Mechanistic details of apoptosis-regulatory proteins BAX and BFL1 at the membrane level

252 p.La homeostasis de tejidos es considerado como el equilibrio entre la muerte y proliferación celular, y es por ello que su desregulación a menudo está asociada a diversas situaciones patológicas, tales como enfermedades neurodegenerativas o el cáncer. Este equilibrio, se encuentra regulado principalmente por un mecanismo denominado apoptosis o suicidio celular. La familia de proteínas BCL2 se erige como pieza clave en la regulación de este mecanismo, principalmente, a nivel de la permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MEM). En las últimas décadas, se han realizado avances de notoria importancia en el conocimiento sobre los mecanismos de acción e interacción de esta familia de proteínas, Sin embargo, importantes aspectos del proceso de activación de las proteinas proapoptóticas tipo BAX (BAX, BAK y quizás BOK) se encuentran vagamente descritos, desconociendo entre otros aspectos la disposición estructural exacta que la proteína BAX adopta en membrana o la cantidad mínima de subunidades de BAX necesarias para la formación del poro. Por otra parte, puesto que la membrana conforma el locus biológico de estas proteinas, el estudio del componente lipídico y de la propia membrana se encuentra actualmente en boga. Concretamente, el lípido especifico de la mitocondria, cardiolipina (CL), se ha erigido como uno de los moduladores claves de la apoptosis. Sin embargo, a pesar de su importancia, la función exacta de la CL en particular y de los lípidos en general, en las actividades de membrana de las BCL2, se encuentra vagamente descrita. Además, dilucidar el modo de acción de las proteinas antiapoptóticas o tipo BCL2, mediadoras del bloqueo de la actividad de las proapoptóticas, es considerado uno de los pilares fundamentales en el desarrollo de posibles dianas terapéuticas. El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido avanzar en la comprensión de los mecanismos de acción de la familia de proteínas BCL2, así como de los factores reguladores que modulan su actividad durante la apoptosis. Concretamente, nos centramos en dos miembros de la familia: la proapoptótica multidominio prototípica BAX, y la poco estudiada proteína antiapoptótica BFL1. Para la consecución de estos objetivos, se han realizado estudios a nivel de membrana tanto en sistemas modelo como en células, mediante diversas técnicas biofísicas cuantitativas. Considerando todo referente a la topología de BAX en membrana, concluimos que en ausencia de estímulo apoptótico BAX adopta una estructura globular apoyando su C-terminal en la membrana, conformación a la cual hemos denominado "lipid primed", ya que el lípido parece favorecer la exposición del bolsillo hidrofóbico que actuará como receptor en el proceso apoptótico. Sin embargo, una vez activada, BAX adopta una configuración BH3 into groove donde la inserción del dominio core, pero no del dominio latch, se antoja indispensable para la formación del poro apoptótico. Referente a BFL1 y sus actividades de membrana, concluimos que BFL1 posee un mecanismo de acción multimodal (MODO-0 o retrotranslocación de BAX, MODO-1 o formación de un hetero-complejo con la proteína proapoptótica cBID y MODO-2 interacción con la proteína BAX activa) y bifuncional (fenotipo antiapoptótico y proapoptótico) regulado por la cantidad de CL en la membrana. BFL1 ejerce su actividad antiapoptótica mediada por interacciones canónicas BH3-into-groove mientras que en membranas con alto contenido en cardiolipina, las cuales imitan los microdominios de este lípido descritos en condiciones apoptóticas, BFL1 no solo pierde la capacidad de formar heterodímeros con los miembros proapoptóticos, sino que también es capaz de homodimerizar vía una superficie no descrita previamente situada en el dominio BH4 de la proteína

Mechanistic details of apoptosis-regulatory proteins BAX and BFL1 at the membrane level

252 p.La homeostasis de tejidos es considerado como el equilibrio entre la muerte y proliferación celular, y es por ello que su desregulación a menudo está asociada a diversas situaciones patológicas, tales como enfermedades neurodegenerativas o el cáncer. Este equilibrio, se encuentra regulado principalmente por un mecanismo denominado apoptosis o suicidio celular. La familia de proteínas BCL2 se erige como pieza clave en la regulación de este mecanismo, principalmente, a nivel de la permeabilización de la membrana externa mitocondrial (MEM). En las últimas décadas, se han realizado avances de notoria importancia en el conocimiento sobre los mecanismos de acción e interacción de esta familia de proteínas, Sin embargo, importantes aspectos del proceso de activación de las proteinas proapoptóticas tipo BAX (BAX, BAK y quizás BOK) se encuentran vagamente descritos, desconociendo entre otros aspectos la disposición estructural exacta que la proteína BAX adopta en membrana o la cantidad mínima de subunidades de BAX necesarias para la formación del poro. Por otra parte, puesto que la membrana conforma el locus biológico de estas proteinas, el estudio del componente lipídico y de la propia membrana se encuentra actualmente en boga. Concretamente, el lípido especifico de la mitocondria, cardiolipina (CL), se ha erigido como uno de los moduladores claves de la apoptosis. Sin embargo, a pesar de su importancia, la función exacta de la CL en particular y de los lípidos en general, en las actividades de membrana de las BCL2, se encuentra vagamente descrita. Además, dilucidar el modo de acción de las proteinas antiapoptóticas o tipo BCL2, mediadoras del bloqueo de la actividad de las proapoptóticas, es considerado uno de los pilares fundamentales en el desarrollo de posibles dianas terapéuticas. El objetivo de esta Tesis Doctoral ha sido avanzar en la comprensión de los mecanismos de acción de la familia de proteínas BCL2, así como de los factores reguladores que modulan su actividad durante la apoptosis. Concretamente, nos centramos en dos miembros de la familia: la proapoptótica multidominio prototípica BAX, y la poco estudiada proteína antiapoptótica BFL1. Para la consecución de estos objetivos, se han realizado estudios a nivel de membrana tanto en sistemas modelo como en células, mediante diversas técnicas biofísicas cuantitativas. Considerando todo referente a la topología de BAX en membrana, concluimos que en ausencia de estímulo apoptótico BAX adopta una estructura globular apoyando su C-terminal en la membrana, conformación a la cual hemos denominado "lipid primed", ya que el lípido parece favorecer la exposición del bolsillo hidrofóbico que actuará como receptor en el proceso apoptótico. Sin embargo, una vez activada, BAX adopta una configuración BH3 into groove donde la inserción del dominio core, pero no del dominio latch, se antoja indispensable para la formación del poro apoptótico. Referente a BFL1 y sus actividades de membrana, concluimos que BFL1 posee un mecanismo de acción multimodal (MODO-0 o retrotranslocación de BAX, MODO-1 o formación de un hetero-complejo con la proteína proapoptótica cBID y MODO-2 interacción con la proteína BAX activa) y bifuncional (fenotipo antiapoptótico y proapoptótico) regulado por la cantidad de CL en la membrana. BFL1 ejerce su actividad antiapoptótica mediada por interacciones canónicas BH3-into-groove mientras que en membranas con alto contenido en cardiolipina, las cuales imitan los microdominios de este lípido descritos en condiciones apoptóticas, BFL1 no solo pierde la capacidad de formar heterodímeros con los miembros proapoptóticos, sino que también es capaz de homodimerizar vía una superficie no descrita previamente situada en el dominio BH4 de la proteína

Diagnóstico biofísico y socioeconómico de la microcuenca del río Jupula, Chalatenango, El Salvador

La investigación se llevó a cabo en la microcuenca del río Jupula, ubicada en el Municipio de San Ignacio, departamento de Chalatenango, durante el periodo de abril de 2007 a junio de 2008. El estudio consistió en realizar un diagnóstico biofísico y socioeconómico representativo de la zona. Estos datos fueron recolectados en las comunidades de Santa Rosa, El Rosario, Río Chiquito y El Carmen. Para ello se realizaron talleres de medios de vida con pobladores de éstas, quienes proporcionaron información de sus comunidades, actividades productivas, infraestructura, recursos naturales y capital humano, y otros, la cual se complementó con información secundaria. La información de todas las comunidades fue procesada y resumida, de manera que tuviera representatividad del área de evaluación. Una de las herramientas utilizada para sistematizar información, fue el Sistema de Información Geográficos (SIG) a través del programa ArcGIS 9.1, el cual permitió obtener información biofísica y socioeconómica de la microcuenca, la cual fue corroborada con observaciones en el campo. Dentro del aspecto biofísico se obtuvieron datos de: suelo, geología, agrología, hidrología, clima, flora y fauna; y dentro del marco socioeconómico: La cantidad e índices poblacionales, principales fuentes de ingreso e instituciones que participan en la economía y desarrollo, calidad de vida, educación, actividades productivas, turismo, infraestructura, salud, riesgos y vulnerabilidades. Los suelos son principalmente de origen volcánicos, con abundante pedregocidad, arcillosos y limosos, su ocupación principal es de bosques de Coníferas, pastos naturales y terrenos principalmente agrícolas. El río Jupula posee un cauce de 9.49 Km de longitud. El clima de la zona es variable con promedios anuales de Temperatura mín (ºC) 14.5, Temperatura máx (ºC) 24.5, Precipitación de 1856.8 mm. Finalmente se presentan algunas conclusiones y recomendaciones, como base para la formulación de proyectos ya sea por el gobierno local y otras instancias de la zona, la elaboración de un plan de manejo para la microcuenca tomando en cuenta que cubre el municipio de San Ignacio

Análisis multivariado de la producción científica iberoamericana indexada en WOS en Bibliotecología y Ciencias de la Información

In the present work, the Ibero-American scientific production of the category of Information Science & Library Science of the Web of Science between the years 2013 to 2017 is analyzed. The purpose is carrying out a multivariate analysis of this information to determine patterns of behavior of the countries. The main conclusions show that the Ibero- American countries have presented an increase of publications in the area of Information Science & Library Science, especially in Spain, Brazil, and Mexico. All of them with library journals indexed in WoS

BFL1 Modulates Apoptosis at the Membrane Level through a Bifunctional And Multimodal Mechanism Showing Key Differences With BCLXL

BFL1 is a relatively understudied member of the BCL2 protein family which has been implicated in the pathogenesis andchemoresistance of a variety of human cancers, including hematological malignancies and solid tumours. BFL1 is generallyconsidered to have an antiapoptotic function, although its precise mode of action remains unclear. By quantitativelyanalyzing BFL1 action in synthetic membrane models and in cells, we found that BFL1 inhibits apoptosis through threedistinct mechanisms which are similar but not identical to those of BCLXL, the paradigmatic antiapoptotic BCL2 familyprotein. Strikingly, alterations in lipid composition during apoptosis activate a prodeath function of BFL1 that is based onnoncanonical oligomerization of the protein and breaching of the permeability barrier of the outer mitochondrial membrane(OMM). This lipid-triggered prodeath function of BFL1 is absent in BCLXL and also differs from that of the apoptoticeffector BAX, which sets it apart from other BCL2 family members. Ourfindings support a new model in which BFL1modulates apoptosis through a bifunctional and multimodal mode of action that is distinctly regulated by OMM lipidscompared to BCLXL.This work was supported by Grants BFU2011-28566 from the Ministerio de Economia y Competitividad and IT838-13 from Gobierno Vasco. HFR is a recipient of a predoctoral fellowship from the Ministerio de Educacion (Spain). We also thank to LE facility technician in the Achucarro Basque Center for Neuroscience for the support in STED experiments. Finally, we thank Dr. Frank Essmann and Prof. Klaus Schulze-Osthoff for providing the HCT116 BAX/BAK DKO cells and Prof. Jean Claude Martinou for HCT116 CL KO cells

Análisis de la producción de aguacate en el Ecuador y su exportación a mercados internacionales en el periodo 2008 al 2018

El presente trabajo de investigación tiene por objetivo analizar la producción y exportación de aguacate en el Ecuador en el periodo 2008 al 2018 y su importancia en la economía. El alcance de la investigación es de tipo de tipo no experimental, realizando la búsqueda de información relacionada con la producción, importaciones, exportaciones de aguacate y su importancia en la economía nacional, mediante la recopilación de información secundaria de bases de datos referenciales. La exportación de aguacate generó 350 millones de dólares en 2018, por su parte el Ministerio de Agricultura y Ganadería impulsa su producción, sobre todo, como un rubro ideal para la diversificación de cultivos, es nueva alternativa para impulsar la economía campesina. Las exportaciones de aguacate han tenido variaciones por factores externos e internos que se producen en la economía por ello en periodo que comprende el año 2011 al 2015 tuvo una caída en las exportaciones, pero en los últimos cinco años ha crecido de forma constante y a ello han ingresado más productores a ofertar ya que la demanda mundial crece en un 10% cada año. El Ecuador puede convertirse en un país altamente competitivo en las exportaciones de aguacate en los próximos años, si se apertura nuevos mercados. Palabras clave: Producción, exportación, aguacate, comercialización, ventas.   ABSTRACT The objective of this research is to analyze the production and export of avocado in Ecuador from 2008 to 2018 and its importance in the economy. The scope of the research is exploratory, descriptive and non-experimental; a comprehensive search for information related to the production, imports and exports of avocado and its importance in the national economy was conducted by collecting secondary information from historical databases and, as a complement, the application of the mean difference method. Avocado exports generated 350 million dollars in 2018, for its part the Ministry of Agriculture and Livestock promotes its production, above all, as an ideal item for crop diversification, it is a new alternative to boost the peasant economy. Avocado exports have had variations by external and internal factors that occur in the economy so in the period from 2011 to 2015 had a drop in exports, but in the last five years has grown steadily and it has entered more producers to offer as global demand grows by 10% each year. Ecuador can become a highly competitive country in avocado exports in the coming years, if new markets are opened. Keywords: Production, export, avocado, marketing, sales

Eficacia del netobimin oral e intramuscular contra nematodos del Abomaso en ganado cebú en clima tropical

EI objetivo fue determinar la eficacia del Netobimin por vía oral e intramuscular a dosis de 20 mg/kg contra nematodos del abomaso; se utilizaron 15 becerros entre seis y nueve mese de edad, divididos en tres lotes al azar, de cinco animales cada uno

Plan de negocio para el desarrollo de una panificadora de pan artesanal en Lima Metropolitana

El presente plan de negocios identifica necesidades no satisfechas en el mercado de ventas hamburguesas en Lima, tanto en el producto como en el servicio. Por ello, se propone la implementación de una panificadora de pan artesanal que pueda cubrir la demanda actual y futura de este mercado, superando las expectativas de los clientes. De esta manera, se desarrollará una propuesta diferenciada que se sustentará en tres pilares: flexibilidad, servicio personalizado y desarrollo de productos. El análisis del entorno muestra condiciones favorables para la implementación del negocio. Asimismo, las características del consumidor peruano, junto con las nuevas tendencias a nivel global y local, garantizan un desarrollo sostenible de la panificadora. De esta manera, el negocio estará en la capacidad de ofrecer una propuesta de valor sólida, a un mercado en crecimiento, elevando el estándar actual. Se espera recuperar la inversión de 122,010.34 soles, que será financiada al 100% por los cuatro accionistas, dentro de 1.25 años, obteniendo un valor actual neto de 797,565.79 soles y una tasa interna de retorno de 100%. Según esta evaluación del negocio, se concluye la factibilidad de su implementación, generando significativa rentabilidad para los socios.This business plan identifies unmet needs in the burger sales market in Lima, both in terms of product and service. Therefore, the implementation of an artisan bread bakery that can meet the current and future demand of this market, exceeding customer expectations, is proposed. In this way, a differentiated proposal, based on three pillars: flexibility, personalized service and product development, will be established. The analysis of the environment shows favorable conditions for the implementation of the business. Likewise, the characteristics of the Peruvian consumer, together with new trends at a global and local level, guarantee a sustainable development of the bakery. In this way, the business will be able to offer a solid value proposition to a growing market, raising the current standard. The payback of the investment of 122,010.24 soles, which will be financed 100% by the four shareholders, is expected within 1.25 years, obtaining a net present value of 797,565.79 soles and an internal rate of return of 100%. According to this evaluation of the business, the feasibility of its implementation is concluded, generating significant profitability for the partners.Trabajo de investigació

Hyperspectral signatures and reflectance models related to the ripening index in four grape varieties

The preference for the consumption of red wine in Mexico is increasing because its components derived from the grape are attributed to health benefits. The quality of wine depends mostly on the vineyard conditions. The objective of this study was able to differentiate the physicochemical composition in the harvest stage of four varieties of red grapes that are used in the production of wine to relate their maturation with those of their hyperspectral signatures. Various parameters including pH, total soluble solids, color, weight, and morphology were determined from the bunches of grapes. Concerning the maturity index, it was observed that the grapes with the highest degree of maturity were Shiraz and Merlot at harvest time. The pH of grape juice is a measure of active acidity; the texture is considered a quick and inexpensive technique. The hyperspectral signatures reflectances versus color, total soluble solids, morphology, weight, texture, and pH for each grape variety was best fitted with Gaussian curves of order 8 to Cabernet sauvignon and Merlot, 7 to Malbec, and 5 to Shiraz with R2 above 0.99