EVALUATION OF CYTOTOXICITY AND EXPRESSION OF CASPASE-3 AND P53 IN HCT-116 CELLS OF LINEAGE TREATED WITH DIFFERENT EXTRACTS OF Euphorbia tirucalli L.

Euphorbia tirucalli, a plant commonly known as aveloz, has been employed in anticancer therapy with little scientific proof. The goal of this study was to evaluate the cytotoxic potential and expression of caspase-3 and p53 in colorectal cancer cell lines treated with aveloz extracts. Hexanic and hydroalcoholic extracts were prepared in different concentrations. After 96 h, cell viability and apoptosis rate (p53 and caspase-3 expression) were verified. The hexanic extract revealed higher cytotoxicity on HCT-116 cell line at concentrations above 125 µg/mL, and hydroalcoholic extract above 500 µg/mL. LC50 for the hexanic extract was 60.2873 µg/mL, and for hydroalcoholic extract 100.6066 µg/mL. There were significant differences among the averages of cells marked with p53 at the concentrations 62.5, 250 and 500 µg/mL, as well as among the averages of caspase-3-positive cells at the concentrations 62.5, 125 and 500 µg/mL, with higher cytotoxic effect being observed for the hydroalcoholic extract. The obtained data provides evidence for the cytotoxic potential in vitro of the hydroalcoholic and hexanic extracts of aveloz on HCT-116 cell line. There was an increase in the expression of caspase-3 and p53 in the tumor line cells exposed to extracts of E. tirucalli

A importância da genotipagem da região codificante do DNA mitocondrial para a utilização forense: o caso do SNP 3010

As análises forenses do DNA mitocondrial humano (DNAmt)  são normalmente realizadas através da análise das regiões hipervariáveis por técnica de sequenciamento, mas a informação da região codificante pode ser útil para distinguir perfis idênticos, cooperando para uma identificação incontestável. No presente estudo, o SNP 3010 da região codificante do DNAmt foi avaliado usando PCR em tempo real em uma população miscigenada brasileira com perfis idênticos. Foram analisadas amostras de sangue de 160 indivíduos residentes na região metropolitana de São Paulo, Brasil. O SNP 3010 foi suficientemente discriminatório para distinguir os indivíduos que compartilhavam o mesmo haplótipo em dois dos treze casos. Além disso, o SNP 3010 é altamente discriminatório para indivíduos classificados como o haplogrupo H europeu e compartilhando o mesmo perfil. Foi possível concluir que, como os SNPs de regiões codificadoras do DNAmt não estão presentes nos bancos de dados atuais, futuros esforços são necessários para a criação de bancos de dados com dados populacionais de genomas mitocondriais inteiros, para que os mesmos possam ser utilizados em análises forenses

EVALUATION OF CYTOTOXICITY AND EXPRESSION OF CASPASE-3 AND P53 IN HCT-116 CELLS OF LINEAGE TREATED WITH DIFFERENT EXTRACTS OF Euphorbia tirucalli L.

Euphorbia tirucalli, a plant commonly known as aveloz, has been employed in anticancer therapy with little scientific proof. The goal of this study was to evaluate the cytotoxic potential and expression of caspase-3 and p53 in colorectal cancer cell lines treated with aveloz extracts. Hexanic and hydroalcoholic extracts were prepared in different concentrations. After 96 h, cell viability and apoptosis rate (p53 and caspase-3 expression) were verified. The hexanic extract revealed higher cytotoxicity on HCT-116 cell line at concentrations above 125 µg/mL, and hydroalcoholic extract above 500 µg/mL. LC50 for the hexanic extract was 60.2873 µg/mL, and for hydroalcoholic extract 100.6066 µg/mL. There were significant differences among the averages of cells marked with p53 at the concentrations 62.5, 250 and 500 µg/mL, as well as among the averages of caspase-3-positive cells at the concentrations 62.5, 125 and 500 µg/mL, with higher cytotoxic effect being observed for the hydroalcoholic extract. The obtained data provides evidence for the cytotoxic potential in vitro of the hydroalcoholic and hexanic extracts of aveloz on HCT-116 cell line. There was an increase in the expression of caspase-3 and p53 in the tumor line cells exposed to extracts of E. tirucalli

A importância da genotipagem da região codificante do DNA mitocondrial para a utilização forense: o caso do SNP 3010

As análises forenses do DNA mitocondrial humano (DNAmt)  são normalmente realizadas através da análise das regiões hipervariáveis por técnica de sequenciamento, mas a informação da região codificante pode ser útil para distinguir perfis idênticos, cooperando para uma identificação incontestável. No presente estudo, o SNP 3010 da região codificante do DNAmt foi avaliado usando PCR em tempo real em uma população miscigenada brasileira com perfis idênticos. Foram analisadas amostras de sangue de 160 indivíduos residentes na região metropolitana de São Paulo, Brasil. O SNP 3010 foi suficientemente discriminatório para distinguir os indivíduos que compartilhavam o mesmo haplótipo em dois dos treze casos. Além disso, o SNP 3010 é altamente discriminatório para indivíduos classificados como o haplogrupo H europeu e compartilhando o mesmo perfil. Foi possível concluir que, como os SNPs de regiões codificadoras do DNAmt não estão presentes nos bancos de dados atuais, futuros esforços são necessários para a criação de bancos de dados com dados populacionais de genomas mitocondriais inteiros, para que os mesmos possam ser utilizados em análises forenses

Using DNA barcodes to identify forensically important species of Diptera in Espírito Santo State, Brazil

ABSTRACT Accurate insect specimen identification is usually a crucial first step in a forensic entomological analysis. It is traditionally done by morphological classification using identification keys. However, due to sensibility limitations in the identification of animal species based only on their morphology, new methods have been developed, including species identification by DNA barcodes. The objective of this study was to identify forensically important species of Diptera in Espirito Santo state using DNA barcodes. For this, adult flies were collected in Espirito Santo, Southeast Region of Brazil. After DNA extraction, COI gene was amplified and sequenced. All sequences were matched to BOLD platform and alternatively to GenBank MegaBLAST. As result, 281 adult flies were collected and identified morphologically. From these, 36% of samples were classified as Calliphoridae, 34% of Muscidae and 30% of Sarcophagidae. Approximately 10% of all collected samples were analyzes by DNA. It was possible to identify only 35.7% of tested samples, probably due to lack of samples deposited in databases. Therefore, more efforts should be made to deposit a greater variety of dipterous in databases to allow the use of this technique in forensic routine, especially in BOLD

Tetrasomy 8 in a patient with chronic lymphocytic leukemia

We report a case of a 47-year-old man diagnosed with chronic lymphocytic leukemia (CLL) with two extra copies of chromosome 8. Classical cytogenetic analysis by the immunostimulatory combination of DSP30 and interleukin 2 showed tetrasomy of chromosome 8 in 60% of the metaphase cells (48,XY,+8,+8[12]/46,XY[8]). Spectral karyotype analysis confirmed the abnormality previously seen by G banding. Additionally, interphase fluorescence in situ hybridization using an LSI CEP 8 probe performed on peripheral blood cells without any stimulant agent showed tetrasomy of chromosome 8 in 54% of analyzed cells (108 of 200). To our knowledge, tetrasomy 8 as the sole chromosomal abnormality in CLL has not been previously described. The prognostic significance of tetrasomy 8 in CLL remains to be elucidated. However, the patient has been followed up in the outpatient hospital since 2004 without any therapeutic intervention and has so far remained stable. (C) 2010 Elsevier Inc. All rights reserved.FAPESP (Fundacao de Amparo a Pesquisa do Estado de Sao Paulo)[07/52462-7]National Institute of Science and Technology in Stem Cell and Cell Therapy, Ribeirao Preto, Brazi

AVALIAÇÃO DA ATIVIDADE LEISHMANICIDA IN VITRO DE EUGENIA UNIFLORA

As leishmanioses são um conjunto de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania, transmitidas por meio de hábitos hematófagos de fêmeas de dípteros infectados, pertencentes à subfamília Phlebotominae. É uma doença negligenciada e de grande relevância devido sua incidência e letalidade quando não tratada. O tratamento das leishmanioses é um obstáculo, devido à alta toxidade e efeitos adversos causados pelos fármacos disponíveis. Neste sentido, as plantas medicinais têm ganhado grande destaque na busca por fármacos que possam apresentar menos efeitos colaterais. Diante disso, este trabalho teve por objetivo avaliar atividade leishmanicida do extrato hidroalcoólico das folhas de Eugenia uniflora na espécie Leishmania amazonensis. Os valores de IC50 foram de 1,99 µg/mL, 1,64 µg/mL e 1,39 µg/mL nos tempos de 24, 48 e 72 horas, respectivamente. Os resultados demonstram que o extrato testado possui significativa atividade leishmanicida