Identificación y caracterización bacteriológica y molecular de cepas de Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis en productos lácteos y agua.

Tesis de doctorado para obtener el grado de Doctor en Ciencia Animal presentada en la Facultad de Ciencias Veterinarias, Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires, 2015La paratuberculosis (PTBC) o enfermedad de Johne es una enteritis crónica producida por Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) que afecta a bovinos y otras especies. MAP ha sido vinculado en humanos a una inflamación crónica del intestino, denominada enfermedad de Crohn. La leche y sus subproductos sería una de las posibles fuentes de infección y se ha sugerido que esta micobacteria podría resistir las condiciones de pasteurización. El objetivo del trabajo fue identificar MAP en alimentos lácteos crudos y/o procesados y en agua, mediante cultivo y reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la caracterización de las diferentes cepas aisladas. Se evaluaron diferentes protocolos para identificar MAP en leche cruda y comercial a través de cultivo y PCR y se determinó el límite de detección de ambas técnicas. Para la identificación de MAP en leche cruda, el protocolo de descontaminación de la muestra con menor límite de detección fue el método que utiliza ácido oxálico al 5% (p/v). Para la identificación de esta micobacteria a través de PCR, la extracción de ADN fue más eficiente utilizando el kit comercial evaluado y las perlas inmunomagnéticas. Se evaluó la supervivencia de MAP, E. coli, and S. Enteritidis durante la elaboración y almacenamiento tradicional de yogur. MAP no fue detectado durante la preparación del yogur, pero fue recuperado a los 180 min luego de la inoculación y durante el almacenamiento. Los recuentos de E. coli y S. Enteritidis aumentaron durante las primeras 24 hs, seguido de un ligero descenso hacia el final del estudio. Estos resultados demostrarían que MAP, E. coli, y S. Enteritidis resistirían las condiciones ácidas generadas durante la preparación de yogur y las bajas temperaturas del almacenamiento. También se evaluó la supervivencia de MAP en quesos blandos elaborados con leche bovina artificialmente inoculada con dos niveles diferentes de unidades formadoras de colonias (UFC) de MAP. Esta micobacteria no fue recuperada desde las muestras tomadas en las primeras etapas de la elaboración. Sin embargo, en los quesos elaborados con baja concentración de MAP, fue aislado hasta los 2 días de almacenamiento y en los inoculados con alta concertación de MAP, hasta los 15 días. Esto podría sugerir una adaptación de la bacteria al medio y posterior desarrollo. Se evaluaron 384 muestras de leche comercializadas en cuenca lechera Mar y Sierras de diferentes marcas comerciales, porcentaje de grasa y tratamientos térmicos. A cada una de las muestras se le realizó cultivo para identificación de MAP y otras micobacterias, recuento de bacterias aerobias mesófilas totales (BAMT) y el test de fosfatasa alcalina (FA) utilizando un kit v comercial. La totalidad de las muestras resultaron negativas al cultivo de micobacterias. Sin embargo, el 1,56% (6/384) de las muestras de leche comercial fueron positivas a PCR para identificación de MAP y el 40,1% (154/384) de las muestras resultaron positivas a la coloración Ziehl Neelsen realizada sobre el barrido de los cultivos negativos. Todas las muestras fueron negativas al test de FA y un 4,95% (19/384) de las muestras, el recuento de BAMT fue superior al límite que establece el Código Alimentario Argentino. Deberían ser evaluadas las medidas necesarias para evitar la transmisión de MAP y otras micobacterias dentro de establecimiento lecheros y enfatizarse las medidas de control en cuanto a higiene, cadena de frío, etc., tanto en industrias lácteas como en los puntos de venta para asegurar la calidad de los productos que llegan al consumidor.Paratuberculosis (PTBC) or Johne´s disease is Chronic Enteritis disease caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) which affects cattle and other animal species. MAP has been linked to Chronic Inflammatory Bowel disease in humans, named Crohn's disease. Milk and byproducts are possible sources of infection to humans as it was suggested that this mycobacterium could resist pasteurization conditions. The aim of this work was to isolate MAP in water and raw or processed dairy products by bacteriological culture and polymerase chain reaction (PCR) followed by molecular characterization of different strains isolated. In order to define the minimum concentration limit for detection of MAP in raw and commercial milk different culture and PCR protocols were evaluated. For the identification of MAP in raw milk, the decontamination protocol with lower detection limit was achieved by using oxalic acid 5% (w/v). DNA extraction methods were evaluated using the commercial kit and the immunomagnetic beads for PCR. During the traditional preparation and storage of yogurt, the survival of MAP, Escherichia coli, and Salmonella Enteritidis was evaluated. MAP was not detected during the preparation of yogurt, but was recovered 180 min after inoculation and during storage. The live bacterial counts of E. coli and S. Enteritidis increased during the first 24 hours of refrigerated storage, followed by a slight decrease at the end of the study. These results have demonstrated that MAP, E. coli and S. Enteritidis resist the acidic conditions generated during the preparation of yogurt and low temperature storage. MAP survival in cream cheese made from bovine milk artificially inoculated with two different concentrations of MAP was also evaluated. Viable MAP was not recovered from early stages of processing. However, during refrigerated storage, the cheese inoculated with a low concentration of MAP, the bacterium was isolated until the second day of storage while the cheese inoculated with a high concentration of MAP, and it was isolated until the 15th day of storage. These results suggest an initial adaptation of the bacteria to the environment with followed by a growth phase. Furthermore, 384 samples of commercial milk from Mar y Sierras area, representing different commercial brands, fat percentage and thermal treatments were evaluated. These samples were examined for MAP and other mycobacterium identification, count of total aerobic mesophilic bacteria (TAMB) count and alkaline phosphatase (AP) test using a commercial kit. All samples resulted negative to mycobacterium culture. Despite that, 1.56% (6/384) of the samples were positive to IS900 PCR and 40.1% (154/384) of the samples were positive for the vii Ziehl-Neelsen. All the samples were negatives to AP test and 4.95% (19/384) had TAMB counts higher than the limit established by the Argentine Food Code. In order to ensure the quality of dairy products to consumers, the necessary measures should be assessed to prevent the transmission of MAP and other mycobacteria in dairy establishment. Furthermore, an emphasize should be give to general measures of control such as hygiene, cold chain, etc. in dairy industries and retail stores.EEA BalcarceFil: Cirone, Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentin

Detection of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis and other mycobacteria in retail milk and dairy products in Argentina

Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) is the etiologic agent of paratuberculosis or Johne’s disease (JD), a chronic enteritis disease that affects cattle and other animal species and has been linked to Crohn’s disease, a chronic inflammatory bowel disease in humans. MAP could resist pasteurization conditions and has been isolated from retail milk in several countries. The aims were to identify MAP and other mycobacteria in retail milk and dairy products in Argentina and to assess the product quality through Mesophilic Total Aerobic Bacteria (TAB) count. Three hundred and eighty-four samples of retail milk were tested for 24 months. All samples were negative for mycobacteria growth. However, 1.56% of the samples were positive for MAP identification by IS900-PCR. The TAB count was higher than the limits established by the Alimentary Argentinian Code (AAC) in 4.95% of the samples. Mycobacteria other than MAP were not detected either by culture or PCR. The MAP positive PCR from retail milk samples would indicate that they could come from dairy farms with JD and suggests that pasteurized milk or dairy products are not significant sources of human exposure to MAP in Argentina. Some milk samples exceeded the limits established by the AAC for TAB counts, indicating that commercialized milk could be processed and stored incorrectly.Mycobacterium avium subesp. paratuberculosis (MAP) es el agente etiológico de la paratuberculosis o la enfermedad de Johne (JD), una enteritis crónica que afecta al ganado vacuno y otras especies animales que se la vincula con la enfermedad de Crohn, una afección intestinal inflamatoria crónica en humanos. MAP podría resistir las condiciones de pasteurización y se lo aisló de la leche al por menor en varios países. Los objetivos fueron identificar MAP y otras micobacterias en leche y productos lácteos al por menor en Argentina y evaluar la calidad de estos a través del conteo de bacterias aerobias totales mesófilas (TAB). Se analizaron 384 muestras de leche de venta minorista durante 24 meses. Todas las muestras resultaron negativas en cuanto al crecimiento de micobacterias. Sin embargo, el 1.56% de las muestras dieron positivas en la identificación de MAP por IS900-PCR. El recuento de TAB superó los límites establecidos por el Código Alimentario Argentino (CAA) en el 4.95% de las muestras. No se detectaron micobacterias distintas de MAP ni por cultivo ni por PCR. La PCR positiva en MAP resultante de muestras de leche al por menor indicaría que podrían provenir de granjas lecheras con JD y sugiere que la leche pasteurizada o los productos lácteos no son fuentes significativas de exposición humana a MAP en Argentina. Algunas muestras de leche excedieron los límites establecidos por la AAC para los recuentos de TAB, lo cual indica que la leche comercializada podría procesarse y almacenarse incorrectamente.EEA BalcarceFil: Cirone, Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Cirone, Karina Mariela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Morsella, Claudia Graciela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Mendez, Laura Luján. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Paolicchi, Fernando. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina

Evaluación por ELISA en leche para la detección de anticuerpos frente a Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis

Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP) es el agente causal de la paratuberculosis (PTBC). Afecta a rumiantes domésticos y especies silvestres causando enteritis granulomatosa. La prueba más utilizada para su diagnóstico es el ELISA (Enzime-linked ImmunoSorbent Assay) debido a su bajo costo y rápido tiempo de procesamiento, aunque la sensibilidad depende del estadio clínico del animal.Trabajo publicado en Cagliada, Maria del Pilar Lilia y Galosi, Cecilia Mónica (comps.). I Congreso de Microbiología Veterinaria. Libro de resúmenes. La Plata: Facultad de Ciencias Veterinarias, 2021.Facultad de Ciencias Veterinaria

Calidad bacteriológica de aguas de pozo del sudeste bonaerense en distintas estaciones climáticas del año

El objetivo del presente trabajo fue determinar la calidad bacteriológica del agua subterránea para consumo humano de acuerdo a los límites establecidos por el CAA. Al mismo tiempo, se investigó la presencia de Micobacterias en distintas estaciones climáticas del año.EEA BalcarceFil: Perez Escalante, Joaquín. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias – Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Unidad Integrada Balcarce; ArgentinaFil: Andreoli, Yolanda Elina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce - Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias. Unidad Integrada Balcarce; ArgentinaFil: Puricelli, Marino Marcelo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce - Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias. Unidad Integrada Balcarce; ArgentinaFil: Castellari, Claudia Carla. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias – Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Unidad Integrada Balcarce; ArgentinaFil: Cirone, Karina Mariela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce - Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias. Unidad Integrada Balcarce; ArgentinaFil: Valle, Facundo Marcos. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias – Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Unidad Integrada Balcarce; Argentin

Reactivation and foetal infection in pregnant heifers infected with neospora caninum live tachyzoites at prepubertal age

Neospora caninum is recognised for causing cattle abortion, provoking severe economic losses in the livestock industry worldwide. The aim of the present study was to evaluate the reactivation and foetal infection in pregnant heifers inoculated with live N. caninum tachyzoites before puberty. A total of 15 30-month-old pregnant heifers were allocated into four groups: animals inoculated with live tachyzoites of NC-Argentina LP1 isolate before puberty and challenged with live tachyzoites of NC-1 strain at 210 days of gestation (DG) (Group A); animals mock inoculated before puberty and challenged with NC-1 strain at 210 DG (Group B), animals inoculated before puberty but not subsequently challenged (Group C); and noninfected and nonchallenged animals (Group D). The results of this study showed that 100% of animals infected before puberty (Groups A and C) suffered reactivation of the infection at the seventh month of gestation. In addition, in three and two calves from Groups A and C, respectively, congenital infection was confirmed. Interestingly, we provide evidence that the use of live N. caninum tachyzoites in young animals as a strategy to induce protection is neither safe nor effective.EEA BalcarceFil: Hecker, Yanina Paola. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Burucúa, Mercedes. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Fiorani, Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Fiorani, Franco. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Maldonado Rivera, Jaime. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Maldonado Rivera, Jaime. Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Agropecuarias; Ecuador.Fil: Cirone, Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Cirone, Karina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Dorsch, Matías. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Dorsch, Matías. Instituto Nacional de Investigación Agropecuaria (INIA). Estación Experimental La Estanzuela; UruguayFil: Cheuquepán Valenzuela, Felipe. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Campero, Lucía. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Cantón, Germán José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Marín, Maia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Ortega Mora, Luis. Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Veterinarias; EspañaFil: Moore, Dadin Prando. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina

Use and comparison of serologic assays to detect anti-Neospora caninum antibodies in farmed red deer (Cervus elaphus)

Neospora caninum is a protozoan parasite that cause abortion in different ruminant species, including red deer ( Cervus elaphus). There are no validated assays to be performed with sera from red deer. At the present work, we evaluated the agreement among indirect fluorescent antibody test (IFAT), competitive inhibition ELISA based on a recombinant protein (ciELISA tSAG1) and immunoblot (IB) to detect anti- N. caninum antibodies in a red deer herd that presented reproductive losses due to N. caninum. In addition, we analyzed the relationship between the serologic results and 15 hinds were analyzed by IFAT, ciELISA tSAG1 and IB to detect anti- N. caninum antibodies. In the three assays, the cut-off established for cattle was used. Besides, sera were analyzed by IFAT to detect anti- Toxoplasma gondii antibodies. The hinds were monitored by ultrasound scanning during the gestational period to detect abortions. Gwet’s agreement coefficient (AC1) and the percentage of agreement were used to estimate the agreement between pairs of assays. Chi-square test and odds ratio (OR) were used for the statistical association between abortion and seropositivity to N. caninum or to T. gondii. The N. caninum seropositivity rate was 53.9% (62/115), 57.4% (66/115) and 55.7% (64/115) for IFAT, ciELISA tSAG1 and IB, respectively. The AC1 and percentage of agreement were 0.760% and 87.8% for the pair ciELISA tSAG1 /IFAT, 0.793% and 89.6% for the pair IFAT/IB, and 0.966% and 98.3% for the pair IB/ciELISA tSAG1. The T. gondii seropositivity rate was 53.0% (61/115). Seropositive hinds to N. caninum were more likely to abort than seronegative hinds by the 3 assays. The OR for the association between N. caninum seropositivity and abortion was 72.70, 22.96 and 83.24 when ciELISA tSAG1, IFAT or IB assays were used, respectively. between T. gondii seropositivity and abortion. The three serologic assays were useful to detect N. caninum infected hinds. The validation of the assays for use in red deer would be an improvement for diagnosis of neosporosis in this species.EEA RafaelaFil: Novoa, María Belen. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Novoa, María Belen. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; Argentina. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IdICaL) (INTA-CONICET); ArgentinaFil: Soler, Juan Pablo. Servicio Veterinario CERVUS; Argentina.Fil: Cirone, Karina Mariela. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Cirone, Karina Mariela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Hecker, Yanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Valentini, Beatriz. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Valentini, Beatriz. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IdICaL) (INTA-CONICET); ArgentinaFil: Primo, María Evangelina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Primo, María Evangelina. Instituto de Investigación de la Cadena Láctea (IdICaL) (INTA-CONICET); ArgentinaFil: Moore, D.P. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Moore, D.P. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentin

Phylogenetic and Multiple-Locus Variable number tandem repeat analysis of Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis isolates from Argentina

Paratuberculosis is a worldwide chronic enteric disease of ruminants, caused by Mycobacterium avium subsp. paratuberculosis (MAP). While MAP has been widely investigated all around the world, little is known about the different strains that circulate in each country. This study describes the genetic diversity of MAP isolates from different bovine and deer herds from Argentina, analyzed by Multiple-Locus Variable number tandem repeat Analysis (MLVA), as well as the phylogenetic relatedness between geographically distant isolates through Whole Genome Sequencing (WGS) and core-genome analysis. A total of 90 MAP isolates were analyzed. The results showed seven different MLVA genotypes, with almost 75% of them belonging to pattern INMV 1, described in all the herds studied. WGS results suggested the presence of a common INMV 1 strain circulating throughout the country. Our results allow confirming the coexistence of different strains in time and space and the mixed infections identified in some animals. These observations suggest the absence of animal monitoring prior to introduction to the herds and the need for a control program in the country. This study represents the first to report WGS of MAP strains in Argentina.Fil: Vasini Rosell, Brenda. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Farace, Pablo Daniel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Amadio, Ariel Fernando. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - Santa Fe. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea. - Instituto Nacional de Tecnologia Agropecuaria. Centro Regional Santa Fe. Estacion Experimental Agropecuaria Rafaela. Instituto de Investigacion de la Cadena Lactea.; ArgentinaFil: Cirone, Karina Mariela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Mendez, Laura. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Morsella, Claudia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Fresia, Pablo. Instituto Pasteur de Montevideo; Uruguay. Instituto Nacional de Investigacion Agropecuaria (inia);Fil: Iraola, Gregorio. Instituto Pasteur de Montevideo; Uruguay. Wellcome Trust Sanger Institute; Reino Unido. Universidad Mayor.; ChileFil: Gioffré, Andrea Karina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación En Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Instituto de Agrobiotecnología y Biología Molecular; ArgentinaFil: Paolicchi, Fernando Alberto. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentin

Frequency of Neospora caninum-specific antibodies in bulk milk from dairy farms from Mar y Sierras Dairy Basin, Argentina

The aim of this study was to describe the prevalence of Neospora caninum based on the detection of specific antibodies in bulk tank milk (BTM) from dairy cattle farms in the Mar y Sierras Basin by using an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). A total of 98 BTM samples from 49 dairy farms were collected during autumn and spring of 2019. Additionally, 147 paired individual milk and serum samples were collected from two dairy farms to assess the prevalence within-herd by ELISA and indirect fluorescent antibody test (IFAT, serum samples). Additionally, 12 individual serum samples were also assessed to test the agreement between IFAT and ELISA (total serum samples 159). Noteworthy, 100 and 91.84% of 49 dairy farms were positive in the BTM in autumn and spring, respectively. For the within-herd individual samples, a good agreement between serum and milk results was obtained for ELISA and IFAT (0.86–0.90). This is the first study in Argentina in which milk samples were tested to determine the N. caninum infection status at herd and within-herd levels in dairy farms, providing a base for further research.Fil: Cirone, Karina Mariela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Fiorani, Franco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: García, C. E.. Universidad Nacional de Mar del Plata; ArgentinaFil: Armendano, Joaquín Ignacio. Universidad Nacional del Centro de la Provincia de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Laboratorio de Análisis Bioquímicos y Minerales; ArgentinaFil: Hecker, Yanina Paola. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Miqueo, Evangelina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; ArgentinaFil: Canton, Germán José. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; ArgentinaFil: Moore, Dadin Prando. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Mar del Plata. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible - Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro Regional Buenos Aires Sur. Estación Experimental Agropecuaria Balcarce. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentin

Bovine neosporosis in dairy cattle from the southern highlands of Ecuador

The aim of this study was to describe bovine neosporosis in dairy cattle from the Sierra region, Ecuador. A case-control study was performed on 841 dairy cattle from 5 dairy herds. The overall seroprevalence was 23.4% having significant association between abortion and seropositivity (p < .05). Additionally, 46 fetuses were recovered from a local slaughterhouse to evaluate the frequency of vertical transmission. Seventeen and 3 fetuses were positive by PCR and had compatible histopathological lesions, respectively. N. caninum infection must be considered as a relevant cause of reproductive losses in Ecuador.EEA BalcarceFil: Maldonado Rivera, J.E. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Agropecuarias; EcuadorFil: Vallecillo, A.J. Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Agropecuarias; EcuadorFil: Pérez, C.L. Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Químicas; Ecuador. Biomecrovet, Laboratorio de Diagnóstico; EcuadorFil: Cirone, Karina Mariela. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Dorsch, MA. Universidad Nacional de Mar dl Plata. Facultad de Ciencias Agraria; Argentina.Fil: Morrel, Eleonora Lidia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Scioli, V. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Hecker, Yanina P. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Fiorani Franco. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Cantón, Germán José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; ArgentinaFil: Moore, Dadín Prando. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina

Neosporosis in Argentina: Past, present and future perspectives

Neosporosis, caused by the protozoan Neospora caninum, was first diagnosed in Argentinean cattle in the 90's. With a national bovine stock of approximately 53 million head, the cattle industry is socially and economically relevant. Severe economic losses have been estimated at US$ 33 and 12 million annually in dairy and beef cattle, respectively. Approximately 9% of bovine abortions in the Buenos Aires province are caused by N. caninum. In 2001, the first isolation of N. caninum oocysts from feces of a naturally infected dog was performed in Argentina and named as NC-6 Argentina. Further strains were isolated from cattle (NC-Argentina LP1, NC-Argentina LP2) and axis deer (Axis axis, NC-Axis). Epidemiological studies revealed a high distribution of Neospora-infections not only in dairy but also in beef cattle, with seroprevalence rates of 16.6–88.8% and 0–73%, respectively. Several experimental infection studies in cattle have been carried out, as well as attempts to develop effective vaccines to avoid Neospora-abortions and transmission. However, no vaccine has proven successful for its use in daily practice. Reduction of seroprevalence, vertical transmission and Neospora-related abortions have been achieved in dairy farms by the use of selective breeding strategies and embryo transfer. Neospora-infections have been also detected in goats, sheep, deer, water buffaloes (Bubalus bubalis) and gray foxes (Lycalopex griseus). Moreover, Neospora-related reproductive losses were reported in small ruminants and deer species and could be more frequent than previously thought. Even though diagnostic methods have been improved during the last decades, control of neosporosis is still not optimal. The development of new strategies including new antiprotozoal drugs and vaccines is highly needed. This paper reviews the information from the previous 28 years of research of N. caninum in Argentina, including seroprevalence and epidemiological studies, available diagnostic techniques, experimental reproduction, immunization strategies, isolations and control measures in domestic and non-domestic animals from Argentina.EEA BalcarceFil: Campero, Lucia María. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Basso, W. University of Bern. Vetsuisse Faculty. Department of Infectious Diseases and Pathobiology. Institute of Parasitology; Suiza.Fil: Moré, G. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina.Fil: Moré, G. University of Bern. Vetsuisse Faculty. Department of Infectious Diseases and Pathobiology. Institute of Parasitology; Suiza.Fil: Fiorani, Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Fiorani, Franco. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Hecker, Yanina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Hecker, Yanina.Universidad Complutense de Madrid. Facultad de Ciencias Veterinarias. Departamento de Sanidad Animal; España.Fil: Echaide, Ignacio Eduardo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Rafaela; ArgentinaFil: Cantón, Germán José. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Cirone, Karina M. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Cirone, Karina M. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina.Fil: Campero, Carlos Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina.Fil: Venturini, M.C. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentina.Fil: Moore, Prando Dadín. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Balcarce; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto de Innovación para la Producción Agropecuaria y el Desarrollo Sostenible; Argentina.Fil: Moore, Prando Dadín. Universidad Nacional de Mar del Plata. Facultad de Ciencias Agrarias; Argentina