Identificación de un aislamiento argentino de Spodoptera frugiperda granulovirus

La oruga militar tardía, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), es una plaga importante del maíz. Debido al impacto ambiental y a la aparición de resistencia causados por los pesticidas químicos y los eventos transgénicos, el uso de baculovirus resulta una alternativa útil y saludable para su control en estrategias de manejo integrado de plagas. En este trabajo reportamos la identificación de un nuevo aislamiento del granulovirus de la S. frugiperda nativo de la región central de Argentina, SfGV ARG. Se observó que larvas infectadas con SfGV ARG mostraron coloración amarillenta, hinchazón y, en algunos casos, lesiones graves en los últimos segmentos abdominales. Se confirmó la identidad del aislamiento por secuenciación de fragmentos de los genes lef-8, lef-9 y granulina, y por cálculo de distancias evolutivas usando el parámetro de Kimura-2. El patrón de restricción generado con el ADN genómico de SfGV ARG permitió estimar un tamaño de genoma de al menos 135 kb.The fall armyworm, Spodoptera frugiperda (J.E. Smith) (Lepidoptera: Noctuidae), is an important maize pest. Due to the environmental impact and emergence of resistance caused by chemical pesticides and transgenic events, the use of baculoviruses becomes a safe and useful alternative for its control in integrated pest management strategies. Here we report the identification of a novel isolate of a granulovirus of S. frugiperda native to the central region of Argentina, named SfGV ARG. We observed that larvae infected with SfGV ARG showed a yellowish coloration, swollen body and, in some cases, severe lesions in the last abdominal segments. We confirmed the identity of the isolate by sequencing fragments of the lef-8, lef-9 and granulin genes and by calculating evolutionary distances using the Kimura-2-Parameter model. SfGV ARG DNA restriction pattern allowed to estimate a genome of at least 135 kb.Fil: Pidre, Matias Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Sabalette, Karina Belén. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Romanowski, Victor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

A simplified strategy to package foreign proteins into baculovirus occlusion bodies without engineering the viral genome

Polyhedron envelope protein (PEP) is the major component of the calyx that surrounds the baculovirus occlusion body (OB). PEP has been associated with the stabilization and resistance of polyhedra in the environment. Due to the abundant levels of PEP in OBs, we decided to use this protein as a fusion partner to redirect foreign proteins to baculovirus polyhedra. In this study we developed a strategy that involves the generation of a monoclonal transformed insect cell line expressing a protein of interest fused to the the Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) N-terminus of PEP that enables the packaging of foreign proteins into the OBs without generating a recombinant baculovirus. This proved to be an efficient platform that could be exploited to improve wild type baculovirus for their use as bioinsecticides without facing the concerns of releasing genetically modified DNA to the environment and bypassing the associated regulatory issues. We demonstrated, using immunological, proteomic and microscopy techniques, that the envelope of AgMNPV OBs can effectively trap chimeric proteins in an infected insect cell line expressing AgMNPV PEP fused to the enhanced green fluorescent protein (eGFP). Furthermore, packaging of chimeric PEP also took place with heterologous OBs such as those of Autographa californica multiple nucleopolyhedrovirus (AcMNPV), another group I alphabaculovirus.Fil: Fabre, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Masson, Tomas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Haase, Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Romanowski, Victor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

Protein composition of the occlusion bodies of Epinotia aporema granulovirus

Within family Baculoviridae, members of the Betabaculovirus genus are employed as bio-control agents against lepidopteran pests, either alone or in combination with selected members of the Alphabaculovirus genus. Epinotia aporema granulovirus (EpapGV) is a fast killing betabaculovirus that infects the bean shoot borer (E. aporema) and is a promising bio-pesticide. Because occlusion bodies (OBs) play a key role in baculovirus horizontal transmission, we investigated the composition of EpapGV OBs. Using mass spectrometry-based proteomics we could identify 56 proteins that are included in the OBs during the final stages of larval infection. Our data provides experimental validation of several annotated hypothetical coding sequences. Proteogenomic mapping against genomic sequence detected a previously unannotated ac110-like core gene and a putative translation fusion product of ORFs epap48 and epap49. Comparative studies of the proteomes available for the family Baculoviridae highlight the conservation of core gene products as parts of the occluded virion. Two proteins specific for betabaculoviruses (Epap48 and Epap95) are incorporated into OBs. Moreover, quantification based on emPAI values showed that Epap95 is one of the most abundant components of EpapGV OBs.Fil: Masson, Tomas. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Fabre, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Pidre, Matias Luis. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Romanowski, Victor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

Analysis of EpapGV gp37 gene reveals a close relationship between granulovirus and entomopoxvirus

The Epinotia aporema Granulovirus GP37 protein gene has been identified, located, and sequenced. This gene was similar to other baculovirus gp37, to entomopoxvirus fusolin gene, and to the chitin-binding protein gene of bacteria. Sequence analysis indicated that the open reading frame is 669 bp long (the smallest gp37 sequenced at present) and encodes a predicted 222-amino acid protein. This protein is glycosylated and specifically recognized by an entomopoxvirus fusolin antiserum. The pairwise comparison of EpapGV gp37 gene product with all the baculovirus sequences in GenBank yields high similarity values ranging from 45 to 63 % with Cydia pomonella Granulovirus gp37 being the most closely related. The phylogenetic analysis interestingly grouped the granuloviruses in a cluster more closely related to entomopoxviruses than to nucleopolyhedroviruses, suggesting a possible horizontal transfer event between the granulovirus group and the entomopoxvirus group.Fil: Salvador, Ricardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Berretta, Marcelo Facundo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Mitsuhashi, Wataru. No especifíca;Fil: Biedma, Marina Elizabeth. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Romanowski, Víctor. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Departamento de Ciencias Biológicas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Sciocco, Alicia Inés. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin

Analysis of a chitinase from EpapGV, a fast killing betabaculovirus

The main function of baculoviral chitinase protein (V-CHIA) is to promote the final liquefaction of infected host larvae, facilitating the dispersion of occlusion bodies (OBs) in the environment. In this study, a v-chiA from Epinotia aporema Granulovirus (EpapGV) was identified and characterized. The 1,713 base pairs long open reading frame encodes a protein of 570 amino acids with a predicted molecular weight of 63 kDa. EpapGV V-CHIA sequence alignment resulted 62 % identical to Pieris rapae GV and Blastp search revealed a high conservation among all baculovirus chitinases. Amino acid sequence analysis indicated that the C-terminal KDEL present in most alphabaculovirus chitinases is absent in EpapGV V-CHIA, as well as in the rest of the betabaculoviruses. Phylogenetic analysis was performed with bacterial, lepidopteran, and baculoviral chitinase sequences available in databases. Using an AcMNPV bacmid (bApGOZA) a recombinant Ac-chiAEpapGV was obtained in order to overexpress EpapGV V-CHIA in cell culture. The presence of chitinase was detected in purified AcMNPV-chiAEpapGV OBs. Peritrophic membranes of Anticarsia gemmatalis larvae fed with recombinant OBs showed an altered structure. The results presented in this study show that EpapGV chitinase overexpression in recombinant baculovirus can cause association of this protein with OBs, and suggest that this could be used to evaluate the protein role in early stages of baculoviral infections.Fil: Salvador, Ricardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Sciocco, Alicia Inés. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Romanowski, Victor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

Identification of a microRNA encoded by Anticarsia gemmatalis Multiple Nucleopolyhedrovirus

MicroRNAs are regulatory RNAs that are scarcely described in Baculoviruses. In this work we predicted a microRNA in silico, denominated agmnpv-miR-4, encoded in the genome of Anticarsia gemmatalis Nucleopolyhedrovirus (AgMNPV), which is homologous to the already validated bmnpv-miR-4 from Bombyx mori Nucleopolyhedrovirus (BmNPV). Considering information known for bmnpv-miR-4 such as seed sequence, coding location in the genome and putative target binding, we searched for the coding sequence of agmnpv-miR-4 in AgMNPV genome. A precursor sequence of agmnpv-miR-4 was predicted, and we identified a putative 23 nt mature microRNA, agmnpv-miR-4, coded in the complementary strand of AgMNPV-2D between positions 49,450 and 49,472. We validated agmnpv-miR-4 by Northern blot from HighFive cells and A. gemmatalis larve extracts infected with AgMNPV.Fil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Garcia, Maria Laura. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Romanowski, Victor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Reyes Martinez, Carina Andrea. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

Effect of the interaction between Anticarsia gemmatalis multiple nucleopolyhedrovirus and Epinotia aporema granulovirus, on A. gemmatalis (Lepidoptera: Noctuidae) larvae

The bean shoot borer Epinotia aporema Wals. (Lepidoptera: Tortricidae) and the velvet bean caterpillar Anticarsia gemmatalis Hübner (Lepidoptera: Noctuidae) are key pests of soybean and other legume crops in South America. They are often found simultaneously in certain regions. A. gemmatalis nucleopolyhedrovirus (AgMNPV) is widely used to control A. gemmatalis. More recently, E. aporema granulovirus (EpapGV) has been characterized and evaluated as a bioinsecticide for E. aporema. In order to increase its potential use and to design optimized strategies for the management of lepidopteran pests, we evaluated the interaction between EpapGV and AgMNPV on third instar A. gemmatalis larvae. Larvae fed with 50 AgMNPV OBs/larva showed an increase in the mortality rates (from 42% to 81%) and a decrease in the median survival time (from 7.7 days to 5.7 days) when these OBs were mixed with 6000 EpapGV OBs/larva. When 300 AgMNPV OBs/larva were used alone or in combination with EpapGV OBs no changes in biological parameters were observed. No mortality was detected in A. gemmatalis larvae treated with EpapGV alone. In larvae fed with the viral mixtures, only AgMNPV DNA was detected by PCR. A. gemmatalis peritrophic membranes (PMs) examined by SDS–PAGE and scanning electron microscopy showed signs of damage. Notably, we found the presence of spheroidal bodies associated with damaged areas in the PMs of larvae fed with EpapGV but not in those that were given AgMNPV alone. These results show that EpapGV increases the viral potency of AgMNPV, and thus the insecticidal efficiency, suggesting that the use of formulations including both viruses might be a valuable tool for pest management.Instituto de BiotecnologíaFil: Biedma, Marina Elizabeth. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Salvador, Ricardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Sciocco, Alicia Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Romanowski, Víctor. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; Argentin

Characterization of a new Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus variant causing epizootic on a previously unreported host, Helicoverpa gelotopoeon (Lepidoptera: Noctuidae)

This paper reports the first biological and molecular characterization of a nucleopolyhedrovirus isolated from the soybean and cotton pest Helicoverpa gelotopoeon. Studies were performed following a virus outbreak in a rearing facility and in wild H. gelotopoeon populations in Córdoba, Argentina. Host identity was corroborated by partial sequencing of the COI gene. Scanning electron microscope observations of purified OBs revealed their polyhedral morphology and an average diameter of 0.89 ± 0.14 lm. Ultrathin sections of infected larvae examined by transmission electron microscopy showed the intranuclear occurrence of polyhedra and virus particles in fat body cells. Nucleocapsids were singly enveloped. Phylogenetic analysis of lef-8, lef-9, polh, orf5/5b and hr3-orf62 viral sequences identified this new NPV isolate (hereafter HegeSNPV) as a variant of Helicoverpa armigera nucleopolyhedrovirus (HearNPV). Furthermore, HegeSNPV was closely related to the so-called ‘‘HzSNPV Group” within HearNPV, although having particular characteristics.Inst. de Microbiología y Zoología Agrícola IMyZAFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - La Plata. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Exactas. Instituto de Biotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Taibo, Catalina Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Servicio de Microscopía; ArgentinaFil: Fichetti, Patricia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Ciencias Agropecuarias. Departamento de Protección Vegetal; ArgentinaFil: Sciocco, Alicia Ines. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Arneodo Larochette, Joel Demian. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Characterization of pathogens associated with lepidopteran pests

Uno de los problemas más importantes de la agricultura moderna es la pérdida de rendimiento derivada del ataque de invertebrados perjudiciales. El uso de plaguicidas químicos para enfrentarlos se contrapone a la demanda mundial de alimentos sanos, con menores niveles de residuos químicos y obtenidos bajo sistemas productivos respetuosos del ambiente.El Programa Nacional de Protección Vegetal del INTA esta fuertemente comprometido con la búsqueda de soluciones a esta problemática promoviendo el Manejo Integrado de Plagas (MIP) y sus distintas tácticas de control. En este marco, el Proyecto Específico del INTA PNPV1135033 "Desarrollo de herramientas para el manejo integrado de artrópodos perjudiciales" se propuso generar conocimientos útiles para el desarrollo de métodos de control biológico, microbiano, genético y comportamental de invertebrados plaga.En lo que a organismos entomófagos se refiere, uno de los aspectos abordados fue el de la calidad de la cría y uso eficiente de organismos biocontroladores. Tomando como modelos biológicos tres especies (dos tricogramáticos parasitoides de huevos de lepidóptero y un mírido predador de aleiródidos) pudieron establecerse protocolos de cría y almacenaje en frío de estos entomófagos. Asimismo, se generaron conocimientos útiles para el manejo de parasitoides y predadores como agentes de control biológico estudiando aspectos tales como la depredación intragremial, identificación molecular de relaciones tróficas, integración con la Técnica del Insecto Estéril (TIE), evitación del supeparasitismo y control biológico en sistemas ornamentales. Paralelamente, se estableció el efecto de diversos fitosanitarios de uso frecuente en frutihorticultura sobre la fauna benéfica (entomófagos y polinizadores) estableciéndose una clasificación útil para la integración de ambos tipos de control en un programa de MIP. Los estudios sobre control biológico microbiano generaron gran cantidad de conocimientos de utilidad para el control de distintas plagas y el desarrollo de futuros bioinsumos. Así, se caracterizaron varios aislamientos de baculovirus de diversos lepidópteros, entre ellos uno para el control de la polilla de la manzana Cydia pomonella del que, a la fecha, se están evaluando formulados experimentales. Se logró establecer una estrategia para el clonado y expresión de genes cry en Bacillus thuringiensis, lo que permitió evaluar la toxicidad individual y de mezclas de protoxinas Cry sobre C. pomonella. Asimismo, se trabajó en la selección de las cepas de B. thuringiensis más tóxicas que contenían las proteínas insecticidas6más activas para esta plaga. Además, se demostró que el aislamiento de B. thuringiensis es factible a partir de un nuevo nicho ecológico como lo representan larvas vivas y sanas de C. pomonella y se realizó el primer reporte de cepas argentinas de B. thuringiensis con actividad nematicida. Finalmente, se seleccionaron cepas de hongos candidatas para el control biológico de hormigas cortadoras y una cepa de hongo nematófago nativo con gran potencial como controlador de nematodos fitoparásitos. Respecto de la generación de conocimientos para ajustar la TIE para el control de la polilla del tomate, se continuaron los estudios sobre la esterilidad heredada comenzados en la cartera anterior pudiendo llegar a un protocolo de irradiación de pupas de Tuta absoluta con rayos X y gamma a partir de su efecto sobre la biología, espermatogénesis y citología del insecto. Respecto del desarrollo de la TIE para la mosca sudamericana de la fruta Anastrepha fraterculus, se generó información básica relacionada con el sexado genético de esta especie y sobre el aumento de la competitividad sexual de los machos a liberar a través de su exposición a diversas sustancias. Asimismo, se estudió el efecto disuasorio de compuestos químicos liberados por el picudo del algodonero, que afectan su comportamiento de oviposición y que pueden ser utilizados en el manejo de esta plaga. En este libro se presentan resumidos los principales resultados obtenidos a lo largo de los 4 años y 9 meses de desarrollo de este proyectoFil: Arneodo Larochette, Joel Demián. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Taibo, Catalina Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas; ArgentinaFil: Balbi, Emilia Inés. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Córdoba. Estación Experimental Agropecuaria Marcos Juárez; ArgentinaFil: Jakubowicz, Violeta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Salvador, Ricardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Quintana, Graciela Mabel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Farinon, Marcelo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; ArgentinaFil: Ferrelli, Maria Leticia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Sciocco Cap, Alicia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Microbiología y Zoología Agrícola; Argentin