integrins dependent mechanism. On collagen I, the increase in cell motility induced by CD9P-1 expression was found to involve integrin α2β1 and CD9P-1 was observed to associate with this collagen receptor. The generation of CD9P-1 mutants demonstrated that the transmembrane and the cytoplasmic domains are necessary for inducing effects on cell motility. On the other hand, expression of tetraspanins CD9 or CD81 was shown to reverse the effects of CD9P-1 on cell motility on collagen I or fibronectin with a concomitant association with CD9P-1. Thus, the ratio of expression levels between CD9P-1 and its tetraspanin partners can regulate cell motility

Etude de l'utilisation de l'électrothérapie antalgique en médecine générale (la stimulation nerveuse tran[s]cutanée)

RENNES1-BU Santé (352382103) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Doxorubicin alters G-protein coupled receptor-mediated vasocontraction in rat coronary arteries

Doxorubicin (Doxo)-associated cardio-and vasotoxicity has been recognised as a serious complication of cancer chemotherapy. The purpose of this novel paper was to determine the effect of Doxo on G-protein coupled receptor (GPCR)-mediated vasocontraction located on vascular smooth muscle cells. Rat left anterior descending artery segments were incubated for 24 h with 0.5 µM Doxo. The vasocontractile responses by activation of endothelin receptor type A (ETA) and type B (ETB), serotonin receptor 1B (5-HT1B) and thromboxane A2 prostanoid receptor (TP) were investigated by a sensitive myography using specific agonists, while the specificity of the GPCR agonists was verified by applying selective antagonists (i.e. ETA and ETB agonist = 10-14-10-7.5 M endothelin-1 (ET-1); ETA antagonist = 10 µM BQ123; ETB agonists = 10-14-10-7.5 M sarafotoxin 6c (S6c) and ET-1; ETB antagonist = 0.1 µM BQ788; 5-HT1B agonist = 10-12-10-5.5 M 5-carboxamidotryptamine (5-CT); 5-HT1B antagonist = 1 µM GR55562; TP agonist = 10-12-10-6.5 M U46619; TP antagonist = 1 µM Seratrodast). Our results show that 0.5 µM Doxo incubation of LAD segments leads to an increased VSMC vasocontraction through the ETB, 5-HT1B and TP GPCRs, with a 2.2-fold increase in ETB-mediated vasocontraction at 10-10.5 M S6c, a 2.0-fold increase in 5-HT1B-mediated vasocontraction at 10-5.5 M 5-CT, and a 1.3-fold increase in TP-mediated vasocontraction at 10-6.5 M U46619. Further studies unravelling the involvement of intracellular GPCR signalling pathways will broaden our understanding of the Doxo-induced vasotoxicity, and thus pave the way to mitigate the adverse effects by potential implementation of adjunct therapy options. <br/

Villaines-les-Rochers, Église Saint-André: Rapport de diagnostic archéologique, Centre-Val de Loire, Indre-et-Loire

L’église de Villaines-les-Rochers est un édifice composite dont les parties les plus anciennes sont attribuées aux Xe et XIIe siècles. Elle a été profondémment modifiée au cours du XIXe siècle avec l’adjonction d’une galerie en 1828, la construction d’une nouvelle nef en 1858 perpendiculaire au vaisseau primitif entrainant la démolition de son transept et enfin la construction d’une sacristieen 1872.L’ouverture de 4 sondages dans l’emprise d’un futur système de drainage, depuis le chevet construit en 1858 au NO jusqu’à la galerie de 1828 au SE, a permis de constater la disparition du premier mètre de stratigraphie antérieure à l’époque contemporaine en contact avec l’édifice. Les vestiges mis au jour sont rares : un mur recoupé par l’église et une structure de combustion partiellement reconnue dans le sondage 2 à 1,20 m de profondeur, une sépulture datée par 14C entre la fin du Xe et le milieu du XIIe s., seul vestige du cimetière médiéval, perturbée par l’installation d’un contrefort à l’angle SE de la façade médiévale, dans le sondage 4 à 0,80 m de profondeur. Une couche contenant des fragments de tegulae et de la céramique attribuable au Haut Empire, reconnue dans les sondages 3 et 4, permet d’envisager la présence d’un site antique dans le secteur.Deux sondages au sol, ouverts de part et d’autre du mur semi-circulaire de l’abside NE et des piquetages réalisés sur le mur gouttereau SE de l’ancien chœur et sur l’abside ont révélé un fort potentiel stratigraphique découlant des nombreux remaniements intervenus dans cette partie de l’édifice (notamment deux états distincts du transept démoli au XIXe s.). Le sondage au sol, réalisé à l’intérieur de l’abside de l’ancien chœur, a permis la mise au jour d’un des piliers soutenant la voûte d’une crypte aujourd’hui remblayée. Deux analyses radiocarbone viennent confirmer une datation ancienne pour cette partie de l’église entre le Xe et le début du XIe siècle

Villaines-les-Rochers, Église Saint-André: Rapport de diagnostic archéologique, Centre-Val de Loire, Indre-et-Loire

L’église de Villaines-les-Rochers est un édifice composite dont les parties les plus anciennes sont attribuées aux Xe et XIIe siècles. Elle a été profondémment modifiée au cours du XIXe siècle avec l’adjonction d’une galerie en 1828, la construction d’une nouvelle nef en 1858 perpendiculaire au vaisseau primitif entrainant la démolition de son transept et enfin la construction d’une sacristieen 1872.L’ouverture de 4 sondages dans l’emprise d’un futur système de drainage, depuis le chevet construit en 1858 au NO jusqu’à la galerie de 1828 au SE, a permis de constater la disparition du premier mètre de stratigraphie antérieure à l’époque contemporaine en contact avec l’édifice. Les vestiges mis au jour sont rares : un mur recoupé par l’église et une structure de combustion partiellement reconnue dans le sondage 2 à 1,20 m de profondeur, une sépulture datée par 14C entre la fin du Xe et le milieu du XIIe s., seul vestige du cimetière médiéval, perturbée par l’installation d’un contrefort à l’angle SE de la façade médiévale, dans le sondage 4 à 0,80 m de profondeur. Une couche contenant des fragments de tegulae et de la céramique attribuable au Haut Empire, reconnue dans les sondages 3 et 4, permet d’envisager la présence d’un site antique dans le secteur.Deux sondages au sol, ouverts de part et d’autre du mur semi-circulaire de l’abside NE et des piquetages réalisés sur le mur gouttereau SE de l’ancien chœur et sur l’abside ont révélé un fort potentiel stratigraphique découlant des nombreux remaniements intervenus dans cette partie de l’édifice (notamment deux états distincts du transept démoli au XIXe s.). Le sondage au sol, réalisé à l’intérieur de l’abside de l’ancien chœur, a permis la mise au jour d’un des piliers soutenant la voûte d’une crypte aujourd’hui remblayée. Deux analyses radiocarbone viennent confirmer une datation ancienne pour cette partie de l’église entre le Xe et le début du XIe siècle