Escenario actual de la resistencia a la colistina mediada por plásmidos en América Latina

Colistin resistance can occur by chromosomal mutations and by acquisition of plasmid-carrying determinants, mainly mcr-1. In the recent years, we have observed the outburst of this resistance gene in our region. Due to the risk of the rapid dissemination of mcr-1, this finding has worried and alerted different actors from the health field and has become one of the most prolific topics. Our review compiles available reports of well-documented mcr-1-positive strains of Enterobacteriaceae, obtained from different samples in Argentina and other countries of Latin America. Furthermore, it addresses the association of mcr-1 with ESBL resistance markers and outlines the platforms involved in their dissemination.Fil: Quiroga, Cecilia. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Medicina. Instituto de Investigaciones en Microbiología y Parasitología Médica; ArgentinaFil: Nastro, Marcela. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Di Conza, José Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentin

Integrons: gene collectors

Los integrones son estructuras genéticas que han despertado gran interés, debido a que algunos de ellos vehiculizan genes de resistencia a los antimicrobianos. Están formados por un fragmento que codifica una integrasa (intI) y, a continuación, una secuencia attI a la que se unen los genes en casetes que codifican diferentes mecanismos de resistencia. Dentro de intI, en su extremo 3´, hay una secuencia promotora Pc a partir de la cual se transcriben los casetes de resistencia integrados, ya que estos genes carecen de promotor. Sin embargo, estos casetes presentan una secuencia específica denominada attC, la cual es reconocida por la integrasa que se une, por recombinación, a la secuencia attI del integrón en la orientación adecuada para su expresión. Los integrones se han clasificado según la secuencia de su integrasa, pero en la actualidad se prefiere clasificarlos según su localización. Se habla, en general, de "integrones móviles" para referirse a aquellos asociados a secuencias de inserción, transposones y/o plásmidos conjugativos, los que en su mayoría median mecanismos de resistencia, y de "superintegrones", de localización cromosómica y con grandes arreglos de genes en casetes. Los integrones móviles de clase 1 son los más abundantes en aislamientos clínicos y suelen estar asociados a transposones del subgrupo Tn21, seguidos por los de clase 2, derivados principalmente de Tn7. Estos elementos no son móviles por sí mismos, pero su asociación con elementos que sí lo son facilita su transferencia horizontal, lo que explica su amplia difusión entre las bacterias. Esta revisión intenta recopilar la información disponible acerca de los integrones móviles descritos en Argentina hasta la fecha.Integrons gained great interest due to their participation in resistance gene recruitment and expression. Their basic structure includes a fragment that encodes an integrase (intI) followed by a recognition sequence (attI) into which they may incorporate gene cassettes (encoding resistance mechanisms). A promoter (Pc) embedded within the integrase gene controls the transcription of integrated resistance markers, as these genes do not have their own promoters. When in cassettes, resistance genes are flanked by specific sequences (attC), which are recognized by the integrase that, by site specific recombination, incorporates them after attI in proper orientation for their expression. In the past, integrons were classified according to their sequence homology; currently they are classified according to their location. In general, they are divided into "mobile" integrons (those associated with insertion sequences, transposons and/or plasmids, being most of them associated with resistance mechanisms), and chromosomally-located "super" integrons with large arrangements of cassette genes. "Mobile" class 1 integrons are the most abundant in clinical isolates and are generally associated with Tn21 subgroup transposons, followed by class 2, derived primarily from Tn7. These elements are not mobile themselves, but their association with mobile platforms that facilitate horizontal transfer, explains their wide distribution among bacteria. This review also attempts to describe the mobile integrons described so far in Argentina.Fil: Di Conza, José Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Cátedra de Microbiología General; ArgentinaFil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentin

Primer relevamiento de marcadores de resistencia a antibióticos en Enterobacteriaceae en Cochabamba, Bolivia

Se llevó a cabo un relevamiento molecular de la resistencia a antibióticos de importancia clínica en aislamientos recuperados en Cochabamba, Bolivia. Se estudiaron los genes codificantes de β-lactamasas de espectro extendido y de resistencia a quinolonas de localización plasmídica (PMQR) en un total de 101 aislamientos de enterobacterias resistentes a oximinocefalosporinas recuperados en distintos centros de salud, durante 4 meses (2012-2013). En todos ellos se detectó la presencia de cefotaximasas, las CTX-M grupo 1 fueron las más prevalentes (88,1%). La presencia de blaOXA-1 se detectó en el 76,4% de estos aislamientos. Se observó una elevada proporción de aislamientos resistentes a quinolonas. El gen aac(6′)-Ib-cr fue el determinante PMQR más frecuentemente identificado (83%). Además, 6 aislamientos resultaron ser portadores de qnrB. Por otro lado, cabe remarcar que 7 Escherichia coli presentaron qepA1 (6) y oqxAB (1); se documenta así por primera vez la presencia de oqxAB en Bolivia. Este estudio constituye el primer relevamiento de marcadores de resistencia en aislamientos clínicos de enterobacterias en Cochabamba, Bolivia; de este modo se contribuye al conocimiento regional de la situación epidemiológica, la cual presenta un escenario similar al observado en el resto de Latinoamérica.A molecular survey was conducted in Cochabamba, Bolivia, to characterize the mechanism involved in the resistance to clinically relevant antibiotics. Extended Spectrum β-lactamase encoding genes and plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) markers were investigated in a total of 101 oxyimino-cephalosporin-resistant enterobacteria recovered from different health centers during four months (2012?2013). CTX-M enzymes were detected in all isolates, being the CTX-M-1 group the most prevalent (88.1%). The presence of blaOXA-1 was detected in 76.4% of these isolates. A high quinolone resistance rate was observed among the included isolates. The aac(6′)-Ib-cr gene was the most frequent PMQR identified (83.0%). Furthermore, 6 isolates harbored the qnrB gene. Interestingly, qepA1 (6) and oqxAB (1), were detected in 7 Escherichia coli, being the latter the first to be reported in Bolivia. This study constitutes the first molecular survey on resistance markers in clinical enterobacterial isolates in Cochabamba, Bolivia, contributing to the regional knowledge of the epidemiological situation. The molecular epidemiology observed herein resembles the scene reported in South America.Fil: Saba Villarroel, Paola M.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaFil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Conza, José Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Radice, Marcela Alejandra. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Intercambio de mecanismos de resistencia entre bacterias gram negativas.

La magnitud global de la resistencia a los antimicrobianos de uso clínico es alarmante adquiriendo una dimensión destacada en países de desarrollo intermedio quienes suelen ser cuantitativamente los más afectados por la emergencia de mecanismos de resistencia dado el acceso a tratamientos con antibióticos de reserva pero una pobre vigilancia o empleo no riguroso de medidas de contención de la resistencia. En este trabajo se realizará una revisión sobre las estructuras genéticas movilizables, que si bien no son esenciales para las bacterias, aportan genes adicionales que le permiten una mejor adaptación a ambientes hostiles. El intercambio de genes de resistencia entre las bacterias permite equipar a un microorganismo sensible a antibióticos con un verdadero arsenal de mecanismos de resistencia, incluso en un único evento de intercambio. La transferencia horizontal de genes de resistencia entre bacilos gram negativos es debida en gran parte a plásmidos (más o menos promiscuos) y a los elementos transponibles e integrones que pueden formar parte del o de los replicones presentes en estos microorganismos. Los integrones son plataformas genéticas que han despertado gran interés desde el punto de vista clínico ya que algunos de ellos vehiculizan genes de resistencia a los antimicrobianos. Están formados por un fragmento que codifica una integrasa (intI) seguido por una secuencia attI, sistema que permite la captura de los genes en casetes (que codifican para diferentes mecanismos de resistencia). Se habla, en general, de integrones “móviles” a aquellos asociados a secuencias de inserción, transposones y/o plásmidos conjugativos, que en su mayoría median mecanismos de resistencia, y “super” integrones, de localización cromosómica con grandes arreglos de genes en casetes.Antimicrobial resistant microorganisms are an alarming problem worldwide, gaining remarkable importance in moderately developed countries which are usually quantitatively more affected by their emergence. In this paper we conduct a review about mobile genetic structures, which although not essential for bacteria, provide additional genes that allow them to better adaptate to unfavorable environments. Resistance genes’ exchange between bacteria could arm a susceptible microorganism with an arsenal of resistance mechanisms, even in a single exchange event. Horizontal transfer of resistance genes among gramnegative bacilli is largely due to plasmids and transposable elements, and integrons may be part of the replicons present in these organisms. In recent decades, integrons gained great interest because of their participation in resistance genes recruitment and expression. Their basic structure includes a fragment that encodes an integrase (intI) followed by a recognition sequence (attI) in which they may incorporate gene cassettes (encoding resistance mechanisms). In general, they are divided in "mobile" integrons (those associated with insertion sequences, transposons and/or plasmids, most of them related to resistance mechanisms), and chromosomally-located "super" integrons with large arrangements of cassettes.Fil: Di Conza, José Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Biotecnología; Argentina; Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Laboratorio de Resistencia Bacteriana; Argentina; Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Cátedra de Microbiología General; Argentina;Fil: Power, Pablo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; Argentina; Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Laboratorio de Resistencia Bacteriana; Argentina;Fil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología; Argentina; Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Laboratorio de Resistencia Bacteriana; Argentina

Plasma Activity of the Broad-snouted Caiman (Caiman latirostris)

Crocodilians exhibit well-defined social behaviors, which frequently result in serious wounds as a consequence of social disputes including the loss of entire limbs. Despite the severity of many wounds, there is typically little sign of infection. A common question is how these animals survive with serious wounds without showing obvious signs of illness, particularly when living in environments containing potentially pathogenic microbes. In this study we determined in vitro plasma antibacterial activity of the Broad-snouted caiman (Caiman latirostris) against Escherichia coli and compared it to that in hen (Gallus gallus) and human plasma. Colony forming units were measured at different exposure times (0, 1, 3, and 6 h). The antibacterial activity of Broad-snouted caiman plasma was consistently superior to those of human and hen plasma, and hen plasma had greater activity than human plasma except at 3 h of exposure. Only C. latirostris plasma completely inhibited E. coli proliferation at 6 h.Fil: Siroski, Pablo Ariel. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Proyecto Yacaré; Argentina. Secretaría de Estado de Medio Ambiente y Desarrollo Sustentable de la Provincia de Santa Fe; ArgentinaFil: Piña, Carlos Ignacio. Provincia de Entre Ríos. Centro de Investigaciones Científicas y Transferencia de Tecnología a la Producción. Universidad Autónoma de Entre Ríos. Centro de Investigaciones Científicas y Transferencia de Tecnología a la Producción. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe. Centro de Investigaciones Científicas y Transferencia de Tecnología a la Producción; Argentina. Proyecto Yacaré; ArgentinaFil: Larriera, Alejandro. Proyecto Yacaré; Argentina. Secretaría de Estado de Medio Ambiente y Desarrollo Sustentable de la Provincia de Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Humanidades y Ciencias; ArgentinaFil: Merchant, Mark. McNeese State University; Estados UnidosFil: Di Conza, José Alejandro. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad Nacional del Litoral. Facultad de Bioquímica y Ciencias Biológicas. Cátedra de Microbiología General; Argentin

Description of In116, the first blaCTX-M-2-containing complex class 1 integron found in Morganella morganii isolates from Buenos Aires, Argentina

peer reviewe

Molecular characterization of InJR06, a class 1 integron located in a conjugative plasmid of Salmonella enterica ser. Typhimurium

The presence of class 1, 2, and 3 integrons was investigated in four pediatric isolates of Salmonella enterica ser. Typhimurium (S. Typhimurium). A class 1 integron was detected in one S. Typhimurium strain, the only one that also showed resistance to various aminoglycoside antibiotics. This integron, called InJR06, and the aminoglycoside resistance determinants were located in pS06, a large (≥55 kb) conjugative plasmid. Asingle mobile cassette (encoding the aminoglycoside adenylyltransferase ANT(3´´)-Ia) was detected in the variable region of InJR06, while the architecture of the attI1 and attC sites was conserved. [Int Microbiol 2005; 8(4):287-290

Phenotypic detection of plasmid-mediated colistin resistance in Enterobacteriaceae

The aim of this work was to evaluate an easy-to-perform assay basedupon inhibition of mobile colistin resistance (MCR) activity by EDTA. We included 92nonrelated isolates of Enterobacteriaceae (74 Escherichia coli, 17 Klebsiella pneumoniae,and 1 Serratia marcescens). Our proposed method is based on a modificationof the colistin agar-spot screening test (CAST), a plate containing 3 g/ml colistin,by adding an extra plate of colistin agar-spot supplemented with EDTA (eCAST).Bacterial growth was evaluated after 24 h of incubation at 35°C. All the colistinresistantisolates showed development on the CAST plates. Colistin-resistant K. pneumoniaewithout mcr-1 and S. marcescens also grew on the eCAST plates. In contrast,colistin-resistant MCR-producing E. coli was not able to grow in eCAST plates. Thecombined CAST/eCAST test could provide a simple and easy-to-perform method todifferentiate MCR-producing Enterobacteriaceae from those in which colistin resistanceis mediated by chromosomal mechanisms.Fil: Gonzales Escalante, Edgar. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología; ArgentinaFil: Yauri Condor, Katherine. Universidad Nacional Mayor de San Marcos; PerúFil: Di Conza, José Alejandro. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; ArgentinaFil: Gutkind, Gabriel Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Microbiología, Inmunología y Biotecnología. Cátedra de Microbiología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Houssay; Argentin

Antibiotic resistance and integrons in Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC)

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) cause hemorrhagic colitis (HC) and hemolyticuremic syndrome in humans (HUS). Cattle are the main reservoir of STEC and transmission to humans occurs through contaminated food and water. Antibiotics are used in pig production systems to combat disease and improve productivity and play a key role in the dissemination of antibiotic resistance genes to the bacteria. Integrons have been identified in resistant bacteria allowing for the acquisition and dissemination of antibiotic resistance genes. STEC strains isolated from humans and animals have developed antibiotic resistance. In our laboratory, 21 non-157 STEC strains isolated from pigs were analyzed to detect class 1 and 2 integrons by PCR. Eight carried integrons, 7 of them harbored intl2. In another study 545 STEC strains were also analyzed for the presence of intl1 and intl2. Strains carrying intl1 belonged to isolates from environment (n = 1), chicken hamburger (n = 2), dairy calves (n = 4) and pigs (n = 8). Two strains isolated from pigs harbored intl2 and only one intl1/intl2, highlighting the presence of intl2 in pigs. The selection for multiresistant strains may contribute to the emergence of antibiotic resistant pathogens and facilitate the spreading of the mobile resistance elements to other bacteria