Avaliação da resposta imunológica no trato gastrintestinal de frangos desafiados com Salmonella enterica : uso de aditivos fitogênicos e ácidos orgânicos

Orientador : Prof. Dr. Elizabeth SantinTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 29/02/2016Inclui referências : f. 116-118Resumo: Salmonella é uma bactéria responsável por perdas econômicas na cadeia avícola e por toxinfecções alimentares em pessoas. A bactéria pode ser sistêmica como Salmonella Pullorum e Salmonella Gallinarum, causando septicemia e mortalidade ou não sistêmica, como Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg e Salmonella Minnesota que desenvolvem poucos sinais clínicos nos animais. A presente Tese está dividida em 6 capítulos. O capítulo 1 refere-se à Introdução, abordando aspectos básicos da epidemiologia da Salmonella e o objetivo geral do trabalho. No capítulo 2 é apresentada uma revisão sobre a patogenicidade da Salmonella, abordando seus principais fatores de virulência na célula hospedeira. Além disso, também são abordadas as principais alterações na dinâmica celular do trato gastrintestinal ocasionada pela Salmonella e as principais medidas de controle da enfermidade em plantéis avícolas. Essas medidas de controle vão desde medidas básicas de biosseguridade até aditivos como ácidos orgânicos, aditivos fitogênicos e produtos que proporcionam exclusão competitiva. No capítulo 3 foi demonstrado que o extrato de sanguinarina na água de bebida é eficiente em reduzir a contagem de Salmonella Enteritidis no papo e ceco de frangos, além de reduzir a expressão de células caliciformes e CD3+ no duodeno e jejuno e aumentar a expressão de células imunológicas no sangue periférico quando comparados ao grupo que não recebeu sanguinarina. No capítulo 4 foi avaliada a patogenia da Salmonella Minnesota em frangos de corte e avaliou-se o efeito in vitro e in vivo de diferentes ácidos orgânicos demonstrando a baixa eficiência destes no controle da Salmonella Minnesota. No capítulo 5 foi realizada a análise retrospectiva de resultados de microbiologia e dinâmica da imunidade celular do trato gastrintestinal de frangos desafiados com Salmonella enterica sorovares Enteritidis, Minnesota e Heidelberg, onde se observou que a quantidade de salmonela no ceco e a mobilização de células imunológicas no trato gastrintestinal de frangos desafiados é dependente do sorovar avaliado. No capítulo 6, em trabalho realizado em parceria com a Universidade da Geórgia, foi avaliada a contribuição de genes da Salmonella Typhimurium de função desconhecida na colonização do trato gastrointestinal de frangos. Estes estudos demonstram a interferência dos diferentes sorovares de salmonelas paratíficas na dinâmica celular do trato gastrointestinal de aves e algumas medidas de controle desta enfermidade.Abstract: Salmonella is a bacterium responsible for economic losses in the poultry chain and food poisoning in humans. This bacterium can be systemic in birds such as Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum causing septicemia and mortality or non-sistemic such as Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Minnesota that present few clinical signs in animals. This Thesis is divided into six chapters. Chapter 1 refers to Introduction, addressing basic aspects of Salmonella epidemiology and the overall objective of the thesis. Chapter 2 presents a review of Salmonella pathogenicity, addressing its major virulence factors into the host cell. It is also addressed the major changes in cellular dynamics of the gastrointestinal tract caused by Salmonella and the main forms of disease control in poultry flocks. These forms of control range from basic biosecurity measures to additives such as organic acids, phytogenic additives and products that provide competitive exclusion. Chapter 3 shows that sanguinarine extract in drinking water is effective in reducing Salmonella Enteritidis count in crop and cecum of chickens, while reducing the expression of goblet cells and CD3+ cells in duodenum and jejunum and increasing immune cell expression in the peripheral blood when compared to the group that did not receive sanguinarine. Chapter 4 presents the evaluation of Salmonella Minnesota pathogenesis in broilers where the effect in vitro and in vivo of different organic acids was evaluated showing their low efficiency of Salmonella Minnesota control. Chapter 5 demonstrates a retrospective analysis of results of microbiology and immune cellular dynamics of gastrointestinal tract of challenged chickens with Salmonella enterica serovar Enteritidis, Minnesota and Heidelberg, where it was observed that the number of Salmonella in the cecum and the mobilization of immunological cells in gastrointestinal tract of challenged chickens is dependent on the assessed serovar. Chapter 6 presents the study performed in partnership with the University of Georgia where it was evaluated Salmonella Typhimurium gene contribution of unknown function in colonizing the gastrointestinal tract of chickens. These studies demonstrate the interference of different paratyphoid Salmonella serovars in cellular dynamics of poultry gastrointestinal tract and some control measurements of this disease

Ácidos orgânicos via água e via ração para controlar Salmonella enterica enterica sorovares Enteritidis e Minnesota em frangos

Resumo: A Salmonelose é um dos maiores problemas na avicultura industrial, principalmente por seus impactos em Saúde Pública. Esta bactéria é responsável por causar toxinfecções alimentares em seres humanos relacionadas ao consumo de carne de frango e ovos contaminados o que explica o grande interesse pelo estudo desta doença. A Salmonella enterica subespécie enterica sorovar Enteritidis ocupa um destacado lugar por causar mortalidade em aves jovens e, sobretudo por ser uma das salmonelas paratíficas mais patogênicas para o homem. Uma vez presente no lote, torna-se muito difícil erradicá-la, pois a ave contaminada permanece eliminando a bactéria pelo resto da vida e assim disseminando-a pelo ambiente. O intenso controle frente aos sorovares Enteritidis e Typhimurium acabaram por ocasionar o aparecimento de outros sorovares, como por exemplo o Minnesota. Existem várias maneiras para o controle das salmonelas paratíficas, entre elas a adição de ácidos orgânicos na ração ou mesmo na água de bebida das aves para reduzir a contaminação das carcaças. Porém, ainda não existem estudos que possam comprovar a eficiência dos usuais métodos de controle de salmonelas, frente a estes outros sorotipos, como o Minnesota, o que requer maiores estudos com relação a capacidade e mecanismo de ação dos ácidos frente aos diferentes patógenos gastrointestinais. Frente a isto, esta dissertação foi dividida em dois capítulos: Capítulo I uma revisão sobre “Acidos orgânicos como ferramenta para Equilibrar a Microbiota Gastrointestinal de frangos” e o capítulo II um trabalho científico intitulado “Avaliação microbiológica, histopatológica e imunológica de frangos de corte desafiados com Salmonella enterica enterica sorovares Enteritidis e Minnesota e tratados com ácidos orgânicos”

ALTERNATIVAS AOS ANTIBIOTICOS PARA EQUILIBRAR A MICROBIOTA GASTROINTESTINAL DE FRANGOS

Uma série de aditivos alimentares, incluindo antibióticos, tem sido amplamente utilizados na indústria avícola durante vários anos. A manipulação das funções gastrointestinais e da microbiota dos animais domésticos com aditivos alimentares é reconhecida como uma importante ferramenta para melhorar o desempenho e a eficiência alimentar. Recentemente, as preocupações com os possíveis resíduos de antibióticos e resistência a doenças tem despertado restrições no uso de antibióticos na indústria animal. A proibição do uso de antibióticos como aditivos na alimentação animal pela União Européia, tem acelerado as investigações sobre aditivos alternativos. Como alternativas, os óleos essenciais e ácidos orgânicos já são utilizados na alimentação animal para melhorar o desempenho e para controlar a população de microorganismos patogênicos no intestino em sistemas de manejo intensivo. O objetivo desta revisão é abordar a importância do equilíbrio da microbiota intestinal e como ácidos orgânicos e o carvacrol podem atuar no desenvolvimento da microbiota intestinal, no controle de bactérias patogênicas como Salmonella e Campylobacter e no desempenho zootécnico dos animais

AVALIAÇÃO DA RESPOSTA IMUNE E HISTOLOGIA DA BOLSA CLOACAL EM FRANGOS VACINADOS COM VACINA VETORIAL HVT-IBD E DESAFIADOS COM CEPA MOULTHROP G603 DO VIRUS DA DOENÇA DE GUMBORO

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imunológica de frangos de corte frente a uma vacina vetorial HVT-IBV com posterior desafio com a cepa Moulthrop G603 aos 21 ou 28 dias de vida. Foram realizadas análises macroscópicas e histológicas da bolsa cloacal e quantificação de células imunológicas no baço (linfócitos B, T CD4+ e CD8+), bolsa cloacal (linfócitos T CD3+) e no sangue (linfócitos B, T CD4 de mucosa e T CD8 ativados). Aos 35 dias de idade, aves desafiadas aos 21 e 28 dias de idade, submetidas ou não a vacina vetorial, apresentaram maior contagem (P<0,05) de linfócitos T CD3+ na bolsa cloacal que aves não desafiadas e não vacinadas. Aves vacinadas e desafiadas apresentaram maior preservação do tecido da bolsa cloacal (P<0,05) e significativa redução de linfócitos CD4+ no baço quando comparadas aos demais grupos. Aves desafiadas aos 28 dias de idade apresentaram maior população de células B, T CD4+ e T CD8+ no baço e menor concentração de células imunológicas no sangue quando comparada a aves desafiadas aos 21 dias (P<0,05). Os resultados demonstram que a vacina vetorial HVT-IBV modifica a dinâmica imune e preserva o tecido da bolsa cloacal

Avaliação da resposta imunológica da mucosa intestinal de frangos de corte desafiados com diferentes sorovares de Salmonella

Objetivou-se com o presente estudo comparar o efeito de diferentes sorovares de Salmonella na resposta imune local da mucosa do intestino de frangos de corte. Aos sete dias de idade, as aves foram desafiadas com os sorovares S. Enteritidis, S. Typhimurium, S. Senftenberg, S. Mbandaka e S. Minnesota. Foi observado que todos os sorovares testados foram capazes de colonizar o intestino das aves sendo possível o isolamento de Salmonella em suabes de cloaca, 48 h após inoculação. De maneira geral, as aves do grupo controle negativo, que não foram desafiados apresentaram quantidade significativamente menor de células imunológicas na mucosa intestinal do que as aves desafiadas. Porém, verificou-se que os sorovares de Salmonella, utilizados neste estudo, apresentaram diferentes efeitos sobre a dinâmica celular da mucosa do íleo e ceco e afetaram de modo diferente o ganho de peso e ganho médio diário das aves demonstrando distintos graus de patogenicidade. Os sorovares Enteritidis e Typhimurium apresentaram um efeito mais intenso tanto no desempenho quanto na mobilização de células imunológicas na mucosa intestinal de frangos de cort

Ácidos orgânicos via água e via ração para controlar Salmonella enterica enterica sorovares Enteritidis e Minnesota em frangos

Resumo: A Salmonelose é um dos maiores problemas na avicultura industrial, principalmente por seus impactos em Saúde Pública. Esta bactéria é responsável por causar toxinfecções alimentares em seres humanos relacionadas ao consumo de carne de frango e ovos contaminados o que explica o grande interesse pelo estudo desta doença. A Salmonella enterica subespécie enterica sorovar Enteritidis ocupa um destacado lugar por causar mortalidade em aves jovens e, sobretudo por ser uma das salmonelas paratíficas mais patogênicas para o homem. Uma vez presente no lote, torna-se muito difícil erradicá-la, pois a ave contaminada permanece eliminando a bactéria pelo resto da vida e assim disseminando-a pelo ambiente. O intenso controle frente aos sorovares Enteritidis e Typhimurium acabaram por ocasionar o aparecimento de outros sorovares, como por exemplo o Minnesota. Existem várias maneiras para o controle das salmonelas paratíficas, entre elas a adição de ácidos orgânicos na ração ou mesmo na água de bebida das aves para reduzir a contaminação das carcaças. Porém, ainda não existem estudos que possam comprovar a eficiência dos usuais métodos de controle de salmonelas, frente a estes outros sorotipos, como o Minnesota, o que requer maiores estudos com relação a capacidade e mecanismo de ação dos ácidos frente aos diferentes patógenos gastrointestinais. Frente a isto, esta dissertação foi dividida em dois capítulos: Capítulo I uma revisão sobre “Acidos orgânicos como ferramenta para Equilibrar a Microbiota Gastrointestinal de frangos” e o capítulo II um trabalho científico intitulado “Avaliação microbiológica, histopatológica e imunológica de frangos de corte desafiados com Salmonella enterica enterica sorovares Enteritidis e Minnesota e tratados com ácidos orgânicos”

Avaliação da resposta imunológica no trato gastrintestinal de frangos desafiados com Salmonella enterica : uso de aditivos fitogênicos e ácidos orgânicos

Orientador : Prof. Dr. Elizabeth SantinTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 29/02/2016Inclui referências : f. 116-118Resumo: Salmonella é uma bactéria responsável por perdas econômicas na cadeia avícola e por toxinfecções alimentares em pessoas. A bactéria pode ser sistêmica como Salmonella Pullorum e Salmonella Gallinarum, causando septicemia e mortalidade ou não sistêmica, como Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg e Salmonella Minnesota que desenvolvem poucos sinais clínicos nos animais. A presente Tese está dividida em 6 capítulos. O capítulo 1 refere-se à Introdução, abordando aspectos básicos da epidemiologia da Salmonella e o objetivo geral do trabalho. No capítulo 2 é apresentada uma revisão sobre a patogenicidade da Salmonella, abordando seus principais fatores de virulência na célula hospedeira. Além disso, também são abordadas as principais alterações na dinâmica celular do trato gastrintestinal ocasionada pela Salmonella e as principais medidas de controle da enfermidade em plantéis avícolas. Essas medidas de controle vão desde medidas básicas de biosseguridade até aditivos como ácidos orgânicos, aditivos fitogênicos e produtos que proporcionam exclusão competitiva. No capítulo 3 foi demonstrado que o extrato de sanguinarina na água de bebida é eficiente em reduzir a contagem de Salmonella Enteritidis no papo e ceco de frangos, além de reduzir a expressão de células caliciformes e CD3+ no duodeno e jejuno e aumentar a expressão de células imunológicas no sangue periférico quando comparados ao grupo que não recebeu sanguinarina. No capítulo 4 foi avaliada a patogenia da Salmonella Minnesota em frangos de corte e avaliou-se o efeito in vitro e in vivo de diferentes ácidos orgânicos demonstrando a baixa eficiência destes no controle da Salmonella Minnesota. No capítulo 5 foi realizada a análise retrospectiva de resultados de microbiologia e dinâmica da imunidade celular do trato gastrintestinal de frangos desafiados com Salmonella enterica sorovares Enteritidis, Minnesota e Heidelberg, onde se observou que a quantidade de salmonela no ceco e a mobilização de células imunológicas no trato gastrintestinal de frangos desafiados é dependente do sorovar avaliado. No capítulo 6, em trabalho realizado em parceria com a Universidade da Geórgia, foi avaliada a contribuição de genes da Salmonella Typhimurium de função desconhecida na colonização do trato gastrointestinal de frangos. Estes estudos demonstram a interferência dos diferentes sorovares de salmonelas paratíficas na dinâmica celular do trato gastrointestinal de aves e algumas medidas de controle desta enfermidade.Abstract: Salmonella is a bacterium responsible for economic losses in the poultry chain and food poisoning in humans. This bacterium can be systemic in birds such as Salmonella Pullorum and Salmonella Gallinarum causing septicemia and mortality or non-sistemic such as Salmonella Typhimurium, Salmonella Enteritidis, Salmonella Heidelberg and Salmonella Minnesota that present few clinical signs in animals. This Thesis is divided into six chapters. Chapter 1 refers to Introduction, addressing basic aspects of Salmonella epidemiology and the overall objective of the thesis. Chapter 2 presents a review of Salmonella pathogenicity, addressing its major virulence factors into the host cell. It is also addressed the major changes in cellular dynamics of the gastrointestinal tract caused by Salmonella and the main forms of disease control in poultry flocks. These forms of control range from basic biosecurity measures to additives such as organic acids, phytogenic additives and products that provide competitive exclusion. Chapter 3 shows that sanguinarine extract in drinking water is effective in reducing Salmonella Enteritidis count in crop and cecum of chickens, while reducing the expression of goblet cells and CD3+ cells in duodenum and jejunum and increasing immune cell expression in the peripheral blood when compared to the group that did not receive sanguinarine. Chapter 4 presents the evaluation of Salmonella Minnesota pathogenesis in broilers where the effect in vitro and in vivo of different organic acids was evaluated showing their low efficiency of Salmonella Minnesota control. Chapter 5 demonstrates a retrospective analysis of results of microbiology and immune cellular dynamics of gastrointestinal tract of challenged chickens with Salmonella enterica serovar Enteritidis, Minnesota and Heidelberg, where it was observed that the number of Salmonella in the cecum and the mobilization of immunological cells in gastrointestinal tract of challenged chickens is dependent on the assessed serovar. Chapter 6 presents the study performed in partnership with the University of Georgia where it was evaluated Salmonella Typhimurium gene contribution of unknown function in colonizing the gastrointestinal tract of chickens. These studies demonstrate the interference of different paratyphoid Salmonella serovars in cellular dynamics of poultry gastrointestinal tract and some control measurements of this disease

AVALIAÇÃO DA RESPOSTA IMUNE E HISTOLOGIA DA BOLSA CLOACAL EM FRANGOS VACINADOS COM VACINA VETORIAL HVT-IBD E DESAFIADOS COM CEPA MOULTHROP G603 DO VIRUS DA DOENÇA DE GUMBORO

O objetivo deste estudo foi avaliar a resposta imunológica de frangos de corte frente a uma vacina vetorial HVT-IBV com posterior desafio com a cepa Moulthrop G603 aos 21 ou 28 dias de vida. Foram realizadas análises macroscópicas e histológicas da bolsa cloacal e quantificação de células imunológicas no baço (linfócitos B, T CD4+ e CD8+), bolsa cloacal (linfócitos T CD3+) e no sangue (linfócitos B, T CD4 de mucosa e T CD8 ativados). Aos 35 dias de idade, aves desafiadas aos 21 e 28 dias de idade, submetidas ou não a vacina vetorial, apresentaram maior contagem (P<0,05) de linfócitos T CD3+ na bolsa cloacal que aves não desafiadas e não vacinadas. Aves vacinadas e desafiadas apresentaram maior preservação do tecido da bolsa cloacal (P<0,05) e significativa redução de linfócitos CD4+ no baço quando comparadas aos demais grupos. Aves desafiadas aos 28 dias de idade apresentaram maior população de células B, T CD4+ e T CD8+ no baço e menor concentração de células imunológicas no sangue quando comparada a aves desafiadas aos 21 dias (P<0,05). Os resultados demonstram que a vacina vetorial HVT-IBV modifica a dinâmica imune e preserva o tecido da bolsa cloacal