Characterization of the protein phosphatase 1E (PPM1E) - Localisation and truncation in brain tissue and effects on neuronal morphology in primary neuronal culture

Die Alzheimer sche Erkrankung (Alzheimer s disease, AD) ist eine progressive, neurodegenerative Krankheit, die durch frühe Defizite im Lernen und Gedächtnis, mit letztendlichem Verlust von höheren kognitiven Funktionen, charakterisiert ist. Obwohl erhebliche Fortschritte im Verstehen der histologischen Veränderungen während der Krankheit gemacht wurden, sind alle heute zur Verfügung stehenden Therapien symptomatisch und die Mechanismen, die dem initialen Entstehen von AD zu Grunde liegen sind immer noch unklar. In einem Screen von humanem Gehirngewebe aus verschiedenen AD Stadien, wie repräsentiert durch die Braak Einstufung, ist die gehirnspezifische Proteinphosphatase 1E (PPM1E) durch ihre starke Hochregulation in frühen AD-Stadien aufgefallen. PPM1E wurde nie zuvor mit neurologischen Erkrankungen oder Demenz in Verbindung gebracht, allerdings war es bekannt, dass PPM1E die Ca2+/calmodulin-abhängigen Kinasen (CaMK) IV und II und die p21-aktivierte Kinase (PAK) 1 negativ reguliert. Diese Kinasen sind wichtige Regulatoren des Aktinzytoskeletts in dendritischen Spines und neuronalen Dendriten. Der Verlust an dendritischen Spines und Dystrophie von Dendriten kann im AD-beeinträchtigten Gehirn beobachtet werden. Eine negative Regulation der CaMKII, CaMKIV und PAK1 Kinasen könnte potentiell mit diesen frühen Veränderungen zusammenhängen. Die vorliegende Studie hat den Einfluss von PPM1E auf neuronale Morphologie in primärer Neuronenkultur evaluiert und versucht die zuvor wenig verstandene Phosphatase ausführlicher zu charakterisieren. Die vorliegende Studie zeigte, dass die Erhöhung der PPM1E mRNA Level in humanen Gehirngewebeproben in frühen Stadien der Alzheimer schen Erkrankung sich auch auf der Proteinebene widerspiegelte. PPM1E zeigte konservierte subzelluläre, prädominant zytoplasmatische Lokalisation und Proteintrunkierung in humanem Gehirngewebe in verschiedenen Braak Stadien, in Rattengehirngeweben und in maturierter, dissoziierter Rattenprimärkultur. Die subzelluläre Lokalisation von PPM1E veränderte sich graduell während der Maturierung der dissoziierten Primärkultur, von einer hauptsächlich kernbasierten Lokalisation in Richtung einer zytoplasmatischen Lokalisation in weiter maturierter Primärkultur. Außerdem war PPM1E angereichert an Stellen mit hoher Mitochondriendichte in den Dendriten der maturierten, dissoziierten hippocampalen Kultur. Obwohl vorgeschlagen worden war, dass CaMKIIα, CaMKIV and PAK1 durch PPM1E dephosphoryliert werden, hat die vorliegende Studie gefunden, dass erhöhte PPM1E Level keinen signifikanten Effekt auf den Phosphorylierungszustand der Kinase in maturierten dissoziierten Primärneuronen haben, während sie die Gesamtexpression der CaMKIV signifikant beeinflussen. Ferner hatten erhöhte Werte von PPM1E einen degenerativen Effekt auf die Anzahl von dendritischen, pilzförmigen Spines in maturierter Neuronenkultur, während Herunterregulation von PPM1E zu einer Erhöhung der Zahl von stummeligen Spines führte. Die Anzahl der Primärdendriten wurde sowohl von einer Herunter- als auch von einer Hochregulation von PPM1E in diesen dissoziierten Kulturen negativ beeinflusst. Folglich könnte eine frühe Dysregulation von PPM1E in der Alzheimer schen Erkrankung die Dendritenmorphogenese und die Morphogenese von dendritischen Spines oder deren Homöostase negativ beeinflussen. Eine Inhibition von PPM1E in früheren Alzheimer Stadien könnte den fortschreitenden kognitiven Abbau verzögern oder bestenfalls sogar stoppen. PPM1E könnte daher ein vielversprechendes neues Drug-Target für neurodegenerative Erkrankungen und besonders für AD sein

The hot pick-up technique for batch assembly of van der Waals heterostructures

The assembly of individual two-dimensional materials into van der Waals heterostructures enables the construction of layered three-dimensional materials with desirable electronic and optical properties. A core problem in the fabrication of these structures is the formation of clean interfaces between the individual two-dimensional materials which would affect device performance. We present here a technique for the rapid batch fabrication of van der Waals heterostructures, demonstrated by the controlled production of 22 mono-, bi- and trilayer graphene stacks encapsulated in hexagonal boron nitride with close to 100% yield. For the monolayer devices we found semiclassical mean free paths up to 0.9 micrometer, with the narrowest samples showing clear indications of the transport being affected by boundary scattering. The presented method readily lends itself to fabrication of van der Waals heterostructures in both ambient and controlled atmospheres, while the ability to assemble pre-patterned layers paves the way for complex three-dimensional architectures.Comment: 32 pages, 6 figures, 34 references, 14 supplementary figure

Quantitative optical mapping of two-dimensional materials

The pace of two-dimensional materials (2DM) research has been greatly accelerated by the ability to identify exfoliated thicknesses down to a monolayer from their optical contrast. Since this process requires time-consuming and error-prone manual assignment to avoid false-positives from image features with similar contrast, efforts towards fast and reliable automated assignments schemes is essential. We show that by modelling the expected 2DM contrast in digitally captured images, we can automatically identify candidate regions of 2DM. More importantly, we show a computationally-light machine vision strategy for eliminating false-positives from this set of 2DM candidates through the combined use of binary thresholding, opening and closing filters, and shape-analysis from edge detection. Calculation of data pyramids for arbitrarily high-resolution optical coverage maps of two-dimensional materials produced in this way allows the real-time presentation and processing of this image data in a zoomable interface, enabling large datasets to be explored and analysed with ease. The result is that a standard optical microscope with CCD camera can be used as an analysis tool able to accurately determine the coverage, residue/contamination concentration, and layer number for a wide range of presented 2DMs

The Danish National Chronic Myeloid Neoplasia Registry

AIM: The Danish National Chronic Myeloid Neoplasia Registry (DCMR) is a population-based clinical quality database, introduced to evaluate diagnosis and treatment of patients with chronic myeloid malignancies. The aim is to monitor the clinical quality at the national, regional, and hospital departmental levels and serve as a platform for research. STUDY POPULATION: The DCMR has nationwide coverage and contains information on patients diagnosed at hematology departments from January 2010 onward, including patients with essential thrombocythemia, polycythemia vera, myelofibrosis, unclassifiable myeloproliferative neoplasms, chronic myelomonocytic leukemia, and chronic myeloid leukemia. MAIN VARIABLES: Data are collected using standardized registration forms (so far up to four forms per patient), which are consecutively filled out online at time of diagnosis, after 2-year and 5-year follow-ups, and at end of follow-up. The forms include variables that describe clinical/paraclinical assessments, treatment, disease progression, and survival – disease-specific variables – as well as variables that are identical for all chronic myeloid malignancies. DESCRIPTIVE DATA: By the end of 2014, the DCMR contained data on 2,690 patients with an inclusion rate of ∼500 patients each year. Since the registry was established, annual reports have shown consistently high national coverage and data completeness, ≥90% and ≥88%, respectively. CONCLUSION: The DCMR is a national database used for monitoring the quality of patient care in patients with chronic myeloid malignancies, but until validation has been conducted, the data must be used with caution. However, the DCMR is a valuable data source accessible to clinicians and researchers

Використання event-маркетингу в плануванні діяльності ТОВ «Микулинецький Бровар»

Акцентується увага на необхідності створення маркетингового плану для будь-якого підприємства, незалежно від форми власності та розмірів. Розглянуто сутність event - маркетингу та запропоновано event - заходи для реалізації маркетингового плану ТОВ«Мукулинецький Бровар»Accentuates the need to create a marketing plan for any enterprise, regardless of firm size. The essence of event - and proposed marketing event - measures to implement a marketing plan Ltd. Mukulynetskyy Brova