Comparative study of chemical composition and succinic acid quantitave analysis in different origin of Amber.

Work title: Comparative study of chemical composition and succinic acid quantitave analysis in different origin of Amber. Laurynas Jarukas master‘s thesis/ supervised by Prof. Dr. Liudas Ivanauskas; Lithuanian University of Health Sciences, Faculty of Pharmacy, Department of Analitic and Toxicological chemistry - Kaunas, 2017. Aim: To analize chemical composition in different origin of Amber extracts and evaluate quantity of succinic acid. Objectives: 1. According to scientific data, choose the most suitable gass chromatgraphy – mass spectroscopy method to analyse chemical composition of Amber and succinic acid quantity. 2. Evaluate chemical composition in different origin of Amber extracts and investigate succinic acid quantity by selected gass chromatography – mass spectroscopy method. 3. Compare chemical composition between different origin of Amber samples and scientific databases. 4. Compare the quantitave of succinic acid between different origin of Amber samples. Object: Different geographical origin of fossil resins: Baltic amber, Ukrainian amber, Madagascar copal, Colombia copal, Sumatra amber. Investigations were carried out with UAB \"Alex amber\" amber samples, which were acquired in the period 2012-2015 for jewelry products. According to the investigate objectives, research includes small fractions of different origin and age amber waste. Methods: gas chromatography - mass spectrometry method. For the quantitative determination of the succinic acid applied derivatization process. Results and conclusions: After the five different origin and age of the fossil resin extracts chemical analysis, chromatography show prevailing of low molecular weight aromatic hydrocarbons: monoterpenes, sesquiterpenes and other diterpenoid volatile compounds. Different origins of Amber contain various in chemical composition. Succinic acid was determined by qualitative analysis using the derivatization process. The quantitative analysis of succinic acid, estimated that in comparison with other fossil resins, the Ukrainian amber contains the most quantity of succinic acid (10,65 µg/ml)

Development and Evaluation of Ginkgo biloba L. Extract Loaded into Carboxymethyl Cellulose Sublingual Films

Oral bioavailability of flavonoids, including G. biloba extract, is limited due to their chemical complexity, which determines slow dissolution in vitro behavior of the extract. The overall research objective was to compare the effect of increasing freeze-dried G. biloba extract (GFD) concentrations in carboxymethyl cellulose (CMC) films on their mechanical properties, release profile of flavonoid glycosides, stability and disintegration time. Physicochemical evaluation of films was performed by SEM and FTIR. The mechanical properties and in vitro release profile of flavonoid glycosides from the prepared films were characterized in the study. The higher elongation at break and tensile strength values, quick release of flavonoids and good stability were observed in formulation, coded FRG—15 (the film contained 0.4 g of GFD, 0.3 g of glycerol and 2 g of 2% CMC), (p < 0.05). Dissolution rate tests showed that approximately 85% of loaded flavonoid glycosides had been released; the release profile of flavonoid glycosides from FRG-15 had levelled off after only 15 min. The results could lay the groundwork for further studies, concerning the development of sublingual films as G. biloba extract-based dosage forms, which might increase the multifunctional properties and pharmacological activity closer to the desired level

Підготовка зразків бурштинової кислоти отриманої з біологічної сировини і процедура оптимізація отримання похідних для газового хромато-мас-спектрометричного аналізу

This study focused on bio-based succinic acid sample preparation and derivatization conditions optimization using GC-MS analytical method. Succinic acid, the precursor of a wide range bio-compounds, especially it is important in accumulation of mitochondrial metabolite succinate (citric acid cycle) and during ischemia controls reperfusion injury through mitochondrial reactive oxygen production. Accurate determination of analytes is the key in metabolomics to use as low molecular biomarkers in case to improve diagnostic methods.Methods. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. For the quantitative determination of the succinic acid applied derivatization process by silylation using -bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide (BSTFA).Results. The derivatization agent BSTFA, the derivatization time of 3-4 hours and derivatization temperature at 70 °C were selected as the optimal derivatization condition for quantification of succinic acid by GС/MS in biological samples. The results show that GC-MS SIM method with evaporation was the most effective to quantify succinate in biological samples after ischemia/reperfusion injury. Selected ion monitoring (SIM) allowed to monitor a subset of fragments with their related mass values in a certain retention time (RT) range for a set of targets.Conclusions. DC – MS has several advantages for measurements of succinate concentration in small kidney tissue samples (lyophilized mitochondria). The method can be applied in small pieces of tissue - biopy samples, tissues from various organsВ этом исследовании основное внимание было уделено получению образцов янтарной кислоты из биологического сырья и условиям оптимизации получения производных с использованием метода ГХ-МС. Янтарная кислота, предшественник биологических соединений широкого диапазона, особенно важна для накопления метаболита митохондрий сукцината (цикл лимонной кислоты), а во время ишемии контролирует реперфузионного повреждение посредством продуцирования митохондриального реактивного кислорода. Точное определение вещества для анализа является ключевым в метаболомики для использования в качестве низкомолекулярных биомаркеров в случае улучшения диагностических методов.Методы. Метод газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС). Для количественного определения применяемого процесса дериватизации янтарной кислоты путем силилирования с использованием -бис- (триметилсилил) -трифторацетамида (BSTFA).Результаты. Дериватизатор BSTFA, время дериватизации 3-4 часа и температура дериватизации 70 °C были выбраны в качестве оптимальных условий процесса для количественного определения янтарной кислоты методом ГХ-МС в биологических образцах. Результаты показывают, что метод ГХ-МС СДИ с испарением наиболее эффективен для количественного определения сукцината в биологических образцах после ишемии/реперфузионного повреждения. Селективное детектирование ионов (СДИ) позволил контролировать подмножество фрагментов со связанными значениями массы в определенном диапазоне времени удерживания (RT) для набора целей.Выводы. ГХ-МС имеет несколько преимуществ для измерения концентрации сукцината в небольших образцах тканей почки (лиофилизированные митохондрии). Метод может быть применен в небольших кусочках ткани - образцы биопии, ткани из разных органовУ цьому дослідженні основна увага була приділена отримання зразків бурштинової кислоти з біологічної сировини і умов оптимізації отримання похідних з використанням методу ГХ-МС. Бурштинова кислота, попередник широкого діапазону біологічних сполук, особливо важлива для накопичення метаболіту мітохондрій сукцината (цикл лимонної кислоти), а під час ішемії контролює реперфузійне пошкодження за допомогою продукування мітохондріального реактивного кисню. Точне визначення речовини для аналізу є ключовим в метаболоміці для використання в якості низькомолекулярних біомаркерів в разі поліпшення діагностичних методів.Методи. Метод газової хромато-мас-спектрометрії (ГХ-МС). Для кількісного визначення використаного процесу дериватизації бурштинової кислоти шляхом силілювання з використанням -біс- (триметилсиліл) -трифторацетаміда (BSTFA).Результати. Дериватизатор BSTFA, час дериватизації 3-4 години і температура дериватизації 70 °C були обрані в якості оптимальних умов процесу для кількісного визначення бурштинової кислоти методом ГХ-МС в біологічних зразках. Результати показують, що метод ГХ-МС СДІ з випаровуванням найбільш ефективний для кількісного визначення сукцината в біологічних зразках після ішемії / реперфузійного ушкодження. Селективне детектування іонів (СДІ) дозволило контролювати підмножина фрагментів зі зв'язаними значеннями маси в певному діапазоні часу утримування (RT) для набору цілей.Висновки. ГХ-МС має кілька переваг для вимірювання концентрації сукцинату в невеликих зразках тканин нирки (ліофілізовані мітохондрії). Метод може бути застосований в невеликих шматочках тканини - зразки біопії, тканини з різних органі

Optimization and Validation of the GC/FID Method for the Quantification of Fatty Acids in Bee Products

To the best of our knowledge, so far, no study has been conducted about the comparison of the total fatty acid concentration in the four bee products (honey, bee pollen, bee bread, and propolis) collected from Lithuania. Therefore, we aimed to optimize the derivatization parameters and to investigate a simple and sensitive gas chromatography-flame ionization detection (GC-FID) method to determine fatty acids. The optimal derivatization parameters were used to analyze fatty acids in the bee products. Regarding sample preparation, three derivatization parameters were compared (temperature and extraction time with BF3/MeOH reagent) in order to obtain a high amount of the total fatty acids of interest from the fatty acid methyl ester (FAME) standard. The results showed that the highest total yield of fatty acids was conducted by using the conventional heating process at 70 °C for 90 min. Under optimal conditions, there was obtained excellent linearity for fatty acids with determination coefficients of r2 > 0.9998. The LODs and LOQs ranged from 0.21 to 0.54 µg/mL and 0.63 to 1.63 µg/mL, respectively. This method has been successfully applied to the qualitative analysis of fatty acids in bee products. The above findings might provide a scientific basis for evaluating the nutritional values of bee products

Effective Isolation of Picrocrocin and Crocins from Saffron: From HPTLC to Working Standard Obtaining

Saffron is widely cultivated and used as a spice. Recently published data on the chemical composition and pharmacological potential of saffron determine its use in pharmacy and medicine. The proposed high-performance thin-layer chromatography (HPTLC) method allows good separation of 11 analytes. The saffron quality (Iran, Ukraine, Spain, Morocco samples) assessment was based on the European Pharmacopoeia monograph and ISO 3632. The HPTLC method for the safranal, crocin, and picrocrocin quantification was proposed and validated. The crocins content in Ukrainian saffron was from 17.80% to 33.25%. Based on qualitative and quantitative assessment results, the saffron sample from Zaporizhzhia (Ukraine) had the highest compounds content and was chosen to obtain the working standards of picrocrocin and crocins (trans-4GG, trans-2G, trans-3Gg) by preparative chromatography. The compounds were isolated from lyophilized extract of saffron using a Symmetry Prep C18 column (300 × 19 mm × 7 µm), and identified by spectroscopic techniques (HPLC-DAD, UPLC-ESI-MS/MS). The purity of crocins and picrocrocin was more than 97%. A novel method proposed to obtain working standards is simple and reproducible for the routine analysis of saffron quality control

Підготовка зразків бурштинової кислоти отриманої з біологічної сировини і процедура оптимізація отримання похідних для газового хромато-мас-спектрометричного аналізу

This study focused on bio-based succinic acid sample preparation and derivatization conditions optimization using GC-MS analytical method. Succinic acid, the precursor of a wide range bio-compounds, especially it is important in accumulation of mitochondrial metabolite succinate (citric acid cycle) and during ischemia controls reperfusion injury through mitochondrial reactive oxygen production. Accurate determination of analytes is the key in metabolomics to use as low molecular biomarkers in case to improve diagnostic methods.Methods. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. For the quantitative determination of the succinic acid applied derivatization process by silylation using -bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide (BSTFA).Results. The derivatization agent BSTFA, the derivatization time of 3-4 hours and derivatization temperature at 70 °C were selected as the optimal derivatization condition for quantification of succinic acid by GС/MS in biological samples. The results show that GC-MS SIM method with evaporation was the most effective to quantify succinate in biological samples after ischemia/reperfusion injury. Selected ion monitoring (SIM) allowed to monitor a subset of fragments with their related mass values in a certain retention time (RT) range for a set of targets.Conclusions. DC – MS has several advantages for measurements of succinate concentration in small kidney tissue samples (lyophilized mitochondria). The method can be applied in small pieces of tissue - biopy samples, tissues from various organsВ этом исследовании основное внимание было уделено получению образцов янтарной кислоты из биологического сырья и условиям оптимизации получения производных с использованием метода ГХ-МС. Янтарная кислота, предшественник биологических соединений широкого диапазона, особенно важна для накопления метаболита митохондрий сукцината (цикл лимонной кислоты), а во время ишемии контролирует реперфузионного повреждение посредством продуцирования митохондриального реактивного кислорода. Точное определение вещества для анализа является ключевым в метаболомики для использования в качестве низкомолекулярных биомаркеров в случае улучшения диагностических методов.Методы. Метод газовой хромато-масс-спектрометрии (ГХ-МС). Для количественного определения применяемого процесса дериватизации янтарной кислоты путем силилирования с использованием -бис- (триметилсилил) -трифторацетамида (BSTFA).Результаты. Дериватизатор BSTFA, время дериватизации 3-4 часа и температура дериватизации 70 °C были выбраны в качестве оптимальных условий процесса для количественного определения янтарной кислоты методом ГХ-МС в биологических образцах. Результаты показывают, что метод ГХ-МС СДИ с испарением наиболее эффективен для количественного определения сукцината в биологических образцах после ишемии/реперфузионного повреждения. Селективное детектирование ионов (СДИ) позволил контролировать подмножество фрагментов со связанными значениями массы в определенном диапазоне времени удерживания (RT) для набора целей.Выводы. ГХ-МС имеет несколько преимуществ для измерения концентрации сукцината в небольших образцах тканей почки (лиофилизированные митохондрии). Метод может быть применен в небольших кусочках ткани - образцы биопии, ткани из разных органовУ цьому дослідженні основна увага була приділена отримання зразків бурштинової кислоти з біологічної сировини і умов оптимізації отримання похідних з використанням методу ГХ-МС. Бурштинова кислота, попередник широкого діапазону біологічних сполук, особливо важлива для накопичення метаболіту мітохондрій сукцината (цикл лимонної кислоти), а під час ішемії контролює реперфузійне пошкодження за допомогою продукування мітохондріального реактивного кисню. Точне визначення речовини для аналізу є ключовим в метаболоміці для використання в якості низькомолекулярних біомаркерів в разі поліпшення діагностичних методів.Методи. Метод газової хромато-мас-спектрометрії (ГХ-МС). Для кількісного визначення використаного процесу дериватизації бурштинової кислоти шляхом силілювання з використанням -біс- (триметилсиліл) -трифторацетаміда (BSTFA).Результати. Дериватизатор BSTFA, час дериватизації 3-4 години і температура дериватизації 70 °C були обрані в якості оптимальних умов процесу для кількісного визначення бурштинової кислоти методом ГХ-МС в біологічних зразках. Результати показують, що метод ГХ-МС СДІ з випаровуванням найбільш ефективний для кількісного визначення сукцината в біологічних зразках після ішемії / реперфузійного ушкодження. Селективне детектування іонів (СДІ) дозволило контролювати підмножина фрагментів зі зв'язаними значеннями маси в певному діапазоні часу утримування (RT) для набору цілей.Висновки. ГХ-МС має кілька переваг для вимірювання концентрації сукцинату в невеликих зразках тканин нирки (ліофілізовані мітохондрії). Метод може бути застосований в невеликих шматочках тканини - зразки біопії, тканини з різних органі

Bio-based Succinic Acid Sample Preparation and Derivatization Procedure Optimisation for Gas Chromatography-mass Spectrometry Analysis

This study focused on bio-based succinic acid sample preparation and derivatization conditions optimization using GC-MS analytical method. Succinic acid, the precursor of a wide range bio-compounds, especially it is important in accumulation of mitochondrial metabolite succinate (citric acid cycle) and during ischemia controls reperfusion injury through mitochondrial reactive oxygen production. Accurate determination of analytes is the key in metabolomics to use as low molecular biomarkers in case to improve diagnostic methods.Methods. Gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS) method. For the quantitative determination of the succinic acid applied derivatization process by silylation using -bis- (trimethylsilyl) -trifluoroacetamide (BSTFA).Results. The derivatization agent BSTFA, the derivatization time of 3-4 hours and derivatization temperature at 70 °C were selected as the optimal derivatization condition for quantification of succinic acid by GС/MS in biological samples. The results show that GC-MS SIM method with evaporation was the most effective to quantify succinate in biological samples after ischemia/reperfusion injury. Selected ion monitoring (SIM) allowed to monitor a subset of fragments with their related mass values in a certain retention time (RT) range for a set of targets.Conclusions. DC – MS has several advantages for measurements of succinate concentration in small kidney tissue samples (lyophilized mitochondria). The method can be applied in small pieces of tissue - biopy samples, tissues from various organ