Atividade leishmanicida e citotoxicidade de constituintes químicos de duas espécies de Annonaceae cultivadas no nordeste do Brasil

INTRODUCTION: Visceral leishmaniasis is endemic in 88 countries, with a total of 12 million people infected and 350 million at risk. In the search for new leishmanicidal agents, alkaloids and acetogenins isolated from leaves of Annona squamosa and seeds of Annona muricata were tested against promastigote and amastigote forms of Leishmania chagasi. METHODS: Methanol-water (80:20) extracts of A. squamosa leaves and A. muricata seeds were extracted with 10% phosphoric acid and organic solvents to obtain the alkaloid and acetogenin-rich extracts. These extracts were chromatographed on a silica gel column and eluted with a mixture of several solvents in crescent order of polarity. The compounds were identified by spectroscopic analysis. The isolated compounds were tested against Leishmania chagasi, which is responsible for American visceral leishmaniasis, using the MTT test assay. The cytotoxicity assay was evaluated for all isolated compounds, and for this assay, RAW 264.7 cells were used. RESULTS: O-methylarmepavine, a benzylisoquinolinic alkaloid, and a C37 trihydroxy adjacent bistetrahydrofuran acetogenin were isolated from A. squamosa, while two acetogenins, annonacinone and corossolone, were isolated from A. muricata. Against promastigotes, the alkaloid showed an IC50 of 23.3 µg/mL, and the acetogenins showed an IC50 ranging from 25.9 to 37.6 µg/mL; in the amastigote assay, the IC50 values ranged from 13.5 to 28.7 µg/mL. The cytotoxicity assay showed results ranging from 43.5 to 79.9 µg/mL. CONCLUSIONS: These results characterize A. squamosa and A. muricata as potential sources of leishmanicidal agents. Plants from Annonaceae are rich sources of natural compounds and an important tool in the search for new leishmanicidal therapies.INTRODUÇÃO: A leishmaniose visceral é uma enfermidade endêmica em 88 países, com um total de 12 milhões de pessoas infectadas e 350 milhões em risco. Na procura de novos agentes com ação leishmanicida, alcalóides e acetogeninas isoladas de Annona squamosa e Annona muricata, foram testados contra as formas promastigotas e amastigotas de Leishmania chagasi. MÉTODOS: Foram preparados extratos com metanol: água (80: 20) das folhas de A. squamosa e sementes de A. muricata que foram extraídos com solução de ácido fosfórico 10% e solventes orgânicos, para obter extratos ricos em alcalóides e acetogeninas. Estes extratos foram cromatografados em coluna de sílica gel sendo eluídos com solventes de diferentes polaridades para o isolamento dos constituintes, e feita a determinação estrutural por análise espectroscópica. Os constituintes isolados foram testados contra Leishmania chagasi, responsável pela leishmaniose visceral, utilizando o teste MTT. Testes de toxicidade foram realizados em todos os compostos isolados, sendo utilizadas células RAW 264.7. RESULTADOS: Um alcalóide benzilisoquinolínico, O-metilarmepavina, e uma C37-triidróxi-acetogenina com anel bistetrahidrofurânico adjacente foram isolados de A. squamosa e duas acetogeninas annonacinona e corossolona da A. muricata. O alcalóide mostrou um índice de inibição médio (IC50) de 23,3µg/mL e as acetogeninas apresentaram IC50 variando entre 25,9 a 37,6µg/mL contra promastigotas, e no ensaio de amastigotas, o IC50 valores variaram entre 13,5 a 28,7 µg/mL. A toxicidade mostrou resultados que variaram entre 43,5 a 79,9µg/mL. CONCLUSÕES: Estes resultados caracterizam A. squamosa e A. muricata como fontes potenciais de agentes leishmanicidas.Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)FUNCAP Fundação Cearense de Apoio ao Desenvolvimento Científico e TecnológicoSistema Único de Saúd

Association of Chlamydia trachomatis, C. pneumoniae, and IL-6 and IL-8 Gene Alterations With Heart Diseases

Atherosclerosis is a progressive disease characterized by chronic inflammation of the arterial walls, associated with genetic and infectious factors. The present study investigated the involvement of Chlamydia trachomatis and Chlamydia pneumoniae infections and immunological markers (C-reactive protein, CRP, TNF-α, IL-6, IL-8, and IL-10) in the process of atherosclerosis. The evaluation included 159 patients for surgical revascularization (CAD) and 71 patients for surgical heart valve disease (HVD) at three hospitals in Belém, Brazil. The control group (CG) comprised 300 healthy individuals. Blood samples collected before surgery were used for antibodies detection (enzyme immunoassay), CRP (immunoturbidimetry) and IL-6 levels (enzyme immunoassay). Tissue fragments (atheroma plaque, heart valve and ascending aorta) were collected during surgery and subjected to qPCR for detection of bacterial DNA. Promoter region polymorphisms of each marker and relative quantification of TNF-α, IL-8, and IL-10 gene expression were performed. Demography and social information were similar to the general population involved with both diseases. Antibody prevalence to C. trachomatis was 30.6, 20.3, and 36.7% (in the CAD, HVD, and CG, respectively) and to C. pneumoniae was 83.6, 84.5, and 80.3% (in the CAD, HVD, and CG, respectively). C. trachomatis cryptic plasmid DNA was detected in 7.4% of the samples. Frequency of IL6−174G>C polymorphism was higher in CAD and HVD than in CG regardless of previous exposure to Chlamydia. Previous C. trachomatis infection showed involvement in HVD and CAD. Significant association between disease and previous C. pneumoniae infection was found only among HVD. GG genotype of IL6−174G>C is apparently a risk factor for heart disease, whereas AT genotype of IL8−251A>T was mainly involved in valvulopathies, including patients with prior exposure to C. pneumoniae

Investigação da infecção por Epstein Barr vírus (EBV) e associação com o perfil epidemiológico, clínico e citogenético de pacientes portadores de leucemia linfocítica crônica (LLC) / Investigation of Epstein Barr virus (EBV) infection and association with the epidemiological, clinical and cytogenetic profile of patients with chronic lymphocytic leukemia (LLC)

A Leucemia Linfocítica Crônica (LLC) é uma doença linfoproliferativa considerada a doença mais comum nos idosos no mundo ocidental. A citogenética é uma importante ferramenta prognóstica que demonstra as principais alterações cromossômicas predizendo o curso clínico da doença, a sobrevida do paciente e auxilia na escolha do tratamento. O vírus Epstein-Barr (EBV) é um γ ubíquo-herpesvírus que infecta mais de 90% da população mundial. A relação entre EBV e o curso clínico de pacientes com LLC é desconhecida. O objetivo desse trabalho é investigar a infecção do EBV em pacientes portadores de LLC. Foi realizado um estudo transversal de 46 pacientes sob diagnóstico de LLC e tratamento efetivado nos períodos de 2017 a 2019. Os dados foram obtidos pela revisão de prontuários médicos e registrados via formulário eletrônico com aspectos demográficos, clínicos, parâmetros hematológicos e perfil citogenético. Para a detecção do EBV foi utilizado o teste de reação em cadeia da polimerase (PCR). O DNA viral foi extraído com auxílio do kit “QIAamp DNA Mini” (QIAGEN) e submetido à reação de PCR, utilizando o kit comercial Ludwig Biotec, tendo como alvo o gene EBNA-3C. Observou-se que o sinal clínico mais frequente foi esplenomegalia e a linfocitose a alteração laboratorial de mau prognóstico. As alterações citogenéticas foram encontradas em 36,6% da população estuda e 16,67% foram de mau prognóstico (deleção 11q, 17p e tp53). Foram detectados 43,47% dos pacientes com DNA viral do EBV. Ocorrendo um aumento estatístico significativo de complicações e comorbidade e evoluções a óbito nos pacientes EBV positivo (p<0,03 e p<0,025, respectivamente). Houve correlação entre as alterações citogenéticas e a infecção por EBV (p<0,0001). Observando que a maioria dos pacientes diagnosticados nesse estudo com as alterações citogéneticas de mau prognóstico apresentarem DNA viral detectável para EBV, sugerindo-se que a infecção por EBV possa piora o prognóstico nesses pacientes, causando uma sobrevida mais curta. A maioria dos achados deste estudo assemelha-se aos relatos da literatura, contudo, evidenciou-se a necessidade de estudos com maior casuística a fim de melhor esclarece a relação entre a infecção do EBV com a LLC

Análise da eficiência da diatomita no tratamento de fluido sintético oleoso, visando aplicação em água produzida em campos de petróleo / Efficiency analysis of diatomite in the treatment of oily synthetic fluid, aiming at application in oil field produced water

Em campos maduros de petróleo é produzido um volume elevado de água como resíduo. O gerenciamento dessa água produzida é um grande desafio para as empresas petrolíferas e, em virtude das grandes quantidades de contaminantes tóxicos, a mesma deve ser rigorosamente tratada com a finalidade de atender as exigências ambientais antes de ser encaminhada ao seu destino final. Diversas técnicas para tratar a água produzida vêm sendo desenvolvidas e a adsorção tem ganhado bastante destaque nesses estudos por apresentar bons resultados. Este trabalho teve como objetivo analisar a utilização da diatomita na forma natural e hidrofobizada como adsorventes para remoção de hidrocarbonetos em fluido sintético. Os materiais foram caracterizados pelas técnicas de termogravimetria e de espectroscopia de absorção na região do infravermelho por transformada de Fourier-FTIR, e através dos resultados obtidos foi verificado que o processo de hidrofobização da diatomita ocorreu corretamente. Para o estudo da eficiência dos materiais no processo de adsorção, um volume fixo de fluido sintético foi posto em contato com os adsorventes sob agitação, amostras foram recolhidas durante os testes experimentais para analisar a sua turbidez e massa específica. Verificou-se que a diatomita hidrofobizada apresentou uma remoção de turbidez nos fluidos acima de 43%, porém, o material natural mostrou uma eficiência maior para essa remoção, superior a 90%. Após o contato com os adsorventes, a massa específica dos fluidos aumentou para valores um pouco superiores ao da água, sugerindo que os hidrocarbonetos foram adsorvidos. Portanto, a diatomita apresenta bom potencial para ser utilizada no tratamento de água produzida. 

Polymorphisms in the MBL2 gene are associated with the plasma levels of MBL and the cytokines IL-6 and TNF-α in severe COVID-19

IntroductionMannose-binding lectin (MBL) promotes opsonization, favoring phagocytosis and activation of the complement system in response to different microorganisms, and may influence the synthesis of inflammatory cytokines. This study investigated the association of MBL2 gene polymorphisms with the plasma levels of MBL and inflammatory cytokines in COVID-19.MethodsBlood samples from 385 individuals (208 with acute COVID-19 and 117 post-COVID-19) were subjected to real-time PCR genotyping. Plasma measurements of MBL and cytokines were performed by enzyme-linked immunosorbent assay and flow cytometry, respectively.ResultsThe frequencies of the polymorphic MBL2 genotype (OO) and allele (O) were higher in patients with severe COVID-19 (p< 0.05). The polymorphic genotypes (AO and OO) were associated with lower MBL levels (p< 0.05). IL-6 and TNF-α were higher in patients with low MBL and severe COVID-19 (p< 0.05). No association of polymorphisms, MBL levels, or cytokine levels with long COVID was observed.DiscussionThe results suggest that, besides MBL2 polymorphisms promoting a reduction in MBL levels and therefore in its function, they may also contribute to the development of a more intense inflammatory process responsible for the severity of COVID-19

Regulation of the Immune Checkpoint Indoleamine 2,3-Dioxygenase Expression by Epstein–Barr Virus

Epstein–Barr virus (EBV) is an oncovirus ubiquitously distributed and associated with different types of cancer. The reason why only a group of infected people develop cancer is still unknown. EBV-associated cancers represent about 1.8% of all cancer deaths worldwide, with more than 150,000 new cases of cancer being reported annually. Since EBV-associated cancers are described as more aggressive and more resistant to the usual treatment compared to EBV-negative ones, the recent introduction of monoclonal antibodies (mAbs) targeting immune checkpoints (ICs) in the treatment of cancer patients represents a possible therapy for EBV-associated diseases. However, the current mAb therapies available still need improvement, since a group of patients do not respond well to treatment. Therefore, the main objective of this review is to summarize the progress made regarding the contribution of EBV infection to the expression of the IC indoleamine 2,3-dioxygenase (IDO) thus far. This IC has the potential to be used as a target in new immune therapies, such as mAbs. We hope that this work helps the development of future immunotherapies, improving the prognosis of EBV-associated cancer patients

Molecular detection of Treponema pallidum sp. pallidum in blood samples of VDRL-seroreactive women with lethal pregnancy outcomes: a retrospective observational study in northern Brazil

INTRODUCTION: Although control measures of maternal and congenital syphilis are available in Brazil, difficulties exist within the healthcare network in providing a laboratory diagnosis of the infection during the prenatal period. The objective of this study was to confirm the presence of Treponema pallidum by PCR in women with positive VDRL serology and lethal pregnancy outcomes, i.e., abortion, stillbirth and neonatal death. METHODS: A retrospective study was conducted on VDRLseroreactive women with lethal pregnancy outcomes admitted to the Fundação Santa Casa de Misericórdia do Pará (FSCM-PA) between January and July 2004. Serum samples and DNA from whole blood were obtained at the time of screening by the VDRL test. These samples were analyzed by IgG ELISA, IgM FTA-Abs and simple PCR (polA). RESULTS: During the study period, 0.7% (36/4,912) of women with lethal pregnancy outcomes presented a positive VDRL test. The polAgene was amplified in 72.7% (24/33) of these women, with 55.6% (20/36) and 94.4% (34/36) presenting IgM and IgG antibodies against T. pallidum, respectively. Comparison of these results showed a significant difference, with agreement between the PCR and IgM FTA-Abs results, suggesting that maternal syphilis was an active infection. No basic cause of death of the conceptus was reported in 97.2% (35/36) of cases. Among women who were submitted to the VDRL test during the prenatal period, only four of the nine seroreactive patients underwent treatment. CONCLUSIONS: The high frequency of syphilis in the group studied indicates the fragility of the service of infection diagnosis, treatment and monitoring, compromising epidemiological control

Molecular detection of Treponema pallidum sp. pallidum in blood samples of VDRL-seroreactive women with lethal pregnancy outcomes: a retrospective observational study in northern Brazil Detecção molecular do Treponema pallidum sp. pallidum em amostras de sangue de mulheres sororeativas ao VDRL com resultado letal da gravidez: um estudo observacional retrospectivo no norte do Brasil

INTRODUCTION: Although control measures of maternal and congenital syphilis are available in Brazil, difficulties exist within the healthcare network in providing a laboratory diagnosis of the infection during the prenatal period. The objective of this study was to confirm the presence of Treponema pallidum by PCR in women with positive VDRL serology and lethal pregnancy outcomes, i.e., abortion, stillbirth and neonatal death. METHODS: A retrospective study was conducted on VDRLseroreactive women with lethal pregnancy outcomes admitted to the Fundação Santa Casa de Misericórdia do Pará (FSCM-PA) between January and July 2004. Serum samples and DNA from whole blood were obtained at the time of screening by the VDRL test. These samples were analyzed by IgG ELISA, IgM FTA-Abs and simple PCR (polA). RESULTS: During the study period, 0.7% (36/4,912) of women with lethal pregnancy outcomes presented a positive VDRL test. The polAgene was amplified in 72.7% (24/33) of these women, with 55.6% (20/36) and 94.4% (34/36) presenting IgM and IgG antibodies against T. pallidum, respectively. Comparison of these results showed a significant difference, with agreement between the PCR and IgM FTA-Abs results, suggesting that maternal syphilis was an active infection. No basic cause of death of the conceptus was reported in 97.2% (35/36) of cases. Among women who were submitted to the VDRL test during the prenatal period, only four of the nine seroreactive patients underwent treatment. CONCLUSIONS: The high frequency of syphilis in the group studied indicates the fragility of the service of infection diagnosis, treatment and monitoring, compromising epidemiological control.INTRODUÇÃO: Apesar das medidas de controle da sífilis materna e congênita estarem disponíveis no Brasil, existem dificuldades da rede em prover o diagnóstico laboratorial da infecção durante o pré-natal. O objetivo deste estudo foi confirmar a presença do Treponema pallidum pela PCR em mulheres com sorologia positiva ao VDRL e com resultado letal da gravidez, isto é, aborto, natimorto e neomorto. MÉTODOS: Estudo retrospectivo realizado em mulheres VDRL-sororeativas com resultado negativo da gravidez, admitidas na Fundação Santa Casa de Misericórdia do Pará FSCM-PA entre janeiro e julho de 2004. As amostras de soro e DNA de sangue total foram obtidas no mesmo período da triagem pelo VDRL. Estas amostras foram analisadas pelo ELISA IgG, FTA-Abs IgM e PCR simples (polA). RESULTADOS: Durante o período de estudo, 0,7% (36/4.912) das mulheres com resultado letal da gravidez apresentaram VDRL positivo. O genepolA foi amplificado em 72,7% (24/33) destas mulheres,com 55,6% (20/36) e 94,4% (34/36) apresentando anticorpos tipo IgG e IgM contra o T. pallidum, respectivamente. A comparação destes resultados mostrou uma diferença estatística significativa, sendo que os resultados da PCR versus FTA-Abs Ig Mmostraram-se concordantes, sugerindo que a sífilis materna era uma infecção ativa. A causa básica de morte dos conceptos não foi relatada em 97,2% (35/36) dos casos. Entre as mulheres que foram submetidas ao VDRL no pré-natal, somente quatro das nove soropositivas receberam tratamento. CONCLUSÕES: A elevada frequência de sífilis no grupo de estudo indica a fragilidade do serviço no diagnóstico, tratamento e monitoramento da infecção, comprometendo o controle epidemiológico

Diagnóstico precoce de Hanseníase em crianças da Vila Santo Antônio do Prata, região hiperendêmica no estado do Pará

This article reports the extension project of early detection of leprosy in schoolchildren from the Eastern Amazon. These are the activities developed by the project "Health promotion focusing on education and diagnosis of leprosy in children in schools in the village of Santo Antônio do Prata", linked to a Higher Education Institution in the North of Brazil and conducted between March and July 2017 in a hyperendemic area. Children (n = 154) were screened using a protocol from the Brazilian Health Ministry with the help of a multi-professional health team, and 3 new cases were diagnosed by clinical and histopathological criteria in children aged 3 to 7 years old. The importance of this type of activity is that school age does not usually represent an age group of leprosy occurrence, so its detection indicates the need for early diagnosis to control leprosy at the family level.Este artigo relata o projeto de extensão em detecção precoce de Hanseníase em escolares da Amazônia Oriental. Tratam-se das atividades desenvolvidas pelo projeto “Promoção de saúde com foco em educação e diagnóstico em Hanseníase em crianças de escolas da Vila de Santo Antônio do Prata”, vinculado a uma Instituição de Ensino Superior do Norte do Brasil e realizado entre março e julho de 2017 em área de hiperendemicidade. A partir de 154 crianças triadas pela Ficha de Autoimagem do Ministério da Saúde, com o auxílio de uma Equipe Multiprofissional em Saúde, foram diagnosticados, por critérios clínicos e histopatológicos, 3 casos novos em crianças com idade entre 3 e 7 anos. A importância desse tipo de atividade reside no fato de que a idade escolar normalmente não representa uma faixa etária de ocorrência de hanseníase, portanto a sua detecção indica necessidade de diagnóstico precoce para controle da Hanseníase em nível familiar