Sélection et intégration d'une souche probiotique fonctionnelle dans une matrice sèche

Probiotics are live microorganisms that can act on the immune system at specific sites in the gastro-intestinal tract. From a technological point of view, the development of a dietary supplement containing viable and functional probiotics requires the control of the selection and production steps. In a first time, we have developed specific and sensitive screening tests to determine the ability of bacteria to be dried and the origin of its sensitivity. To develop these tests, we investigated the mechanisms involved during drying process. Thus, microorganisms simultaneously undergo osmotic stress and oxidative stress. Results show a strong impact of drying on the survival rate and immunomodulatory potential with a decrease of proinflammatory cytokines (IL-12). To protect probiotic bacteria, three optimization strategies have been developed: drying by foam formation, encapsulation of probiotic bacteria using a pea-protein alginate matrix and drying of a sensitive probiotic strain with a resistant bacterium. Knowledge obtained during this study was used to optimize the industrial process of the final strain of the project. A randomized double blinded (RDB) trial is in progress (2011-2013) to test the bacteria in humansLes probiotiques sont des micro-organismes vivants, capables d’interagir avec le microbiote et les cellules de l’organisme hôte. Par leurs présences ou leurs métabolismes, ils contribuent notamment à la régulation du système immunitaire. D’un point de vue technologique, le développement d’un complément alimentaire contenant des probiotiques nécessite la maitrise des étapes de sélection et de production d’une bactérie fonctionnelle sous forme sèche et revivifiable. Au cours de ce travail, nous avons développé des tests de criblage en cytométrie en flux, permettant de déterminer l’aptitude d’une bactérie à être séchée et l’origine de sa sensibilité. Pour mettre en place ces tests, nous nous sommes intéressés aux mécanismes mis en jeu lors du procédé de séchage. Ainsi, lors de la déshydratation, les micro-organismes vont subir simultanément un stress osmotique et un stress oxydant. Les résultats montrent un fort impact du séchage sur la viabilité et le potentiel immuno-modulateur avec une diminution de la composante pro-inflammatoire (IL-12). Pour protéger les bactéries, trois stratégies d’optimisation ont été développées : le séchage par formation de mousse, l’encapsulation dans une matrice alginate-protéines de pois, et le co-séchage d’une bactérie fragile avec une bactérie résistante. Les connaissances acquises au cours de cette étude ont permis d’optimiser la production industrielle de la souche finale du projet. Afin de répondre au nouveau cadre réglementaire européen, une étude clinique en double aveugle contre placébo est actuellement en cours (2011-2013

Mesure de l’acidité des zéolites par adsorption d’indicateurs colorés

La détermination du nombre et de la force des sites acides des zéolites est réalisée par une méthode de titrage indirecte établie à partir du déplacement par la pyridine d’une fraction d’indicateur coloré préalablement adsorbé à la surface du solide. Pour que les résultats soient rigoureux, les indicateurs utilisés sont des anilines primaires et appartiennent à la même fonction d’acidité H’o de Hammet ; les mesures sont effectuées par spectrophotométrie UV. Nous mettons en évidence une sigmoide de protonation analogue à celle obtenue en milieu homogène dans les titrages acide-base classiques

Selection and integration of a new immunomodulatory probiotic strain in a food supplement

Les probiotiques sont des micro-organismes vivants, capables d’interagir avec le microbiote et les cellules de l’organisme hôte. Par leurs présences ou leurs métabolismes, ils contribuent notamment à la régulation du système immunitaire. D’un point de vue technologique, le développement d’un complément alimentaire contenant des probiotiques nécessite la maitrise des étapes de sélection et de production d’une bactérie fonctionnelle sous forme sèche et revivifiable. Au cours de ce travail, nous avons développé des tests de criblage en cytométrie en flux, permettant de déterminer l’aptitude d’une bactérie à être séchée et l’origine de sa sensibilité. Pour mettre en place ces tests, nous nous sommes intéressés aux mécanismes mis en jeu lors du procédé de séchage. Ainsi, lors de la déshydratation, les micro-organismes vont subir simultanément un stress osmotique et un stress oxydant. Les résultats montrent un fort impact du séchage sur la viabilité et le potentiel immuno-modulateur avec une diminution de la composante pro-inflammatoire (IL-12). Pour protéger les bactéries, trois stratégies d’optimisation ont été développées : le séchage par formation de mousse, l’encapsulation dans une matrice alginate-protéines de pois, et le co-séchage d’une bactérie fragile avec une bactérie résistante. Les connaissances acquises au cours de cette étude ont permis d’optimiser la production industrielle de la souche finale du projet. Afin de répondre au nouveau cadre réglementaire européen, une étude clinique en double aveugle contre placébo est actuellement en cours (2011-2013)Probiotics are live microorganisms that can act on the immune system at specific sites in the gastro-intestinal tract. From a technological point of view, the development of a dietary supplement containing viable and functional probiotics requires the control of the selection and production steps. In a first time, we have developed specific and sensitive screening tests to determine the ability of bacteria to be dried and the origin of its sensitivity. To develop these tests, we investigated the mechanisms involved during drying process. Thus, microorganisms simultaneously undergo osmotic stress and oxidative stress. Results show a strong impact of drying on the survival rate and immunomodulatory potential with a decrease of proinflammatory cytokines (IL-12). To protect probiotic bacteria, three optimization strategies have been developed: drying by foam formation, encapsulation of probiotic bacteria using a pea-protein alginate matrix and drying of a sensitive probiotic strain with a resistant bacterium. Knowledge obtained during this study was used to optimize the industrial process of the final strain of the project. A randomized double blinded (RDB) trial is in progress (2011-2013) to test the bacteria in human

Catalyse tandem pour la protection régiosélective de saccharides (vers l'élaboration de sulfoglycolipides mycobactériens)

L accès par voie chimique à des oligosaccharides nécessite souvent le recours à de nombreuses étapes de protection-déprotection. Au cours de ce projet de thèse, une méthodologie pour la protection régiosélective et orthogonale des fonctions alcool de disaccharides dérivant de la biomasse a tout d abord été développée. Les glycopyranosides protégés ont été préparés par catalyse tandem au FeCl3 6H2O en réalisant dans le même pot des réactions d acétalation, d éthérification réductrice, d acétylation et/ou d ouverture réductrice régiosélective d acétals. Dans un second temps, une stratégie de synthèse flexible, rapide et performante pour accéder à des sulfoglycolipides diacylés et tétraacylés comportant un cœur tréhalose a été mise au point. Ces molécules sont produites par Mycobacterium tuberculosis, l agent pathogène responsable de la tuberculose, et les sulfoglycolipides diacylés pourraient permettre l élaboration d un nouveau vaccin contre cette maladie. Des sulfoglycolipides diacylés et tétraacylés comportant des chaînes monométhylées chirales ont été obtenus. Les précurseurs des acides gras chiraux utilisés au cours de la synthèse ont été analysés par spectroscopie RMN du deutérium en abondance naturelle dans des cristaux liquides chiraux.The synthesis of oligosaccharides often requires long sequences of protection-deprotection steps. For a rapid access to suitably protected glycopyranosides, we have developed a one-pot regioselective protection strategy based on FeCl3 6H2O-tandem catalyzed reactions (acetalation, acetylation, reductive etherification, regioselective ring opening of acetal). This procedure was applied to persilylated disaccharides derived from biomass. This methodology allowed the development of a fast, efficient and flexible access to diacylated and tetraacylated sulfoglycolipids based on a trehalose core. These molecules are found in the cell wall of Mycobacterium tuberculosis and the diacylated sulfoglycolipids appear to be promising candidates for the development of a new tuberculosis vaccine. Synthetics diacylated and tetraacylated sulfoglycolipids bearing chiral monomethylated fatty chains were produced. The chiral fatty-acid precursors, used in the procedure, were synthetized and analyzed by NMR spectroscopy of natural abundance deuterium in chiral liquid crystals.PARIS11-SCD-Bib. électronique (914719901) / SudocSudocFranceF

Le test de diagnostic rapide dans l'angine (enquête en Haute-Normandie sur son utilisation par des médecins généralistes formés ou non)

Au début des années 2000, 90% des 9 millions d'angines diagnostiquées en France étaient traitées par antibiotiques. Depuis 2002 les médecins disposent de Test de Diagnostic Rapide (TDR) des angines streptococciques qui seules nécessitent une antibiothérapie. Nous avons voulu, par notre étude, évaluer l'appropriation de cet outil par les médecins généralistes haut-normands et son impact sur leurs prescriptions. 105 généralistes ont répondu à une enquête téléphonique sur le TDR et 24 ont poursuivi l'étude en participant à une enquête prospective incluant 118 cas d'angines. Sur les 105 médecins interrogés, 59 ont participé à une formation conventionnelle sur l'utilisation des TDR et 56%, soit 80% des médecins formés, l'utilisent actuellement, dont 30% de façon systématique. La raison de non utilisation du TDR la plus souvent invoquée est le manque de temps. Or, sa pratique n'allonge pas de façon systématique la durée de consultation. Les médecins qui ont adopté le TDR l'utilisent dans 80% des cas d'angines. En cas de négativité du test, un antibiotique est prescrit dans 4% des cas. Cependant un contrôle par culture n'est pratiquement jamais réalisé. Quand un TDR n'est pas pratiqué le médecin est guidé par son intuition clinique qui est rarement en corrélation avec un score de Mac Isaac. Ce score est peu connu et peu utilisé en pratique. Sur les 118 cas d'angines, un antibiotique a été prescrit dsans 58% des cas. Notons que les macrolides sont prescrits dans 30% des cas et souvent de manière injustifiée. Ainsi la diffusion du TDR en Haute-Normandie est aussi bonne que sur le reste de la France, et elle a permis une diminution de plus de 30% de prescription d'antibiotique dans l'angine.ROUEN-BU Médecine-Pharmacie (765402102) / SudocPARIS-BIUM (751062103) / SudocSudocFranceF

Sélection et intégration d'une souche probiotique fonctionnelle dans une matrice sèche

Les probiotiques sont des micro-organismes vivants, capables d interagir avec le microbiote et les cellules de l organisme hôte. Par leurs présences ou leurs métabolismes, ils contribuent notamment à la régulation du système immunitaire. D un point de vue technologique, le développement d un complément alimentaire contenant des probiotiques nécessite la maitrise des étapes de sélection et de production d une bactérie fonctionnelle sous forme sèche et revivifiable. Au cours de ce travail, nous avons développé des tests de criblage en cytométrie en flux, permettant de déterminer l aptitude d une bactérie à être séchée et l origine de sa sensibilité. Pour mettre en place ces tests, nous nous sommes intéressés aux mécanismes mis en jeu lors du procédé de séchage. Ainsi, lors de la déshydratation, les micro-organismes vont subir simultanément un stress osmotique et un stress oxydant. Les résultats montrent un fort impact du séchage sur la viabilité et le potentiel immuno-modulateur avec une diminution de la composante pro-inflammatoire (IL-12). Pour protéger les bactéries, trois stratégies d optimisation ont été développées : le séchage par formation de mousse, l encapsulation dans une matrice alginate-protéines de pois, et le co-séchage d une bactérie fragile avec une bactérie résistante. Les connaissances acquises au cours de cette étude ont permis d optimiser la production industrielle de la souche finale du projet. Afin de répondre au nouveau cadre réglementaire européen, une étude clinique en double aveugle contre placébo est actuellement en cours (2011-2013)Probiotics are live microorganisms that can act on the immune system at specific sites in the gastro-intestinal tract. From a technological point of view, the development of a dietary supplement containing viable and functional probiotics requires the control of the selection and production steps. In a first time, we have developed specific and sensitive screening tests to determine the ability of bacteria to be dried and the origin of its sensitivity. To develop these tests, we investigated the mechanisms involved during drying process. Thus, microorganisms simultaneously undergo osmotic stress and oxidative stress. Results show a strong impact of drying on the survival rate and immunomodulatory potential with a decrease of proinflammatory cytokines (IL-12). To protect probiotic bacteria, three optimization strategies have been developed: drying by foam formation, encapsulation of probiotic bacteria using a pea-protein alginate matrix and drying of a sensitive probiotic strain with a resistant bacterium. Knowledge obtained during this study was used to optimize the industrial process of the final strain of the project. A randomized double blinded (RDB) trial is in progress (2011-2013) to test the bacteria in humansDIJON-BU Doc.électronique (212319901) / SudocSudocFranceF

Industrial production of dried yeast: plasma membrane as a survival indicator of air drying process

International audiencePreservation of microorganisms by desiccationis a major industrial interest.However, study of cell survival mechanismsthat occur during desiccation is complex. In this work, the impact of the magnitude and the kinetics of dehydration on yeastsurvival wereevaluatedin either hyperosmotic liquid medium or a gaseous environment. Asame lethal magnitude of dehydration and a same lethal kinetic effect were found. As previously shown for osmotic stress, this work demonstrate that yeast survival after drying was also related to plasma membrane disorganization, suggesting a similar passive rearrangement of the membrane components.Hyperosmotic treatment in liquid medium represents an opportune environment to optimize industrial drying processes

Two Liters a Day Keep the Doctor Away? Considerations on the Pathophysiology of Suboptimal Fluid Intake in the Common Population

Suboptimal fluid intake may require enhanced release of antidiuretic hormone (ADH) or vasopressin for the maintenance of adequate hydration. Enhanced copeptin levels (reflecting enhanced vasopressin levels) in 25% of the common population are associated with enhanced risk of metabolic syndrome with abdominal obesity, type 2 diabetes, hypertension, coronary artery disease, heart failure, vascular dementia, cognitive impairment, microalbuminuria, chronic kidney disease, inflammatory bowel disease, cancer, and premature mortality. Vasopressin stimulates the release of glucocorticoids which in turn up-regulate the serum- and glucocorticoid-inducible kinase 1 (SGK1). Moreover, dehydration upregulates the transcription factor NFAT5, which in turn stimulates SGK1 expression. SGK1 is activated by insulin, growth factors and oxidative stress via phosphatidylinositide-3-kinase, 3-phosphoinositide-dependent kinase PDK1 and mTOR. SGK1 is a powerful stimulator of Na+/K+-ATPase, carriers (e.g. the Na+,K+,2Cl- cotransporter NKCC, the NaCl cotransporter NCC, the Na+/H+ exchanger NHE3, and the Na+ coupled glucose transporter SGLT1), and ion channels (e.g. the epithelial Na+ channel ENaC, the Ca2+ release activated Ca2+ channel Orai1 with its stimulator STIM1, and diverse K+ channels). SGK1 further participates in the regulation of the transcription factors nuclear factor kappa-B NFκB, p53, cAMP responsive element binding protein (CREB), activator protein-1, and forkhead transcription factor FKHR-L1 (FOXO3a). Enhanced SGK1 activity fosters the development of hypertension, obesity, diabetes, thrombosis, stroke, inflammation including inflammatory bowel disease and autoimmune disease, cardiac fibrosis, proteinuria, renal failure as well as tumor growth. The present brief review makes the case that suboptimal fluid intake in the common population may enhance vasopressin and glucocorticoid levels thus up-regulating SGK1 expression and favouring the development of SGK1 related pathologies