Androgen receptor signaling regulates follicular growth and steroidogenesis in interaction with gonadotropins in the ovary during mini-puberty in mice

In females, androgens contribute to ovarian diseases such as polycystic ovarian syndrome (PCOS), but their action is also crucial for ovarian physiology, i.e., follicular growth and estradiol (E2) synthesis during reproductive life, in interaction with the gonadotropins LH and FSH. However, it is unclear whether androgens already play a role in the ovary at mini-puberty, a phase of postnatal development with active follicular growth and high E2 levels. Therefore, we analyzed the potential actions of androgens on the ovary and their possible interaction with gonadotropins during this period in mice. We used molecular-based studies and pharmacological approaches in vivo and on cultured ovaries. We found that mini-pubertal ovaries produce significant amounts of testosterone and display androgen receptor (AR) expression in growing follicles, both under the control of LH. By blocking AR signaling either in vivo or in ovarian cultures, we found that this pathway may participate in the regulation of prepubertal E2 synthesis and follicular growth, possibly by regulating the expression of a number of key intra-ovarian regulators, including FSH receptor (Fshr), the aromatase enzyme converting androgens into estrogens (Cyp19a1) and the cell cycle inhibitor p27KIP1 (Cdkn1b). We further showed that AR may stimulate FSH-mediated regulation of Cyp19a1 through its action on Fshr mRNA abundance. Overall, this work supports the idea that AR signaling is already activated in mini-pubertal ovaries to regulate E2 synthesis and follicular growth, at the interplay with LH and FSH signaling. Its early action may, thus, contribute to the implementation of early ovarian function with possible impacts on reproductive function

Optimisation et harmonisation des opérations de vérification de vide de ligne au sein d'un atelier Fabrication Formes Sèches

Après chaque production d'un lot de médicament et avant le démarrage de tout autre production, des étapes de vide de ligne et de vérification de vide de ligne sont essentielles afin d'éviter toute contamination croisée.Suite à l'observation de contaminations croisées dans un atelier de fabrication, il a été décidé de mettre en place une nouvelle méthode de vérification de vide de ligne.A l'issu de l'analyse du système en vigueur, une nouvelle structure de procédure fut mise en place afin de décrire tous les cas de chaînage qu'il est possible de rencontrer sur chaque équipement. D'autre part, une annexe à chaque procédure de vérification de vide de ligne fut créée de manière à fixer la chronologie des tâches à effectuer. La reproductibilité entre opérateurs est donc améliorée et la présence de cette annexe dans le dossier de lot permet d'accroître la traçabilité des opérations effectuées.TOURS-BU Sciences Pharmacie (372612104) / SudocSudocFranceF

Reconsidérer le rôle de la lignée germinale dans la différenciation et la fonction de l’ovaire

International audienceThe production of fertilizable ova is the consequence of multiple events that start as soon as ovarian development and culminate at the time of ovulation. Throughout their development, germ cells are associated with companion somatic cells, which ensure germ cell survival, growth and maturation. Data obtained in vitro and in vivo on several animal models of germ cell depletion have led to uncover the many roles of germ cells on both ovarian development and folliculogenesis. During ovarian development, germ cells become progressively enclosed within epithelial structures called "ovigerous cords" constituted by pregranulosa cells, lined by a basement membrane. At the end of ovarian development, ovigerous cords fragment into primordial follicles, which are epithelial units constituted by an oocyte surrounded by a single layer of granulosa cells. Germ cells are necessary for the fragmentation of ovigerous cords into follicles, since in their absence, no follicle will form. Germ cells also ensure the differentiation of the ovarian somatic lineage, and they may inhibit the testis-differentiating pathway by preventing the conversion of pregranulosa cells into Sertoli cells, their counterpart in the testis. Regularly, primordial follicles are recruited into the growing follicle pool and initiate their growth. They develop through primary, preantral, antral and preovulatory stages before being ovulated. Interestingly, the action of the oocyte on companion somatic cells tightly depends on the follicular stage. In primordial follicles, the oocyte prevents the transdifferentiation of granulosa cells into cells resembling Sertoli cells. By contrast, as soon as the follicle enters growth, the oocyte regulates the functional differentiation of granulosa cells and at the latest stages, it prevents their premature maturation into luteal cells. Overall, these data demonstrate that the female germ cell act on companion somatic cells to regulate ovarian development and folliculogenesis, thereby actively supporting its own maturation.Le stock de follicules primordiaux, chacun formé d’un ovocyte entouré par une assise de cellules somatiques folliculaires ou cellules de la granulosa, est définitivement constitué pendant la vie fœtale ou très peu de temps après la naissance chez la majorité des mammifères. Dès la constitution de cette réserve et jusqu'à son épuisement chez la femelle âgée, l’ovaire est le siège de la folliculogenèse qui est l’ensemble des processus de croissance et de maturation des follicules ovariens depuis le stade de follicule primordial jusqu’au stade préovulatoire. Sa finalité biologique est la production, lors de chaque cycle menstruel ou estrien, d’ovocytes aptes à la fécondation et au développement. L’obtention de tels ovocytes implique des régulations paracrines et endocrines complexes. Au cours de ces dernières décennies, de nombreuses données ont clairement établi l’importance des cellules somatiques ovariennes dans la survie, la croissance et la maturation ovocytaires. Mais ce n’est que plus récemment que des travaux ont mis en lumière le rôle clé joué par la cellule germinale dans la folliculogenèse et dans la différenciation ovarienne. Cette revue présente une synthèse des connaissances, basées principalement sur l’interprétation de travaux sur différents modèles animaux, ayant permis de reconsidérer le rôle des cellules germinales dans la différenciation et la fonction de l’ovaire

Deciphering the Roles & Regulation of Estradiol Signaling during Female Mini-Puberty: Insights from Mouse Models

Mini-puberty of infancy is a short developmental phase occurring in humans and other mammals after birth. In females, it corresponds to transient and robust activation of the hypothalamo-pituitary-ovarian (HPO) axis revealed by high levels of gonadotropin hormones, follicular growth, and increased estradiol production by the ovary. The roles of estradiol signaling during this intriguing developmental phase are not yet well known, but accumulating data support the idea that it aids in the implementation of reproductive function. This review aims to provide in-depth information on HPO activity during this particular developmental phase in several mammal species, including humans, and to propose emerging hypotheses on the putative effect of estradiol signaling on the development and function of organs involved in female reproduction

Synergetic effect of antibiotic mixtures on soil bacterial N2O-reducing communities

International audienceAntibiotics released in agricultural soils alter soil bacterial communities, inducing antimicrobial resistance and, in turn, canceling the efficiency of antibiotic drugs used for human and animal health. In soils, antibiotic impact on nitrogen cycling is poorly known, notably when antibiotic mixtures are applied. We hypothesized that the impact of antibiotic mixtures would have higher effects on denitrification. We exposed soil denitrifying bacteria enrichments to tetracycline, ofloxacin, sulfamethoxazole and tylosin, either applied single or as mixture of three antibiotics, during 7 days under denitrifying conditions. We measured the minimum inhibitory concentration of the N2O-reducing capacity of the bacterial enrichment, we deduced the half maximal effective concentration (EC50) from the experimental data and from the concentration addition hypothesis, and we quantified nosZ gene abundances. Results show that single antibiotic exposure inhibited N2O-reduction only for tetracycline at 64 mg/L. Inhibition by antibiotic mixtures always exceeded the modeled inhibition calculated by concentration addition. At high-antibiotic exposure, nosZ gene clade I denitrifiers remained abundant, of 107–108 copies/ng DNA. NosZ gene clade II denitrifiers increased with antibiotic concentrations. Our findings reveal for the first time the synergistic effects of antibiotic mixtures on soil nitrogen cycling

GnRH regulates the expression of its receptor accessory protein SET in pituitary gonadotropes.

Reproductive function is under the control of the neurohormone GnRH, which activates a G-protein-coupled receptor (GnRHR) expressed in pituitary gonadotrope cells. GnRHR activates a complex signaling network to regulate synthesis and secretion of the two gonadotropin hormones, luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone, both regulating gametogenesis and steroidogenesis in gonads. Recently, in an attempt to identify the mechanisms underlying GnRHR signaling plasticity, we identified the first interacting partner of GnRHR, the proto-oncogene SET. We showed that SET binds to intracellular domains of GnRHR to enhance its coupling to cAMP pathway in αT3-1 gonadotrope cells. Here, we demonstrate that SET protein is rapidly regulated by GnRH, which increases SET phosphorylation state and decreases dose-dependently SET protein level. Our results highlight a post-translational regulation of SET protein involving the proteasome pathway. We determined that SET phosphorylation upon GnRH stimulation is mediated by PKC and that PKC mediates GnRH-induced SET down-regulation. Phosphorylation on serine 9 targets SET for degradation into the proteasome. Furthermore, a non-phosphorylatable SET mutant on serine 9 is resistant to GnRH-induced down-regulation. Altogether, these data suggest that GnRH-induced SET phosphorylation on serine 9 mediates SET protein down-regulation through the proteasome pathway. Noteworthy, SET down-regulation was also observed in response to pulsatile GnRH stimulation in LβT2 gonadotrope cells as well as in vivo in prepubertal female mice supporting its physiological relevance. In conclusion, this study highlights a regulation of SET protein by the neurohormone GnRH and identifies some of the mechanisms involved

Les pesticides dans le bassin de la Seine: Comprendre les origines et le transfert des pesticides pour en évaluer l'impact sur l'homme et l'environnement

La contamination de l'environnement par les pesticides est une problématique majeure du XXIe siècle. Les produits de synthèse développés pour protéger les cultures sont devenus indispensables pour maintenir les rendements agricoles. Leurs usages se sont répandus jusque dans nos villes et nos jardins pour l'entretien des allées et trottoirs. Chaque année, de nouvelles matières actives sont autorisées. Dans le bassin versant de la Seine où se mêlent terres agricoles et zones périurbaines, il est difficile d'identifier ces sources. Le constat est préoccupant : les suivis de la qualité des eaux de surface montrent une contamination récurrente par les pesticides sur l'ensemble du territoire. La rémanence de certains produits comme l'atrazine explique également la contamination des eaux souterraines malgré leur interdiction, ce qui a conduit à l'abandon des captages d'eau potable les plus contaminés. Or, seulement 1 à 5 % des quantités appliquées sont effectivement transférées dans les cours d'eau. Dans un contexte où la réglementation sur les usages et sur les seuils de contamination das l'environnement évolue en continu, il devient indispensable de comprendre le devenir des pesticides dans le bassin versant. Cela passe par l'analyse du comportement des produits depuis leur application jusqu'à leur transfert dans les cours d'eau ou les eaux souterraines, en tenant compte des interactions possibles dans le sol, le sous-sol et l'atmosphère. Enfin, la modélisation est l'étape indispensable pour évaluer le risque de contamination future par des nouveaux produits actuellement utilisés. L'étude des anciennes molécules toujours présentes dans l'environnement permet d'établir les paramètres à prendre en compte. Les quantités utilisées et le taux de détection dans les milieux facilitent la calibration. Cela ne sera peut-être pas le cas des molécules plus récentes ayant un effet à des doses plus infimes et devenant donc difficiles à détecter dans le milieu naturel par des techniques d'analyse chromatographique classiques. Ces analyses amènent tant à rechercher de nouvelles pratiques culturales qu'à concevoir des programmes de réduction du recours aux produits phytosanitaires en milieu urbain, avec pour objectif une moindre contamination des milieux par les pesticides

Les pesticides dans le bassin de la Seine : Comprendre les origines et le transfert des pesticides pour en évaluer l'impact sur l'homme et l'environnement

La contamination de l'environnement par les pesticides est une problématique majeure du XXIe siècle. Les produits de synthèse développés pour protéger les cultures sont devenus indispensables pour maintenir les rendements agricoles. Leurs usages se sont répandus jusque dans nos villes et nos jardins pour l'entretien des allées et trottoirs. Chaque année, de nouvelles matières actives sont autorisées. Dans le bassin versant de la Seine où se mêlent terres agricoles et zones périurbaines, il est difficile d'identifier ces sources. Le constat est préoccupant : les suivis de la qualité des eaux de surface montrent une contamination récurrente par les pesticides sur l'ensemble du territoire. La rémanence de certains produits comme l'atrazine explique également la contamination des eaux souterraines malgré leur interdiction, ce qui a conduit à l'abandon des captages d'eau potable les plus contaminés. Or, seulement 1 à 5 % des quantités appliquées sont effectivement transférées dans les cours d'eau. Dans un contexte où la réglementation sur les usages et sur les seuils de contamination das l'environnement évolue en continu, il devient indispensable de comprendre le devenir des pesticides dans le bassin versant. Cela passe par l'analyse du comportement des produits depuis leur application jusqu'à leur transfert dans les cours d'eau ou les eaux souterraines, en tenant compte des interactions possibles dans le sol, le sous-sol et l'atmosphère. Enfin, la modélisation est l'étape indispensable pour évaluer le risque de contamination future par des nouveaux produits actuellement utilisés. L'étude des anciennes molécules toujours présentes dans l'environnement permet d'établir les paramètres à prendre en compte. Les quantités utilisées et le taux de détection dans les milieux facilitent la calibration. Cela ne sera peut-être pas le cas des molécules plus récentes ayant un effet à des doses plus infimes et devenant donc difficiles à détecter dans le milieu naturel par des techniques d'analyse chromatographique classiques. Ces analyses amènent tant à rechercher de nouvelles pratiques culturales qu'à concevoir des programmes de réduction du recours aux produits phytosanitaires en milieu urbain, avec pour objectif une moindre contamination des milieux par les pesticides

Les pesticides dans le bassin de la Seine: Comprendre les origines et le transfert des pesticides pour en évaluer l'impact sur l'homme et l'environnement

La contamination de l'environnement par les pesticides est une problématique majeure du XXIe siècle. Les produits de synthèse développés pour protéger les cultures sont devenus indispensables pour maintenir les rendements agricoles. Leurs usages se sont répandus jusque dans nos villes et nos jardins pour l'entretien des allées et trottoirs. Chaque année, de nouvelles matières actives sont autorisées. Dans le bassin versant de la Seine où se mêlent terres agricoles et zones périurbaines, il est difficile d'identifier ces sources. Le constat est préoccupant : les suivis de la qualité des eaux de surface montrent une contamination récurrente par les pesticides sur l'ensemble du territoire. La rémanence de certains produits comme l'atrazine explique également la contamination des eaux souterraines malgré leur interdiction, ce qui a conduit à l'abandon des captages d'eau potable les plus contaminés. Or, seulement 1 à 5 % des quantités appliquées sont effectivement transférées dans les cours d'eau. Dans un contexte où la réglementation sur les usages et sur les seuils de contamination das l'environnement évolue en continu, il devient indispensable de comprendre le devenir des pesticides dans le bassin versant. Cela passe par l'analyse du comportement des produits depuis leur application jusqu'à leur transfert dans les cours d'eau ou les eaux souterraines, en tenant compte des interactions possibles dans le sol, le sous-sol et l'atmosphère. Enfin, la modélisation est l'étape indispensable pour évaluer le risque de contamination future par des nouveaux produits actuellement utilisés. L'étude des anciennes molécules toujours présentes dans l'environnement permet d'établir les paramètres à prendre en compte. Les quantités utilisées et le taux de détection dans les milieux facilitent la calibration. Cela ne sera peut-être pas le cas des molécules plus récentes ayant un effet à des doses plus infimes et devenant donc difficiles à détecter dans le milieu naturel par des techniques d'analyse chromatographique classiques. Ces analyses amènent tant à rechercher de nouvelles pratiques culturales qu'à concevoir des programmes de réduction du recours aux produits phytosanitaires en milieu urbain, avec pour objectif une moindre contamination des milieux par les pesticides

Contaminants en sols urbains : une revue

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