Specific fibroblast subpopulations and neuronal structures provide local sources of Vegfc-processing components during zebrafish lymphangiogenesis

Proteolytical processing of the growth factor VEGFC through the concerted activity of CCBE1 and ADAMTS3 is required for lymphatic development to occur. How these factors act together in time and space, and which cell types produce these factors is not understood. Here we assess the function of Adamts3 and the related protease Adamts14 during zebrafish lymphangiogenesis and show both proteins to be able to process Vegfc. Only the simultaneous loss of both protein functions results in lymphatic defects identical to vegfc loss-of-function situations. Cell transplantation experiments demonstrate neuronal structures and/or fibroblasts to constitute cellular sources not only for both proteases but also for Ccbe1 and Vegfc. We further show that this locally restricted Vegfc maturation is needed to trigger normal lymphatic sprouting and directional migration. Our data provide a single-cell resolution model for establishing secretion and processing hubs for Vegfc during developmental lymphangiogenesis

Qualidade de silagens de sorgo com aditivos.

Um delineamento inteiramente ao acaso, com três repetições, foi utilizado para avaliar os efeitos da adição de 0,5% de uréia, de 0,5% de carbonato de cálcio (CaCO3), de 0,5% de uréia mais 0,5% de CaCO3 e de inoculante bacteriano sobre o pH, teores de matéria seca (MS), proteína bruta (PB), fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente ácido (FDA), hemicelulose, celulose, lignina, carboidratos solúveis, ácido lático e ácido acético sobre a digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) de silagens de quatro híbridos de sorgo (BR700, BR701, BR601 e AG2002). Os híbridos ensilados sem a adição de aditivos constituíram o grupo-controle. De cada genótipo foram coletadas três amostras do material original (MOR). Foram utilizados 60 silos de PVC com 10cm de diâmetro interno e 50cm de comprimento, sendo três por tratamento. A abertura dos silos ocorreu depois de 56 dias de fermentação. As silagens contendo CaCO3 e inoculante bacteriano apresentaram, em geral, características muito semelhantes às do controle. A adição de uréia e de uréia mais CaCO3 às silagens resultou em aumento (P<0,05) nos teores de PB. A adição conjunta de uréia e CaCO3 não propiciou aumento (P<0,05) superior ao obtido nas silagens contendo apenas uréia. Uréia pura, como aditivo, pode ser recomendada na ensilagem dos híbridos BR700, BR601 e AG2002

Teores de fibra em detergente neutro, fibra em ditergente ácido, lignina e digestibilidade in vitro da matéria seca das silagens de três genótipos de girassol (Helianthus annuus L.) com aditivos em sete diferentes épocas de abertura.

Foram ensilados tres genotipos de girassol (M 734, Rumbosol 91 e a variedade V2000), sendo a forragem fresca enriquecida com 0,5% de ureia (U); 0,5% de carbonato de calcio (CC); 0,5% de ureia mais 0,5% de carbonato de calcio (U+CC); inoculante bacteriano (IB) comercial. Tambem foi ensilado material original sem aditivo que serviu como silagem testemunha (T). Foram utilizados silos de laboratorio de PVC, abertos com um, tres, cinco, sete, 14, 28 e 56 dias de ensilados, sendo determinados fibra em detergente neutro (FDN), fibra em detergente acido (FDA), lignina e a digestibilidade in vitro da materia seca (DIVMS). As silagens do Rumbosol 91 apresentaram valores estatisticos superiores ao genotipo V2000 e M734 na maioria dos dias de abertura para o FDN, FDA e lignina, sendo que os aditivos não promoveram alteracoes nos constituintes da parede celular. As silagens T apresentaram no dia de abertura 56 valores de 51,0%, 49,1% e 48,9% de DIVMS para o genotipo M734, V2000 e Rumbosol 91, respectivamente, nao havendo diferença entre eles, o mesmo observado para os aditivos utilizados no decorrer do processo fermentativo. Pode-se concluir, que os aditivos utilizados neste experimento nao proporcionaram melhoras nas silagens de girassol quanto aos parametros avaliados

Valores de pH e teores de nitrogênio amoniacal das silagens de três genótipos de girassol (Helianthus annuus L.) com aditivos durante o processo fermentativo.

Silagens de tres genotipos de girassol: M 734, Rumbosol 91 e a variedade V2000, foram enriquecida com 0,5% de ureia (U); 0,5% de carbonato de calcio (CC); 0,5% de ureia mais 0,5% de carbonato de calcio (U+CC); inoculante bacteriano (IB), sendo também ensilado material original sem aditivo que serviu como silagem testemunha (T), visando avaliar os efeitos nos valores de pH e nitrogenio amoniacal (N-NH)(. Foram utilizados silos de laboratório de PVC, abertos nos dias um, tres, cinco, sete, 14, 28 e 56 de ensilados. A adicao de U as silagens acarretou em pH numericamente mais elevado em todas as silagens a partir do terceiro dia de abertura quando comparado a silagem T, porem as diferenças estatisticas observadas nao foram consistentes. Os maiores valores de pH foram verificados nas silagens de girassol tratadas com U+CC (78,8% N-NH3/NT), que estabilizou a producao de nitrogenio amoniacal no decimo quarto dia de abertura com 69,3% N.NH3/NT. A penas a adicao de ureia associada a carbonato de calcio apresentou a mesma resposta para os parametros avaliados nos tres genotipos. Contudo, deve-se ter cautela na recomendacao destes aditivos para silagem de girassol, pois estes altos valores encontrados podem estar relacionados a fermentacao indesejaveis no silo

2P15-p16.1 microdeletions encompassing and proximal to BCL11A are associated with elevated HbF in addition to neurologic impairment

Elevated fetal hemoglobin (HbF) ameliorates the clinical severity of hemoglobinopathies such as β-thalassemia and sickle cell anemia. Currently, the only curative approach for individuals under chronic transfusion/chelation support therapy is allogeneic stem cell transplantation. However, recent analyses of heritable variations in HbF levels have provided a new therapeutic target for HbF reactivation: the transcriptional repressor BCL11A. Erythroid-specific BCL11A abrogation is now actively being sought as a therapeutic avenue, but the specific impact of such disruption in humans remains to be determined. Although single nucleotide polymorphisms in BCL11A erythroid regulatory elements have been reported, coding mutations are scarcer. It is thus of great interest that patients have recently been described with microdeletions encompassing BCL11A. These patients display neurodevelopmental abnormalities, but whether they show increased HbF has not been reported. We have examined the hematological phenotype, HbF levels, and erythroid BCL11A expression in 3 such patients. Haploinsufficiency of BCL11A induces only partial developmental g-globin silencing. Of greater interest is that a patient with a downstream deletion exhibits reduced BCL11A expression and increased HbF. Novel erythroid-specific regulatory elements in this region may be required for normal erythroid BCL11A expression, whereas loss of separate elements in the developing brain may explain the neurological phenotype

Teores de ácidos graxos voláteis e acido láctico das silagens de girassol (Helianthus annuus L.) tratadas com aditivos em seis diferentes épocas de abertura.

O objetivo deste trabalho foi avaliar os teores de acidos organicos das silagens de tres genotipos de girassol (M734, Rumbosol 91 e variedade V2000) enriquecida com os seguintes aditivos 0,5% de ureia (U); 0,5% de carbonato de calcio (CC); 0,5% de ureia mais 0,5 de carbonato de calcio (U*CC); inoculante bacteriano (IB) comercial. Também foi ensilado material original sem aditivos que serviu como silagem testemunha (T), sendo utilizados 180 silos de laboratorio de PVC, os quais foram abertos nos dias: um, tres, cinco, sete, 28 e 56 dias. Foram determinados os teores dos acidos lactico, acetico, propionico e butirico por cromatografia gasosas. As silagens com aditivos tiveram a concentracao de acido lactico diminuida significativamente no intervalo para o dia 56 e, com excecao do M734, foram menores que a silagem T, chegando a não ser detectado acido lactico nas silagens do Rumbosol 91 tratados com U, CC, e UCC. Somente as silagens com U*CC foram consistentes em alterar os teores de acido butirico no dia 56 para todos os genotipos (3,62%; 2,73% e 1,69% para o V2000, Rumbosol 91 e M734, respectivamente). O uso do CC elevou a concentracao de acido propionico para 1,39% no ultimo dia de abertura no Rumbosol 91. Sua associacao com ureia resultou em aumento do teor de acido propionico nas silagens do V2000 (0,84%) e do Rumbosol 91 (1,32%). Os aditivos utilizados neste experimentos nao promoveram melhores quanto aos teores dos acidos organicos analisados nas silagens de girassol

Teores de matéria seca, proteína bruta, carboidratos solúveis e extrato etéreo das silagens de tres genótipos de girassol (Helianthus annuus L.) com aditivos em sete diferentes épocas de abertura.

O objetivo deste experimento foi avaliar os teores de materia seca (MS), proteína bruta (PB), carboidratos soluveis (CHO) e extrato etereo (EE) das silagens de tres genotipos: M 734, Rumbosol 91 e a variedade V2000, enriquecidas com ureia (U), carbonato de calcio (CC), ureia mais carbonato de calcio (U*CC); e inoculante bacteriano (IB), sendo tambem ensilado material original sem aditivo que serviu como silagem testemunha (T). Foram utilizados silos de laboratorio de PVC, abertos com um, tres, cinco, sete, 14, 28 e 56 dias de ensilados. As silagens de genotipos M734 foram as que apresentaram os maiores teores de MS comparadas as silagens do Rumbosol 91 e este maior que o V2000. A adicao somente de U resultou em silagens com teores de PB superiores as silagens T e foram semelhantes entre si nos diferentes dias de abertura. Os teores de CHO soluveis variaram de 0,03% a 3,86%, sendo que as silagens T e com aditivos do genotipo M734 apresentaram no dia de abertura um teores significativamente superiores ao Rumbosol 91 e ao V2000. O IB nao promoveu uma rapida queda nos teores de CHO soluveis como esperado. os teores de EE foram estatisticamente superiores para os genotipos V2000 e M734 em relacao ao Rumbosol 91 e nao apresentaram diferenca com a utilizacao dos aditivos. Concluindo, as silagens de girassol avaliadas apresentaram baixos teores de MS e apenas o uso de ureia promoveu alteracoes aumentando o teor de proteina bruta das silagens dentro dos parametros avaliados