Detección de anticuerpos anti-VIAA (virus asociado a la infección aftosa) mediante la técnica de ELISA, 2. Estimación del punto de corte positivonegativo para la clasificación de animales.

El antígeno VIAA (virus asociado a la infección aftosa) ha sido descrito como un antígeno no-estructural asociado a la replicación del virus de la fiebre aftosa, el cual induce anticuerpos específicos de la enfermedad, pero inespecíficos del tipo y subtipo de virus que lo origina. Para su detección se ha empleado la técnica de inmunodifusión en el gel de agar (IDGA), y actualmente se estandariza la técnica inmunoenzimática de ELISA-sandwich indirecta con fase líquida bloqueada. En este trabajo se estima el punto de corte positivo/negativo para esta técnica serológica, y se evalúa la sensibilidad y especificidad con relación a IDGA (prueba de referencia). Para el efecto, se analizaron 442 sueros de animales de distinta procedencia (área libre, área de vacunación y animales enfermos) y se calculó el título (logaritmo en base 10 para ELISA en 50 por ciento). Mediante la metodología del análisis discriminante se estimó el valor de 0.8450 logarítmico (antilogaritmo igual a 7) como punto de corte para clasificar por esta técnica un animal en la categoría de positivo o negativo al antígeno VIAA. Al analizar el esquema de clasificación según procedencia, se observó que ELISA posee una mayor sensibilidad y especificidad que la técnica de IDGA. Finalmente se concluye sobre la utilización de la técnica de ELISA para detectar anticuerpos VIAA en la vigilancia epidemiológica de las áreas libres de fiebre aftosa y en la selección de animales para control de la vacuna antiaftosa

Detección de anticuerpos anti-VIAA (virus asociado a la infección aftosa) mediante la técnica de ELISA, 1. Aplicación de la técnica de ELISA-sandwich indirecta con fase líquida bloqueada.

Este trabajo describe los procedimientos establecidos para preparar, titular los reactivos y aplicar la técnica de ELISA-Sandwich indirecta con fase líquida bloqueada, utilizada para evaluar, detectar y cuantificar anticuerpos VIAA (virus asociado a la infección aftosa), así como para evaluar la repetitividad del método y estimar los valores de referencia. Se obtuvo el título serológico ELISA 50 por ciento (logaritmo en base 10) en 442 sueros de distinta procedencia. Respecto a los controles, los resultados indican un coeficiente de variación en la lectura de absorvancia a 492 nm, de 18 por ciento (suero positivo), 8 por ciento (suero negativo), 4 por ciento (antígeno VIAA) en pruebas realizadas en 8 días diferentes. Los límites de confianza (95 por ciento) para la absorbancia media del antígeno VIAA (Li, 1.59, Ls igual a 1.83) se consideran como valores de diferencia de la técnica. Se concluye sobre la utilidad del método como prueba de rutina en los laboratorios de control de la vacuna y áreas declaradas libres de la enfermedad. Se establece la necesidad de establecer un punto de corte del título serológico ELISA 50 por ciento que permita clasificar un animal como positivo o negativo al antígeno VIA

Comparación de metodologías para la purificación de proteínas de membrana externa de Brucella abortus.

Las proteínas de la membrana externa de la Brucella abortus, Cepa 19 y RB-51 se purificaron por dos métodos, el primero basado en la extracción secuencial por tratamientos sucesivos con detergentes y lisozima y el segundo, en la formación del saco de peptidoglican con sus proteínas asociadas, utilizando dodecil sulfato de so-dio (SOS) a 50°C y extracción directa de las proteínas de la membrana externa con 50 mM de MgCl2 en SDS-23 Mercaptoetanol a 37°. Se utilizó la sonicacion para lograr la ruptura bacterial y su efecto se comprobó por microscopia electrónica. Las proteínas obtenidas se caracterizaron por electroforesis en geles de poliacrilamida. El método de extracción por detergentes aniònicos débiles y dipolares y tratamiento con lisozima, comprobó ser superior en calidad, selectividad y concentración de las proteínas de interés. Los pesos moleculares obtenidos para las proteínas denominadas porinas van de 37 a 41 kilo Daltons (k0), asi mismo se detecta una proteína de bajo peso molecular (14kI3). Se detecto reacción especifica de las proteínas en sueros controles de bovinos con infección natural de B. abortus por to técnica de inmunotransferencia en papel de nitrocelulosa.Outer membrane proteins of Bruce/la abortus strain 19 and strain RB-51 were purified using two methods. One based on sequential detergent extraction plus iysosyme treatment and the other obtaining peptidoglican saculae associated proteins by sodium dodecil sulfate (SDS) treatment at 50°C, and external protein extraction with SDS-23 mercaptoetanol, 50 mM MgCl2 at 37°C. Sonication was used in order to disrupt the cells and its effect was monitored by electron microscopy. The proteins were characterized by polycrilamide gel electrophoresis. Detergent and lysozyme treatment demonstrated superiority over SDS extraction regarding selectivity, antigenicity and yield. The proteins obtained from strain RB-51 had less LPS contamination. The molecular weights of the porin proteins obtained ranged between 37 and 41 kD, and a 14 kD protein was also detected. Specific reaction of the purified proteins was detected by western-blotting with positive bovine control serums.Ganado de leche-Ganadería lech

Cell interactions, signals and transcriptional hierarchy governing placode progenitor induction

In vertebrates, cranial placodes contribute to all sense organs and sensory ganglia and arsise from a common pool of Six1/Eya2+ progenitors. Here we dissect the events that specify ectodermal cells as placode progenitors using newly identified genes upstream of the Six/Eya complex. We show that two different tissues, the lateral head mesoderm and the prechordal mesendoderm, gradually induce placode progenitors: cells pass through successive transcriptional states, each identified by distinct factors and controlled by different signals. Both tissues initiate a common transcriptional state, but over time impart regional character and the acquisition of anterior identity depends on Shh signalling. Using a network inference approach we predict the regulatory relationships among newly identified transcription factors and verify predicted links using knock-down experiments. Based on this analysis we propose a new model for placode progenitor induction, in which the initial induction of a generic transcriptional state precedes regional divergence

La agroindustria panelera en Colombia. Pequeña producción y relaciones inter empresariales

La panela es un producto alimenticio agroindustrial, de muy alto consumo nacional, elaborado mediante la deshidratación de los jugos de la cafia de azúcar sin someterlos a procesos de cristalización. El cultivo de la cafia panel era y su procesamiento para obtener la panela están diseminados por toda la geografía andina del país. En casi todas las regiones se establecen relaciones más o menos complejas entre propietarios de tierra, cultivadores, propietarios de trapiches y encargados de la molienda (proceso para obtener la panela) que confluyen en diversos modelos de asociacióninterempresarial. El papel tradicional de los propietariosrentistas y de los aparceros explotados, ha sido desplazado substancialmente por un sistema en que los propietarios de tierra, los «aparceros» y los comerciantes juegan, según el caso, un papel fundamental en la financiación monetaria de un proceso de producción que aunque conserva su carácter familiar, es cada vez más exigente en dinero. Se ha comprobado que la economía empresarial traslada a la subremuneración del trabajo familiar las pérdidas cuando caen los precios de la panela. El análisis del mercado ha mostrado una gran inestabilidad de los precios, explicada por la falsificacion masiva de paneloa a partir de azucar

La agroindustria panelera en Colombia. Pequeña producción y relaciones inter empresariales

La panela es un producto alimenticio agroindustrial, de muy alto consumo nacional, elaborado mediante la deshidratación de los jugos de la cafia de azúcar sin someterlos a procesos de cristalización. El cultivo de la cafia panel era y su procesamiento para obtener la panela están diseminados por toda la geografía andina del país. En casi todas las regiones se establecen relaciones más o menos complejas entre propietarios de tierra, cultivadores, propietarios de trapiches y encargados de la molienda (proceso para obtener la panela) que confluyen en diversos modelos de asociacióninterempresarial. El papel tradicional de los propietariosrentistas y de los aparceros explotados, ha sido desplazado substancialmente por un sistema en que los propietarios de tierra, los «aparceros» y los comerciantes juegan, según el caso, un papel fundamental en la financiación monetaria de un proceso de producción que aunque conserva su carácter familiar, es cada vez más exigente en dinero. Se ha comprobado que la economía empresarial traslada a la subremuneración del trabajo familiar las pérdidas cuando caen los precios de la panela. El análisis del mercado ha mostrado una gran inestabilidad de los precios, explicada por la falsificacion masiva de paneloa a partir de azucar