Canagliflozin and renal outcomes in type 2 diabetes and nephropathy

BACKGROUND Type 2 diabetes mellitus is the leading cause of kidney failure worldwide, but few effective long-term treatments are available. In cardiovascular trials of inhibitors of sodium–glucose cotransporter 2 (SGLT2), exploratory results have suggested that such drugs may improve renal outcomes in patients with type 2 diabetes. METHODS In this double-blind, randomized trial, we assigned patients with type 2 diabetes and albuminuric chronic kidney disease to receive canagliflozin, an oral SGLT2 inhibitor, at a dose of 100 mg daily or placebo. All the patients had an estimated glomerular filtration rate (GFR) of 30 to <90 ml per minute per 1.73 m2 of body-surface area and albuminuria (ratio of albumin [mg] to creatinine [g], >300 to 5000) and were treated with renin–angiotensin system blockade. The primary outcome was a composite of end-stage kidney disease (dialysis, transplantation, or a sustained estimated GFR of <15 ml per minute per 1.73 m2), a doubling of the serum creatinine level, or death from renal or cardiovascular causes. Prespecified secondary outcomes were tested hierarchically. RESULTS The trial was stopped early after a planned interim analysis on the recommendation of the data and safety monitoring committee. At that time, 4401 patients had undergone randomization, with a median follow-up of 2.62 years. The relative risk of the primary outcome was 30% lower in the canagliflozin group than in the placebo group, with event rates of 43.2 and 61.2 per 1000 patient-years, respectively (hazard ratio, 0.70; 95% confidence interval [CI], 0.59 to 0.82; P=0.00001). The relative risk of the renal-specific composite of end-stage kidney disease, a doubling of the creatinine level, or death from renal causes was lower by 34% (hazard ratio, 0.66; 95% CI, 0.53 to 0.81; P<0.001), and the relative risk of end-stage kidney disease was lower by 32% (hazard ratio, 0.68; 95% CI, 0.54 to 0.86; P=0.002). The canagliflozin group also had a lower risk of cardiovascular death, myocardial infarction, or stroke (hazard ratio, 0.80; 95% CI, 0.67 to 0.95; P=0.01) and hospitalization for heart failure (hazard ratio, 0.61; 95% CI, 0.47 to 0.80; P<0.001). There were no significant differences in rates of amputation or fracture. CONCLUSIONS In patients with type 2 diabetes and kidney disease, the risk of kidney failure and cardiovascular events was lower in the canagliflozin group than in the placebo group at a median follow-up of 2.62 years

Cell therapy applied at different stages of healing in the treatment of chronic wounds in a murine model

Células-tronco mesenquimais (CTMs) representam uma terapia promissora na medicina regenerativa, não apenas por sua capacidade de diferenciação, mas também pelo seu tropismo por lesões, por seus efeitos imunomodulatórios e por sua bioestabilidade quando cultivada e expandida in vitro. O benefício das CTMs na regeneração celular, tem sido bastante evidente, retratando melhora significativa da cicatrização cutânea, baseada no efeito parácrino destas células, que atuam principalmente na ação anti-inflamatória. Este estudo teve por objetivo avaliar a terapia celular aplicada nas diferentes fases da cicatrização de feridas cutâneas crônicas. Para isso, foram utilizados 96 ratos Wistar, machos, com oito semanas de idade, variando entre 250 a 300 gramas de peso. Do total de 96, 24 animais serviram como doadores de gordura gonadal para cultura e isolamento de CTMs. Os outros 72 foram aleatoriamente divididos em 3 grupos: C (controle), CTM1 (1 aplicação de CTM) e CTM2 (2 aplicações de CTM). Estes grupos foram subdivididos em três diferentes períodos de tempo para avaliação: 7, 14 e 21 dias. Os tratamentos com CTM foram realizados aos 0 e 5 dias após a cronificação das feridas. Nos dias de eutanásia (7, 14 e 21 dias), foram coletados fragmentos de ferida para avaliação microscópica (HE e imunoistoquímica) e macroscópicas das feridas. O grupo CTM2-21 dias apresentou maior taxa de contração (p < 0,001). O colágeno I, o colágeno III e o FGF apresentaram em média diferença estatisticamente significativa entre os grupos, independente do dia da avaliação (p < 0,001). A taxa de contração (TC) e a marcação de Ki67 apresentaram em média diferentes comportamentos entre grupos e período de avaliação (p Interação = 0,039 e p Interação = 0,018 respectivamente). O grupo CTM1 apresentou menor frequência de úlcera (p<0,05). O grupo CTM1-7 dias apresentou maior índice de inflamação crônica, enquanto que os demais grupos apresentaram inflamação sub-aguda (p= 0,006). Com base nos resultados obtidos, conclui-se que a terapia celular beneficia a cicatrização de feridas crônicas, e que duas aplicações de CTMs promovem maior taxa de contração, quando avaliadas no 21º dia.Mesenchymal stem cells are a promising therapy in regenerative medicine, not only because their differentiating ability, but also due to their tropism to lesions, their immunomodulatory effects and their biostability when cultured and expanded in vitro. The benefits of MSCs in cell regeneration has been quite evident promoting a significant increase in cutaneous healing, based on the paracrine effect, which acts mainly on the anti-inflammatory action. The aim of this study was to evaluate cell therapy applied in different cicatrization phases of cutaneous chronic wounds. For this were used 96 male Wistar rats, eight weeks old, weighing 250 to 300 grams. Of this total, 24 animals served as donors of gonadal fat for culture and isolation of MSCs. The other 72 were randomly divided into 3 groups: C (control), MSC1 (1 MSC application) and MSC2 (2 MSC applications). These groups were subdivided into three different time periods for evaluation: 7, 14 and 21 days. MSCs treatments were performed at 0 and 5 days after wound chronification. Wound and scar macroscopic evaluation was made, and wound fragments were collected for microscopic evaluation (HE and immunoistochemistry) at evaluation days. MSC2-21 days group had the biggest contraction rate (p<0,001). Mean collagen I, collagen III and FGF were significantly different between groups, in all evaluation days (p<0,001). Means contraction rate and Ki67 mark were different between groups and evaluation days (pInteraction = 0,039 and pInteraction = 0,018 respectively). MSC1 group had less frequent ulcer (p<0,05). MSC1-7 days had more chronic inflammation rate, while the other groups had subacute inflammation (p=0,006). The study results concludes that cell therapy benefits chronic wound healing, and two MSC application promotes greater contraction rate evaluated after 21 days of healing

Protocolo para estabelecimento de ferida cutânea crônica experimental em ratos Wistar (Rattus norvergicus)

Estudos sobre cronificação têm se mostrado cada vez mais importantes, visto que, tanto na medicina humana, quanto na medicina veterinária, tem sido comum a ocorrência de lesões crônicas, que muitas vezes apresentam dificuldade de cicatrização com terapia convencional. Por este motivo, o presente trabalho tem por objetivo estabelecer modelo de ferida crônica em ratos Wistar, com o uso de agentes químicos, comumente utilizados na rotina clínica como antissépticos, em doses consideradas tóxicas ao leito da ferida. Para isso, foram utilizados 48 ratos Wistar, machos, divididos em quatro grupos de 12 animais cada. (Controle, Polivinilpirrolidona - PVPI 1%, Clorexidina 1% e H2O2 35%). Os animais foram submetidos a anestesia inalatória e sofreram lesão circular de 1cm de diâmetro, confeccionada com o uso de trépano corneal. Foram realizadas duas feridas simétricas paralelas e em seguida à confecção iniciou-se a aplicação tópica dos agentes químicos, com auxílio de pipeta de 50μl, sendo instilados duas vezes ao dia, durante 15 ou 30 dias. As avaliações macroscópicas das feridas induzidas cirurgicamente eram realizadas a cada dois dias, através de medição com paquímetro, além de observação quanto a presenças de sangramentos e outras secreções. Foram avaliadas também através de histologia e imuno-histoquímica. Como resultados o grupo PVPI teve maior taxa de contração, cicatrizando em menor tempo que o grupo controle, embora essa diferença de tempo não tenha sido significativa estatisticamente; apesar das feridas se apresentarem cicatrizadas macroscopicamente, à avaliação histológica foi possível perceber que haviam alterações, dignas de processo cicatricial em curso; o grupo H2O2 proporcionou resultados positivos perante aquilo que foi proposto. Sugere-se que novos estudos sejam realizados, com o H2O2, nos quais os períodos de uso do agente sejam prolongados, superiores aos usados no presente estudo, utilizando ainda material de silicone, fixado nas bordas da ferida, com o intuito de evitar cicatrização por contração. Sugere-se também o uso de doses elevadas de analgésicos durante todo o tempo de experimento.Research on chronic lesions have been of increased interest in both human and veterinary medicine, as different conditions can delay and lead to difficulties on wound healing, even after conventional therapy has been instituted. Although there are several reports on experimental models for the study of acute wound healing, the establishment of chronic lesions using chemical agents, for scientific purposes, is scarce. This study pursued the development of a chronic skin wound model with chemical substances routinely used as antiseptics, in concentrations considered detrimental to injured tissue. For that, forty-eight Wistar rats were divided in four groups of 12 animals each, for of one of the topical treatments: povidone-iodine solution, 1% chlorhexidine, 35% hydrogen peroxide (H2O2), and control with 0.9% saline solution (NaCl). Under general anesthesia, two circular full skin defects, with 1cm diameter, were produced (with a corneal trephine) in the dorsal cervical region of all the animals. Immediately after the incisions, 50μl of one of the treatments were administrated twice daily, for either 15 or 30 days. Macroscopic evaluations were performed every other day, recording wound size (with a pachymeter) and occurrence of bleeding or exudates. Microscopically, at day 15 or 30, histologic and immunohistochemical studies were carried out with the complete removal of the wound or cicatricial region. Macroscopically, the povidone-iodine group showed faster wound contraction and healing rate than the control, yet, this difference was not statistically significant. Although, under clinical observation, the incised regions presented scar tissue, the histopathological evaluation of the respective specimens showed uncompleted healing process features. The hydrogen peroxide demonstrated promising results to the proposed intent. However, a bigger sample is needed to ascertain the found evidences. Furthermore, studies with longer or more frequent periods of substance exposure, along with devices to circumvent wound contraction and higher doses of analgesics, are recommended

Protocolo para estabelecimento de ferida cutânea crônica experimental em ratos Wistar (Rattus norvergicus)

Estudos sobre cronificação têm se mostrado cada vez mais importantes, visto que, tanto na medicina humana, quanto na medicina veterinária, tem sido comum a ocorrência de lesões crônicas, que muitas vezes apresentam dificuldade de cicatrização com terapia convencional. Por este motivo, o presente trabalho tem por objetivo estabelecer modelo de ferida crônica em ratos Wistar, com o uso de agentes químicos, comumente utilizados na rotina clínica como antissépticos, em doses consideradas tóxicas ao leito da ferida. Para isso, foram utilizados 48 ratos Wistar, machos, divididos em quatro grupos de 12 animais cada. (Controle, Polivinilpirrolidona - PVPI 1%, Clorexidina 1% e H2O2 35%). Os animais foram submetidos a anestesia inalatória e sofreram lesão circular de 1cm de diâmetro, confeccionada com o uso de trépano corneal. Foram realizadas duas feridas simétricas paralelas e em seguida à confecção iniciou-se a aplicação tópica dos agentes químicos, com auxílio de pipeta de 50μl, sendo instilados duas vezes ao dia, durante 15 ou 30 dias. As avaliações macroscópicas das feridas induzidas cirurgicamente eram realizadas a cada dois dias, através de medição com paquímetro, além de observação quanto a presenças de sangramentos e outras secreções. Foram avaliadas também através de histologia e imuno-histoquímica. Como resultados o grupo PVPI teve maior taxa de contração, cicatrizando em menor tempo que o grupo controle, embora essa diferença de tempo não tenha sido significativa estatisticamente; apesar das feridas se apresentarem cicatrizadas macroscopicamente, à avaliação histológica foi possível perceber que haviam alterações, dignas de processo cicatricial em curso; o grupo H2O2 proporcionou resultados positivos perante aquilo que foi proposto. Sugere-se que novos estudos sejam realizados, com o H2O2, nos quais os períodos de uso do agente sejam prolongados, superiores aos usados no presente estudo, utilizando ainda material de silicone, fixado nas bordas da ferida, com o intuito de evitar cicatrização por contração. Sugere-se também o uso de doses elevadas de analgésicos durante todo o tempo de experimento.Research on chronic lesions have been of increased interest in both human and veterinary medicine, as different conditions can delay and lead to difficulties on wound healing, even after conventional therapy has been instituted. Although there are several reports on experimental models for the study of acute wound healing, the establishment of chronic lesions using chemical agents, for scientific purposes, is scarce. This study pursued the development of a chronic skin wound model with chemical substances routinely used as antiseptics, in concentrations considered detrimental to injured tissue. For that, forty-eight Wistar rats were divided in four groups of 12 animals each, for of one of the topical treatments: povidone-iodine solution, 1% chlorhexidine, 35% hydrogen peroxide (H2O2), and control with 0.9% saline solution (NaCl). Under general anesthesia, two circular full skin defects, with 1cm diameter, were produced (with a corneal trephine) in the dorsal cervical region of all the animals. Immediately after the incisions, 50μl of one of the treatments were administrated twice daily, for either 15 or 30 days. Macroscopic evaluations were performed every other day, recording wound size (with a pachymeter) and occurrence of bleeding or exudates. Microscopically, at day 15 or 30, histologic and immunohistochemical studies were carried out with the complete removal of the wound or cicatricial region. Macroscopically, the povidone-iodine group showed faster wound contraction and healing rate than the control, yet, this difference was not statistically significant. Although, under clinical observation, the incised regions presented scar tissue, the histopathological evaluation of the respective specimens showed uncompleted healing process features. The hydrogen peroxide demonstrated promising results to the proposed intent. However, a bigger sample is needed to ascertain the found evidences. Furthermore, studies with longer or more frequent periods of substance exposure, along with devices to circumvent wound contraction and higher doses of analgesics, are recommended