Herpesvirus felino 1 (FHV-1): aislamiento de cepas virales en pacientes felinos con signología ocular y respiratoria

El Herpesvirus felino 1 (FHV-1), perteneciente a la familia Herpesviridae, subfamilia Alphaherpesvirinae, género Varicellovirus produce la rinotraqueitis felina, enfermedad de distribución mundial que afecta a los felinos domésticos y a otros miembros de la familia Felidae. El FHV-1 penetra por las mucosas oronasal y conjuntival y se encuentra asociado a diferentes cuadros clínicos, principalmente respiratorios y oculares. La infección primaria ocurre en felinos desde edades tempranas como el mes de vida y el periodo de incubacion es de de 5-7 días. Luego de la infección, el virus migra a través de las terminaciones nerviosas hasta los ganglios regionales, principalmente el trigémino y permanece allí en estado de latencia. La reactivación viral puede ocurrir con o sin signos clínicos. La infección aguda se caracteriza inicialmente por depresión, hipertermia, anorexia, estornudos y descargas oculonasales serosas que pueden llegar a ser mucopurulentas. La conjuntivitis es la forma de presentación ocular más frecuente. La queratitis herpética es frecuente en felinos adultos y se caracteriza por lisis de las células del epitelio corneal con forma de dendritas llamada “úlcera dendrítica”. La presentación de menor frecuencia es la queratitis estromal que se caracteriza por la opacidad del estroma como consecuencia de un proceso inmunoinflamatorio. La infección podría implicar también al tracto uveal y ha sido relacionada con signos neurológicos. El FHV-1 se asocia también a cuadros de rinosinusitis crónica, aunque su participación en la queratoconjuntivitis seca, queratitis eosinofílica y secuestro corneal, no es tan clara. El diagnóstico se realiza por el hallazgo de signos clínicos y las técnicas de detección directa utilizadas para confirmarlo son PCR y el aislamiento viral (AV). El objetivo de este trabajo fue aislar cepas virales obtenidas a partir de casos clínicos oculares y respiratorios ingresados al Hospital de Clínica de la Facultad de Ciencias Veterinarias de la UNLP.Facultad de Ciencias Veterinaria

Virus herpes equino tipo 1 (EHV-1): patrones de restricción de ADN, perfiles proteicos y estudio de patogenicidad en ratones

Se estudiaron siete cepas de herpesvirus equino 1 (EHV-1) aisladas en Argentina desde 1979 hasta 1996 y una cepa de referencia japonesa, analizándose los patrones de restricción del ADN, perfiles proteicos en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) y los biotipos, para determinar posibles diferencias entre las mismas y su correlación con la patogenicidad en el ratón. El análisis genómico con enzimas de restricción demostró que todas las cepas pertenecen al tipo 1P de EHV-1. Sólo el primer aislamiento realizado en el país (cepa SP) mostró diferencias en su patrón de restricción del ADN. Esta cepa y la cepa aislada en el año 1985 (cepa LP) presentaron además diferencias en sus perfiles proteicos. El estudio de patogenicidad en ratones indicó la presencia de tres biotipos, no encontrándose correlación con las variaciones halladas en los electroferotipos y con la sintomatología clínica en el equino.Seven strains of equine herpesvirus 1 (EHV-1) isolated in Argentina from 1979 to 1996 and reference Japanese strain, were compared by restriction fragments analysis (RFA), polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and inoculation of baby mice. The RFA revealed that all EHV-1 strains belonged to genome type 1P. Only the first isolate (SP strain) showed differences. This strain and the LP strain isolated in 1985 presented a small differences for SDS-PAGE analysis. Baby mice inoculation revealed that three biotypes could be distinguished on the basis of pathogenicity. However, no strict correlation with pathogenicity in the natural host was seen

Isolation of equine herpesvirus-2 from the lung of an aborted fetus

This study describes the isolation of equine herpesvirus-2 (EHV-2) from the lung of an aborted equine fetus in Argentina. The isolated virus was confirmed as EHV-2 by indirect immunofluorescence using a rabbit anti-EHV-2 polyclonal antiserum and by virus-neutralization test using an equine polyclonal antibody against EHV-2. Restriction endonuclease DNA fingerprinting with BamHI also confirmed the identity of the virus as EHV-2. Furthermore, viral nucleic acid was detected by polymerase chain reaction from the original lung sample and from the DNA obtained from cells infected with the virus isolate. This work constitutes the first reported isolation of EHV-2 from an aborted equine fetus. The presence of EHV-2 in the lung of the aborted fetus would indicate that this virus is capable of crossing the placental barrier. However, no cause-effect relationship was established between the EHV-2 isolate and the abortion.Facultad de Ciencias Veterinaria

Isolation of equine herpesvirus-2 from the lung of an aborted fetus

This study describes the isolation of equine herpesvirus-2 (EHV-2) from the lung of an aborted equine fetus in Argentina. The isolated virus was confirmed as EHV-2 by indirect immunofluorescence using a rabbit anti-EHV-2 polyclonal antiserum and by virus-neutralization test using an equine polyclonal antibody against EHV-2. Restriction endonuclease DNA fingerprinting with BamHI also confirmed the identity of the virus as EHV-2. Furthermore, viral nucleic acid was detected by polymerase chain reaction from the original lung sample and from the DNA obtained from cells infected with the virus isolate. This work constitutes the first reported isolation of EHV-2 from an aborted equine fetus. The presence of EHV-2 in the lung of the aborted fetus would indicate that this virus is capable of crossing the placental barrier. However, no cause-effect relationship was established between the EHV-2 isolate and the abortion.Facultad de Ciencias Veterinaria

Detection of equine herpesvirus 1 genome 1B in Argentina

To determine the genomic variation of equine herpesviruses (EHVs) isolated in Argentina between 1979 and the first half of 2004, DNA sequences from all 69 strains isolated were analysed. Sixty strains were recovered from aborted fetuses, one from leucocyte-rich plasma from a horse with respiratory signs and eight from cases of neonatal disease. The DNA was extracted from rabbit kidney epithelial (RK13) cells infected with each strain and digested with three restriction endonucleases (BamHI, Bg/II and KpnI). Two strains could be differentiated using BamHI restriction and were assigned to the EHV-1 1B prototype group. Only one of these two strains was typed EHV-1 1B with Bg/II. DNA digestion with KpnI was ineffective. The results obtained in this study demonstrate that the EHV-1 1B genome has been present in Argentina since at least 1996. The finding of two strains with this electropherotype suggests that there is genomic heterogeneity among Argentinian isolates.Facultad de Ciencias Veterinaria

Prevalencia de anticuerpos contra el virus de la encefalomielitis murina de Theiler en colonias de ratones de Argentina

En el presente estudio se analizó la prevalencia de anticuerpos contra el virus de la encefalomielitis de Theiler en colonias de ratones de Argentina. En el primer ensayo se analizaron 352 sueros por ELISA indirecto (iELISA) e inmunofluorescencia indirecta (IFI). La prevalencia establecida fue del 73 y 67 %, respectivamente, siendo los valores de sensibilidad, especificidad y kappa de 100%, 76,2% y 0,8 respectivamente. En un segundo análisis realizado unicamente por iELISA, en 558 sueros provenientes de 53 colonias, se obtuvo una seroprevalencia de 72.6%, entre valores de 0% hasta 100% .La prevalencia más elevada se observó en bioterios sin barreras sanitarias. Las infecciones del virus Theiler en colonias de ratones puede interferir con los resultados experimentales; esto se relaciona con una infraestructura deficiente, falta de entrenamiento del personal y un manejo inadecuado de la colonia.This study analyzes the prevalence to antibodies of Theiler’s murine encephalomyelitis virus (TMEV) in mice colonies of Argentina. A first study performed by indirect enzymelinked immunosorbent assay (iELISA) and indirect fluorescent antibody test (IFI) on 352 sera determined a prevalence of antibodies of 73% and 67% respectively with sensitivity of 100% and 76,2% respectively and 0,8 of kappa value. In a second assay performed only by iELISA on 558 sera from 53 colonies a seroprevalence of 72,6% varying between 0% to 100% was obtained. The higher values were found in those animal facilities without barrier systems. Theiler virus infections in mouse colonies could interfere with experimental results; this may be due to a lack of barriers, and poor staff training and colony management in the facility

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1): restriction fragment patterns, polyacrylamide gel electrophoresis profiles and pathogenicity in baby mice

Se estudiaron siete cepas de herpesvirus equino 1 (EHV-1) aisladas en Argentina desde 1979 hasta 1996 y una cepa de referencia japonesa, analizándose los patrones de restricción del ADN, perfiles proteicos en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) y los biotipos, para determinar posibles diferencias entre las mismas y su correlación con la patogenicidad en el ratón. El análisis genómico con enzimas de restricción demostró que todas las cepas pertenecen al tipo 1P de EHV-1. Sólo el primer aislamiento realizado en el país (cepa SP) mostró diferencias en su patrón de restricción del ADN. Esta cepa y la cepa aislada en el año 1985 (cepa LP) presentaron además diferencias en sus perfiles proteicos. El estudio de patogenicidad en ratones indicó la presencia de tres biotipos, no encontrándose correlación con las variaciones halladas en los electroferotipos y con la sintomatología clínica en el equino.Seven strains of equine herpesvirus 1 (EHV-1) isolated in Argentina from 1979 to 1996 and reference Japanese strain, were compared by restriction fragments analysis (RFA), polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and inoculation of baby mice. The RFA revealed that all EHV-1 strains belonged to genome type 1P. Only the first isolate (SP strain) showed differences. This strain and the LP strain isolated in 1985 presented a small differences for SDS-PAGE analysis. Baby mice inoculation revealed that three biotypes could be distinguished on the basis of pathogenicity. However, no strict correlation with pathogenicity in the natural host was seen.Facultad de Ciencias Veterinaria

Equine herpesvirus type 1 (EHV-1): restriction fragment patterns, polyacrylamide gel electrophoresis profiles and pathogenicity in baby mice

Se estudiaron siete cepas de herpesvirus equino 1 (EHV-1) aisladas en Argentina desde 1979 hasta 1996 y una cepa de referencia japonesa, analizándose los patrones de restricción del ADN, perfiles proteicos en geles de poliacrilamida (SDS-PAGE) y los biotipos, para determinar posibles diferencias entre las mismas y su correlación con la patogenicidad en el ratón. El análisis genómico con enzimas de restricción demostró que todas las cepas pertenecen al tipo 1P de EHV-1. Sólo el primer aislamiento realizado en el país (cepa SP) mostró diferencias en su patrón de restricción del ADN. Esta cepa y la cepa aislada en el año 1985 (cepa LP) presentaron además diferencias en sus perfiles proteicos. El estudio de patogenicidad en ratones indicó la presencia de tres biotipos, no encontrándose correlación con las variaciones halladas en los electroferotipos y con la sintomatología clínica en el equino.Seven strains of equine herpesvirus 1 (EHV-1) isolated in Argentina from 1979 to 1996 and reference Japanese strain, were compared by restriction fragments analysis (RFA), polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) and inoculation of baby mice. The RFA revealed that all EHV-1 strains belonged to genome type 1P. Only the first isolate (SP strain) showed differences. This strain and the LP strain isolated in 1985 presented a small differences for SDS-PAGE analysis. Baby mice inoculation revealed that three biotypes could be distinguished on the basis of pathogenicity. However, no strict correlation with pathogenicity in the natural host was seen.Facultad de Ciencias Veterinaria

Isolation of equine herpesvirus-2 from the lung of an aborted fetus

This study describes the isolation of equine herpesvirus-2 (EHV-2) from the lung of an aborted equine fetus in Argentina. The isolated virus was confirmed as EHV-2 by indirect immunofluorescence using a rabbit anti-EHV-2 polyclonal antiserum and by virus-neutralization test using an equine polyclonal antibody against EHV-2. Restriction endonuclease DNA fingerprinting with BamHI also confirmed the identity of the virus as EHV-2. Furthermore, viral nucleic acid was detected by polymerase chain reaction from the original lung sample and from the DNA obtained from cells infected with the virus isolate. This work constitutes the first reported isolation of EHV-2 from an aborted equine fetus. The presence of EHV-2 in the lung of the aborted fetus would indicate that this virus is capable of crossing the placental barrier. However, no cause-effect relationship was established between the EHV-2 isolate and the abortion.Facultad de Ciencias Veterinaria

Detection of equine herpesvirus 1 genome 1B in Argentina

To determine the genomic variation of equine herpesviruses (EHVs) isolated in Argentina between 1979 and the first half of 2004, DNA sequences from all 69 strains isolated were analysed. Sixty strains were recovered from aborted fetuses, one from leucocyte-rich plasma from a horse with respiratory signs and eight from cases of neonatal disease. The DNA was extracted from rabbit kidney epithelial (RK13) cells infected with each strain and digested with three restriction endonucleases (BamHI, Bg/II and KpnI). Two strains could be differentiated using BamHI restriction and were assigned to the EHV-1 1B prototype group. Only one of these two strains was typed EHV-1 1B with Bg/II. DNA digestion with KpnI was ineffective. The results obtained in this study demonstrate that the EHV-1 1B genome has been present in Argentina since at least 1996. The finding of two strains with this electropherotype suggests that there is genomic heterogeneity among Argentinian isolates.Facultad de Ciencias Veterinaria