Parâmetros biológicos de Euschistus heros (Hemiptera:Pentatomidae) alimentados em dietas na naturais e sua relação com a infecção causada por fungos entomopatogênicos

Orientador : Prof. Dr. Daniel Ricardo Sosa-GómezTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 23/04/2014Inclui referênciasArea de concentração: EntomologiaResumo: Euschistus heros é uma das principais pragas da soja no Brasil, e apresenta sérias dificuldades para seu controle. Em campo, estes insetos possuem baixa susceptibilidade a fungos entomopatogênicos, não sendo registrada a ocorrência de epizootias naturais. Assim, avaliouse o efeito da alimentação em diferentes combinações de dietas naturais sobre os parâmetros biológicos destes insetos e o papel da cutícula, e suas características físico-químicas, nos estágios iniciais do processo de infecção pelos fungos Beauveria bassiana (Bb) e Metarhizium anisopliae (Ma). As combinações de dietas testadas foram: Padrão (vagens de feijão+grãos de soja, amendoim, girassol), e nas demais foram oferecidas vagens de feijão mais o respectivo grão exclusivamente (Soja, Amendoim, Girassol, Ervilha ou Gergelim). Nas avaliações dos parâmetros biológicos, verificou-se que os insetos alimentados na dieta Padrão apresentaram o menor tempo de desenvolvimento e a maior viabilidade no ciclo, de 49,5%. A menor viabilidade foi obtida na dieta Ervilha, com valores inferiores a 30%, e 11% dos adultos desta dieta continham deformações. Na tabela de vida, o melhor desempenho em todos os índices também foi na dieta Padrão, e o pior foi observado nos insetos alimentados com Ervilha. Os valores da razão finita de aumento foram: Padrão=1,091, Soja=1,077, Amendoim=1,071, Girassol=1,076, Ervilha=1,058 e Gergelim=1,065. Quanto ao efeito na susceptibilidade, apenas em Gergelim a mortalidade ocasionada por Ma (55%) superou Bb (40%). Comparando-se entre as dietas, para ambos os fungos, os percevejos criados em Girassol e Gergelim sempre estiveram dentre os mais susceptíveis, em relação à Padrão. Avaliando o crescimento dos tubos germinativos sobre as asas, observou-se muita variação entre tratamentos, porém as asas dos percevejos criados em Amendoim figuraram dentre as que apresentaram o maior crescimento, para Bb e Ma. Para os ensaios de avaliação dos efeitos da cutícula sobre os fungos, os extratos cuticulares avaliados foram obtidos em adultos (brutos) e exúvias (brutos e frações hexânicas, clorofórmicas e metanólicas) dos percevejos alimentados nas dietas já descritas. Verificou-se aumento na adesão de conídios nos extratos brutos de adultos, com destaque para os insetos criados em Ervilha que apresentaram até quatro vezes mais conídios aderidos que o Controle, para Bb e Ma. Contrariamente, a adesão foi prejudicada em todos os tratamentos da fração metanólica, na qual os compostos polares presentes, além de não servirem como substrato de adesão, repeliram os conídios. A germinação e o tamanho do tubo germinativo dos fungos também foram influenciados pelos tratamentos, que apresentaram efeito suprimindo ou estimulando estes processos. As frações hexânicas e quase todos os tratamentos com extratos brutos estimularam a germinação/tamanho do tubo. Já os efeitos inibitórios foram observados nos extratos brutos de exúvias na maior concentração (50?g), para todos os tratamentos. As frações clorofórmicas e metanólicas dos extratos de exúvias tiveram efeito inibitório de germinação na maioria dos tratamentos, principalmente para Ma. Não ocorreu a formação de apressórios de Bb nas condições avaliadas. Entretanto, todos os tratamentos permitiram a formação de apressórios de Ma, sendo constatado com maior frequência, em 7,5%, no tratamento Soja. Concluiu-se que a dieta influencia os parâmetros biológicos de E. heros e proveem susceptibilidade diferencial aos fungos Bb e Ma. Também é possível ressaltar que ocorreu relação entre a dieta utilizada pelos insetos e as características físico-químicas da cutícula, ocasionando efeitos sobre os estágios iniciais da infecção pelos fungos. Palavras-chave: Beauveria bassiana; Interações tritróficas; Lipídios cuticulares; Metarhizium anisopliae.Abstract: Euschistus heros is a major pest of soybean in Brazil, and its control is very difficult. In field condition, the stink bug have low susceptibility to entomopathogenic fungi, not being registered the epizootic occurrence. Thus, we assessed the effect of feeding on natural diets on biological parameters of these insects and the role of the cuticle, and their physical and chemical characteristics in the early stages of the infection process by the fungi Beauveria bassiana (Bb) and Metarhizium anisopliae (Ma). The evaluated diets included a standard diet (beans pods + soybeans, peanuts and sunflower) and diets in which the bean pods were combined with only one type of grain, either soybeans, peanuts, sunflower, peas or sesame seeds. In evaluation of the biological parameters, it was found that the insects fed on standard diet had the shortest development period and the higher viability in the cycle, with 49.5%. The insects fed the pea diet exhibited less than 30% viability and 11% of adults had wing/legs deformations. The life table results demonstrated that the best indices was also in insects fed on standard diet, and the worst was observed when fed on pea. The finite rate of increase values for the treatment groups were: standard: 1.091; soybean: 1.077; peanut: 1.071; sunflower: 1.076; pea: 1.058; and sesame: 1.065. Regarding the susceptibility, the mortality to Ma (55%) was greater than that for Bb (40%) only in insects fed the sesame diet. Considering the effects of diet on their susceptibility, the stink bugs fed the sunflower or sesame diet were always among the most susceptible to both fungal species compared with those fed the standard diet. The growth of the germ tubes varied, but the wings of insects fed the peanut diet supported the largest Bb and Ma tubes. For assess the effects of the cuticle on fungi, the cuticular extracts evaluated were obtained in adults (crude) and in fifth instar exuviae (crude and hexanic, chloroformic and methanolic fractions) of insects fed on diets already described. Was verified an increase in the adhesion of conidia on crude extracts of adults, highlighting the extract of insects reared on peas, presenting up to four times more conidia adhered to the control treatment, for Bb and Ma. In contrast, the adhesion was affected in all treatments of the methanol fraction, in which the polar compounds does not served as a substrate to conidia adhesion, and causing repellency. Percentage of germination and germ tube size of the fungi were also influenced by treatments that show effects suppressing or stimulating these processes. The hexanic fractions and almost all treatments with crude extracts stimulated germination/tube size. The inhibitory effects were observed in crude extracts of exuviae at the highest concentration (50 ìg) for all treatments. Also, the chloroform and methanolic fractions had inhibitory effects on the germination of most treatments, mainly for Ma. No appressoria formation was observed in the evaluated conditions to Bb. However, all treatments of Ma led to appressoria formation, being found more frequently (7,5%) in the soybean treatment. Based on these results, we concluded that the diet affects the biological parameters of E. heros and differentially affects their susceptibility to Bb and Ma fungi. We also emphasize that occurred relationship between diet used by E. heros and the physical and chemical characteristics of the cuticle, causing effects on the early stages of infection by fungi. Key words: Beauveria bassiana; Tri-trophic interactions; Cuticular lipids; Metarhizium anisopliae

Parastethorus histrio (Chazeau) (Coleoptera: Coccinellidae) predator of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil

This is the first record of Parastethorus histrio (Chazeau), feeding on eggs, nymphs and adults of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil.This is the first record of Parastethorus histrio (Chazeau), feeding on eggs, nymphs and adults of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil

Parâmetros biológicos de Euschistus heros (Hemiptera:Pentatomidae) alimentados em dietas na naturais e sua relação com a infecção causada por fungos entomopatogênicos

Orientador : Prof. Dr. Daniel Ricardo Sosa-GómezTese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Zoologia. Defesa: Curitiba, 23/04/2014Inclui referênciasArea de concentração: EntomologiaResumo: Euschistus heros é uma das principais pragas da soja no Brasil, e apresenta sérias dificuldades para seu controle. Em campo, estes insetos possuem baixa susceptibilidade a fungos entomopatogênicos, não sendo registrada a ocorrência de epizootias naturais. Assim, avaliouse o efeito da alimentação em diferentes combinações de dietas naturais sobre os parâmetros biológicos destes insetos e o papel da cutícula, e suas características físico-químicas, nos estágios iniciais do processo de infecção pelos fungos Beauveria bassiana (Bb) e Metarhizium anisopliae (Ma). As combinações de dietas testadas foram: Padrão (vagens de feijão+grãos de soja, amendoim, girassol), e nas demais foram oferecidas vagens de feijão mais o respectivo grão exclusivamente (Soja, Amendoim, Girassol, Ervilha ou Gergelim). Nas avaliações dos parâmetros biológicos, verificou-se que os insetos alimentados na dieta Padrão apresentaram o menor tempo de desenvolvimento e a maior viabilidade no ciclo, de 49,5%. A menor viabilidade foi obtida na dieta Ervilha, com valores inferiores a 30%, e 11% dos adultos desta dieta continham deformações. Na tabela de vida, o melhor desempenho em todos os índices também foi na dieta Padrão, e o pior foi observado nos insetos alimentados com Ervilha. Os valores da razão finita de aumento foram: Padrão=1,091, Soja=1,077, Amendoim=1,071, Girassol=1,076, Ervilha=1,058 e Gergelim=1,065. Quanto ao efeito na susceptibilidade, apenas em Gergelim a mortalidade ocasionada por Ma (55%) superou Bb (40%). Comparando-se entre as dietas, para ambos os fungos, os percevejos criados em Girassol e Gergelim sempre estiveram dentre os mais susceptíveis, em relação à Padrão. Avaliando o crescimento dos tubos germinativos sobre as asas, observou-se muita variação entre tratamentos, porém as asas dos percevejos criados em Amendoim figuraram dentre as que apresentaram o maior crescimento, para Bb e Ma. Para os ensaios de avaliação dos efeitos da cutícula sobre os fungos, os extratos cuticulares avaliados foram obtidos em adultos (brutos) e exúvias (brutos e frações hexânicas, clorofórmicas e metanólicas) dos percevejos alimentados nas dietas já descritas. Verificou-se aumento na adesão de conídios nos extratos brutos de adultos, com destaque para os insetos criados em Ervilha que apresentaram até quatro vezes mais conídios aderidos que o Controle, para Bb e Ma. Contrariamente, a adesão foi prejudicada em todos os tratamentos da fração metanólica, na qual os compostos polares presentes, além de não servirem como substrato de adesão, repeliram os conídios. A germinação e o tamanho do tubo germinativo dos fungos também foram influenciados pelos tratamentos, que apresentaram efeito suprimindo ou estimulando estes processos. As frações hexânicas e quase todos os tratamentos com extratos brutos estimularam a germinação/tamanho do tubo. Já os efeitos inibitórios foram observados nos extratos brutos de exúvias na maior concentração (50?g), para todos os tratamentos. As frações clorofórmicas e metanólicas dos extratos de exúvias tiveram efeito inibitório de germinação na maioria dos tratamentos, principalmente para Ma. Não ocorreu a formação de apressórios de Bb nas condições avaliadas. Entretanto, todos os tratamentos permitiram a formação de apressórios de Ma, sendo constatado com maior frequência, em 7,5%, no tratamento Soja. Concluiu-se que a dieta influencia os parâmetros biológicos de E. heros e proveem susceptibilidade diferencial aos fungos Bb e Ma. Também é possível ressaltar que ocorreu relação entre a dieta utilizada pelos insetos e as características físico-químicas da cutícula, ocasionando efeitos sobre os estágios iniciais da infecção pelos fungos. Palavras-chave: Beauveria bassiana; Interações tritróficas; Lipídios cuticulares; Metarhizium anisopliae.Abstract: Euschistus heros is a major pest of soybean in Brazil, and its control is very difficult. In field condition, the stink bug have low susceptibility to entomopathogenic fungi, not being registered the epizootic occurrence. Thus, we assessed the effect of feeding on natural diets on biological parameters of these insects and the role of the cuticle, and their physical and chemical characteristics in the early stages of the infection process by the fungi Beauveria bassiana (Bb) and Metarhizium anisopliae (Ma). The evaluated diets included a standard diet (beans pods + soybeans, peanuts and sunflower) and diets in which the bean pods were combined with only one type of grain, either soybeans, peanuts, sunflower, peas or sesame seeds. In evaluation of the biological parameters, it was found that the insects fed on standard diet had the shortest development period and the higher viability in the cycle, with 49.5%. The insects fed the pea diet exhibited less than 30% viability and 11% of adults had wing/legs deformations. The life table results demonstrated that the best indices was also in insects fed on standard diet, and the worst was observed when fed on pea. The finite rate of increase values for the treatment groups were: standard: 1.091; soybean: 1.077; peanut: 1.071; sunflower: 1.076; pea: 1.058; and sesame: 1.065. Regarding the susceptibility, the mortality to Ma (55%) was greater than that for Bb (40%) only in insects fed the sesame diet. Considering the effects of diet on their susceptibility, the stink bugs fed the sunflower or sesame diet were always among the most susceptible to both fungal species compared with those fed the standard diet. The growth of the germ tubes varied, but the wings of insects fed the peanut diet supported the largest Bb and Ma tubes. For assess the effects of the cuticle on fungi, the cuticular extracts evaluated were obtained in adults (crude) and in fifth instar exuviae (crude and hexanic, chloroformic and methanolic fractions) of insects fed on diets already described. Was verified an increase in the adhesion of conidia on crude extracts of adults, highlighting the extract of insects reared on peas, presenting up to four times more conidia adhered to the control treatment, for Bb and Ma. In contrast, the adhesion was affected in all treatments of the methanol fraction, in which the polar compounds does not served as a substrate to conidia adhesion, and causing repellency. Percentage of germination and germ tube size of the fungi were also influenced by treatments that show effects suppressing or stimulating these processes. The hexanic fractions and almost all treatments with crude extracts stimulated germination/tube size. The inhibitory effects were observed in crude extracts of exuviae at the highest concentration (50 ìg) for all treatments. Also, the chloroform and methanolic fractions had inhibitory effects on the germination of most treatments, mainly for Ma. No appressoria formation was observed in the evaluated conditions to Bb. However, all treatments of Ma led to appressoria formation, being found more frequently (7,5%) in the soybean treatment. Based on these results, we concluded that the diet affects the biological parameters of E. heros and differentially affects their susceptibility to Bb and Ma fungi. We also emphasize that occurred relationship between diet used by E. heros and the physical and chemical characteristics of the cuticle, causing effects on the early stages of infection by fungi. Key words: Beauveria bassiana; Tri-trophic interactions; Cuticular lipids; Metarhizium anisopliae

Establishment of a protocol to evaluate the conidial viability of entomopathogenic fungi and determination of heat protection to Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae by emulsifiable oil formulation

Este trabalho teve o objetivo de avaliar, em condições de laboratório, a influência da temperatura e do tempo de exposição na viabilidade e virulência dos fungos Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae em suspensões preparadas com produtos à base de Conídios puros, Arroz+fungo e nas formulações Pó molhável e Suspensão concentrada em óleo emulsionável. Inicialmente foi necessário o desenvolvimento de um método eficiente e econômico para avaliação da viabilidade, especialmente para produtos formulados em óleo emulsionável misturados em água (suspensão de aplicação). Durante o desenvolvimento do método de avaliação foram definidos parâmetros e condições adequadas para cada formulação, como o meio de cultura, e também a influência de antibióticos e fungistáticos. O protocolo estabelecido baseiase resumidamente no plaqueamento de 150 µL de uma suspensão contendo entre 0,7 e 1×106 conídios/mL em placas tipo Rodac® com 5 mL de meio de cultura Batata-Dextrose-Ágar + 5 mg/L de Pentabiótico® e 10 µL/L de Derosal® (Carbendazim), efetuando-se posteriormente a contagem dos conídios germinados. Este método foi comparado com outra técnica de viabilidade direta (VD) e com as técnicas de Unidade Formadoras de Colônia (UFC) e viabilidade por fluorescência, confrontando-se a precisão obtida pelo coeficiente de variação (CV) das análises de cada método. Os resultados demonstraram que além da facilidade de execução, o método desenvolvido apresentou maior precisão que as demais técnicas (com CV até 7 vezes menor em relação à VD, e até 32 vezes menor que UFC). Foi constatado que a técnica de UFC não é adequada para avaliações de produtos formulados, visto que em relação à quantificação inicial subestimou a concentração viável na maioria das formas dos fungos testadas, sendo que nos produtos em óleo emulsionável estes valores foram 54% menores para B. bassiana, e 73% menores para M. anisopliae. A técnica para avaliação da viabilidade da suspensão preparada com produtos formulados em óleo se mostrou eficaz, após a retirada do óleo da suspensão e outras adaptações. Suspensões de produtos e formulações a base de B. bassiana e M. anisopliae foram mantidas a 26°C, 36°C e 46°C por 1h, 4h e 6h e os efeito destes tratamentos foram medidos na viabilidade e virulência dos fungos contra lagartas de Diatraea saccharalis. Verificou-se que quanto maior o tempo de exposição e maior a temperatura, maior é a influência negativa nos parâmetros dos fungos. Entretanto, a formulação em óleo emulsionável foi a que apresentou melhor proteção aos efeitos detrimentais da temperatura. Mesmo após 6h de exposição a temperatura de 36°C a viabilidade se manteve acima dos 85% para ambos os fungos avaliados. Esta formulação também apresentou os melhores resultados de mortalidade dos insetos, e mesmo após 4h de exposição a 46°C atingiu 39% e 50% de eficiência para B. bassiana e M. anisopliae, respectivamente, sendo recomendável para o controle de D. saccharalis. O protocolo para avaliação da viabilidade de conídios de fungos entomopatogênicos proposto constitui-se como uma ferramenta importante para estudos da influência de fatores bióticos e abióticos durante o período de pré-aplicação na eficiência de micoinseticidas.This study aimed to evaluate, under laboratory conditions, the influence of temperature and exposure time on the viability and virulence of Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae in suspensions prepared with pure conidia, rice plus fungus and in formulations of wettable powder and concentrated suspension in emulsifiable oil. Initially, an efficient and economical methodology was developed to evaluate conidia viability for each formulation, especially for products formulated in emulsifiable oil mixed in water (suspension of application). During the development of the methodology, the influence of culture media, antibiotics and fungistatics and appropriate conditions were defined for each formulation. Briefly, the established protocol was based on plating 150 L of suspensions containing between 0.7 and 1×106 conidia/mL on a plate type Rodac® with 5 ml of Potato Dextrose Agar culture medium plus 5 mg/L pentabiotic® and 10mg/L and 10 µL/L Derosal® (Carbendazim) and the subsequent counting of germinated conidia. This method was compared to a direct counting (DC) technique, the technique of colony-forming unit (CFU) and viability through fluorescence. The precision of each methodology was measured by their coefficient of variability (CV). Besides its easiness of execution, the new developed methodology was the most precise of all methods (with CV up to 7 times lower compared to the DC, and up to 32 times lower than the UFC). Our results showed that the technique of UFC is not appropriate for evaluation of formulated products, as compared to the conidial quantification by hemacytometer, this technique underestimated the viable concentration in most forms of fungi tested, and for the products in emulsifiable oil these values were 54% lower for B. bassiana, and up to 73% lower for M. anisopliae. The technique for assessing the viability of the suspension prepared with products formulated in emulsifiable oil was effective, after the removal of oil from the suspension and others adaptations. The effect of temperature and period of time on conidia viability of B. bassiana and M. anisopliae-based products and formulations and their virulence against larvae of Diatraea saccharalis was measured at 26°C, 36°C and 46°C for 1h, 4h and 6h. The longer the time of heat exposure and the higher the temperature, the greater the negative influence on vital parameters of the fungi. However, the emulsifiable oil formulation was the least affected by the detrimental effects of heat for both fungi. Even after 6 hours of exposure to temperature of 36°C, the viability remained above 85% for both species evaluated. This formulation also showed the best results of insect mortality, and even after 4h of exposure to 46°C the efficiency was 39% (for B. bassiana) and 50% (for M. anisopliae), and therefore can be useful for control of D. saccharalis. The proposed protocol of evaluation of entomopathogenic fungi viability is a valuable tool for studies of biotic and abiotic factors effect on efficiency of micoinsecticides during the pre-application period

Parastethorus histrio (Chazeau) (Coleoptera: Coccinellidae) predator of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor) (Acari: Tetranychidae), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil

This is the first record of Parastethorus histrio (Chazeau), feeding on eggs, nymphs and adults of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil.This is the first record of Parastethorus histrio (Chazeau), feeding on eggs, nymphs and adults of the red mite Oligonychus yothersi (McGregor), on Paraguay tea (Ilex paraguariensis A.St.Hil.) in Brazil

Biological Parameters of Euschistus heros (F.) (Heteroptera: Pentatomidae) and its Susceptibility to Entomopathogenic Fungi When Fed on Different Diets

ABSTRACT: The effects of six diets on biological parameters of Euschistus heros (F.) (Heteroptera: Pentatomidae) and its susceptibility to entomopathogenic fungi Beauveria bassiana (Bb) and Metarhizium anisopliae (Ma) were studied. The diets included a standard diet (bean pods+soybeans, peanuts and sunflower) and diets in which the bean pods were combined with only one type of grain, either soybean, peanut, sunflower, pea or sesame seeds. The best performance was that of insects fed on standard diet, which had the shortest development period and 49.5% of egg-to-adult viability. The insects fed the pea diet exhibited less than 30% viability and 11% of adults had wing deformations. The finite rate of increase values for the treatment groups were: standard: 1.091; soybean: 1.077; peanut: 1.071; sunflower: 1.076; pea: 1.058; and sesame: 1.065. The susceptibility to Ma (55%) was greater than Bb (40%) only for insects fed on the sesame diet. Considering the effects of diet on susceptibility to both fungal species comparatively among the diet-treatment groups, the stink bugs fed the restrictive diets were more susceptible compared with those fed the standard diet. We concluded that diet composition affects the biological parameters of E. heros and differentially affects their susceptibility to Bb and Ma fungi

Persistence of insecticidal activity and repellency of the diatomaceous earth against the lesser mealworm Alphitobius diaperinus (Panzer, 1797) (Coleoptera: Tenebrionidae)

A persistência da ação inseticida da terra de diatomácea (TD), e o seu efeito repelente foram avaliados contra o cascudinho-dos-aviários, Alphitobius diaperinus. Para o experimento de persistência foram utilizados potes plásticos (20 cm de diâmetro) com cama tratada com TD (172g/m2). Foram liberados 13g de adultos de cascudinho (cerca de 1100 insetos), e a mortalidade foi avaliada retirando-se e fazendo a contagem dos insetos mortos nos recipientes 10, 20 e 30 dias após a infestação. Este procedimento repetiu-se com 80, 160, 240, 320 e 400 dias após a aplicação de TD. Para avaliação da repelência foram utilizadas bandejas plásticas com (36×24×6 cm C×L×A), contendo 5 cm de cama de aviário tratada e não-tratada com TD (200g/m2) em metade de cada bandeja. Foram liberados 13g de adultos de cascudinho na linha de divisão dos tratamentos, avaliando-se após 1, 4, e 7 dias da infestação, pela contagem dos insetos presentes em cada área. Obteve-se atividade inseticida até oito meses após a aplicação (60% de mortalidade), demonstrando a persistência da ação inseticida da TD na cama de aviário. Além disso, o produto apresentou ação repelente para os insetos, a qual deve ser considerada no estabelecimento de estratégias de controle do cascudinho.The persistence and repellency of the diatomaceous earth (DE) formulation was evaluated against the lesser mealworm, Alphitobius diaperinus. Persistence bioassays werw conduced in 20 cm diameter plastic cups with DE-treated poultry litter (172g/m2). The adults were transferred (13g – about 1100 insects) and the mortality was assessed by counting and removing dead adult beetles in the cups 10, 20 and 30 days after placement. All procedures were repeated 80, 160, 240, 320 and 400 days after first evaluation. The repellency test was conducted in plastic box (36×24×6 cm L×W×H) containing poultry litter trated and non-treated with DE (200g/m2), distribuited in two parts. The adults were added to the litter (13g), and the evaluation ocurred after 1, 4 and 7 days after placement, by counting the insects in the treated and non-treated area. It was verified the inseticidal activity until eight month after litter treatment (60% of mortality), showing the persistence of the product. The repellency activity of the DE was confirmed and it must be considered in a development of control strategies of the lesser mealworm with

Genetic variability of the fungus Beauveria spp. isolates and virulence to the lesser mealworm Alphitobius diaperinus Panzer (Coleoptera: Tenebrionidae)

A variabilidade genética de 13 isolados de Beauveria spp. foi avaliada por meio da técnica de RAPD, para verificar se há relação entre o perfil molecular e a origem geográfica dos isolados, hospedeiro inicial e virulência ao cascudinho dos aviários (Alphitobius diaperinus). Os bioensaios de virulência foram realizados com larvas e adultos do inseto, utilizaram-se os fungos na concentração de 109 conídios ml-1 e a mortalidade dos insetos foi avaliada durante dez dias. Com a técnica de RAPD foram testados 50 primers, dos quais sete apresentaram padrões de bandas consistentes. Pela análise dos perfis gerados observou-se a separação em dois grupos com nível de similaridade superior a 60%, sendo que em um deles agruparam-se somente os isolados de cascudinho, com similaridade de 72%. Verificou-se relação entre o hospedeiro original dos isolados avaliados e o perfil molecular gerado nas análises. Não foi constatada qualquer relação entre os perfis moleculares e a região geográfica de procedência ou virulência ao inseto. Os resultados demonstraram que os isolados coletados em regiões próximas podem apresentar grande variabilidade genética.The genetic variability of 13 Beauveria spp. isolates was assessed by RAPD technique and verified the relationship between the molecular profiles generated and geographical location of isolates, the original host and pathogenicity to the lesser-mealworm Alphitobius diaperinus. Pathogenicity bioassays were carried with larvae and adult insects at fungal concentration of 109 conidia / mL, during a ten-day period. With RAPD technique, seven of 50 tested primers showed consistent banding patterns. Two groups with a similarity level above 60% were observed in the analysis profiles and one of them formed only by isolates from the lesser mealworm, with 72% of similarity. Was found relationship between the origin host of the isolates and the molecular profile, generated in the analysis. There was no relationship between the molecular profiles and the geographical location or pathogenicity to the insect. The results showed that even the isolates collected in near areas may have highly variability