Quantification of mitochondrial DNA in human whole blood using real- time quantitative PCR

Las variaciones en el contenido de mtDNA se han asociado con diferentes situaciones patológicas. Su determinación en sangre es un parámetro de interés pero se ve afectado por numerosas variables. El objetivo del presente proyecto es analizar la influencia de estas variables de cara a establecer un protocolo eficiente y reproducible. La PCR a tiempo real es una técnica que se está aplicando ampliamente en las ciencias biomédicas para la cuantificación de DNA tanto mitocondrial como genómico. En este estudio trabajamos con sangre total para cuantificar el DNA mitocondrial, calculado como el ratio DNA mitocondrial/DNA nuclear. Hemos iniciado el estudio de diferentes variables que pueden afectar a dicha cuantificación. Así, se ha comprobado que la concentración de plaquetas, orgánulos que contienen DNA mitocondrial pero no DNA nuclear, afecta de forma significativa en la determinación final. De igual modo hemos estudiado la influencia que produce en la cuantificación el método de extracción utilizado para obtener el DNA y la variabilidad inter-día e intra-día en el método de extracción. Se han encontrado diferencias significativas en todas estas variables. Para realizar estos análisis hemos creado un plásmido fruto de la fusión de nuestros genes de estudio (mitocondrial y nuclear) con el fin de realizar una calibración de las medidas mediante una recta de calibrado realizada con diluciones seriadas de este estándar. También hemos estudiado la influencia de la conformación del material genético en la eficacia de la reacción de PCR y se ha visto que, puesto que al digerir el DNA mitocondrial con una enzima la cuantificación de DNA mitocondrial se ve aumentada. En la continuación del proyecto queremos seguir clarificando las fuentes de variabilidad que afectan a la técnica de PCR a tiempo real en la cuantificación de DNA mitocondrial

REGULACIÓN TIROIDEA Y EMBARAZO

Las hormonas tiroideas cambian en la madre durante el embarazo , y la patología tiroidea preexistente y el estado tiroidea fisiológico durante el embarazo puede influir en los resultados de la gestación. Existe una relación en la población general entre la regulación tiroidea y la diabetes y en un estudio preliminar observamos que esta disminuye en embarazadas.<br /

Hipercolesterolemia con elevación simultánea de LDL-c y HDL-c: ¿Un nuevo fenotipo?

Introducción. Algunos pacientes con hipercolesterolemia presentan elevación simultánea del colesterol unido a LDL (LDL-c) y del colesterol unido a HDL (HDL-c). No se dispone de trabajos que hayan estudiado esta alteración en grandes poblaciones. Objetivos. Estudiar si existe un subgrupo de pacientes con LDL-c y HDL-c simultáneamente elevados con unas características clínicas propias, que configurarían una nueva entidad dentro de las dislipemias de origen desconocido.Material y métodos. Se diseñó un estudio transversal en el que se incluyó a todos los pacientes de la consulta de dislipemias primarias del Hospital Universitario Miguel Servet (HUMS) de Zaragoza (n=4928). Se estudió a aquellos pacientes con LDL-c y HDL- c elevados simultáneamente para ver su frecuencia y comprobar si era mayor de la esperada con respecto a la población general. Para conocer si la asociación de ambas variables era consecuencia del aumento de LDL-c, los sujetos se dividieron en dependencia de la presencia de una variante patogénica en los genes responsables de hipercolesterolemia familiar (HF). Se analizó la cohorte del NHANES 2015-2016 para estudiar la asociación entre LDL-c y HDL-c en la población general.Resultados. La elevación simultánea de LDL-c y HDL-c (>p95) es poco frecuente en la población general ya que ambas variables son independientes entre sí. En la población de la consulta con LDL-c >p95, existe un subgrupo de pacientes con HDL-c elevado (>90 mg/dL) mayor del esperado, siendo más probable presentar un HDL-c elevado en los pacientes sin HF que en aquellos con HF (OR= 13,5; p250 mg/dL y HDL-c >89 mg/dL para mujeres, y LDL-c >195 mg/dL y HDL-c >75 mg/dL para varones. Los pacientes con este fenotipo presentaron un índice de masa corporal (IMC) bajo, una tendencia a padecer menos enfermedad cardiovascular (ECV), una gamma-glutamiltransferasa (GGT) más elevada y triglicéridos normales.Conclusiones. La elevación simultánea de LDL-c y HDL-c es un fenotipo que está presente únicamente en un 1% de pacientes con dislipemia de origen desconocido. Las características clínicas y analíticas sugieren que esta hipercolesterolemia combinada constituye una entidad diferenciada de carácter multifactorial.<br /

Asociación de los distintos componentes de síndrome metabólico y riesgo de cardiopatía isquémica en población laboral española

Entre los trabajadores de una factoria, 208 casos indicentes de enfermedad cardiovascular entre 1981 y 2005 fueron emparejados por edad con 2080 trabajadores sanos visitados de forma rutinaria entre 2004-2005. El sindrome metabolico fue definido por los criterios revisados de la definición ATP-III (2005). El SM estaba fuertemente asociado con la enfermedad cardiovascular (OR=4-03; 95%CI2.98,5.45) y el riesgo parece todo ser explicado por los componenetes de SM (OR=0.84, p=0.54). la Odds ratio del efecto independiente de cada uno de los criterios diagnosticos de SM fue: hipertrigliceridemia (OR=3.39, p<0.001), hiperglucemia(OR=2,7,p<0.001), HDL colesterol bajo (OR=2,35, p<0.001), hipertension (OR=1,49,p=0,016) y sobrepeso (OR 1,07,p=0.678).Amongs the workers of a factory, 208 incident cases of cardiac heart disease (CHD) between 1981 and 2005 were age matched with 2080 healthy workers visited routinely in 2004-2005. The metabolic syndrome (MetS) was characterized with modified criteria of the revised ATP-III definition (2005). MetS was strongly associated with CHD (OR=4-03; 95%CI2.98,5.45) and the risk increase seems to be fully explained by Met S components (OR=0.84, p=0.54 after adjustment). Odds ratios for the independent effects of the diagnostic criteria were: hyperglyceridemia (OR=3.39, p&lt;0.001), hyperglcemia (OR=2,7,p&lt;0.001), low HDL-cholesterol (OR=2,35, p&lt;0.001), hypertension (OR=1,49,p=0,016) and overweight (OR 1,07,p=0.678)

Riesgo cardiovascular de jovenes españoles en dos epocas diferentes (años 1980 y 2000): Estudio Agemza

Analizamos el perfil de riesgo cardiovascular de una muestra de jóvenes varones españoles de los años ochenta, cohorte inicial del estudio AGEMZA, y la comparamos con otraLACLAUSTRA GIMENO, MARTÍN (Codirector) muestra de similares características, tras el 2000. Las dos muestras están compuestas por residentes cadetes de la Academia General Militar de Zaragoza. Obtuvimos datos de prevalencia de los factores de riesgo y estimamos el riesgo coronario mediante la ecuación de Framingham. Comparamos 260 sujetos de la muestra inicial y 248 de la actual, encontrando empeoramiento significativo en la muestra actual en el peso, IMC, perfil lipídico, riesgo coronario estimado en los próximos 10 años y el proyectado a los 65 años de edad. Los aumentos de peso y del IMC se correlacionan de forma significativa con los cambios encontrados en el perfil lipídico. Ésto nos obliga a tomar medidas preventivas en los jóvenes y extremar el desarrollo de campañas destinadas a frenar este aumento progresivo de la obesidad para prevenir su aparición. To investigate the cardiovascular risk profile of a sample of young Spanish men taken in the 1980s, the initial AGEMZA study cohort, and to compare the findings with those in another sample with similar characteristics taken after 2000.The two AGEMZA study cohorts comprised young men who were resident at the Zaragoza General Military Academy. Data on the prevalence of various risk factors were obtained and the coronary disease risk was estimated using the Framingham equation. Comparison 248 subjects from the current cohort with 260 from the initial cohort, showed the following significant changes: weight, BMI, lipid profile, estimated coronary disease risk in the next 10 years and estimated coronary disease risk up to the age of 65 years. There were significant correlations between increases in weight and BMI and lipid profile alterations. The lipid profile and BMI were worse in the current sample. These findings make it essential that preventive measures for young people should be introduced and that an increased effort should be made to develop programs aimed at either stopping the progressive rise in obesity or even preventing it altogether