Nuclear Outsourcing of RNA Interference Components to Human Mitochondria

MicroRNAs (miRNAs) are small non-coding RNAs that associate with Argonaute proteins to regulate gene expression at the post-transcriptional level in the cytoplasm. However, recent studies have reported that some miRNAs localize to and function in other cellular compartments. Mitochondria harbour their own genetic system that may be a potential site for miRNA mediated post-transcriptional regulation. We aimed at investigating whether nuclear-encoded miRNAs can localize to and function in human mitochondria. To enable identification of mitochondrial-enriched miRNAs, we profiled the mitochondrial and cytosolic RNA fractions from the same HeLa cells by miRNA microarray analysis. Mitochondria were purified using a combination of cell fractionation and immunoisolation, and assessed for the lack of protein and RNA contaminants. We found 57 miRNAs differentially expressed in HeLa mitochondria and cytosol. Of these 57, a signature of 13 nuclear-encoded miRNAs was reproducibly enriched in mitochondrial RNA and validated by RT-PCR for hsa-miR-494, hsa-miR-1275 and hsa-miR-1974. The significance of their mitochondrial localization was investigated by characterizing their genomic context, cross-species conservation and instrinsic features such as their size and thermodynamic parameters. Interestingly, the specificities of mitochondrial versus cytosolic miRNAs were underlined by significantly different structural and thermodynamic parameters. Computational targeting analysis of most mitochondrial miRNAs revealed not only nuclear but also mitochondrial-encoded targets. The functional relevance of miRNAs in mitochondria was supported by the finding of Argonaute 2 localization to mitochondria revealed by immunoblotting and confocal microscopy, and further validated by the co-immunoprecipitation of the mitochondrial transcript COX3. This study provides the first comprehensive view of the localization of RNA interference components to the mitochondria. Our data outline the molecular bases for a novel layer of crosstalk between nucleus and mitochondria through a specific subset of human miRNAs that we termed ‘mitomiRs’

Pitfalls in Monitoring Mitochondrial Temperature Using Charged Thermosensitive Fluorophores

Mitochondria are the source of internal heat which influences all cellular processes. Hence, monitoring mitochondrial temperature provides a unique insight into cell physiology. Using a thermosensitive fluorescent probe MitoThermo Yellow (MTY), we have shown recently that mitochondria within human cells are maintained at close to 50 °C when active, increasing their temperature locally by about 10 °C. Initially reported in the HEK293 cell line, we confirmed this finding in the HeLa cell line. Delving deeper, using MTY and MTX (MitoThermo X), a modified version of MTY, we unraveled some caveats related to the nature of these charged fluorophores. While enabling the assessment of mitochondrial temperature in HEK and HeLa cell lines, the reactivity of MTY to membrane potential variations in human primary skin fibroblasts precluded local temperature monitoring in these cells. Chemical modification of MTY into MTX did not result in a temperature probe unresponsive to membrane potential variations that could be universally used in any cell type to determine mitochondrial temperature. Thus, the cell-type dependence of MTY in measuring mitochondrial temperature, which is likely due to the variable binding of this dye to specific internal mitochondrial components, should imply cautiousness while using these nanothermometers for mitochondrial temperature analysis

Coût de revient du suivi de la warfarine en clinique d’anticoagulothérapie

Résumé Introduction : Le cout global de la surveillance de la thérapie à la warfarine est inconnu. Il est donc difficile d’estimer les retombees pharmacoeconomiques des nouveaux anticoagulants ne necessitant aucun monitorage. Objectifs : Determiner le cout direct de l’obtention, de l’analyse et de l’interpretation du rapport normalise international selon le lieu de prelevement de l’echantillon dans la perspective du systeme de sante quebecois. Méthodologie : La population etudiee est constituee de tous les dossiers suivis par notre programme d’anticoagulotherapie entre le 1er avril 2008 et le 31 mars 2009. Le cout du rapport normalise international est tire du Répertoire québécois et système de mesure des procédures de biologie médicale. On a utilise les salaires moyens ou medians, y compris les charges de l’employeur. Le cout moyen par visite a domicile a ete determine par un echantillonnage de 50 professionnels des centres de sante et de services sociaux participants afin de determiner la duree d’une visite et le nombre moyen de kilomètres parcourus par visite. Résultats : En moyenne, la surveillance de la warfarine coute 7,62 $par rapport numerise international effectue, y compris l’analyse. Cinquante pour cent (50$ pour l’execution et l’analyse d’un rapport numerise international. La surveillance de l’anticoagulation a court terme coute 89,92 $pour l’episode entier, alors que le cout annuel pour un traitement a long terme est de 137,16$ par patient. Lorsque les prelevements doivent etre effectues a domicile, le cout annuel s’eleve a 694,08 $par patient. Conclusions : Cette recherche permet de connaître le coût global de la surveillance de la warfarine et d’estimer les retombees economiques des nouveaux anticoagulants oraux.Abstract Introduction: The global cost of monitoring warfarin therapy is unknown. It is thus difficult to estimate the pharmacoeconomic consequences of new anticoagulants that do not require any monitoring. Objectives: Within the perspective of the Quebec health system, to determine the direct costs related to acquisition, analysis, and interpretation of the international normalized ratio (INR) according to where the sample was drawn. Methods: The study population consisted of all patients followed in our anticoagulation program from April 1, 2008–March 31, 2009. The cost associated with the international normalized ratio was obtained from the Repertoire quebecois et systeme de mesure des procedures de biologie medicale. We used average or median salaries, including employer fees. The average cost per home visit was determined using a sampling of 50 professionals from participating Health and Social Service Centres (CSSS), this in order to determine the length of a visit and the average number of kilometers covered per visit. Results: On average, warfarin monitoring costs$7.62 per measured INR, including analysis. Fifty percent (50%) of patients were followed at home. The cost then increases to $30.94 for the execution and analysis of an INR. Monitoring anticoagulation on a short-term basis costs$89.92 for the entire episode, whereas the annual cost for long-term treatment is $137.16 per patient. When sampling is done at home, the annual cost increases to$694.08 per patient. Conclusion: This study established the global cost of monitoring warfarin and estimated the economic impact of the new oral anticoagulants

L'importance du mode de mise en place des materiaux pedologiques dans l'organisation des sols : origine et caracteristiques de l'espace poral

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L’autoformation à l’harmonisation travail-vie personnelle : une action concertée des personnes en emploi, des employeurs et des syndicats

Cet article documente les avantages et les limites d’une démarche d’autoformation à l’harmonisation travail-vie personnelle (HTVP) destinée aux personnes en emploi, aux employeurs et aux syndicats. Les résultats suggèrent une diminution du conflit et une augmentation de l’enrichissement travail-vie personnelle chez les personnes en emploi, lorsque les employeurs et les représentants syndicaux ont été sensibilisés et outillés en matière d’HTVP. L’autoformation constitue un outil de gestion des ressources humaines pour améliorer la qualité de vie au travail, pour se démarquer et pour développer une culture organisationnelle favorable à l’HTVP. Les limites de l’autoformation sont le manque de temps et de ressources pour s’engager dans une démarche autogérée.This article documents the benefits and limitations of a self-training program on work-life balance intended for workers, employers, and labor union representatives. Results show less conflict and an improvement in work-life enrichment among workers. Results also show employers and labor union representatives became more aware of work-life balance issues within their organisation. Self-training programs on work-life balance constitute a useful human resources management tool to improve quality of life at work and gain a competitive edge. The limits of the self-training program experienced by workers, employers, and labor union representatives include lack of time and resources to a dequately complete the training

Conception et usage d’un environnement virtuel éducatif. Quelles spécifications didactiques pour faire apprendre la complexité de la gestion durable de la forêt ?

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Essai de modelisation de l'organisation spatiale des sols d'une region. Application aux plateaux calcaires bourguignons

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La construction d'un bien commun à travers une démarche de sélection participative : le cas du blé dur adapté à l'AB

National audienceIn 2001 farmers appealed to INRA researchers to initiate a breeding program for developing durum wheat varieties adapted to organic farming. Implemented in two contrasting durum wheat production areas in France, it has mobilized farmers, processors and researchers of biological and social sciences. The collective challenge is ambitious: to reconcile the diversity of objectives, constraints and skills of each participant mobilized while focusing on debate on the assumptions of varietal improvement project. The originality of the approach rests on two innovations: (i) technical because it integrates decentralized selection devices under actual production conditions varieties, (ii) social because it merges skills and knowledge (expert, empirical, etc.). To explain it, the article describes the process and construction effects of a common good, namely the development of an ideotype and its evolution towards a "realtype" adapted to organic practices and the chain quality requirements. The first part of this paper presents the characteristics of occupations of all stakeholders, and aims to understand the specific and generic expectations and to identify shared objects in the confrontation of steps perspectives. Faced with divergent expectations and the complexity of the standards and parameters involved, the analysis shows the difficulty of building compromises. The second part problematizes the process of circulation, movement and evolution of content knowledge, constructed and negotiated the service of a common path "to several branches" that allows the emergence of new fields of interesting agronomic research questions for those involved in this participatory selection. Finally, the lessons from this participatory approach should provide answers to important issues of diversification of French agriculture by giving farmers the opportunity to actively participate in building a sustainable development of the sectors and territories. The varieties resulting from this participatory way allowed to structure the durum wheat organic chain and are today largely disseminated inside.En 2001 des agriculteurs ont fait appel à des chercheurs de l’INRA pour engager un programme de sélection variétale du blé dur adapté à l’agriculture biologique. Mis en œuvre dans deux territoires contrastés de l’aire de production du blé dur en France, il a mobilisé des agriculteurs, des transformateurs et des chercheurs des sciences biologiques et sociales. L’enjeu collectif est ambitieux : il s’agit de concilier la diversité des objectifs, des contraintes et des compétences de chacun des acteurs en mettant en débat les hypothèses au cœur du projet d'amélioration variétale. L’originalité de la démarche suivie repose sur une double innovation : d’abord technique puisqu’elle intègre des dispositifs de sélection décentralisés dans les conditions réelles de production des variétés, puis sociale car elle mêle des compétences et des savoirs divers (experts, empiriques, …). Pour l’expliquer, l’article décrit les processus et les effets de construction d’un bien commun, à savoir l’élaboration d’un « Idéotype » puis son évolution vers un « Realtype » variétal, fruit d’un compromis pour son adaptation aux pratiques agrobiologiques et aux exigences de qualité de la filière. Une première partie présente les caractéristiques des métiers exercés par tous les acteurs, dans l’objectif de comprendre les attentes spécifiques et génériques et de repérer les objets de partage dans les phases de confrontation de points de vue. Face aux divergences des attentes, l’analyse montre toute la difficulté de construire des compromis. La deuxième partie problématise les processus de circulation et d’évolution des contenus de savoirs, construits et négociés au service d’un cheminement commun qui permet de faire émerger de nouvelles questions de recherche agronomique d’intérêt pour les acteurs de la sélection participative. Finalement, les enseignements de cette approche participative doivent permettre de répondre aux enjeux importants de diversification de l’agriculture française, en redonnant aux agriculteurs la possibilité de participer activement à la construction d’un développement durable des filières et des territoires. Les variétés issues de cette démarche participative ont permis une structuration de la filière blé dur en agriculture biologique et sont aujourd’hui largement diffusées en son sein

Etude de la motivation des élèves pour la réalisation de tâches d'apprentissage utilisant l'environnement virtuel éducatif Silva Numerica

This document presents the modalities of realization and the results of two experiments of the use of the EVE Silva Numerica with students of 1st technological STAV. It shows the impact of different scenarios of use of this EVE with regard to a scenario using a video resource on the regulation of student motivation during a teaching/learning session concerning concepts relating to forest development (environment and competition). It is based on the model developed by the self-determination theory - SDT (Deci and Ryan, 1971, 1975, 1985, 1991) and reworked by Vallerand et al. (1989) in the context of the development of the educational motivation scale (EMS), a tool on which we based our data collection.Our results show that, beyond a prior interest in the theme and the objects taught (the forest), it is not so much the type of resource used that primarily intervenes in the regulation of the students' motivation as their feeling of learning in the use of this resource in relation to the goals they are pursuing (academic or professional), associated with a cognitive interest in the tasks proposed. Beyond the novelty effect of the situation on the motivation of the pupils, which we can suppose may diminish with repeated use of the EVE, they lead to the recommendation of a major attention to the pedagogical and didactic scenario of the use of the resource and to the learning potential of this resource with regard to the potential learning area of the pupils concerning the targeted learning objects (in this case the development of the forest and its management). They also lead to the observation that the characteristics of the EVE (including graphics) primarily affect motivation via their impact on the pupils' sense of learning. The "medium effect" and the pleasure associated with the use of a virtual environment (sometimes described as more playful by the actors) only have a significant effect on motivation for some pupils.Ce document présente les modalités de réalisation et les résultats de deux expérimentations de l’usage de l’EVE Silva Numerica avec des élèves de 1ère technologique STAV. Il donne à voir l’incidence de différents scénarii d’usage de cette EVE au regard d’un scénario utilisant une ressource vidéo sur la régulation de la motivation des élèves lors d’une séance d’enseignement/apprentissage concernant des concepts relatifs au développement de la forêt (milieu et concurrence). Il s’appuie sur le modèle développé par la théorie de l’autodétermination – TAD (Deci et Ryan, 1971, 1975, 1985,1991) et retravaillé par Vallerand et al. (1989) dans le cadre de l’élaboration de l’échelle de motivation à l’éducation (EME), outil sur lequel nous nous sommes appuyés pour recueillir nos données.Nos résultats montrent que, au-delà d’un intérêt préalable pour le thème et les objets enseignés (la forêt), ce n’est pas tant le type de ressource utilisée qui intervient en premier lieu sur la régulation de la motivation des élèves que leur sentiment d’apprentissage dans l’usage de cette ressource en lien avec les buts qu’ils poursuivent (scolaires ou professionnels), associé à un intérêt cognitif des tâches proposées. Au-delà d’un effet nouveauté de la situation sur la motivation des élèves, dont nous pouvons supposer qu’il risque de diminuer au fil de l’usage répété de l’EVE, ils conduisent à préconiser une attention majeure au scénario pédagogique et didactique d’usage de la ressource et au potentiel d’apprentissage de cette ressource eu égard à la zone potentielle d’apprentissage des élèves concernant les objets d’apprentissage visés (ici le développement de la forêt et sa gestion). Ils conduisent aussi à constater que les caractéristiques de l’EVE (y compris graphiques) interviennent d’abord sur la motivation via leur incidence sur le sentiment d’apprentissage des élèves. L’« effet médium » et le plaisir associé à l’usage d’un environnement virtuel (parfois qualifié de plus ludique par les acteurs) n’intervient de manière importante sur la motivation que pour quelques élèves