Influencia del receptor de hormonas tiroideas en daño genómico y senescencia celular

Tesis doctoral inédita leída en la Universidad Autónoma de Madrid, Facultad de Medicina, Departamento de Bioquímica. Fecha de lectura: 16 de Octubre de 2012

Induction of DNA double-strand breaks and cellular senescence by human respiratory syncytial virus

Human respiratory syncytial virus (HRSV) accounts for the majority of lower respiratory tract infections during infancy and childhood and is associated with significant morbidity and mortality. HRSV provokes a proliferation arrest and characteristic syncytia in cellular systems such as immortalized epithelial cells. We show here that HRSV induces the expression of DNA damage markers and proliferation arrest such as P-TP53, P-ATM, CDKN1A and γH2AFX in cultured cells secondary to the production of mitochondrial reactive oxygen species (ROS). The DNA damage foci contained γH2AFX and TP53BP1, indicative of double-strand breaks (DSBs) and could be reversed by antioxidant treatments such as N-Acetylcysteine (NAC) or reduced glutathione ethyl ester (GSHee). The damage observed is associated with the accumulation of senescent cells, displaying a canonical senescent phenotype in both mononuclear cells and syncytia. In addition, we show signs of DNA damage and aging such as γH2AFX and CDKN2A expression in the respiratory epithelia of infected mice long after viral clearance. Altogether, these results show that HRSV triggers a DNA damage-mediated cellular senescence program probably mediated by oxidative stress. The results also suggest that this program might contribute to the physiopathology of the infection, tissue remodeling and aging, and might be associated to long-term consequences of HRSV infections.This work was supported by Grants MPY-1038/14 to Alberto Zambrano, PI 11/00590 to Isidoro Martínez and RD12/0036/0030 to Ana Aranda from FIS (Instituto de Salud Carlos III) and Grant BFU2011-28958, from Ministerio de Economía y Competitividad to Ana Aranda. The authors have no conflicting financial interests

NSD2 contributes to oncogenic RAS-driven transcription in lung cancer cells through long-range epigenetic activation

The histone methyltransferase NSD2/WHSC1/MMSET is overexpressed in a number of solid tumors but its contribution to the biology of these tumors is not well understood. Here, we describe that NSD2 contributes to the proliferation of a subset of lung cancer cell lines by supporting oncogenic RAS transcriptional responses. NSD2 knock down combined with MEK or BRD4 inhibitors causes co-operative inhibitory responses on cell growth. However, while MEK and BRD4 inhibitors converge in the downregulation of genes associated with cancer-acquired super-enhancers, NSD2 inhibition affects the expression of clusters of genes embedded in megabase-scale regions marked with H3K36me2 and that contribute to the RAS transcription program. Thus, combinatorial therapies using MEK or BRD4 inhibitors together with NSD2 inhibition are likely to be needed to ensure a more comprehensive inhibition of oncogenic RAS-driven transcription programs in lung cancers with NSD2 overexpression.This work was supported by Eli Lilly and Company. We would like to thank the Genomics and Flow Cytometry units at the CNIO for technical help, C. Pantoja and the CNIO-Lilly Cell Signaling Therapies Laboratory for sharing protocols and reagents.S

Puntos de encuentro. Investigaciones de posgrado en proceso

“Puntos de encuentro. Investigaciones de posgrado en proceso” es un proyecto de innovación docente que ha pretendido generar espacios para el debate y el diálogo entre estudiantes de doctorado que están realizando su tesis doctoral y profesores y directores de tesis. Se ha contemplado trabajar para la creación de una comunidad de aprendizaje en la que, a través de los vínculos entre los participantes, se posibilite una tutorización entre pares. El equipo de trabajo ha estado compuesto por profesores, doctorandos, becarios de investigación y directores de tesis. Teniendo en cuenta la naturaleza de la investigación en artes, se ha planteado la necesidad de articular espacios transdisciplinares de encuentro en los que abordar las potencialidades de trabajar conjuntamente personas e investigaciones adscritas a distintas áreas de conocimiento afines. Se ha ensayado, así mismo, la confluencia de alumnos que están adscritos en diversas universidades españolas, de tal manera que el contexto en el que realizan sus investigaciones se vea ampliado y se genere una red que pueda posibilitar acciones conjuntas de movilidad en un futuro. Se ha contemplado, por otra parte, fomentar las competencias relativas a la elaboración de textos científicos. Para ello se han realizado una serie de actividades en continuidad que han abordado encuentros mensuales, un seminario de investigación público, espacios de trabajo on-line y una publicación. Esta memoria recoge la valoración de los resultados obtenidos haciendo mención a los objetivos alcanzados, la metodología empleada, al grupo de trabajo adscrito al proyecto y a las actividades desarrolladas a lo largo del curso 2017-18. Presenta a modo de anexo una serie de imágenes de los encuentros realizados y los documentos de difusión del seminario de investigación

Puntos de encuentro. Investigaciones de posgrado en proceso (II)

Puntos de encuentro. Investigaciones de posgrado en proceso (II) es la continuación del proyecto de innovación docente “Puntos de encuentro. Investigaciones de posgrado en proceso” desarrollado durante el curso 2017-18. Dicho proyecto trataba de generar una comunidad de aprendizaje a través de encuentros periódicos, seminarios y actividades comunes entre directores de tesis, profesores y doctorandos. El desarrollo del mismo ha puesto de manifiesto la necesidad de continuar las dinámicas instauradas, así como la articulación de otros posibles modos de ensayar metodologías colaborativas, que son la base de la propuesta. Teniendo en cuenta los resultados obtenidos durante el curso 2017-18 el desarrollo de este proyecto ha estado condicionado por el interés de mantener y propiciar la comunidad de aprendizaje generada. Por otra parte, ha sido fundamental la experimentación en procesos de tutorización entre pares y colectivos, en un periodo formativo definido, en el campo de estudio propuesto por procesos de investigación de carácter individual. El desarrollo de las actividades desarrolladas ha puesto en práctica metodologías colaborativas capaces de ensayar otras aproximaciones a procesos de aprendizaje para las nuevas generaciones de estudiantes. El equipo de trabajo ha estado compuesto por los miembros que ya habían participado en el anterior proyecto (22 doctorandos y 10 docentes) y por nuevas incorporaciones que demostraron interés en formar parte del grupo (28 doctorandos y 14 docentes). En este sentido, cabe destacar que la comunidad no únicamente se ha mantenido sino que se ha visto incrementada. Al igual que el curso anterior el desarrollo de las investigaciones en curso se inscriben en distintos campos de conocimiento afines lo que ha permitido seguir articulando espacios transdisciplinares de encuentro que dieran lugar al debate y al diálogo, así como la creación de redes propiciadas por las afinidades entre distintos miembros del grupo. Esta memoria recoge la valoración de los resultados obtenidos haciendo mención a los objetivos alcanzados, a la metodología empleada, al grupo de trabajo adscrito al proyecto y a las actividades desarrolladas a lo largo del curso 2018-19. Presenta a modo de anexo una serie de imágenes de los encuentros realizados y los documentos de difusión del seminario de investigación

Estrogen- and Progesterone (P4)-Mediated Epigenetic Modifications of Endometrial Stromal Cells (EnSCs) and/or Mesenchymal Stem/Stromal Cells (MSCs) in the Etiopathogenesis of Endometriosis

Endometriosis is a common chronic inflammatory condition in which endometrial tissue appears outside the uterine cavity. Because ectopic endometriosis cells express both estrogen and progesterone (P4) receptors, they grow and undergo cyclic proliferation and breakdown similar to the endometrium. This debilitating gynecological disease affects up to 15% of reproductive aged women. Despite many years of research, the etiopathogenesis of endometrial lesions remains unclear. Retrograde transport of the viable menstrual endometrial cells with retained ability for attachment within the pelvic cavity, proliferation, differentiation and subsequent invasion into the surrounding tissue constitutes the rationale for widely accepted implantation theory. Accordingly, the most abundant cells in the endometrium are endometrial stromal cells (EnSCs). These cells constitute a particular population with clonogenic activity that resembles properties of mesenchymal stem/stromal cells (MSCs). Thus, a significant role of stem cell-based dysfunction in formation of the initial endometrial lesions is suspected. There is increasing evidence that the role of epigenetic mechanisms and processes in endometriosis have been underestimated. The importance of excess estrogen exposure and P4 resistance in epigenetic homeostasis failure in the endometrial/endometriotic tissue are crucial. Epigenetic alterations regarding transcription factors of estrogen and P4 signaling pathways in MSCs are robust in endometriotic tissue. Thus, perspectives for the future may include MSCs and EnSCs as the targets of epigenetic therapies in the prevention and treatment of endometriosis. Here, we reviewed the current known changes in the epigenetic background of EnSCs and MSCs due to estrogen/P4 imbalances in the context of etiopathogenesis of endometriosis

Dinámicas colectivas de base creativa en procesos universitarios de enseñanza-aprendizaje en artes

Esta memoria presenta el desarrollo y los resultados del proyecto de Innovación “Dinámicas colectivas de base creativa en procesos universitarios de enseñanza-aprendizaje en artes” concedido en la Convocatoria Docentia UCM 2021-22. En el marco del mismo se han generado una serie de dinámicas educativas en el contexto universitario de los estudios de arte y áreas afines durante el curso académico 2021-22. Se han creado e implementado una serie de prácticas docentes en las asignaturas impartidas por las y los participantes en el proyecto, a partir de los vínculos que se establecen entre los procesos artísticos y las metodologías de enseñanza-aprendizaje en las enseñanzas universitarias de arte. La premisa del proyecto planteaba las potencialidades de ampliar los ámbitos de acción de la innovación docente en la Universidad, determinando el papel significativo de los modos de hacer de prácticas que se están desarrollando en los espacios de producción artística y cultural en las metodologías docentes en el EEES. Se trataba de apostar, así, por un acercamiento a la innovación múltiple, entendido como una relación de nodos entre estudiantes, docentes, educadoras/es, instituciones académicas e instituciones artísticas, entendiendo que dichos ejes quedaban vertebrados por los modos de hacer y las metodologías propias de cada ámbito de actuación que podían ponerse en diálogo para nutrirse mutuamente más allá de sus contextos de inserción determinados institucionalmente

Thyroid hormone increases bulk histones expression by enhancing translational efficiency

The expression of canonical histones is normally coupled to DNA synthesis during the S phase of the cell cycle. Replication-dependent histone mRNAs do not contain a poly(A) tail at their 3′ terminus, but instead possess a stem-loop motif, the binding site for the stem-loop binding protein (SLBP), which regulates mRNA processing, stability, and relocation to polysomes. Here we show that the thyroid hormone can increase the levels of canonical histones independent of DNA replication. Incubation of mouse embryonic fibroblasts with T3 increases the total levels of histones, and expression of the thyroid hormone receptor β induces a further increase. This is not restricted to mouse embryonic fibroblasts, because T3 also raises histone expression in other cell lines. T3 does not increase histone mRNA or SLBP levels, suggesting that T3 regulates histone expression by a posttranscriptional mechanism. Indeed, T3 enhanced translational efficiency, inducing relocation of histone mRNA to heavy polysomes. Increased translation was associated with augmented transcription of the eukaryotic translation initiation factor 4 γ2 (EIF4G2). T3 induced EIF4G2 protein and mRNA levels and the thyroid hormone receptor bound to the promoter region of the Eif4g2 gene. Induction of EIF4G2 was essential for T3-dependent histone induction, because depletion of this factor abolished histone increase. These results point out the importance of the thyroid hormones on the posttranscriptional regulation of histone biosynthesis in a cell cycle–independent manner and also suggest the potential regulation of eukaryotic translation by the modulation of the initiation factor EIF4G2, which also operates in the translation of canonical mRNAs.This work was supported by the Ministerio de Economía y Competitividad (Grant BFU2011–28058), the Instituto de Salud Carlos III (Grant RD12/0036/0030), and the Comunidad de Madrid (Grant S2011/BMD-2328 to A.A), and by the Instituto de Salud Carlos III (Grant MPY-1038/14 to A.Z.).Peer Reviewe

The growing role of gene methylation on endocrine function

DNA methylation is the best studied epigenetic factor, playing a key role in producing stable changes in gene expression, thus defining cell identity and function and adapting cells to environmental changes. DNA methylation has also been recently shown to mediate cell responses to physiological endocrine signals. Moreover, alterations of the normal DNA methylation pattern can also contribute to the development of endocrine and metabolic diseases and can explain the relationship between an individual's genetic background, the environment, and disease. It should be remarked that although DNA methylation and demethylation are active processes, epigenetic changes produced during development can impact adult processes, establishing the idea that endocrine function can be persistently affected by events occurring in early life. Given the complexity of the endocrine system, both genetic and epigenetic processes, including DNA methylation, must be involved in its proper development and functioning. In this study, we summarize the recent knowledge in the field of DNA methylation and endocrinology. Given that DNA methylation can be involved in a number of endocrine and metabolic disorders, understanding and manipulating this modification opens a new door for preventing and treating endocrine diseases.The laboratory of A A is supported by Grants BFU2007-62402 from Ministerio de Ciencia e Innovación, RD06/0020/0036 from the Fondo de Investigaciones Sanitarias and by the European Grant CRES-CENDO (FP-018652). The Cancer Epigenetics Unit at the IUOPA is supported by grants from the Spanish Ministry of Health (PS09/02454) and the Community of Asturias (FICYT IB09-106). The IUOPA is supported by the Obra Social Cajastur, Spain.Peer reviewe