Evaluation of a mouse infection model to evaluate homologue and heterologue vaccines against Brucella canis in mouse model

La brucelosis canina es una enfermedad zoonótica que afecta a los caninos y provoca importantes pérdidas económicas en criaderos. En la actualidad, no existe una vacuna para la prevención de esta enfermedad. Una limitante en el desarrollo de una vacuna eficaz es la falta de un modelo experimental que permita evaluar la infección con Brucella canis. En este trabajo, se desarrolló un modelo ratón para evaluar la infección esplénica por B. canis empleando distintas dosis, tiempos de sacrificio y vías de inoculación. Además, se ensayaron inmunógenos homólogos (B. canis inactivada) y heterólogos (B. ovis inactivada y viva) como potenciales vacunas control. Las bacterinas fueron formuladas en Marcol 52, Montanide o Quil A. La inoculación de 106 -107 UFC (unidades formadoras de colonias) de B. canis por las vías intraperitoneal o intravenosa no mostró diferencias en la carga bacteriana esplénica. El recuento de UFC en bazo fue similar cuando los ratones se sacrificaron a 14, 21 o 30 días post-inoculación. B. ovis PA76250 viva confirió el mejor nivel de protección contra B. canis mientras que una protección menor, pero significativa, fue obtenida cuando se administró la bacterina B. canis M- formulada en Marcol 52 o Montanide. Los resultados obtenidos indican que el modelo ratón es adecuado para evaluar, en el futuro, la eficacia de potenciales inmunógenos contra la brucelosis canina.The development of an effective vaccine against brucellosis is a research area of much interest since there is no available vaccine against canine brucellosis. One limitation in testing any immunization strategy is the lack of a suitable laboratory animal that is permissive to the infection. In this work, a mouse model was developed to study splenic B. canis RM6/66 infection using different doses, times of sacrifice and inoculation routes. In addition, homologous (B. canis M- bacterin) and heterologous (live or B. ovis bacterin) rough whole cell vaccines were evaluated as potential control vaccines. Bacterins were formulated in Marcol 52, Montanide or Quil A. The evolution of B. canis infection in the spleen of mice inoculated by i.p. or i.v. route was similar when 106 -107 CFU (colony forming unit) were administered. Using these doses and routes, similar spleen bacterial burden was found in mice sacrificed at 14, 21 and 30 days after inoculation. The best protection was conferred by live B. ovis while a lower but significant protection was observed in groups vaccinated with B. canis M- bacterin formulated in Marcol 52 or Montanide. These results indicate that mouse model is adequate to evaluate potential vaccines against canine brucellosis.Fil: Clausse, María. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Una problemática para la producción y la salud pública

La brucelosis porcina es una enfermedad de difícil diagnóstico. Por ello, desde la Facultad de Ciencias Veterinarias de Tandil se están evaluando modificacionesen algunas de las técnicas serológicas oficiales para aumentar su eficiencia o bien, desarrollar nuevas pruebas a implementar para mejorar el diagnóstico.Fil: Bence, Angel Ricardo. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Gutiérrez, Silvina Elena. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Comparative genetic analysis of glutathione S-transferase Fasciola hepatica from different definitive hosts

La fasciolosis, parasitosis zoonótica de ubicación intrahepática, es ocasionada por Fasciola hepatica. La resistencia de F. hepatica a TCBZ está progresando mundialmente por lo cual es necesario ampliar el conocimiento sobre los mecanismos de detoxificación que este helminto posee. Las glutatión S-transferasas (GSTs), enzimas multifuncionales implicadas en la detoxificación de compuestos endógenos y xenobióticos, podrían participar en la expresión de resistencia al TCBZ. En este trabajo se determinó el nivel de expresión del ARNm y se caracterizó el gen para GST (genGST) correspondiente a fasciolas provenientes de tres hospedadores diferentes infectados naturalmente. Las secuencias del genGST de las fasciolas analizadas se compararon con las secuencias de las cepas Sligo (triclabendazol resistente: TCBZ-R) y Cullompton (triclabendazol sensible: TCBZ-S) (GenBank ID: KF680281- KF680284, respectivamente) obtenidas en nuestro laboratorio. Las fasciolas de las tres especies hospedadoras expresaron diferencias significativas en el ARNm: cerdo 2> bovino 1.7> ovino 1 y un genGST idéntico al de la cepa TCBZ-S. La diferencia de expresión podría relacionarse con el nivel de resistencia de los diferentes huéspedes a F. hepatica. Estos resultados aportarían a la comprensión de los mecanismos generadores de resistencia a F. hepatica en los distintos huéspedes definitivos.Fasciolosis, a zoonotic intrahepatic parasitosisis caused by Fasciola hepatica. Resistance of F. hepatica to TCBZ is progressing globally so it is necessary to increase the knowledge of the mechanisms of detoxification that this helminth possesses. The multifunctional enzymes glutathione S- transferases (GSTs) are involved in the detoxification of endogenous and xenobiotic compounds and could be involved in the expression of resistance to TCBZ. In this work the level of mRNA expression was determined and the gene for GST (genGST) from flukes from three different naturally infected hosts was characterized. The sequence of the genGST was compared with the sequences of resistant (TCBZ-R) (Sligo) and sensible (TCBZ-S) (Cullompton) strains of F. hepatica (GenBank ID: KF680281 - KF680284, respectively) obtained in our laboratory. Flukes of three different hosts expressed significant differences in their mRNA: porcine 2> bovine 1.7 > ovine 1 and the genGST sequence was identicalto TCBZ-S strain of F. hepatica. The difference in expression of the genGST could be related to the level of resistance of the different hosts against F. hepatica. These results would contribute to the understanding of the mechanisms of resistance to F. hepatica in different definitive hosts.Fil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Ortiz, Pedro. Universidad Nacional de Cajamarca; PerúFil: Solana, Hugo Daniel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Comparación del test directo de anticuerpos fluorescentes y el cultivo bacteriológico para detección de Brucella suis

El diagnóstico de brucelosis se apoya en el cultivo bacterioló- gico o en la detección de fragmentos de ADN de la bacteria mediante la reacción en cadena de la polimerasa. El empleo de una inmunoglobulina anti-Brucella conjugada a fluoresceína para la detección de este antígeno en tejidos constituye una técnica simple, fácil, reproducible, econó- mica y rápida. El objetivo de este trabajo fue evaluar la fracción gammaglobulínica de un suero policlonal anti-Brucella abortus marcada con isotiocianato de fluoresceína (FITC), 1) contra dis- tintas especies lisas y rugosas de Brucella sp, 2) contra bacterias de otros géneros, y 3) comparar los resultados obtenidos con la inmunofluorescencia directa y el cultivo bacteriológico para la detección de B. suis en distintos tejidos de porcinos infectados. Este conjugado detectó todas las brucelas con distinta intensidad de fluorescencia, pero no hubo fluorescencia inespecífica cuando se ensayaron las bacterias de otros géneros. La fluorescencia de fondo en muestras de los distintos tejidos infectados fue baja. La mayoría de los tejidos infectados mostraron la presencia de microorganismos verde-fluorescentes con la morfología de las brucelas. El anticuerpo conju- gado a FITC permitió un diagnóstico de brucelosis rápido, efectivo y económico.Methods available for detection of Brucella sp from different specimens include bacteriological culture or detection of specific DNA fragments by polymerase chain reaction. The use of fluorescein-labeled anti-Brucella globulin for demonstrating this antigen in animal tissues is a simple, easy, reproducible, cheap and fast technique. The aim of this work was to evaluate the gamma globulin fraction of polyclonal anti-Brucella abortus serum labeled with fluorescein iso-tio-cyanate (FITC-labeled antibody): 1) against different smooth and rough Brucella sp, 2) against bacterium of other genus, and 3) to compare direct fluorescent antibody test results with bacteriological culture for the detection of B. suis in different tissues from infected animals. This conjugate stained all Brucella sp with different intensities but it did not stain any heterologous bacterium tested. Background fluorescence associated with its use on smears from infected sources of different specimens was particularly low. Most of the infected tissues showed the presence of yellowish-green fluorescent organisms with brucella morphology. The tested FITC-labeled antibody allows a quick, effective and inexpensive diagnosis of brucellosis.Fil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Bence, Angel Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Cacciato, Claudio Santiago. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Echavarría, Hilda María. Laboratorio Biologico de Tandil Srl.; ArgentinaFil: Soto, Pedro. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentin

Submandibular puncture with injection needle in mice: comparison between two different procedures

La punción del plexo venoso a nivel submandibular en ratones es una técnica aceptada para la obtención de volúmenes de sangre adecuados para análisis de rutina. Si bien se recomienda el uso de lancetas comerciales, en Argentina no están disponibles, por lo tanto pueden sustituirse por agujas de inyección. El objetivo de este trabajo fue comparar el uso de agujas 21G x 1? utilizando dos procedimientos de punción submandibular en ratones BALB/c de 8 semanas deedad: G1) con capuchón cortado a 10 mm (restringiendo la profundidad de la punción) y G2) sin capuchón para determinar: a) volumen de sangre obtenido, b) datos hematológicos y glucemia y c) daño tisular. El volumen de sangre obtenido por la punción submandibular con aguja sin capuchón fue significativamente mayor que el colectado con capuchón. Los valores hematológicos y la glucemia fueron normales para ambos procedimientos. No se observaron daños histológicos en ninguno de los procedimientos empleados. En conclusión, se recomienda el uso de aguja como procedimiento de refinamiento para la obtención de sangre submandibular dado que es económico, práctico, permite obtener un volumen sanguíneo moderado sin provocar daño tisular y asegura la recuperación de los animales.The puncture of the venous plexus in the submandibular region in mice is an accepted technique to obtain blood volumes suitable for routine clinical analysis. Although the use of commercial lancets is recommended, in Argentina they are not available and they could be replaced by injection needles. The aim of this study was to compare the use of 21G x 1" needles using two different submandibular puncture procedures in 8-week-old BALB/c mice: G1) with cap cut to 10 mm (restricting the depth of the puncture) and, G2) without cap to determine: a) blood volume obtained, b) hematological data and glycaemia and c) tissue damage. The blood volume obtained by submandibular needle puncture without cap was significantly higher than the one collected with cap. Hematological values and glycaemia were normal for both procedures. No histological damage was observed in any of the procedures used. In conclusion, it is recommended the use of needle without cap as a refining procedure to collect submandibular blood since it is cheapest, practical, allows to obtain moderate volumes no causing tissue damage and ensuring the animal recovery.Fil: Fernandez, Vanesa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Dominguez, Maria Paula. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Garcia, Jorge P.. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal y Medicina Preventiva. Laboratorio de Inmunoquímica y Biotecnología; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

Identificación de un establecimiento de producción porcina infectado con Brucella suis a partir de un caso clínico de brucelosis humana en la provincia de Buenos Aires, Argentina

En este trabajo reportamos un caso de brucelosis humana ocasionada por Brucella suis en una persona que trabajaba en un establecimiento de producción porcina en pequeña escala. La granja no tenía antecedentes de la enfermedad y los animales no registraban signos clínicos al ser examinados. Se obtuvieron muestras de suero de todos los padrillos (n=3), de 16/22 chanchas y 9/25 cachorras y se analizaron mediante las técnicas de aglutinación rápida en placa con antígeno tamponado (BPA) y Rosa de Bengala (RB) y Polarización de la Fluorescencia (FPA). Muestras de tejido de un padrillo y de una hembra serológicamente positivos fueron analizadas por cultivo bacteriológico y por la técnica de Inmunofluorescencia Directa (IFD). Se detectaron anticuerpos específicos en el 53% de los cerdos adultos (10/19), mientras que todas las cachorras fueron seronegativas. Se aisló B. suis biovar 1 de un padrillo. En contraste, la bacteria no fue aislada en ninguno de los tejidos de la cerda seropositiva aunque sí se detectó la bacteria mediante IFD. A partir de los datos bacteriológicos y serológicos se evidencia la presencia de una infección endémica por B. suis. Asimismo, teniendo en cuenta la falta de medidas de prevención y de bioseguridad se concluye que la persona probablemente adquirió la enfermedad por contacto directo con los animales infectados o con el ambiente contaminado con la bacteria.Here we report a case of human brucellosis due to Brucella suis in a person who worked in a small-scale pig farm. The farm had no history of clinical brucellosis, and signs of the disease were not observed upon clinical examination of the animals. Serum from all the 3 boars, 16/22 sows and 9/25 gilts was obtained for serological examination by Buffered Plate Agglutination Test (BPAT), Rose Bengal Test (RBT) and Fluorescent Polarization Assay (FPA). Bacteriological culture and Direct Fluorescence Antibody Test (DFAT) were performed in tissue samples from a seropositive boar and a sow. Specific antibodies were detected in 53 % (10/19) adult pigs, while all sampled gilts were seronegative. B. suis biovar 1 was isolated from one boar. In contrast, while the bacterium was not isolated from any tissue from a seropositive sow, it was detected by DFAT. From the bacteriological and serological evidence of B. suis endemic infection in the pig farm and the lack of preventive measures and biosecurity practices, it is concluded that the person most likely acquired the disease from the infected animals or by contact with contaminated environment in the farm.Fil: Bence, Angel Ricardo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; Argentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Análisis Bioquímicos y Minerales; ArgentinaFil: Moran, María Celeste. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Cacciato, Claudio Santiago. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentina. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comisión de Investigaciones Científicas; ArgentinaFil: Soto, Javier. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Gutiérrez, Silvina Elena. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin

MapB, the Brucella suis TamB homologue, is involved in cell envelope biogenesis, cell division and virulence

Brucella species are Gram-negative, facultative intracellular pathogens responsible for a worldwide zoonosis. The envelope of Brucella exhibits unique characteristics that make these bacteria furtive pathogens and resistant to several host defence compounds. We have identified a Brucella suis gene (mapB) that appeared to be crucial for cell envelope integrity. Indeed, the typical resistance of Brucella to both lysozyme and the cationic lipopeptide polymyxin B was markedly reduced in a ∆mapB mutant. MapB turned out to represent a TamB orthologue. This last protein, together with TamA, a protein belonging to the Omp85 family, form a complex that has been proposed to participate in the translocation of autotransporter proteins across the outer membrane (OM). Accordingly, we observed that MapB is required for proper assembly of an autotransporter adhesin in the OM, as most of the autotransporter accumulated in the mutant cell periplasm. Both assessment of the relative amounts of other specific outer membrane proteins (OMPs) and a proteome approach indicated that the absence of MapB did not lead to an extensive alteration in OMP abundance, but to a reduction in the relative amounts of a protein subset, including proteins from the Omp25/31 family. Electron microscopy revealed that ∆mapB cells exhibit multiple anomalies in cell morphology, indicating that the absence of the TamB homologue in B. suis severely affects cell division. Finally, ∆mapB cells were impaired in macrophage infection and showed an attenuated virulence phenotype in the mouse model. Collectively, our results indicate that the role of B. suis TamB homologue is not restricted to participating in the translocation of autotransporters across the OM but that it is essential for OM stability and protein composition and that it is involved in cell envelope biogenesis, a process that is inherently coordinated with cell division.Fil: Bialer, Magali Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Ruiz, Veronica. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Sycz, Gabriela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Russo, Daniela Marta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Altabe, Silvia Graciela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Rosario. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Universidad Nacional de Rosario. Facultad de Ciencias Bioquímicas y Farmacéuticas. Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario; ArgentinaFil: Sieira, Rodrigo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; ArgentinaFil: Zorreguieta, Ángeles. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires. Fundación Instituto Leloir. Instituto de Investigaciones Bioquímicas de Buenos Aires; Argentin

The BtaF Trimeric Autotransporter of Brucella suis Is Involved in Attachment to Various Surfaces, Resistance to Serum and Virulence

AbstractThe adhesion of bacterial pathogens to host cells is an event that determines infection, and ultimately invasion and intracellular multiplication. Several evidences have recently shown that this rule is also truth for the intracellular pathogen Brucella. Brucella suis displays the unipolar BmaC and BtaE adhesins, which belong to the monomeric and trimeric autotransporter (TA) families, respectively. It was previously shown that these adhesins are involved in bacterial adhesion tohost cells and components of the extracellular matrix (ECM). In this work we describe the role of a new member of the TA family of B. suis (named BtaF) in the adhesive properties of the bacterial surface. BtaF conferred the bacteria that carried it a promiscuous adhesiveness to various ECM components and the ability to attach to an abiotic surface. Furthermore, BtaF was found to participate in bacterial adhesion to epithelial cells and was required for full virulence in mice. Similar to BmaC and BtaE, the BtaF adhesin was expressed in a small subpopulation of bacteria, and in all cases, it was detected at the new  pole generated after cell division. Interestingly, BtaF was also implicated in the resistance of B. suis to porcine serum. Our findings emphasize the impact of TAs in the Brucella lifecycle.Fil: Ruíz Ranwez V. FUND.INSTITUTO LELOIR.Fil: Posadas Dm,. FUND.INSTITUTO LELOIR.Fil: Estein S.m.. UNIV.NAC.DEL CENTRO DE LA PCIA.DE BS.AS.. FAC.DE CS.VETERINARIAS. DTO.DE SANIDAD ANIMAL Y MEDICINA PREVENTIVA.Fil: Abdian P.l.. FUND.INSTITUTO LELOIR.Fil: Martín F.a. FUND.INSTITUTO LELOIR.Fil: Zorreguieta A.. FUND.INSTITUTO LELOIR

Lead exposure in consumers of culled invasive alien mammals in El Palmar National Park, Argentina

Consumption of meat from animals hunted with Pb ammunition can cause toxic accumulation with consequent health risks, even if relatively small amounts are consumed in each exposure. In El Palmar National Park, Argentina, invasive alien mammals, wild boar (Sus scrofa) and axis deer (Axis axis), are culled with Pb ammunition and their meat is consumed. In this study, we evaluated blood Pb concentrations in 58 consumers of culled game and examined Pb exposure risk according to their demographics, duty, and consumption habits. Likewise, the likelihood of exposure was evaluated by quantifying Pb concentrations in meat samples of seven culled axis deer. Twenty-seven participants (46%) had detectable blood Pb levels (limit of detection = 3.3 μg/dL), with an average 4.75 ± 1.35 μg/dL (geometric mean ± geometric S.D.); the average for all participants was 3.25 ± 1.51 μg/dL. Blood Pb concentrations were significantly higher in hunters, in participants who reported consuming game meat more than 5 times per week, and in participants who reported frequently consuming cured game meat (compared to cooked or pickled). Pb concentration varied significantly along the trajectory of the bullet in deer muscle, being highest at mid-point but with detectable Pb levels even in distant tissue samples (control), suggesting potential for dietary intake by consumers. These findings provide evidence of Pb exposure risk in consumers and emphasize the relevance of replacing Pb ammunition with non-toxic alternatives. This change would reduce dietary exposure in frequent consumers and allow the use of game meat as safe food for people whilst eliminating collateral risks to wild animals and the environment.Fil: Tammone Santos, Agostina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Caselli, Elsa Andrea. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; ArgentinaFil: Condorí, Walter Ezequiel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Fernández, Valentina. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires; Argentina. Universidad Nacional de San Martín. Instituto de Investigación e Ingeniería Ambiental. - Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Investigación e Ingeniería Ambiental; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Vanstreels, Ralph Eric Thijl. University of California at Davis; Estados UnidosFil: Sosa, Cristian. Administración de Parques Nacionales; ArgentinaFil: Delaloye, Aldo. Administración de Parques Nacionales; ArgentinaFil: Uhart, Marcela María. University of California at Davis; Estados Unido

Diferentes estrategias para el diagnóstico de la brucelosis ovina por brucella ovis en una majada endémica de Argentina

Brucella ovis es el agente etiológico de la epididimitis contagiosa del carnero. El diagnóstico se basa en el examen clínico, la serología y en el aislamiento de B. ovis a partir de semen. El análisis del semen mediante PCR complementa el diagnóstico directo para la detección de B. ovis y de otros patógenos reproductivos de los ovinos. En este trabajo se comparan diferentes estrategias para el diagnóstico de la epididimitis contagiosa del carnero. Veintidós carneros fueron examinados clínicamente. Las muestras de suero fueron analizadas con diferentes pruebas serológicas. Las muestras de semen se cultivaron y evaluaron mediante PCR multiplex. Los carneros con cultivo positivo fueron sacrificados y se tomaron muestras de testículos, epididídimos, vesículas seminales y ampollas del conducto deferente para el estudio por histopatológico. La presencia de B. ovis en semen se asoció significativamente con la seropositividad y con lesiones histopatológicas en los órganos estudiados. La multiplex PCR mostró una sensibilidad similar al cultivo de semen y podría ser usada para el diagnóstico directo de B. ovis. Aunque este estudio fue realizado en pocos animales, este provee información útil para el diagnóstico de la brucelosis ovina en una majada endémica y refuerza la necesidad de dos controles por año.Brucella ovis is the etiological agent of contagious epididymitis in rams. Prevalence increases when biannual control was not performed in B. ovis endemic flocks. Diagnosis is based on clinical examination, serological tests and bacteriological isolation of B. ovis from semen. Semen analysis by PCR technique complements the direct diagnosis for the detection of B. ovis or other pathogens of reproduction in sheep. In this work, different strategies for the diagnosis of contagious epididymitis in a flock, which this disease have been apparently controlled, were compared. Twenty-two rams were clinically examined and serum samples were analyzed different serological tests. Semen samples were cultured in bacteriological media and were evaluated by multiplex PCR. Rams with a positive culture were necropsied and testes, epididymides, vesicular glands and ampullaes were taken and studied by histopathology. B. ovis shedding in semen was significantly associated with the seropositivity and genital tract histopathological lesions. In our work, multiplex PCR showed a similar sensitivity to semen culture and could be used as a complementary test for the direct diagnosis of B. ovis. Although this study involved a low number of animals, it provides useful information for the diagnosis of ovine brucellosis in an endemic flock and reinforces the need for biannual control.Fil: Fiorentino, Maria Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Velilla, Alejandra Vanesa. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Manes, Jorgelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Diaz, Alejandra. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Clausse, María. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Área de Investigación en Agronomía; ArgentinaFil: Estein, Silvia Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Tandil. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil. Provincia de Buenos Aires. Gobernación. Comision de Investigaciones Científicas. Centro de Investigación Veterinaria de Tandil; Argentin