Conditioned medium derived from murine BM-MSCs cultured as spheroids exhibit in vitro immunomodulatory capacity

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Los residuos 32 y 36 de la hélice 2 del homeodominio de Antennapedia son necesarios para la interacción con TFIIEβ y para su especificidad funcional en D. melanogaster.

RESUMEN: Las homeoproteínas constituyen una familia de factores de transcripción con un papel predominante para determinar el plan corporal de un embrión durante el desarrollo. Estas contienen el homeodominio (HD) de unión al DNA que aumenta su especificidad al interactuar con cofactores adicionales constituyendo el interactoma. En Drosophila, la primera liga de interacción funcional con un factor general de transcripción (GTF) se encontró entre Antennapedia (Antp) y BIP2 (complejo TFIID). Las proteínas Hox también interactúan con otros componentes de la maquinaria basal de la RNA Pol II, como la subunidad Med19 del complejo Mediador (MED), TFIIEβ y el factor de pausa de la transcripción M1BP. Todas estas interacciones muestran claramente que en la regulación transcripcional dirigida por Hox están implicadas diversas proteínas, sin embargo, el mecanismo molecular preciso no es del todo claro. En esta tesis, nos centramos en la interfase proteína-proteína de Antp-TFIIEβ para determinar los contactos específicos de interacción, así como su importancia funcional in vivo. La estrategia experimental consistió en analizar la interacción de las proteínas mediante el uso de Fluorescencia por Complementación Bimolecular (BiFC) in vivo en embriones y discos imaginales de Drosophila. Los resultados mostraron muy evidentemente que TFIIEβ interactúa con Antp a través de la hélice 2 del HD, específicamente las posiciones de aminoácidos I32 y H36 de Antp. Para determinar que estas dos posiciones en la hélice 2 son cruciales para la función homeótica de Antp en la involución de la cabeza y las transformaciones torácica y antena-tarso, se realizaron ensayos de expresión ectópica. De manera interesante, la sobreexpresión de Antp y TFIIEβ en el disco imaginal de antena mostró que esta interacción es indispensable para la transformación antena-tarso. También se determinó, mediante BiFC competitivo que los GTFs: TBP, Bip2, TFIIB y TFIIAγ, y las homeoproteínas EXD y AbdB afectaron la interacción dimérica Antp-TFIIEβ sugiriendo la formación probable de complejos triméricos. Nuestros resultados muestran claramente que los aminoácidos 32 y 36 en la hélice 2 de Antp HD son necesarios para la interacción con TFIIEβ y para la especificidad funcional de Antp, lo que abre la posibilidad para analizar su función en el control transcripcional de activación y/o represión de genes blanco en el interactoma Hox durante el desarrollo de Drosophila. ABSTRACT: Homeoproteins contain the conserved homeodomain (HD) and have an important role determining embryo body plan during development. HDs increase their DNA-binding specificity by interacting with additional cofactors outlining a Hox interactome with a multiplicity of protein-protein interactions. In Drosophila, the first link of functional contact with a general transcription factor (GTF) was found between Antennapedia (Antp) and BIP2 (TFIID complex). Hox proteins also interact with other components of Pol II machinery such as the subunit Med19 from Mediator (MED) complex, TFIIEβ and transcription-pausing factor M1BP. All these interactions clearly demonstrate Hox-driven transcriptional regulation, but the precise molecular mechanism remains unclear. In this thesis, we focused on the Antp-TFIIEβ protein-protein interface to establish the specific contacts as well as its functional role in vivo. Using Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) in vivo we found that TFIIEβ interacts with Antp through the HD independently of the YPWM motif and the direct physical interaction is at helix 2, specifically aminoacidic positions I32 and H36 of Antp. We also found, through ectopic assays, that these two positions in helix 2 are crucial for Antp homeotic function in head involution, and thoracic and antenna-to tarsus transformations. Interestingly, overexpression of Antp and TFIIEβ in the antennal disc showed that this interaction is required for the antenna-to-tarsus transformation. We also determined by competitive BiFC in cell culture that the GTFs: TBP, Bip2, TFIIB y TFIIAγ, as well as homeoproteins EXD and AbdB interfere with the Antp-TFIIEβ dimeric interaction, suggesting the probable formation of trimeric complexes. In conclusion, interaction of Antp with TFIIEβ is important for the functional specificity of Antp, and amino acids 32 and 36 in Antp HD helix 2 are key for this interaction. Our results open the possibility to more broadly analyze Antp-TFIIEβ interaction on the transcriptional control for the activation and/or repression of target genes in the Hox interactome during Drosophila development

Gestión administrativa y el desempeño laboral de los colaboradores de la empresa ALPER S.A.C. Jaén, 2023

La presente investigación se enfoca en realizar un análisis entre la gestión y el desempeño en el área laboral de ALPER S.A.C. en Jaén, en 2023. La población y muestra de estudio estuvo conformada por 66 colaboradores que laboran en la empresa ALPER S.A.C., en Jaén, la técnica que se utilizó para la recolección de datos fue el cuestionario para cada una de las variables, la cual estuvo diseñada a través de la escala de Likert con 5 niveles de respuesta. El estudio se basó en un enfoque cuantitativo, de diseño no experimental, descriptivo y correlacional. El análisis de confiabilidad con un Rho de Spearman de 0.781 entre las variables gestión administrativa y desempeño laboral determino que nos niveles de confiabilidad son buenos. Se utilizo SPSS. Es crucial comprender cómo las prácticas de gestión afectan a los empleados para mejorar la eficiencia y promover un mejor desempeño laboral en la organización. Al implementar soluciones, se podrá mejorar y promover un mejor desempeño en la organización, lo que a su vez beneficiará tanto a los empleados como a la empresa en general

Interacciones moleculares proteína-proteína de ANTP con el factor TFIIE-β a través de los residuos 32 y 36 del homeodominio

Las homeoproteínas contienen el homeodominio (HD) que actúa como dominio de unión al DNA y así mismo participa en interacciones proteína-proteína que intensifican la especificidad de unión. La homeoproteína Antennapedia (Antp) es responsable de la formación de segmentos torácicos y de la cabeza. El motivo de unión proteína-proteína YPWM liga a Antp a la maquinaria basal transcripcional ya que interactúa con el factor transcripcional BIP2. Estudios realizados en el laboratorio mostraron que Antp interacciona con el factor transcripcional TFIIE-β y que la hélice II del HD está involucrada en esta interacción (Cárdenas-Chávez 2012). Como los residuos 32 y 36 de la hélice II del HD se encuentran expuestos en la hélice II y están conservados en Antp y otras homeoproteínas, el objetivo de ésta tesis consistió en determinar si éstas posiciones están involucradas en la interacción molecular proteína-proteína Antp-TFIIEβ. Para ello, se realizó mutagénesis sitio-dirigida de los residuos 32 y 36 de la hélice II de Antp y se determinó su efecto en la interacción proteína-proteína con TFIIE-β mediante Fluorescencia por Complementación Bimolecular (BiFC) y activación de la transcripción. Los resultados de BiFC mostraron una considerable disminución de la interacción molecular en células transfectadas con las mutantes AntpI32L (29%), AntpI32A (31%), AntpH36R (23%) y AntpH36A (25%) con TFIIE-β. Las mutantes dobles de los residuos 32 y 36 mostraron una drástica reducción del porcentaje de interacción con TFIIE-β correspondientes al 11% con AntpI32L-H36R y 12% con AntpI32A-H36A. La falta de interacción de Antp con TFIIE-β debido a la mutación de los residuos I32 y H36 en la hélice II recuperó la actividad transactivadora de Antp en cultivo celular ya que no mostró efecto significativo en ausencia y presencia de TFIIE-β. Estos resultados en conjunto indican que los residuos 32 y 36 de la hélice II del HD de Antp están involucrados directamente en la interacción proteína-proteína con TFIIEβ y rescataron la actividad transcripcional de Antp en los sitios blanco de unión al DNA. El análisis de interacción molecular contribuye al conocimiento de los procesos de regulación génica de homeoproteínas mediante interacciones proteína-proteína con factores generales de transcripción como TFIIE-β que requieren ser verificados in vivo en Drosophila para determinar cómo contribuyen a la especificidad funcional. - 7 - 2. ABSTRAC

Caso de estudio: análisis y diagnóstico de una empresa del sector agroindustrial peruano, propuesta de un plan estratégico

En los últimos años, se ha presentado un incremento de la demanda internacional de productos agropecuarios, gracias a sus altos valores nutricionales, ya que se presenta en la sociedad, una tendencia de consumo saludable y preocupación por el medio ambiente. Ello ha permitido que la industria de las agroexportaciones detecte oportunidades para entrar a nuevos mercados con un portafolio diversificado de productos, logrando satisfacer las necesidades de los clientes. Camposol es una empresa agroexportadora peruana reconocida a nivel mundial por sus productos de alta calidad, valor nutricional y sostenibles, apoyados por certificados internacionales de calidad, investigación y desarrollo, y economías de escala gracias a su tecnología. De acuerdo con lo analizado sus fortalezas principales son su portafolio diversificado de productos desde frutas y verduras hasta mariscos, presenta sólidas alianzas comerciales y oficinas comerciales a nivel internacional que le permite dar un mejor nivel de servicio al cliente. Por otro lado, se presentan enriquecedoras oportunidades para Camposol como mayor número de acuerdos comerciales entre Perú y otros países, incremento de la tendencia de consumo saludable, por ende, alta demanda y facilidades para exportar. Su estrategia principal se basa en la reducción de los costos, gracias a sus plantas de procesamiento de alta tecnología, que le permite incrementar la productividad y un adecuado rendimiento de sus cultivos, logrando atender a la demanda de sus clientes minoristas y distribuidores. Cabe resaltar, que Camposol tiene una trayectoria de constantes cambios en su organización, por ello es esencial una reestructuración, para que permita una mejor coordinación entre las áreas y adecuado desempeño de sus colaboradores, generando mayor productividad y flexibilidad.In recent years, there has been an increase in the international demand for agricultural products because they present high nutritional values. The society presents a trend of healthy consumption and concern for the environment. This has allowed the agro-export industry to detect opportunities to enter to new markets with diversified products, managing to meet the needs of customers. Camposol is a Peruvian agro-export company recognized worldwide for its high quality products, nutritional value and sustainable, supported by international certificates of quality, research and development, economies of scale thanks to its technology. According to what has been analyzed, its main strengths are its diversified portfolio of products from fruits and vegetables to seafood, it has solid commercial alliances and international commercial offices that allow it to provide a better level of customer service. On the other hand, there are enriching opportunities for Camposol as a greater number of trade agreements between Peru and other countries, an increase in the trend of healthy consumption, therefore, high demand and facilities for export. Its main strategy is based on cost reduction, thanks to its high-tech processing plants, which allows it to increase the productivity and adequate yield of its crops, managing to meet the demand of its retail customers and distributors. It should be noted that Camposol has a trajectory of constant changes in its organization, so a restructuring is essential, to allow better coordination between the areas and adequate performance of its employees, generating greater productivity and flexibility

Trimeric interaction of Antp-Ubx with TBP and homeoprotein EXD in the genetic control of development in D. melanogaster

Homeoproteins specify body segments along the anteroposterior axis during embryo development; they bind DNA through the homeodomain (HD). Homeoproteins bind to similar and repetitive target sequences on DNA, raising the question of how they achieve functional specificity. Homeoproteins form complexes with proteins through the HDs or other regions. Antennapedia (Antp) and Ultrabithorax (Ubx) have an important role in conferring thorax identity; also they are involved in a repression transcriptional mechanism: Ubx binds to Antp promoter repressing its expression. We analyzed if Ubx and Antp perform protein-protein interaction as a regulation mechanism and if the complex Antp-Ubx are involved in trimeric interaction with other transcription factors. Using Bimolecular Fluorescence Complementation (BIFC) we showed Antp-Ubx interaction in cell culture and in vivo in embryos and imaginal discs of Drosophila melanogaster. Also, we detected the Antp HD importance as well as the E19G residue in the interaction. We next analyzed if dimer Antp-Ubx affected Antp function in head involution on larvae, showing 80% of larvae with homeosis. In adult flies dimer Antp-Ubx caused a partial antenna to leg transformation. Additionally, using BiFC-based FRET, we showed that Antp-Ubx form trimeric complexes with TBP and EXD in cell culture and we test the trimeric complexes function in vivo in head involution on larvae, showing 80% of homeosis expressing Antp-Ubx/TBP complex and 66% of homeosis expressing Antp-Ubx/EXD complex. We conclude that Antp-Ubx is involved in trimeric interaction with TBP and EXD and both trimeric complexes are important for Antp function in vivo

Oregano essential oils: Antimicrobial activity and its application to films based on cornstarch and glycerol

This trend has led to research on the development of new biodegradable packaging materials from natural polymers also suggests that several materials may be incorporated into edible films and have influence on the mechanical, protective and sensory properties. The objective of this work was to characterize oregano essential oils and incorporated edible films made with cornstarch and glycerol. The oregano essential oil obtain the raw material used was the variety Italian Oregano or Origanum majorana using a Clevenger-type apparatus. The study included the refractive index, chemical composition, color at day 0 and day 10 and antimicrobial activity of Salmonella Enteritidis and Escherichia Coli O157:H7. The films were prepared according to the method of casting, cornstarch, glycerol (plasticizer) and water. To assess the effect of the composition on the physical properties of films, the experiment was arranged in a 22 factorial design, with one central point. It analyzed the transfer of water vapor (Method ASTM E96-92) and color. The film which showed the best characteristics was selected; subsequently oregano essential oil was added. The refractive index of the oregano essential oils obtained from the various extractions varied between 1.4875 and 1.4981. There was a significant difference (P<0.05) between the parameters a* and b* between day 0 and day 10. According to gas chromatography analysis, 52 compounds were identified in oregano essential oil, thymol (31.96%) and carvacrol (0.66%) phenols. The test antimicrobial activity, showed that Salmonella Enteritidis and Escherichia Coli O157:H7 were extremely sensitive to pure essential oil. The films obtained were transparent, presented homogeneous and compact surfaces. The values of permeability to water vapor were between 1.93 x 10-12 and 9.85 x 10-12 (g/m.s.Pa). The Analysis of Variance (ANOVA) indicated a significant differences between the different formulation (P<0.05). The incorporation of oregano essential oil at the formulations influenced the permeability presenting more or less resistant to the passage of water vapor. About the color, incorporating essential oil did not affect the appearance and did not show strong antibacterial activity at the concentration at which it was decided to work.Fil: Córsico, Francisco Armando. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Larrosa, Virginia Judit. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: López Noviello, Luciano Hernán. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Altamirano, Alfonsina. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Naef, Antonella. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Alfaro, Cristina. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Garzón, Claudia Guadalupe. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; ArgentinaFil: Lound, Liliana Haydee. Universidad Nacional de Entre Ríos. Facultad de Bromatología; Argentin

Development of a dynamic SH-SY5Y 3D culture model for biological evaluation of Alzheimer-induced pathology

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La respuesta institucional escolar, una de las claves de las dinámicas de inclusión/exclusión de familias inmigradas

Este estudio reúne los resultados de dos investigaciones en torno a las relaciones entre familias de origen latinoamericano emigradas a Barcelona (España) y las escuelas a las que asisten sus hijos. Ambas investigaciones han sido llevadas a cabo por miembros del mismo equipo de la Universidad Autónoma de Barcelona, en dos momentos: 2005-2007 y 2011-2013, en los cuales la situación económica y social del país de destino era diferente. En total se realizaron 35 entrevistas en profundidad, orientadas a obtener narraciones en torno al proceso migratorio y las expectativas y experiencias en la escuela. Se procedió a la creación de categorías emergidas de los datos, con las que se codificaron las citas en que se segmentó cada entrevista para su análisis, con la ayuda del programa ATLAS.ti. Los resultados presentan estrategias familiares orientadas a la convivencia intercultural y al favorecimiento de la convergencia de proyectos educativos. En cuanto a las dinámicas institucionales, se mostraron determinantes en la inclusión educativa la legitimación de las prácticas familiares, el tipo de gestión de la diversidad en el aula, la comunicación personalizada, la guía a las familias y la presencia de una actitud afectuosa en los profesionales.This study brings together the results of two researches on the relationships between families of Latin American origin emigrated to Barcelona (Spain) and the schools their children attend. Both investigations were carried out by members of the same team at the Autonomous University of Barcelona, on two times, 2005-2007 and 2011-2013, in which the economic and social situation in the host country was different. Were made in total 35 interviews, aimed at obtaining narratives about the migration process and the expectations and experiences related to school. We proceeded to the creation of categories emerged from data, and each interview was segmented in quotations for analysis with the help of ATLAS.ti. The results show the presence of family strategies for intercultural harmony and favoring the convergence of educational projects. Regarding institutional dynamics, were determining factors in the educational inclusion legitimizing family practices, the type of managing diversity in the classroom, personalized communication, guidance to families and the presence of a caring attitude in the teachers