Validierung der Herstellung und Qualitätsprüfung autologer dendritischer Zellen für die adjuvante Immuntherapie

Am Institut für Klinische Hämostaseologie und Transfusionsmedizin der Universität des Saarlandes wurde 2012 ein Forschungsprojekt initiiert, um die Herstellungserlaubnis für dendritische Zellen zur adjuvanten Immuntherapie von höhergradigen Gliomen zu erlangen. Gliome sind die häufigsten primären Hirntumore, wobei die höhergradig-malignen Glioblastome unter diesen den größten Anteil ausmachen. Die Standardtherapie dieser Tumorentität ist die Kombination aus Operation und Radiochemotherapie. Unter dieser Therapie liegt die mittlere Überlebenszeit der Patienten bei 14,6 Monaten. Auf Grund der nicht zufriedenstellenden Therapieergebnisse beschäftigen sich viele Studien mit alternativen Therapiemöglichkeiten, unter anderem auch mit Arzneimitteln für neuartige Therapien. Zu diesen zählen auch somatische Zelltherapeutika, wie beispielsweise dendritische Zellen zur adjuvanten Immuntherapie. Um somatische Zelltherapeutika zur Anwendung am Patienten herstellen zu dürfen, muss dem herstellenden Labor durch die zuständige Landesaufsichtsbehörde eine Herstellungserlaubnis erteilt werden. Diese Herstellungserlaubnis wird beim saarländischen Ministerium für Soziales, Gesundheit, Frauen und Familie beantragt und durch dieses erteilt. Zuvor müssen zahlreiche Verfahrensschritte im Herstellungsprozess etabliert sowie validiert werden und Funktionstests mit den generierten dendritischen Zellen durchgeführt werden. Alle hierbei gewonnenen Ergebnisse werden in Form eines Validierungsberichtes der zuständigen Behörde vorgelegt. Ziel dieser Arbeit war es, durch die Etablierung und Validierung unterschiedlicher Methoden zur Erlangung der Herstellungserlaubnis beizutragen. Hierzu wurden verschiedenste Untersuchungen an Proben der DZ-Kulturen durchgeführt, die sowohl Sicherheit als auch Qualität des Herstellungsprozesses und des zellulären Produktes gewährleisten sollen.In 2012 the Institute for Clinical Hemostaseology and Transfusion Medicine of the University of the Saarland started a research project to obtain the permission for the manufacturing of dendritic cells for adjuvant immunotherapy of malignant glioma. Gliomas are the most frequent primary brain tumors and the high-grade glioblastomas account for the largest part of these. The standard course of therapy for high-grade glioblastoma is the combination of operation, radio- and chemotherapy. Under this therapy the mean survival time for a patient amounts to 14,6 month. Due to these poor treatment outcomes, many studies are concerned with alternative therapy approaches for this tumor entity, as for example with Advanced Therapy Medical Products. These also include somatic cell based therapeutics, such as dendritic cells for adjuvant immunotherapy. To be authorized to produce somatic cell based therapeutics for human use the producer has to obtain the permission of manufacturing. This permission is applied at the Ministry for Social Affairs, Health Care, Women and Family of the Saarland. To obtain this permission, numerous procedural steps have to be proved as well as established and performance tests have to be carried out with the manufactured dendritic cells. All results gained at this were submitted to the competent authority in form of a validation report. The object of this research was to contribute to the obtainment of permission for the manufacturing by validation and establishment of different methods. For this purpose different investigations on the dendritic cells were carried out to prove quality and safety of the manufacturing process as well as the manufactured product

Elucidating different pattern of immunoregulation in BALB/c and C57BL/6 mice and their F1 progeny

© The Author(s) 2021. Open Access. This article is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License, which permits use, sharing, adaptation, distribution and reproduction in any medium or format, as long as you give appropriate credit to the original author(s) and the source, provide a link to the Creative Commons licence, and indicate if changes were made. The images or other third party material in this article are included in the article’s Creative Commons licence, unless indicated otherwise in a credit line to the material. If material is not included in the article’s Creative Commons licence and your intended use is not permitted by statutory regulation or exceeds the permitted use, you will need to obtain permission directly from the copyright holder. To view a copy of this licence, visit http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ .Helminths are large multicellular parasites that infect one quarter of the human population. To prolong their survival, helminths suppress the immune responses of their hosts. Strongyloides ratti delays its expulsion from the gut by induction of regulatory circuits in a mouse strain-specific manner: depletion of Foxp3+ regulatory T cells (Treg) improves the anti-S. ratti immunity in BALB/c but not in C57BL/6 mice. In the current study we compare the hierarchy of immunoregulatory pathways in BALB/c, C57BL/6 mice and their F1 progeny (BALB/c × C57BL/6). Using multicolor flow cytometry, we show that S. ratti induces a distinct pattern of inhibitory checkpoint receptors by Foxp3+ Treg and Foxp3- T cells. Intensity of expression was highest in C57BL/6 and lowest in BALB/c mice, while the F1 cross had an intermediate phenotype or resembled BALB/c mice. Treg subsets expanded during infection in all three mouse strains. Similar to BALB/c mice, depletion of Treg reduced intestinal parasite burden and increased mucosal mast cell activation in S. ratti-infected F1 mice. Our data indicate that Treg dominate the regulation of immune responses in BALB/c and F1 mice, while multiple regulatory layers exist in C57BL/6 mice that may compensate for the absence of Treg.Open Access funding enabled and organized by Projekt DEAL.info:eu-repo/semantics/publishedVersio

A quantitative synthesis study on body mass index and associated factors among adult men and women in Switzerland

Excess weight is caused by multiple factors and has increased sharply in Switzerland since the 1990s. Its consequences represent a major challenge for Switzerland, both in terms of health and the economy. Until now, there has been no cross-dataset overview study on excess weight in adults in Switzerland. Therefore, our aim was to conduct the first synthesis on excess weight in Switzerland. We included all existing nationwide Swiss studies (eight total), which included information on body mass index (BMI). Mixed multinomial logistic regression analyses were performed to assess the associations between different socio-demographic, lifestyle cofactors and the World Health Organization (WHO) categories for BMI. Along with lifestyle factors, socio-demographic factors were among the strongest determinants of BMI. In addition, self-rated health status was significantly lower for underweight, pre-obese and obese men and women than for normal weight persons. The present study is the first to synthesise all nationwide evidence on the importance of several socio-demographic and lifestyle factors as risk factors for excess weight. In particular, the highlighted importance of lifestyle factors for excess weight opens up the opportunity for further public health interventions

Handreichung Anrechnung Teil 1. Ein theoretischer Überblick

Diese Handreichung gibt in neun Kapiteln einen theoretischen Einblick in das Thema Anrechnung. Dabei werden u. a. Anrechnungsverfahren, zentrale Konzepte und Bezugsrahmen sowie die Qualitätssicherung in Anrechnungsprozessen in den Blick genommen. Die Handreichung wird ergänzt durch einen zweiten Teil, der Praxiserfahrungen mit Anrechnung einbezieht. Diese Publikation ist im Rahmen der wissenschaftlichen Begleitung des Bund-Länder-Wettbewerbs „Aufstieg durch Bildung: offene Hochschulen“ entstanden. (Hrgs.

Structural and mechanistic aspects influencing the ADAM10-mediated shedding of the prion protein

Background: Proteolytic processing of the prion protein (PrPC) by endogenous proteases generates bioactive membrane-bound and soluble fragments which may help to explain the pleiotropic roles of this protein in the nervous system and in brain diseases. Shedding of almost full-length PrPC into the extracellular space by the metalloprotease ADAM10 is of peculiar relevance since soluble PrP stimulates axonal outgrowth and is protective in neurodegenerative conditions such as Alzheimer’s and prion disease. However, molecular determinates and mechanisms regulating the shedding of PrP are entirely unknown. Methods: We produced an antibody recognizing the neo-epitope of shed PrP generated by ADAM10 in biological samples and used it to study structural and mechanistic aspects affecting the shedding. For this, we investigated genetically modified cellular and murine models by biochemical and morphological approaches. Results: We show that the novel antibody specifically detects shed PrP in cell culture supernatants and murine brain. We demonstrate that ADAM10 is the exclusive sheddase of PrPC in the nervous system and reveal that the glycosylation state and type of membrane-anchorage of PrPC severely affect its shedding. Furthermore, we provide evidence that PrP shedding can be modulated by pharmacological inhibition and stimulation and present data suggesting that shedding is a relevant part of a compensatory network ensuring PrPC homeostasis of the cell. Conclusions: With the new antibody, our study introduces a new tool to reliably investigate PrP-shedding. In addition, this study provides novel and important insight into the regulation of this cleavage event, which is likely to be relevant for diagnostic and therapeutic approaches even beyond neurodegeneration

Belagerte Moderne: Krieg und Kommune in der französischen Druckgraphik 1870/71 ; Begleitheft zur Ausstellung

Der Deutsch-Französische Krieg und die gewaltsamen Auseinandersetzungen um die Pariser Kommune stellen einen denkbar scharfen Kontrast zum kulturellen Leben der modernen Metropole Paris in den Jahren vor 1870 dar. Die 1860er Jahre waren auch in den bildenden Künsten von einem produktiven Aufbruch gekennzeichnet: Édouard Manet hatte mit ersten Skandalen in Ausstellungen auf sich aufmerksam gemacht; Maler wie Claude Monet und Camille Pissarro begannen damit, den Impressionismus herauszubilden; und eine Reihe von ambitionierten Druckgraphikern hatte die Radierung als anspruchsvolles und durchaus modernes Bildmedium wiederbelebt. Während Krieg und Kommune in der offiziellen Kunst und im Impressionismus vergleichsweise wenige Spuren hinterlassen haben, lassen sich die einschneidenden Ereignisse der Jahre 1870 und 1871 in der Druckgraphik gut nachvollziehen. Radierungen von Adolphe Martial Potémont, Maxime Lalanne oder François Pierdon führen vor Augen, wie die Künstler mit ihren zuvor entwickelten künstlerischen Mitteln auf die radikal veränderte Situation zu reagieren versuchten. Ausstellung und Begleitheft stellen ausgewählte Druckgraphiken von französischen Künstlern ins Zentrum, um einen etwas anderen Blick auf den Deutsch-Französischen Krieg und die Kommune zu richten

ZBTB7A prevents RUNX1-RUNX1T1-dependent clonal expansion of human hematopoietic stem and progenitor cells

ZBTB7A is frequently mutated in acute myeloid leukemia (AML) with t(8;21) translocation. However, the oncogenic collaboration between mutated ZBTB7A and the RUNX1–RUNX1T1 fusion gene in AML t(8;21) remains unclear. Here, we investigate the role of ZBTB7A and its mutations in the context of normal and malignant hematopoiesis. We demonstrate that clinically relevant ZBTB7A mutations in AML t(8;21) lead to loss of function and result in perturbed myeloid differentiation with block of the granulocytic lineage in favor of monocytic commitment. In addition, loss of ZBTB7A increases glycolysis and hence sensitizes leukemic blasts to metabolic inhibition with 2-deoxy-d-glucose. We observed that ectopic expression of wild-type ZBTB7A prevents RUNX1-RUNX1T1-mediated clonal expansion of human CD34+ cells, whereas the outgrowth of progenitors is enabled by ZBTB7A mutation. Finally, ZBTB7A expression in t(8;21) cells lead to a cell cycle arrest that could be mimicked by inhibition of glycolysis. Our findings suggest that loss of ZBTB7A may facilitate the onset of AML t(8;21), and that RUNX1-RUNX1T1-rearranged leukemia might be treated with glycolytic inhibitors

Anrechnung Teil 1: Ein theoretischer Überblick

Diese Handreichung gibt in neun Kapiteln einen theoretischen Einblick in das Thema Anrechnung. Dabei werden unter anderem Anrechungsverfahren, zentrale Konzepte und Bezugsrahmen sowie die Qualitätssicherung in Anrechnungsprozessen in den Blick genommen. Die Handreichung wird ergänzt durch einen zweiten Teil, der Praxiserfahrungen mit Anrechnung einbezieht