Validación técnica de una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de Chlamydia trachomatis

Objetivo: Implementar una técnica de PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) para la detección de Chlamydia trachomatis. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio experimental en el que se estandarizaron las condiciones de PCR (Concentración de MgCl2 , Taq polimerasa y temperatura de alineamiento de cebadores) para la amplificación de una región de 201pb  del plásmido de C. trachomatis con los cebadores CtP1 5´-TAGTAACTGCCACTTCATCA-3´ y CtP2 5´- TTCCCCTTGTAATTCGTTGC-3. Se realizaron diluciones seriadas del ADN de C. trachomatis ATCC VR885D para determinar la sensibilidad analítica.  La especificidad analítica de los cebadores se determinó con ADN de diferentes microorganismos patógenos y comensales del tracto urogenital. Se determinó la variabilidad intra e interensayo de la PCR  sobre triplicados de diferentes muestras de ADN. Resultados: Las condiciones  de amplificación fueron  94°C/4 min, seguido de 40 ciclos a 94°C/1 min, 56°C/1 min y 72°C/1.5 min y extensión final de 72°C/4 min. La concentración óptima de MgCl2 fue 1.5 mM y de ADN polimerasa 1U. La sensibilidad analítica de la prueba fue 4.8 x10-15 g/mL de ADN equivalentes a 160 cuerpos elementales de C. trachomatis. La especificidad analítica fue 100% y la variabilidad intra e interensayo mostraron reproducibilidad de la PCR. Conclusiones: Los datos sugieren que esta PCR puede emplearse con fines diagnósticos. Se requieren estudios adicionales para la evaluación clínica de esta prueba.

Os métodos manuais modificados são válidos para determinar a velocidade de hemossedimentação(VHS) nos laboratórios clínicos?

Four methods were statistically evaluated for their validity to determine the alternative Erythrocyte sedimentation rate to that of Westergren, which was taken as the “gold standard”. The methods evaluated were Wintrobe (WB), Wintrobe inclined (WI) at 45° and two capillary micromethods, one vertical (MM) and one inclined at 45° (MMI). A total of 419 samples were processed by the five methods. Concordance (C), sensitivity (S), specificity (E), positive predictive value (PPV) and negative predictive value (NPV) were evaluated.  The results for S, E, PPV, NPV and C were: 93.8%, 93.6, 98.8%, 72.8% and 71% for WB; 86.3%, 85.7%, 97.2%, 52.4% and 54% for WI; 94.6%, 66.6%, 94.1%, 71.4% and 54% for MM and 91.9%, 72.4%, 94.8%, 60.8% and 55% for MMI. The kappa index showed “good” agreement between the Westergren method and the Wintrobe method and “moderate” agreement with the WBI, MM and MMI methods. The results of the present study show that the Wintrobe method is reliable for use in the clinical laboratory compared to the Westergren method.Se evaluó estadísticamente la validez de cuatro métodos para determinar la Velocidad de Eritrosedimentación Globular (VSG) alternos al de Westergren, el que se tomó como “gold standard”. Los métodos evaluados fueron Wintrobe (WB), Wintrobe inclinado (WI) a 45° y dos micrométodos  capilares, uno vertical (MM) y otro inclinado a 45° (MMI). Se procesaron 419 muestras por los cinco métodos. Se evaluó la concordancia (C), la sensibilidad (S), especificidad (E), valor predictivo positivo (VPP) y valor predictivo negativo (VPN).  Los resultados de S, E, VPP, VPN y C fueron: 93,8%, 93,6, 98,8%, 72,8% y 71% en el de WB; 86,3%, 85,7%, 97,2%, 52,4% y 54% en el de WI; 94,6%, 66,6%, 94,1%, 71,4% y 54% para MM y 91,9%, 72,4%, 94,8%, 60,8% y 55% para MMI. El índice kappa mostró  una concordancia “buena” entre el método de Westergren y el método de Wintrobe y  “moderada” con los métodos de WBI, MM y MMI. Los resultados del presente estudio muestran que el método de Wintrobe es confiable para su uso en el laboratorio clínico comparado con el de Westergreen.Neste trabalho, foi avaliada estatisticamente a validez de quatro métodos para determinar a Velocidade de Eritrosedimentação Globular (VSG) alternos ao Westergren, que foi considerado como o “Método Padrão”. Os métodos avaliados foram Wintrobe (WB), Wintrobe inclinado a 45° (WI) e dois micro-métodos capilares, um vertical (MM) e outro inclinado a 45° (MMI). 419 amostras foram processadas pelos cinco métodos. Envalou-se a concordância (C),  sensibilidade (S), especificidade (E), assim como os valores preditivos positivos (VPP) e negativos (VPN). Os resultados de S, E, VPN e VPP foram: 93.8%, 93.6%, 98.8%, 72.8% e 71%  com o WB; 86.3%, 85.7%, 97.2%, 52.4% e 54% com o WI; 94.6%, 66.6%, 94.1%, 71.4% e 54% para MM e 91.9%, 72.4%, 94.8%, 60.8% e 55% para o MMI. O índice kappa apresentou “boa” concordância entre os métodos de Westergren e Wintrobe, enquanto teve concordância “moderada” com os métodos WBI, MMe MMI. Os resultados deste estudo revelaram que o método de Wintrobe é confiável para seu uso no laboratório clínico comparado com o método de Westergren

Community participation and communication processes in the implementation of programs of resettlement of families within the context of urban development in the city of Barranquilla (Colombia)

Objetivo: Estandarizar una técnica de PCR para la detección de Chlamydia trachomatis . Materiales y método: Estudio experimental en el que se optimizaron las condiciones de PCR para la detección in vitro de C. trachomatis . Se utilizó ADN de C. trachomatis VR885D y los cebadores CtP1 5 ́-TAGTAACTGCCACTTCATCA-3 ́ y CtP2 5 ́- TTCCCCTTGTAATTCGTTGC-3 , que amplificaron un segmento de 201 pb del plásmido clamidial. Se realizaron diluciones logarítmicas de ADN clamidial y fueron empleados para determinar la sensibilidad analítica expresada como copias de plásmidos y/o de cuerpos elementales. La especificidad analíti - ca de la prueba se evaluó usando los cebadores CtP1 y CtP2 y ADN de microorganismos colonizadores y/o patógenos urogenitales. La variabilidad intraensayo fue evaluada sobre muestras por triplicado, mientras que la variabilidad interensayo se determinó mediante comparación de los resultados obtenidos por tres técnicos en diferentes días. Resultados: Las condiciones de PCR para la amplificación del gen de interés fueron estable - cidas (94°C/4 min; 40 ciclos de 94°C/1 min, 56°C/1 min. y 72°C/1.5 min; 72°C/4 min); 1.5 mM MgCl 2 y 1 U/μL Ta q polimerasa. La sensibilidad analítica de la PCR fue de 10 -17 g de ADN , equivalentes a una copia del plásmido o menos de un cuerpo elemental de C. tracho - matis. Los cebadores CtP1 y CtP2 amplificaron específicamente el ADN de C. trachomatis bajo las condiciones experimentales evaluadas. La repetitibilidad y reproducibilidad de la PCR se determinó con experimentos de variabilidad intra e interensayo respectivamente. Conclusiones: La estandarización de esta PCR es el primer paso para su utilización en el diagnóstico de infecciones por C. trachomatis . Se requieren estudios adicionales de validación clínica de ésta prueba

Validación técnica de una reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la detección de Chlamydia trachomatis

Objetivo: Implementar una técnica de PCR (Reacción en cadena de la polimerasa) para la detección de Chlamydia trachomatis. Materiales y Métodos: Se realizó un estudio experimental en el que se estandarizaron las condiciones de PCR (Concentración de MgCl2 , Taq polimerasa y temperatura de alineamiento de cebadores) para la amplificación de una región de 201pb  del plásmido de C. trachomatis con los cebadores CtP1 5´-TAGTAACTGCCACTTCATCA-3´ y CtP2 5´- TTCCCCTTGTAATTCGTTGC-3. Se realizaron diluciones seriadas del ADN de C. trachomatis ATCC VR885D para determinar la sensibilidad analítica.  La especificidad analítica de los cebadores se determinó con ADN de diferentes microorganismos patógenos y comensales del tracto urogenital. Se determinó la variabilidad intra e interensayo de la PCR  sobre triplicados de diferentes muestras de ADN. Resultados: Las condiciones  de amplificación fueron  94°C/4 min, seguido de 40 ciclos a 94°C/1 min, 56°C/1 min y 72°C/1.5 min y extensión final de 72°C/4 min. La concentración óptima de MgCl2 fue 1.5 mM y de ADN polimerasa 1U. La sensibilidad analítica de la prueba fue 4.8 x10-15 g/mL de ADN equivalentes a 160 cuerpos elementales de C. trachomatis. La especificidad analítica fue 100% y la variabilidad intra e interensayo mostraron reproducibilidad de la PCR. Conclusiones: Los datos sugieren que esta PCR puede emplearse con fines diagnósticos. Se requieren estudios adicionales para la evaluación clínica de esta prueba.

Cloning, expression and partial inmunological characterizationof a P. vivax antigen candidate for a pre-erythrocytic stage vaccine

IP 1106-12-1043

ESTADO NUTRICIONAL EN NIÑOS CON DREPANOCITOSIS DE UN HOSPITAL UNIVERSITARIO DE TERCER NIVEL DE ATENCIÓN DE CALI, COLOMBIA Y POSIBLES FACTORES DE RIESGO SOCIODEMOGRÁFICOS

Introducción: El estado nutricional (EN) de los niños con enfermedades crónicas hematológicas, permite proponer un oportuno y adecuado plan de recuperación nutricional y evitar su morbimortalidad. Objetivo: Determinar la prevalencia del EN de niños con anemia de células falciformes (ACF) por medio de las tablas de la OMS de un hospital universitario de tercer nivel de atención de Cali, Colombia y posibles factores de riesgo. Metodología: Estudio descriptivo observacional no experimental de tipo prevalencia en 80 niños con ACF. Fueron incluidas variables sociodemográficas (edad y género), clínicas (peso y talla) y nutricionales (índice de masa corporal IMC y talla para la edad TE). Fueron clasificados en malnutridos (MNT) o con talla alterada (TA). Resultados: Se analizaron 80 niños de 6.1±3.8 años (5 meses-14 años); 51,2% del género masculino; con promedio de peso = 21.6±9.9 kg (7.2-64.6) y talla = 114.1±22.4 cm (67-167). Hubo una prevalencia para MNT del 42,5%: y para TA del 42,9%. Hubo > oportunidad de presentar MNT en el grupo de escolares y de TA en el género femenino; siendo posibles factores de riesgo asociados a MNT la edad y a TA el género (