Transfert des gènes p53 et pten par vectorisation non virale : effet pro-apoptotique et potentialisation de la réponse cellulaire au cétuximab

P53 and PTEN abnormalities are early events in carcinogenesis and are associated with poor prognosis and resistance to cancer therapies including targeted therapy. Cetuxirnab (Erbitnx®) is a IgG chimeric monoclonal antibody, directed against the extracellular dornain of EGFR. !ts activity has been shown to be dependent on the functionality of PI3KJAKT and MAPK signaling pathways as weil as the apoptosis induction capacity of the cells . The present study was designed to evaluate the influence of pten and p53 gene transfer using polyethylenimine with or without photochemical internalisation on cell apoptosis induction and cell growth in cells bearing p53 and pten mutations and on the response to cetuximab. The results presented show that pten and p53 gene transfer using polyethertimine and PCI restored P53 and PTEN expression, cell growth inhibition and apoptosis induction. Associated with cetuximab treatrnent, pten and p53 reintroduction, restored the functionality of AKTIPI3K and MAPK signaling pathways and increased cell growth inhibition and apoptosis induction by cetuximab. The results achieved in the present study show that pten and p53 mutations could be predictive of cell response to cetuximab through the functional impact of these mutations on cell signaling. The data presented put forward the interest of the analysis of EGFR phosphoproteins downstream signalling to evaluate the functionality of the signaling pathways implicated in the cell response to cetuximab and could be used to propose the original targeted therapies.L'inactivation des gènes p53 et pten présente un facteur de mauvais pronostic et de résistance à différents traitements anticancéreux incluant les thérapies ciblées. Le cétuximab (Erbitux®) est un anticorps monoclonal chimérique dirigé contre le domaine extracellulaire du récepteur à l'EGF. Son mécanisme d'action est fortement lié à la fonctionnalité des voies de signalisation de PI3KJAKT et des MAPK. Nous avons évalué l'influence de la réintroduction des gènes p53 et pten par vectorisation non viral à base de polyéthylènimine, couplée ou non à l'internalisation photochimique sur l'induction de l'apoptose et l'inhibition de la croissance cellulaire dans des cellules P53 et pten mutés d'une part, et sur l'impact de ce transfert de gène sur la fonctionnalité des voies de signalisation impliquées dans la réponse cellulaire au cétuximab. Nous avons montré que la transfection des gènes suppresseurs de tumeurs p53 et pten par polyétylènimine couplé à la PCI rétablit l'expression de P53 et de PTEN et permet de restaurer l'inhibition de croissance et l'induction de l'apoptose. Associée au traitement par cétuximab La restauration de PTEN et P53 réprime l'activation constitutive des voies de signalisation PI3K et MAPK et potentialise l'inhibition de la croissance et l'induction de l'apoptose induites par le cétuximab. Ces résultats montrent que l'inactivation de p53 et pten pourrait être prédictive de la résistance au cétuximab à travers l'activation constitutive de la voie de signalisation PI3/AKT et confirme que la détennination de la fonctionnalité des voies de signalisation des rtiveaux d'expression des phosphoprotéines de signalisation permettrait de prédire la réponse au cétuximab et de proposer des options thérapeutiques originales

P53 and pten transfer gene using non viral vector : pro-apoptotic effect and potentiation of cell response to cetuximab

L'inactivation des gènes p53 et pten présente un facteur de mauvais pronostic et de résistance à différents traitements anticancéreux incluant les thérapies ciblées. Le cétuximab (Erbitux®) est un anticorps monoclonal chimérique dirigé contre le domaine extracellulaire du récepteur à l'EGF. Son mécanisme d'action est fortement lié à la fonctionnalité des voies de signalisation de PI3KJAKT et des MAPK. Nous avons évalué l'influence de la réintroduction des gènes p53 et pten par vectorisation non viral à base de polyéthylènimine, couplée ou non à l'internalisation photochimique sur l'induction de l'apoptose et l'inhibition de la croissance cellulaire dans des cellules P53 et pten mutés d'une part, et sur l'impact de ce transfert de gène sur la fonctionnalité des voies de signalisation impliquées dans la réponse cellulaire au cétuximab. Nous avons montré que la transfection des gènes suppresseurs de tumeurs p53 et pten par polyétylènimine couplé à la PCI rétablit l'expression de P53 et de PTEN et permet de restaurer l'inhibition de croissance et l'induction de l'apoptose. Associée au traitement par cétuximab La restauration de PTEN et P53 réprime l'activation constitutive des voies de signalisation PI3K et MAPK et potentialise l'inhibition de la croissance et l'induction de l'apoptose induites par le cétuximab. Ces résultats montrent que l'inactivation de p53 et pten pourrait être prédictive de la résistance au cétuximab à travers l'activation constitutive de la voie de signalisation PI3/AKT et confirme que la détennination de la fonctionnalité des voies de signalisation des rtiveaux d'expression des phosphoprotéines de signalisation permettrait de prédire la réponse au cétuximab et de proposer des options thérapeutiques originales.P53 and PTEN abnormalities are early events in carcinogenesis and are associated with poor prognosis and resistance to cancer therapies including targeted therapy. Cetuxirnab (Erbitnx®) is a IgG chimeric monoclonal antibody, directed against the extracellular dornain of EGFR. !ts activity has been shown to be dependent on the functionality of PI3KJAKT and MAPK signaling pathways as weil as the apoptosis induction capacity of the cells . The present study was designed to evaluate the influence of pten and p53 gene transfer using polyethylenimine with or without photochemical internalisation on cell apoptosis induction and cell growth in cells bearing p53 and pten mutations and on the response to cetuximab. The results presented show that pten and p53 gene transfer using polyethertimine and PCI restored P53 and PTEN expression, cell growth inhibition and apoptosis induction. Associated with cetuximab treatrnent, pten and p53 reintroduction, restored the functionality of AKTIPI3K and MAPK signaling pathways and increased cell growth inhibition and apoptosis induction by cetuximab. The results achieved in the present study show that pten and p53 mutations could be predictive of cell response to cetuximab through the functional impact of these mutations on cell signaling. The data presented put forward the interest of the analysis of EGFR phosphoproteins downstream signalling to evaluate the functionality of the signaling pathways implicated in the cell response to cetuximab and could be used to propose the original targeted therapies

Transfert des gènes p53 et pten par vectorisation non virale (effet pro-apoptotique et potentialisation de la réponse cellulaire au cétuximab)

L'inactivation des gènes p53 et pten présente un facteur de mauvais pronostic et de résistance à différents traitements anticancéreux incluant les thérapies ciblées. Le cétuximab (Erbitux®) est un anticorps monoclonal chimérique dirigé contre le domaine extracellulaire du récepteur à l'EGF. Son mécanisme d'action est fortement lié à la fonctionnalité des voies de signalisation de PI3KJAKT et des MAPK. Nous avons évalué l'influence de la réintroduction des gènes p53 et pten par vectorisation non viral à base de polyéthylènimine, couplée ou non à l'internalisation photochimique sur l'induction de l'apoptose et l'inhibition de la croissance cellulaire dans des cellules P53 et pten mutés d'une part, et sur l'impact de ce transfert de gène sur la fonctionnalité des voies de signalisation impliquées dans la réponse cellulaire au cétuximab. Nous avons montré que la transfection des gènes suppresseurs de tumeurs p53 et pten par polyétylènimine couplé à la PCI rétablit l'expression de P53 et de PTEN et permet de restaurer l'inhibition de croissance et l'induction de l'apoptose. Associée au traitement par cétuximab La restauration de PTEN et P53 réprime l'activation constitutive des voies de signalisation PI3K et MAPK et potentialise l'inhibition de la croissance et l'induction de l'apoptose induites par le cétuximab. Ces résultats montrent que l'inactivation de p53 et pten pourrait être prédictive de la résistance au cétuximab à travers l'activation constitutive de la voie de signalisation PI3/AKT et confirme que la détennination de la fonctionnalité des voies de signalisation des rtiveaux d'expression des phosphoprotéines de signalisation permettrait de prédire la réponse au cétuximab et de proposer des options thérapeutiques originales.P53 and PTEN abnormalities are early events in carcinogenesis and are associated with poor prognosis and resistance to cancer therapies including targeted therapy. Cetuxirnab (Erbitnx®) is a IgG chimeric monoclonal antibody, directed against the extracellular dornain of EGFR. !ts activity has been shown to be dependent on the functionality of PI3KJAKT and MAPK signaling pathways as weil as the apoptosis induction capacity of the cells . The present study was designed to evaluate the influence of pten and p53 gene transfer using polyethylenimine with or without photochemical internalisation on cell apoptosis induction and cell growth in cells bearing p53 and pten mutations and on the response to cetuximab. The results presented show that pten and p53 gene transfer using polyethertimine and PCI restored P53 and PTEN expression, cell growth inhibition and apoptosis induction. Associated with cetuximab treatrnent, pten and p53 reintroduction, restored the functionality of AKTIPI3K and MAPK signaling pathways and increased cell growth inhibition and apoptosis induction by cetuximab. The results achieved in the present study show that pten and p53 mutations could be predictive of cell response to cetuximab through the functional impact of these mutations on cell signaling. The data presented put forward the interest of the analysis of EGFR phosphoproteins downstream signalling to evaluate the functionality of the signaling pathways implicated in the cell response to cetuximab and could be used to propose the original targeted therapies.NANCY1-Bib. numérique (543959902) / SudocSudocFranceF

Identifying patients with cerebral infarction within the time window compatible with reperfusion therapy, diagnostic performance of glutathione S-transferase-π (GST-π) and peroxiredoxin 1 (PRDX1): exploratory prospective multicentre study FLAG-1 protocol

Introduction Plasma biomarkers may be useful in diagnosing acute cerebral infarction requiring urgent reperfusion, but their performance remains to be confirmed. If confirmed, these molecules could be used to develop rapid and reliable decentralised measurement methods, making it possible to initiate reperfusion therapy before hospital admission. The FLAG-1 large prospective study will constitute a plasma bank to assess the diagnostic performance of two biomarkers: glutathione S-transferase-π and peroxiredoxin 1. These molecules are involved in the oxidative stress response and could identify cerebral infarction within a therapeutic window of less than 4.5 hours following the onset of symptoms. Secondary objectives include assessing performance of these biomarkers within 3-hour and 6-hour windows; identifying additional biomarkers diagnosing cerebral infarction and significant criteria guiding therapeutic decisions: ischaemic features of stroke, presence of diffusion/fluid-attenuated inversion recovery mismatch, volume of cerebral infarction and penumbra on cerebral MRI.Methods and analysis The exploratory, prospective, multicentre FLAG-1 Study will include 945 patients with acute stroke symptoms (onset ≤12 hours, National Institute of Health Stroke Scale score ≥3). Each patient’s 25 mL blood sample will be associated with cerebral MRI data. Two patient groups will be defined based on the time of blood collection (before and after 4.5 hours following onset). Receiver operating characteristic analysis will determine the diagnostic performance of each biomarker, alone or in combination, for the identification of cerebral infarction <4.5 hours.Ethics and dissemination The protocol has been approved by an independent ethics committee. Biological samples are retained in line with best practices and procedures, in accordance with French legislation. Anonymised data and cerebral imaging records are stored using electronic case report forms and a secure server, respectively, registered with the French Data Protection Authority (Commission Nationale de l'Informatique et des Libertés (CNIL)). Results will be disseminated through scientific meetings and publication in peer-reviewed medical journals.Trial registration number ClinicalTrials.gov Registry (NCT03364296)