Efeito estacional sobre características ovarianas e produção de oócitos em vacas Bos indicus no Mato Grosso do Sul

The present study evaluated the effect of two seasons of the year (dry and rainy) on the ovarian characteristics of Bos indicus slaughter cows in Mato Grosso do Sul, Brazil. Ovaries (n = 10) were collected on November and December of 1998 and from January to October of 1999. In the laboratory the ovaries were evaluated for weight (g), volume (Vol. (cm³) = 3/4 p x length /2 x width/2 x thickness/2), number of corpus luteum, number of follicles >; 9 mm of diameter, total number of follicles < 9 mm, number of oocytes viable and degenerated. The main effect of the season (dry or rainy) was estimated by analysis of variance (t test), for completely randomized design. Analysis of simple correlation (Sperman rank correlations) was performed among the variables studied, which were adjusted for the season effect. The results demonstrated that the effect of ovaries weight (5.1 x 6.5 g), total follicles (10.1 x 13.7), corpus luteum (0.32 x 0.47, p < 0.05) and the frequency of viable oocytes (19.6% x 35.6%) on the total oocytes recovered varied significantly (p < 0.01) between the dry and rainy season, respectively. Correlation analysis (r) showed significant coefficients (p < 0.01) between weight and volume of the ovaries (r = 0.78), weight and total follicles (r = 0.32), weight and corpus luteum (r = 0.41), total follicles and viable oocytes (r = 57), among others. It is concluded that important changes in ovarian function, based on the production and quality of oocytes, can be estimated between the dry and the rainy season. Therefore, based on those characteristics, the rainy season is the most appropriate for implantation of reproductive programs in commercial herds.Verificou-se o efeito de duas distintas estações do ano (seca e chuvosa) sobre algumas características ovarianas em vacas Bos indicus abatidas na região de Campo Grande, MS. Ovários (n = 10) foram obtidos nos meses de novembro e dezembro de 1998 e de janeiro a outubro de 1999. No laboratório, os ovários foram avaliados quanto ao peso (g), volume (Vol. (cm³) = 3/4 p x comprimento/2 x largura/2 x espessura/2), número de corpos lúteos, número de folículos com >; 9 mm de diâmetro, número total de folículos com menos de 9 mm, número de oócitos, oócitos viáveis e oócitos degenerados. O efeito principal da estação (seca ou chuvosa) foi estimado pela análise de variância (teste t), para modelos completamente ao acaso. Utilizou-se a análise da correlação simples entre as variáveis estudadas, ajustadas para o efeito da estação. Os resultados revelaram que o peso dos ovários (5,1 x 6,5 g), folículos totais (10,1 x 13,7), corpos lúteos (0,32 x 0,47, p < 0,05) e a percentagem de oócitos viáveis (19,6% x 35,6%) sobre o total de oócitos variaram significativamente (p < 0,01) entre as estações seca e chuvosa, respectivamente. A análise da correlação (r) mostrou coeficientes significativos (p < 0,01) entre peso e volume (r = 0,78), peso e total de folículos (r = 0,32), peso e corpos lúteos (r = 0,41), total de folículos e oócitos viáveis (r = 57), entre outros. Concluiu-se que importantes modificações na função ovariana, com base na produção e qualidade dos oócitos, podem ser estimadas entre a estação seca e chuvosa. Com base nestas características, a estação chuvosa torna-se mais favorável para a implantação de programas reprodutivos em rebanhos comerciais

Efeito da suplementação da insulina transferrina selênio (its) na produção e qualidade de embriões bovinos

Visto que o Brasil é um importante país no desenvolvimento da produção in vitro de embriões (PIVE) bovinos, a eficiência dessa biotécnica ainda possui algumas limitações como por exemplo, o estresse oxidativo gerado pela produção exacerba de radicais livres. Os radicais livres são produzidos naturalmente pelo metabolismo, mas quando em altas concentrações geram danos ao sistema biológico, podendo causar apoptose e lipoperoxidação lipídica, consequentemente influenciando nas baixas taxas de produção de embriões e diminuindo a qualidade embrionária. Portanto, torna-se necessário buscar alternativas para minimizar os problemas causados pelo estresse oxidativo, como por exemplo o uso de antioxidantes eficientes, estáveis, seguros e não tóxicos para a suplementação dos meios utilizados para produção de embriões. Tendo em vista nisso foi testado o uso do ITS (insulina transferrina e selênio) como antioxidantes em ovócitos coletados de ovários oriundos de abatedouro através de quatro tratamentos: T1: -CIS -ITS; T2: +CIS -ITS; T3: +CIS +ITS; T4: -CIS +ITS do meio de maturação in vitro. Esses ovócitos foram submetidos ao restante das etapas de produção in vitro de embriões, fecundação e cultivo in vitro. No primeiro experimento foi visualizado as taxas de produção de embriões de cada tratamento. Já no segundo experimento foi aferido a qualidade dos embriões a partir da coloração diferencial realizada em cada embrião produzido. Sendo possível avaliar se a presença do ITS ou não interferiu na produção e qualidade dos embriões produzidos. Em ambos os experimentos a presença do ITS na maturação in vitro não influenciou de forma significativa a produção e qualidade embrionária (p0,05). Portanto há uma necessidade de mais estudos para avaliar outras formas de suplementação com ITS e associações onde tal complexo pode ser funcional, seja em outras concentrações ou em vias de uso como no cultivo in vitro, ou associação de seu uso nas duas etapas, maturação e cultivo in vitr

Composição de fosfolipídios e resistência à vitrificação de blastocistos produzidos in vivo de uma raça de suíno naturalizada brasileira

Blastocistos de suínos foram submetidos ao MALDI-TOF para se identificarem os principais fosfolipídios (PL). Depois, parte destes embriões (D6) foram vitrificados (n=52), ou permaneceram frescos (grupo controle, n=42). Após o aquecimento, os blastocistos foram cultivados in vitro para se avaliar a reexpansão e a eclosão (BE) às 24 e 48 horas. Finalmente, às 48 horas, os BE foram submetidos ao RT-qPCR em busca dos genes BCL2A1, BAK, BAX e CASP3. No MALDI-TOF, a intensidade do íon foi expressa em unidades arbitrárias. O desenvolvimento embrionário foi comparado por qui-quadrado (P0,05) entre blastocistos frescos ou vitrificados às 24 (33,3%, 32,7%) e 48 horas (2,4%, 13,5%). As taxas de eclosão foram maiores (P 0.05) between fresh or vitrified blastocysts at 24 (33.3%; 32.7%) or 48 hours (2.4%; 13.5%). Hatching rates were higher (P< 0.05) for fresh compared to vitrified at 24 (66.7%; 15.4%) and 48 hours (97.6%; 36.0%). BAX was overexpressed (P< 0.05) after vitrification. In conclusion, Piau blastocysts can be cryopreserved by Cryotop. This study also demonstrated that the apoptotic pathway may be responsible for the low efficiency of porcine embryo cryopreservation

Change in energy metabolism of in vitro produced embryos: an alternative to make them more cryoresistant?

Para o desenvolvimento de embriões bovinos produzidos in vitro (PIV) e in vivo, é extremamente importante que o metabolismo energético funcione de maneira adequada, pois o embrião precisa ser capaz de metabolizar os substratos energéticos necessários para a produção de energia. Os lipídios desempenham papel importante no desenvolvimento embrionário inicial, atuando como fonte de energia para oócitos e embriões. Entretanto, sabe-se que oócitos e embriões bovinos, principalmente os PIV, acumulam grande quantidade de lipídios no citoplasma. Apesar de serem extremamente importantes no desenvolvimento embrionário, os lipídios têm sido associados com a reduzida sobrevivência após a criopreservação de embriões bovinos. Existem evidências de que pelo menos quatro classes de lipídios afetam a sobrevivência embrionária pós-criopreservação, sendo os triglicerídeos (TAG), ácidos graxos livres, colesterol e os fosfolipídios. Sendo assim, vários estudos estão sendo realizados com o intuito de melhorar a resistência dos embriões PIV ao processo de criopreservação, realizando a redução ou retirada do soro do meio ou a redução mecânica ou química de lipídios. Com relação ao uso de agentes delipidantes que diminuam a captação e síntese de ácidos graxos (AG) pelas células, substâncias como fenazina etossulfato (PES), forskolin, L-carnitina e isômeros do ácido linoleico conjugado (CLA) tem sido utilizadas. O objetivo desta revisão foi abordar aspectos importantes relacionados ao metabolismo energético embrionário, a importância dos lipídios no metabolismo e sua relação com a criopreservação de embriões bovinos PIV sumarizando os estudos mais recentes nessa área.For the development of in vitro produced (IVP) as well as in vivo produced bovine embryos, it is extremely important that their energy metabolism works properly because the embryo must be able to metabolize energy substrates that are necessary for producing energy. Lipids play an important role in early embryonic development, acting as source of energy for oocytes and embryos. However, it is known that oocytes and embryos, mainly IVP, accumulate large amounts of lipids in the cytoplasm. Although they are extremely important in embryonic development, lipids have been associated with the reduced survival of bovine embryos following cryopreservation. There is evidence that at least four different categories of lipids affect embryo survival after cryopreservation, including triglycerides (TAG), free fatty acids, cholesterol and phospholipids. Thus, many studies are being conducted to improve the resistance of IVP embryos to the cryopreservation process by reducing the concentration or removing the source of serum from the medium or by reducing oocyte/embryo lipids using mechanical or chemical means. Regarding the use of delipidating agents that reduce the uptake and synthesis of fatty acids (FA) by cells, substances such as phenazine ethosulfate (PES), forskolin, L-carnitine and isomers of conjugated linoleic acid (CLA) have been utilized. This review aims to address important issues related to embryonic energy metabolism, the importance of lipid metabolism and its relation to the cryopreservation of IVP bovine embryos by summarizing the latest research in this field

Zinc levels in seminal plasma and blood serum of pubescent nelore cattle, in relation with sperm characteristics and reproductive development

O estudo estabeleceu o nível do Zn e fosfatase ácida e alcalina no plasma seminal em relação ao desenvolvimento reprodutivo em 13 machos da raça Nelore, desde os dez meses de idade até a puberdade, criados em pastagem de Brachiaria brizantha, recebendo sal mineralizado ad libitum. O desenvolvimento reprodutivo foi medido pela circunferência escrotal, características físicas do sêmen e concentração da testosterona no plasma sangüíneo. A concentração do Zn no plasma seminal mostrou uma alta variação individual (CV = 64%), situando-se entre 0,3 e 18,3 mcg/ml. Animais que alcançaram mais precocemente a puberdade possuíam maior quantidade de Zn seminal (P < 0,001). Houve correlação entre o zinco seminal e a concentração de testosterona (P < 0,001). Não houve correlação do nível do Zn seminal com as características físicas do sêmen. Os níveis das fosfatases do plasma seminal apresentaram correlação com vigor, motilidade e defeitos dos espermatozóides (P < 0,001).The levels of zinc and of acid and alkaline phosphatase in seminal plasma in relation to reproductive development in thirteen Nellore males from ten months of age until puberty, raised on Brachiaria brizantha pasture and receaving mineral salt ad libitum were determined. The reproductive development was determined through scrotal circumference, physical semen characteristics and blood testosterone concentration. The zinc concentrations showed a high individual variation (CV = 64%) with values between 0.3 and 18.3 meg/ml. The animals who reached sooner the puberty had a higher zinc concentration (P < 0.001). A correlation between zinc and blood testosterone level (P < 0.001) was observed. The phosphatase levels were correlated with vigour, motility and sperm defects (P < 0.001)