MBSP1: a biosurfactant protein derived from a metagenomic library with activity in oil degradation

Microorganisms represent the most abundant biomass on the planet; however, because of several cultivation technique limitations, most of this genetic patrimony has been inaccessible. Due to the advent of metagenomic methodologies, such limitations have been overcome. Prevailing over these limitations enabled the genetic pool of non-cultivable microorganisms to be exploited for improvements in the development of biotechnological products. By utilising a metagenomic approach, we identifed a new gene related to biosurfactant production and hydrocarbon degradation. Environmental DNA was extracted from soil samples collected on the banks of the Jundiaí River (Natal, Brazil), and a metagenomic library was constructed. Functional screening identifed the clone 3C6, which was positive for the biosurfactant protein and revealed an open reading frame (ORF) with high similarity to sequences encoding a hypothetical protein from species of the family Halobacteriaceae. This protein was purifed and exhibited biosurfactant activity. Due to these properties, this protein was named metagenomic biosurfactant protein 1 (MBSP1). In addition, E. coli RosettaTM (DE3) strain cells transformed with the MBSP1 clone showed an increase in aliphatic hydrocarbon degradation. In this study, we described a single gene encoding a protein with marked tensoactive properties that can be produced in a host cell, such as Escherichia coli, without substrate dependence. Furthermore, MBSP1 has been demonstrated as the frst protein with these characteristics described in the Archaea or Bacteria domains

Cotrimoxazole enhances the in vitro susceptibility of Coccidioides posadasii to antifungals

The aim of the present study was to evaluate the effect of cotrimoxazole on the in vitro susceptibility of Coccidioides posadasii strains to antifungals. A total of 18 strains of C. posadasii isolated in Brazil were evaluated in this study. The assays were performed in accordance with the Clinical and Laboratory Standards Institute guidelines and the combinations were tested using the checkerboard method. The minimum inhibitory concentrations were reduced by 11, 2.4, 4.3 and 3.5 times for amphotericin B, itraconazole, fluconazole and voriconazole, respectively. Moreover, it was seen that cotrimoxazole itself inhibited C. posadasii strains in vitro. The impairment of folic acid synthesis may be a potential antifungal target for C. posadasii.Universidade Federal do Ceará Centro Especializado em Micologia MédicaUniversidade Federal do Ceará Programa de Pós-Graduação em Ciências MédicasUniversidade Federal do Ceará Departamento de QuímicaUniversidade Federal do Ceará Departamento de EstatísticaUniversidade Estadual do Ceará Programa de Pós-Graduação em Ciência VeterináriaUniversidade Federal de São Paulo (UNIFESP) Departamento de Microbiologia, Imunologia e ParasitologiaUNIFESP, Depto. de Microbiologia, Imunologia e ParasitologiaSciEL

Anomalia de Ebstein com comunicação interatrial em paciente gestante com pré-eclâmpsia: um raro relato de caso

A Anomalia de Ebstein (AE) é uma cardiopatia congênita rara, ocorre em apenas 1% das más formações cardíacas. É uma alteração da implantação dos folhetos da valva tricúspide, ocorre o aumento do volume do átrio direito e a atrialização do ventrículo direito. Geralmente, possui uma evolução clínica lenta, com sintomas aparecendo em idade avançada. A comunicação interatrial (CIA), também consiste em uma cardiopatia congênita, do tipo acianótica, comumente assintomática, com prevalência de 5 a 10% de todas as cardiopatias, mais comum em mulheres. Baseia-se na formação de um “shunt” esquerdo-direito, podendo causar hiperfluxo da veia pulmonar. Por outro lado, a pré-eclâmpsia é uma complicação gestacional detectada na vigésima semana. É uma disfunção materno/placentária responsável por elevação da pressão arterial (> 140/90 mmHg), associada a lesão de órgão alvo, proteinúria ou disfunção útero/placentária. Neste estudo, o objetivo é relatar as complicações desenvolvidas durante a gestação em paciente que possuía essa rara associação de comorbidades. Paciente feminina, 20 anos, primigesta com 30 semanas e 4 dias, vista em USG obstétrico, com descontrole pressórico desde de o início da gestação. Cardiopata, sem acompanhamento, apresentando EA e IA (diagnóstico em laudo de 2008). Foi admitida em Unidade de Terapia Intensiva (UTI) com dispneia, saturação de O2 de 91%, pressão de 150/100 mmHg. Após estabilização, solicitados pareceres para cardiologia, obstetrícia e risco anestésico. USG obstétrico mostrou compartimento fetal alterado e relação cérebro/placentária alterada. No 2º dia, após corticoterapia, paciente retorna do centro-cirúrgico após cesariana, acoplada à ventilação mecânica invasiva, devido à descompensação. Radiografia pós-cirurgia mostrou pequeno derrame pleural bilateral. Mantida Cefalotina por mais 2 dias. No dia 3, TC de tórax revelou derrame persistente e consolidações, iniciando Ceftriaxone e Clindamicina. Noradrenalina iniciada após descompensação hemodinâmica. No dia 6, após teste de respiração espontânea bem-sucedido, o ecocardiograma evidenciou AE, insuficiência tricúspide acentuada e mitral leve. Sem critérios graves, a paciente foi transferida para a enfermaria para seguimento e término da antibioticoterapia. A gestação pode agravar riscos em pacientes com comorbidades raras como anomalias cardíacas congênitas. O acompanhamento específico é crucial e, em casos graves, a gravidez deve ser evitada

Coccidioides posadasii de origem clÃnica e ambiental: um estudo da diversidade genÃtica

Coccidiodomycosis is a systemic infection, predominantly pulmonary, caused by the geophilic and dimorphic fungi, Coccidioides immitis and Coccidioides posadasii. In Brazil, coccidioidomycosis is associated with semi-arid areas in the Northeastern region of this country, which is considered one of the endemic areas of this disease in South America. These pathogens are morphologically indistinguishable species, but they exhibit molecular differences. Different molecular techniques have been described for the characterization of these species. The nuclear ribosomal DNA (rDNA) from Coccidioides spp. has been described as an important molecular marker for the identification, taxonomy and phylogeny. Currently, there are still shortages of maps for epidemiological approaches in order to direct the correlation between populations of Coccidioides spp. and the outbreaks of coccidiomycosis. Given the above, this study aimed at performing the molecular identification of 18 clinical and environmental isolates of C. posadasii, from Northeastern Brazil, maintained in the fungal collection of the Specialized Medical Mycology Center (CEMM), through PCR, as well as, to analyze the genetic diversity of these isolates by sequencing of 18S-28S regions of nuclear rDNA. The identification of the isolates was performed through PCR, using specific primers Coi9-1F and Coi9-R. The sequencing of the 18S-28S rDNA regions was performed through the method of chain termination by dideoxynucleotides, using the kit DYEnamicTM ET terminators cycle sequencing (GE Healthcare). The results confirmed the identification of all strains included in this study as belonging to the species C. posadasii. The phylogenetic tree based on 18S-28S rDNA region of C. posadasii from CEMM and Coccidioides spp. from Genbank. reveals the formation of a unique cluster encompassing the following strains CEMM 05-2-063, CEMM 05-2-064, CEMM 05-2-066 and CEMM 05-2-065, in a properly sustained branch, which apparently seems to group these isolates according to their geographical origin. The strains of C. posadasii showed lower genetic divergence in the ITS1 and ITS2 regions, when compared to strains of C. immitis. Analyses did not detect differences between strains of clinical origin and those of environmental origin. Further studies involving the analysis of fast evolving markers, such as microsatellites, can provide evidences to determine whether the groups found in this study are derived from a lineage of clonal reproduction.A coccidioidomicose à uma infecÃÃo sistÃmica, predominantemente pulmonar, causada pelos fungos dimÃrficos e geofÃlicos, Coccidioides immitis e Coccidioides posadasii. No Brasil, a coccidioidomicose està associada a locais situados na zona semi-Ãrida da regiÃo Nordeste, considerada uma das Ãreas endÃmicas da doenÃa na AmÃrica do Sul. Estes patÃgenos consistem em espÃcies morfologicamente indistinguÃveis, mas que exibem diferenÃas moleculares peculiares. O DNA ribossÃmico nuclear (rDNA) de Coccidioides spp. tem sido apontado como importante marcador molecular utilizado na identificaÃÃo, taxonomia e filogenia. Atualmente, ainda hà escassez de mapas de abordagens epidemiolÃgicas para direcionar a correlaÃÃo entre as populaÃÃes de Coccidioides spp. com os surtos de coccidioidomicose. Diante do exposto, este estudo teve por objetivo, realizar a identificaÃÃo molecular de 18 isolados clÃnicos e ambientais de C. posadasii, oriundos do Nordeste brasileiro, mantidos na Micoteca do Centro Especializado em Micologia MÃdica (CEMM), atravÃs da tÃcnica de PCR, bem como, analisar a diversidade genÃtica destes isolados por meio do seqÃenciamento das regiÃes 18S-28S do rDNA nuclear. A identificaÃÃo dos isolados foi realizada por PCR utilizando os primers especÃficos Coi9-1F e Coi9-R. O sequenciamento das regiÃes 18S-28S rDNA foi realizado pelo mÃtodo da terminaÃÃo da cadeia pelo didesoxinucleotÃdeo, usando-se o kit DYEnamicTM ET terminators cycle sequencing (GE Healthcare). Os resultados confirmaram a identificaÃÃo de todas as cepas incluÃdas neste estudo, como pertencentes à espÃcie C. posadasii. A Ãrvore filogenÃtica, baseada na regiÃo 18S-28S rDNA de C. posadasii do CEMM, juntamente com sequÃncias de Coccidioides spp. depositadas no Genbank. revela a formaÃÃo de um cluster exclusivo englobando as cepas CEMM 05-2-063, CEMM 05-2-064, CEMM 05-2-065 e CEMM 05-2-066, em um ramo adequadamente sustentado, que aparentemente parece agrupar estes isolados segundo sua origem geogrÃfica. As cepas de C. posadasii apresentaram menor Ãndice de divergÃncia genÃtica nas regiÃes ITS1 e ITS2, quando comparadas Ãs cepas de C. immitis A anÃlise nÃo detectou diferenÃas entre as cepas de origem clÃnica e as de origem ambiental. Estudos posteriores envolvendo a anÃlise de marcadores de evoluÃÃo mais rÃpida, os microssatÃlites, podem fornecer evidÃncias para determinar se os agrupamentos encontrados neste estudo sÃo resultantes de uma linhagem de reproduÃÃo clonal

Coccidioidomycosis and Histoplasmosis in Equines: An Overview to Support the Accurate Diagnosis

Fungal infections of the respiratory tract of horses are not as frequent as those of bacterial and viral origin, often leading to worsening of clinical conditions due to misdiagnosis and incorrect treatment. Coccidioidomycosis and histoplasmosis are systemic mycoses caused by the dimorphic fungi Coccidioides spp. and Histoplasma capsulatum, respectively, which affect humans and a variety of other animals, including equines. These systemic mycoses of chronic and progressive nature can exhibit clinical manifestations similar to other microbial infections. Thus, this article broadly discusses the epidemiology, etiology, virulence, pathogenesis, clinical presentation, treatment, and diagnostic strategies of coccidioidomycosis and histoplasmosis, to support accurate diagnosis. (C) 2016 Elsevier Inc. All rights reserved.National Scientific and Technological Research CouncilBrazil (CNPq)Univ Fed Ceara, Postgrad Program Med Microbiol, Specialized Med Mycol Ctr, Dept Pathol & Legal Med,Sch Med, BR-60430275 Fortaleza, Ceara, BrazilUniv Estadual Ceara, Postgrad Program Vet Sci, Sch Vet, Fortaleza, Ceara, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Dept Microbiol Immunol & Parasitol, Sao Paulo, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Dept Microbiol Immunol & Parasitol, Sao Paulo, BrazilCNPq: 445670/2014-2CNPq: 552161/2011-0Web of Scienc

In Vitro Effect of Sulfamethoxazole-Trimethoprim against Histoplasma capsulatum var. capsulatum▿

This study evaluated the in vitro effect of sulfamethoxazole-trimethoprim against Histoplasma capsulatum var. capsulatum isolated from HIV-positive patients. The drugs were tested by microdilution testing in accordance with the CLSI guidelines. All of the strains were inhibited by sulfamethoxazole-trimethoprim, with MIC ranges of 0.039 (sulfamethoxazole)/0.0078 (trimethoprim) mg/ml to 0.625/0.125 mg/ml for mycelial forms and 0.0025/0.0005 to 0.02/0.004 mg/ml for yeast-like forms. However, in vivo studies are necessary to evaluate the significance of these results

Synergistic Effect of Antituberculosis Drugs and Azoles In Vitro against Histoplasma capsulatum var. capsulatum▿

This study evaluated in vitro interactions of antituberculosis drugs and triazoles against Histoplasma capsulatum. Nine drug combinations, each including an antituberculosis drug (isoniazid, pyrazinamide, or ethambutol) plus a triazole (itraconazole, fluconazole, or voriconazole), were tested against both growth forms of H. capsulatum. Stronger synergistic interactions were seen in isoniazid or pyrazinamide plus triazoles for the mold form and ethambutol plus voriconazole for the yeast-like form. Further studies should evaluate these combinations in vivo