Cuantificación de taxol y baccatin III en callos de Taxus baccata por cromatografía líquida de alta eficiencia (HPLC)

Callos de Taxus baccata fueron inducidos a partir de segmentos de agujas y tallos en el medio de cultivo TM5 suplementado con diferentes concentraciones de picloram en combinación con ácido giberélico (GA3) y kinetina. Los segmentos de tallo produjeron callos con tasas de crecimiento más altas que las obtenidas a partir de las agujas. Los mejores medios para la inducción de callos fueron TM5 suplementados con 1 o 6 mg/L de picloram en combinación con 0,1 mg/L de GA3 y 0,1 mg/L de kinetina respectivamente. El análisis por HPLC de los extractos metanólicos de los callos determinó que el rango de concentración de Taxol estuvo entre 1,90¿8,75 mg/L y el de Baccatin III entre 4,55¿18,90 mg/L.Callus of Taxus baccata were induced from needles and stem explants in the culture media TM5 supplemented with different picloram oncentrations in combination with GA3 and kinetin. Stem segments gave the highest growth rate than those obtained from the needles. The best media for callus induction were the TM5 with 1 mg/L or 6 mg/L of picloram, plus 0.1 mg/L of GA3 and 0.1 mg/L of kinetin, respectively. The HPLC analysis of the different callus methanolic extracts showed a concentration range between 1.90¿8.75 mg/L for Taxol and between 4.55¿18.9 mg /L for Baccatin III

Inhibición de ADN por extractos vegetales de plantas de la ecorregión cafetera

Este estudio presenta los resultados de la inhibición del ADN de 52 extractos metanólicos y 51 de diclorometano evaluados con el ADN del esperma de Herring mediante la reducción de la señal de absorción al ultravioleta a través del método de HPLC descrito por Pezzuto y colaboradores. Se evaluaron 103 extractos pertenecientes a plantas de las familias: Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae y Solanaceae recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU, Colombia). Los porcentajes de inhibición más altos del ADN lo presentaron los extractos metanólicos de las siguientes especies pertenecientes a la familia Asteraceae: Schistocarpha sinforisi Cuatrec. (68.3%), Aspilla quinquernervis Blake (50.74%) y Verbesina nudipes Blake (43.20%); adicionalmente, el porcentaje de inhibición de la Solanaceae, Deprea glabra Standl fue del 41.01%. Todos los extractos de diclorometano evaluados mostraron baja inhibición del ADN.This study present the results of DNA inhibition of 52 methanol and 51 dichloromethane crude plant extracts against the with Herring sperm DNA evaluated in terms of absorbance reduction of the peak, following the HPLC method described by Pezzuto and his colleagues. The 103 plant extracts belong to the Asteraceae, Euphorbiaceae, Melastomataceae, Rubiaceae and Solanaceae families and were collected in the Regional Natural Park Ucumarí (RNPU, Colombia). The highest percentages of DNA inhibition within the six plant families studied were shown by the methanol extracts of Schistocarpha sinforosi Cuatrec. (68.30%), Aspilla quinquenervis Blake (50.74%) and Verbesina nudipes Blake (43.20%) all members of the Asteraceae family; followed by the methanol extract of Deprea glabra (Standl.) A.T. Hunziker (41.01%) a member of the Solanaceae family. The dichloromethane plant extracts studied displayed weak percentage of DNA inhibition

Cuantificacion de licorina en callos y raices cultivados in-vitro de crinum x powelli “album” (amaryllidaceae) por cromatografia liquida de alta eficiencia (hplc)

La familia Amaryllidaceae ha sido estudiada ampliamente por la importancia de sus alcaloides. En el género Crinum perteneciente a esta importante familia se destaca la licorina por su abundancia y marcada actividad citotóxica contra varias líneas celulares de tumores humanos. Para la realización de este trabajo se utilizaron bulbos de Crinum x powelli “album” los cuales fueron desinfectados y expuestos a diferentes medios de cultivo para la inducción de callos y raíces en condiciones in-vitro; el medio de cultivo donde se presentó mejor crecimiento de callos friables fue el Murashige y Skoog (MS) suplementado con 4 mg/L de Picloram y los mejores callos nodulares crecieron en los medios MS complementados con 2 y 4 mg/L de ácido 2,4-diclorofenoxiacético (2,4-D). Así mismo, se determinó que los medios suplementados con bencilaminopurina (BAP) y kinetina generaron raíces, mientras que el ácido abscísico (ABA) fue tóxico a todas las concentraciones evaluadas. La licorina fue extraída de callos y raíces normales obtenidas in-vitro y posteriormente se cuantificó mediante Cromatografía Líquida de Alta ficiencia (HPLC) por el método de estándar externo. Las raíces cultivadas en el medio de cultivo MS suplementado con 1 mg/L de kinetina produjeron la mayor cantidad de licorina (0.0116 %) en base seca

Detección in-vitro de inhibidores de la acetilcolinesterasa en extractos de cuarenta plantas de la flora colombiana mediante el método cromatográfico de ellman

En la búsqueda de plantas como fuente potencial de fitocompuestos inhibidores de la enzima acetilcolinesterasa (AChE) se normalizó el método cromatográfico de Ellman, con extractos metanólicos y de diclorometano de 40 plantas recolectadas en el Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU). La verdadera actividad inhibitoria sobre AChE fue observada en los extractos metanólicos de las plantas pertenecientes a la familia Solanaceae: Witheringia coccoloboides (Damn) Hunz, Solanum sp, Solanum deflexiflorum Bitter, Solanum leucocarpum Dunal y en el extracto de diclorometano de la última planta, los cuales presentaron halos de inhibición significativos de la AChE en el ensayo por cromatografía de capa delgada (CCD). los mismos extractos fueron positivos frente al revelador de Dragendorff, sugiriendo que estos inhibidores pueden ser de naturaleza alcaloidal. También, se detectaron por CCD aldehídos y aminas los cuales se consideraron como falsos-positivos en el ensayo de inhibición de la AChE.In the search of plants as potential source of inhibitors of the enzyme acetylcholinesterase (AChE) the Ellman chromatographic method was standardized, to determine the inhibitory activity against the AChE of methanolic and dichloromethane extracts from 40 plants collected in the Natural Regional Park Ucumarí (PRNU). The true inhibitory activity on the acetylcholinesterase was observed in the methanolic extracts of the plants belonging to the family Solanaceae: Witheringia coccoloboides (Damn) Hunz, Solanum sp, Solanum leucocarpum Dunal, Solanum deflexiflorum Bitter and the dichloromethane extract of Solanum leucocarpum Dunal which presented inhibition spots on the AChE in thin layer chromatography (TLC) assay. These extracts were also positive against the Dragendorff reagent, suggesting that the acetylcholinesterase inhibitors (IAChE) can be of alkaloidal origen. In addition, thin layer chromatography allowed to detect aldehydes and amines like false-positive in the AChE inhibition assay

Estandarización del método de captura de radicales libres para la evaluación de la actividad antioxidante de extractos vegetales

La evaluación preliminar de la actividad antioxidante en extractos vegetales se realizó mediante el método de captura de radicales libres que utiliza el radical 1,1-difenil-2-picril-hidrazilo (DPPH). Con el fin de determinar las condiciones físicas, químicas y termodinámicas del ensayo fotométrico, se utilizaron los extractos metanólicos de plantas provenientes del Parque Regional Natural Ucumarí (PRNU) y Parque Natural Municipal La Nona (PNMN); extracto estandarizado de GingSeng (obtenido con el nombre comercial de GINGSANA) además de hidroquinona y ácido tánico. Los resultados permitieron establecer las condiciones óptimas las cuales corresponden a: 517 nm (longitud de onda), 30 minutos (tiempo de reacción) y temperatura ambiente (temperatura de reacción); adicionalmente, se indica la baja estabilidad de las soluciones del radical libre usado, hecho que implica inmediata utilización de las mismas.The preliminary antioxidant activity evaluation in plant extracts was maked by the scavenging free radical assay with 1,1-diphenyl-2-picryl-hidrazyl DPPH radical compound. To determinate the photometric assay conditions were used plant extracts come from to Parque Regional Natural Ucumarí and la Nona; standardized GingSeng extract (obtained commercially as GINGSANA) also hidroquinone and tanic acid. The evaluation of those plant extracts and compounds, allowed stablishing the best conditions, correspond to: 517 nm (experimental wavelength), 30 minutes (reaction time with free radical) and enviromental temperature (reaction temperature); complementarily, it suggest that the free radical solutions are unesteady and must be used immedialtely

Evaluación de extractos vegetales para el control de la broca del café (Hypothenemus hampei, ferrari)

Este trabajo describe la evaluación por antibiosis de la actividad antibroca de 21 extractos metanólicos de las plantas recolectadas en la Reserva Natural Bremen-La Popa (Quindío). Los bioensayos se realizaron bajo condiciones controladas (23 ± 3 ºC; 75 ± 5 % H.R.), utilizando como unidad experimental (UE) un tubo eppendorf al interior del cual se transfirió un grano de café pergamino impregnado del respectivo extracto a 1000 mg/L y una hembra adulta de broca. Se hicieron 90 UE por cada extracto. Cada cuatro días, por 40 días, se evaluaron dos UE de cada extracto para determinar los estados biológicos de la broca. Se encontró que algunos extractos metanólicos mostraron actividad contra la broca del café (Hypothenemus hampei, Ferrari).This work describes the evaluation of the activity against the coffee berry borer of 21 methanolic extracts of plants collected in the Natural Reserve Bremen-La Popa (Quindío). The bioassays were made under controlled conditions (23±3 ºC; 75±5 % H.R.), using like experimental unit an eppendorf with a parchment coffee impregnated with extract at 1000 mg/L and a mature female coffee berry borer inside, 90 repetitions for each extract were done. Every four days, for 40 days, to recount of the biological states of two experimental units of each extract was made, it was found that some methanolic extracts showed activity against the coffee berry borer (Hypothenemus hampei, Ferrari)

Determinación de la actividad antifúngica de extractos vegetales sobre el hongo Mycosphaerella fijiensis Morelet

Los cultivos de plátano, banano y heliconias (Musaceae) son afectados por el hongo ascomiceto Mycosphaerella fijiensis Morelet agente causante de la enfermedad más destructiva de estos cultivos conocida como Sigatoka negra, generando perdidas económicas considerables tanto para los grandes como los pequeños cultivadores. En el control de esta enfermedad, se emplean diversos tipos de fungicidas de origen sintético que aumentan los costos de producción, además de causar deterioro significativo al medio ambiente.The plantain, banana and heliconias crops (Musaceae) are affected by the ascomicete fungus Mycosphaerella fijiensis Morelet the agent that cause one of the most destructive disease for these cultivations known like black Sigatoka, generating considerable economic lost for great and small farmers. In the control of this disease diverse types of synthetic fungicides are used, but this increases the production costs, besides to cause significant deterioration to the environment. In this work 20 methanolics and 21 dichloromethane extracts from plants belonging to the Asclepiedaceae, Asteraceae, Euphorbiaceae, Rubiaceae and Solanaceae families collected in the Natural Reserve Bremen-La Popa (Quindío, Colombia) were evaluated, through ascospore germinative tube growth tests. It was found that five methanolics (25%) and six of dichloromethane extracts (28,6%) displayed in-vitro activity against Mycosphaerella fijiensis. The phytocompounds responsible for this activity can be: alkaloids, steroids, phenols, flavonoids, saponins, tannins and triterpenoids