Reperfúziós károsodások csökkentésének lehetőségei endogén adaptációs mechanizmusok indukciójával : Kísérletes és klinikai vizsgálatok = Limiting the ischaemic-reperfusion injury with the induction of endogenous adaptation mechanisms : Experimental and clinical study.

A pályázatban végzett munka a kardiovaszkuláris sebészeti beavatkozások során kialakuló iszkémiás-reperfúziós károsodások csökkentésének, kivédésének lehetőségeit vizsgálja. Munkánk során in vitro miokardium sejttenyészetben vizsgáltuk az iszkémiás pre- és posztkondicionálás szignálmechanizmusaiban az NFkB, az urocortin és a hemoxigenáz-1 szerepét. In vivo állatkísérletes vizsgálataink során aortakirekesztést követően alkalmazott posztkondicionálás citoprotektív hatását figyeltük meg, mely jelentősen csökkentette a kialakuló oxidatív stressz mértékét, és mérsékelte a lokális és szisztémás gyulladásos válaszreakciókat, valamint szignifikánsan gátolta a proapoptotikus szignálokat. Klinikai vizsgálataink során leírtuk az akut végtag iszkémiát követő reperfúziós folyamatok sejtszintű változásait, igazoltuk a posztkondicionálással kiváltható sejt és szöveti védelem hatékonyságát. Vizsgálataink hozzájárultak a reperfúziós folyamatok mélyebb megismeréséhez, valamint sikerült igazolnunk a pre-és posztkondicionálás hatékonyságát kísérletes és klinikai körülmények között. | In this project we have examined the possible methods for reducing the ischaemic-reperfusion injuries evoked by the cardiovascular surgical interventions. The roles of NFkB, urocortin and haemoxigenase-1 were determined in the signaling pathways of ischaemic pe-and postconditioning in in vitro myocardial cell culture models. In our in vivo animal models we have demonstrated the citoprotective effect of postconditioning after aortic clamping, which could effectively reduce the evoked oxidative stress and systemic and local inflammatory responses. Furthermore postconditioning significantly inhibited the proapoptotic pathways after aortic ischaemia-reperfusion. The pathophysiologic and cellular changes of reperfusion injury in acute limb ischaemia were monitored in our clinical stud. We have confirmed the clinical effectiveness of postconditioning induced citoprotection. Our results help to understand the clinical complications of reperfusion injury and we could evidence the protective potential of pre and postconditioning

A user-friendly, high-throughput tool for the precise fluorescent quantification of deoxyribonucleoside triphosphates from biological samples

Cells maintain a fine-tuned, dynamic concentration balance in the pool of deoxyribonucleoside 5′-triphosphates (dNTPs). This balance is essential for physiological processes including cell cycle control or antiviral defense. Its perturbation results in increased mutation frequencies, replication arrest and may promote cancer development. An easily accessible and relatively high-throughput method would greatly accelerate the exploration of the diversified consequences of dNTP imbalances. The dNTP incorporation based, fluorescent TaqMan-like assay published by Wilson et al. has the aforementioned advantages over mass spectrometry, radioactive or chromatography based dNTP quantification methods. Nevertheless, the assay failed to produce reliable data in several biological samples. Therefore, we applied enzyme kinetics analysis on the fluorescent dNTP incorporation curves and found that the Taq polymerase exhibits a dNTP independent exonuclease activity that decouples signal generation from dNTP incorporation. Furthermore, we found that both polymerization and exonuclease activities are unpredictably inhibited by the sample matrix. To resolve these issues, we established a kinetics based data analysis method which identifies the signal generated by dNTP incorporation. We automated the analysis process in the nucleoTIDY software which enables even the inexperienced user to calculate the final and accurate dNTP amounts in a 96-well-plate setup within minutes

Meddőséggel kapcsolatos vélekedések orvostanhallgatók körében

Bevezetés: A termékenységi problémákkal küzdő páciensek kezelésében részt vevő egészségügyi szakemberek meddőséggel kapcsolatos tudása és kliensekkel szemben tanúsított érzékenysége alapvetően fontos meghatározója a kezelés minőségének. Célkitűzés: A vizsgálat célja orvostanhallgatók, azaz a jövőbeli meddőségi kezelésben potenciálisan részt vevő, véleményvezérlő szakemberek meddőséggel kapcsolatos tudásának felmérése, és a meddőség érzelmi, illetve testi és kognitív következményeire vonatkozó elképzelések vizsgálata. Módszer: A kérdőíves vizsgálatban 112 (76 nő, 36 férfi) orvostanhallgató vett részt önkéntes, kompenzációmentes közreműködéssel. Eredmények: Az orvostanhallgatók több területen hiányos tudással rendelkeznek a témában. A meddőséggel összefüggő testi és érzelmi tünetek jelenlétét meddő párok férfi tagjait illetően alulbecsülik a hallgatók, míg nők esetében fölülértékelnek érzelmi tüneteket, például a bánatosságot. Következtetések: Az orvosképzés során a hallgatóknak több témaspecifikus ismeretre és gyakorlati tapasztalatszerzési lehetőségre lenne igényük, szükségük. A hallgatók olyan sztereotípiákkal rendelkeznek, amelyek potenciálisan megnehezítik a páciensek torzításmentes percepcióját. E torzítás kockázata különösen hátrányosan érintheti a meddő férfi pácienseket. Orv. Hetil., 2015, 156(3), 105–112

ABC transzporterek vizsgálata emberi őssejtekben és a sejt-differenciálódás során = Expression and function of ABC transporters in human stem cells and during cell differentiation

A projektben az ABC (ATP-Binding Cassette) transzporterek kifejeződését és funkcióját vizsgáltuk emberi őssejtekben, valamint követtük a normális és daganatos sejtdifferenciálódás során bekövetkező molekuláris szintű változásokat. Elsősorban a gyógyszerek hatásában, anyagcseréjében, az ellenük kifejeződő rezisztenciában szereplő transzportereket, valamint a sejtmembrán lipid-anyagcseréjében szerepet játszó ABC transzportereket vizsgáltuk. A projekt fontos része volt az emberi embrionális őssejtek speciális tenyésztési és differenciálási módszereinek adaptálása, továbbfejlesztése. Az ABC transzporterek vizsgálata során igazoltuk, hogy a humán embrionális őssejtekben az ABCG2 a legjelentősebb xenobiotikum transzporter, a korai sejtdifferenciálódás során az ABCG2 kifejeződése először emelkedik, majd jelentősen csökken. Megállapítottuk, hogy az ABCG2 mRNS használata különbözik a tumorsejtekben, a differenciálódott szöveti sejtekben, illetve a nem-differenciálódott őssejtekben. Új, transzpozon-alapú módszereket dolgoztunk ki az őssejtek stabil genetikai módosítására, fluoreszcens riporter fehérjék bevitelére. Az ABCG2 és az ABCA1 fehérjék címkézett változatainak kifejezése lehetővé tette a transzporterek sejten belüli lokalizációjának követését. Részletesen elemeztük az ABCG2 multidrog transzporter szerkezet-funkció összefüggéseit, szubsztrátokkal jelentkező kölcsönhatásait, alkalmazásokat fejlesztettünk ki a gyógyszerhatások vizsgálatára. | In this project we have studied the expression and function of ABC (ATP-Binding Cassette) transporters in human embryonic and tumor stem cells and followed the changes during normal and tumor cell differentiation at a molecular level. We have focused on the investigation of ABC transporters involved in drug metabolism, cancer multidrug resistance and cellular lipid metabolism. An important part of the project was to establish and further develop proper laboratory conditions and methodologies for culturing and differentiating human pluripotent stem cells. When studying human ABC transporters in human embryonic stem cells we demonstrated the major role of the ABCG2 protein. We found that the expression of this transporter first increases, then greatly decreases during early stem cell differentiation. The use of mRNA was found to be different in the tumor cells, differentiated cells, and pluripotent stem cells, respectively. We have developed new, transposon-based methods for the stable genetic modification of pluripotent stem cells and for the expression of fluorescent reporter proteins. By using tagged versions of the ABCG2 and ABCA1 proteins we could follow the intracellular localization of these transporters. We have studied in detail the structure-function relationships and substrate interactions of the ABCG2 transporter and developed new assays for studying drug interactions

Pegylated liposomal formulation of doxorubicin overcomes drug resistance in a genetically engineered mouse model of breast cancer.

Success of cancer treatment is often hampered by the emergence of multidrug resistance (MDR) mediated by P-glycoprotein (ABCB1/Pgp). Doxorubicin (DOX) is recognized by Pgp and therefore it can induce therapy resistance in breast cancer patients. In this study our aim was to evaluate the susceptibility of the pegylated liposomal formulation of doxorubicin (PLD/Doxil(R)/Caelyx(R)) to MDR. We show that cells selected to be resistant to DOX are cross-resistant to PLD and PLD is also ineffective in an allograft model of doxorubicin-resistant mouse B-cell leukemia. In contrast, PLD was far more efficient than DOX as reflected by a significant increase of both relapse-free and overall survival of Brca1-/-;p53-/- mammary tumor bearing mice. Increased survival could be explained by the delayed onset of drug resistance. Consistent with the higher Pgp levels needed to confer resistance, PLD administration was able to overcome doxorubicin insensitivity of the mouse mammary tumors. Our results indicate that the favorable pharmacokinetics achieved with PLD can effectively overcome Pgp-mediated resistance, suggesting that PLD therapy could be a promising strategy for the treatment of therapy-resistant breast cancer patients

Szemelvények a Semmelweis Egyetem, az Országos Onkológiai Intézet és az Országos Korányi Tbc és Pulmonológiai Intézet együttműködésén alapuló tüdőrák-kutatási programból

Lung cancer places a significant socio-economic burden on the Hungarian population. This overview summarizes the findings of collaborative translational lung cancer research efforts of three Hungarian flagship academic institutions, the Semmelweis University, the National Institute of Oncology and the National Koranyi Institute of TB and Pulmonology. With regards to the molecular factors regulating tumor angiogenesis, we identified the prognostic significance of apelin and erythropoietin receptor (EPOR) expression in non-small cell lung cancer (NSCLC). Furthermore, the impact of KRAS mutation subtypes and ERCC1 (excision repair cross-complementation group 1) expression on the response to platinum-based chemotherapy have been studied. We also described the epidemiology and predictive power of rare EGFR (epidermal growth factor receptor) mutations in a large Hungarian patient cohort. Lastly, the expression of molecular factors associated with NSCLC progression was studied specifically in brain metastatic matched cases series. These preclinical and clinical studies provide clinically relevant information that hopefully will contribute to the improvement of lung cancer patient care

Thermal convection with non-Newtonian plates

The coupling between plate motions and mantle convection is investigated using a fully dynamic numerical model consisting of a thin non-Newtonian layer which is dynamically coupled to a thick Newtonian viscous layer. The non-Newtonian layer has a simple power-law rheology characterized by power-law index n and stiffness constant Μ p. A systematic investigation of steady, single cell configurations demonstrates that under certain conditions ( n > 7 being one of them) the non-Newtonian layer behaves like a mobile tectonic plate. Time-dependent calculations with multicellular configurations show the ability of the plate-mantle coupling model to adjust the number of plates and their sizes in accordance with the flow in the Newtonian layer. These calculations show that the geometry and number of plates do not necessarily resemble the planform of convection below.Peer Reviewedhttp://deepblue.lib.umich.edu/bitstream/2027.42/72550/1/j.1365-246X.1992.tb02109.x.pd