Milk Protein Detection in Raw and Cooked Meat Products Using Immunochemichal Methods

The aim of this study was to evaluate different immunochemical methods (Dot Blot, Immnoblotting and two different ELISA kits) for the detection of milk proteins in eleven raw and cooked model systems of meat products with 0 – 5000 ppm of powder deffated milk (PDM) and in nine raw and cooked model systems of meat products with 0-2000 ppm of dry whey (DW) and in eleven commercial meat products. All the samples were analysed with Dot Blot and Immunoblotting with specific polyclonal rabbit serum against milk proteins and with two ELISA kits: Veratox® Total Milk Allergen Quantitative Test from Neogen and Ridascreen® Fast Milk from R-Biopharm. ELISA methods are more sensitive for the detection of milk proteins than Dot Blot and Immunoblotting. The R-Biopharm kit was the most sensitive kit for the analysis of these samples. However Immunoblotting can be useful for the detection of milk proteins if it is suspected that they were added as ingredients or additives. Immunoblotting allows to verify the presence of caseins and / or β-lactoglobulin. In contrast, the use of an ELISA kit is more appropriate to verify a possible cross-contamination.Laboratorio de Investigaciones del Sistema Inmun

Bioaccesibilidad y aporte potencial de minerales en alimentos libres de gluten

La enfermedad celíaca tiene una prevalencia del 1% al 2%. El único tratamiento efectivo para esta patología es una dieta permanente libre de gluten. La misma puede conducir a posibles deficiencias de algunos nutrientes. Se sabe que, el duodeno y el yeyuno proximal son necesarios para una buena absorción, y al existir un daño en la mucosa de estos la absorción mineral se ve afectada. También se ha demostrado, que la dieta libre de gluten aporta poca cantidad de minerales

Milk Protein Detection in Raw and Cooked Meat Products Using Immunochemichal Methods

The aim of this study was to evaluate different immunochemical methods (Dot Blot, Immnoblotting and two different ELISA kits) for the detection of milk proteins in eleven raw and cooked model systems of meat products with 0 – 5000 ppm of powder deffated milk (PDM) and in nine raw and cooked model systems of meat products with 0-2000 ppm of dry whey (DW) and in eleven commercial meat products. All the samples were analysed with Dot Blot and Immunoblotting with specific polyclonal rabbit serum against milk proteins and with two ELISA kits: Veratox® Total Milk Allergen Quantitative Test from Neogen and Ridascreen® Fast Milk from R-Biopharm. ELISA methods are more sensitive for the detection of milk proteins than Dot Blot and Immunoblotting. The R-Biopharm kit was the most sensitive kit for the analysis of these samples. However Immunoblotting can be useful for the detection of milk proteins if it is suspected that they were added as ingredients or additives. Immunoblotting allows to verify the presence of caseins and / or β-lactoglobulin. In contrast, the use of an ELISA kit is more appropriate to verify a possible cross-contamination.Laboratorio de Investigaciones del Sistema Inmun

En el Museo de la Anexa… “El objeto del mes”

La presente propuesta pretende acercarlos a la reconstrucción de la historia de la escuela y avanzamos hacia el proceso de conservación de documentos y objetos patrimoniales.Se pensó una actividad lúdica, para mostrar a los alumnos los objetos existentes en el museo. Es nuestra intención que los niños aprendan jugando con los valores fundamentales de la comunidad de pertenencia, como así también con nuestra propia historia escolar. (Párrafo extraído del texto a modo de resumen)Eje 2: Educación y PúblicoRed de Museos de la Universidad Nacional de La Plat

En el Museo de la Anexa… “El objeto del mes”

La presente propuesta pretende acercarlos a la reconstrucción de la historia de la escuela y avanzamos hacia el proceso de conservación de documentos y objetos patrimoniales.Se pensó una actividad lúdica, para mostrar a los alumnos los objetos existentes en el museo. Es nuestra intención que los niños aprendan jugando con los valores fundamentales de la comunidad de pertenencia, como así también con nuestra propia historia escolar. (Párrafo extraído del texto a modo de resumen)Eje 2: Educación y PúblicoRed de Museos de la Universidad Nacional de La Plat

En el Museo de la Anexa… “El objeto del mes”

La presente propuesta pretende acercarlos a la reconstrucción de la historia de la escuela y avanzamos hacia el proceso de conservación de documentos y objetos patrimoniales.Se pensó una actividad lúdica, para mostrar a los alumnos los objetos existentes en el museo. Es nuestra intención que los niños aprendan jugando con los valores fundamentales de la comunidad de pertenencia, como así también con nuestra propia historia escolar. (Párrafo extraído del texto a modo de resumen)Eje 2: Educación y PúblicoRed de Museos de la Universidad Nacional de La Plat

Contenido de macronutrientes,perfil de ácidos grasos y adecuación nutricional en alimentos complementarios comerciales

Existe gran variedad de alimentos complementarios comerciales (ACC) diseñados para alimentación de lactantes. En los comercializados en polvo, la forma de preparación determinará su aporte de nutrientes. Nos propusimos determinar el contenido de macronutrientes, minerales, fibra dietaria (FDT), valor energético y perfil de ácidos grasos (AG) en papillas preparadas a partir de ACC en polvo para lactantes a partir del 6º mes y evaluar su adecuación nutricional

Quantificação de traços de soja com kits de ELISA em biscoitos e produtos extrusados

Se evaluó la detección de trazas de soja en sistemas modelo (SM) de galletitas y extrudidos que contenían 5000, 250, 100, 50, 25, 10, 5 y 0 ppm de concentrado de proteína de soja (CPS). Se analizaron, además, dos lotes diferentes de ocho clases de galletitas comerciales y dos tipos de extrudidos que declaraban la presencia de soja a través de la frase “Contiene ...” o a través de frases de advertencia. La determinación de proteínas de soja se realizó utilizando tres kits ELISA (R-Biopharm, Neogen-Veratox y Romer). Solo el kit de R-Biopharm permitió la cuantificación de soja a partir de 25 ppm de CPS en galletitas y a partir de 5 ppm de CPS en productos extrudidos. Los otros dos kits resultaron menos sensibles. De acuerdo con los resultados obtenidos en el análisis de los SM de galletitas y de productos extrudidos con diferentes kits comerciales se concluye que debe estudiarse el desempeño de cada kit para cada alergeno y para cada matriz en particular. Esto permitiría establecer cuál es el método más adecuado para el control de los productos comerciales a los fines de evaluar la correcta declaración de alergenos en los respectivos rótulos.Detection of traces of soy was evaluated in cookies and extruded product model systems (MS) containing 5000, 250, 100, 50, 25, 10, 5 and 0 ppm of soy protein concentrate (SPC). Besides, two different batches of eight different types of commercial cookies and two types of extruded products declaring soy presence through either the statement: “Contains…” or precautionary phrases were analyzed. Soy protein determination was carried out using three different commercial ELISA kits (R-Biopharm, Neogen-Veratox and Romer). Only the R-Biopharm kit allowed quantification of soy from 25 ppm of SPC in cookies and from 5 ppm of SPC in the extruded products. The other two kits had lower sensitivity. According to the results obtained in the analysis of cookies and extruded product MS with different commercial kits, it can be concluded that the performance of every kit should be studied for all allergens and each particular food matrix. This would enable establishing the most suitable method for commercial products control, in order to assess the correct allergen labeling.Avaliou-se a detecção de traços de soja em sistemas modelo (SM) de biscoitos e extrusados que continham 5000, 250, 100, 50, 25, 10, 5 e 0 ppm de concentrado de proteína de soja (CPS). Analisaram-se, também dois lotes diferentes de oito tipos de biscoitos comerciais e dois tipos de extrusados que declaravam a presença de soja através da frase “Contém.... ou através de frases de advertência. A determinação de proteínas de soja foi realizada utilizando três kits ELISA (R-Biopharm, Neogen-Veratox e Romer). Apenas o kit de R-Biopharm permitiu a quantificação de soja a partir de 25 ppm de CPS em biscoitos e de a partir de 5 ppm de CPS em produtos extrusados. Os outros dois kits resultaram menos sensíveis. De acordo com os resultados obtidos na análise dos SM de biscoitos e de produtos extrusados com diferentes kits comerciais conclui-se que é preciso estudar o desempenho de cada kit para cada alergeno e para cada matriz em particular. Isto permitiria estabelecer qual é o método mais adequado para o controle dos produtos comerciais viando avaliar a correta declaração de alergenos nas respectivas etiquetas.Fil: Binaghi, Maria Julieta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; ArgentinaFil: Greco, Carola Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; ArgentinaFil: Martin, María Eugenia. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; ArgentinaFil: Drago, Silvina Rosa. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Santa Fe; Argentina. Universidad Nacional del Litoral; ArgentinaFil: Ronayne de Ferrer, Patricia Ana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; ArgentinaFil: Lopez, Laura Beatriz. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica. Departamento de Sanidad Nutrición Bromatología y Toxicología; Argentin

Role of phosphorylation in regulating the functional activity of the movement protein TGBp1 of potato virus X

El Potato virus X (PVX) es un virus de plantas perteneciente al género Potexvirus. Su genoma está compuesto por una única molécula de ARN que codifica una replicasa viral, tres proteínas de movimiento (MPs: TGBp1, TGBp2 y TGBp3) y la proteína de la cápside (CP). La proteína TGBp1 es una proteína multifuncional requerida para el movimiento viral célula a célula en la planta hospedera. Se ha demostrado que esta MP es fosforilada en los residuos T193 y T214 por una quinasa tipo CK2. Diferentes líneas de investigación sugieren que la fosforilación de las proteínas virales puede regular la replicación y el movimiento viral. El objetivo de este trabajo fue estudiar el rol de la fosforilación en la regulación funcional de la proteína de movimiento TGBp1 de PVX y en su interacción con la proteína de plantas remorina (REM). Para ello se construyeron por mutagénesis dirigida versiones de TGBp1 no fosforilables (T193A y T214A) y otras que simulan la fosforilación (T193D y T214D). En ensayos de transcomplementación de la movilización célula a célula de un virus defectivo para dicha función, se demostró que las modificaciones en ambas treoninas resultan perjudiciales en la complementación del movimiento viral. Se determinó que la fosforilación de TGBp1 en la T193 regula la estabilidad de esta proteína viral por medio de un mecanismo que involucra la presencia de una secuencia de degradación tipo PEST en el extremo C-terminal de dicha proteína. A través de la combinación de estudios que involucran el análisis comparativo in silico de varias TGBp1s de virus de los géneros Alpha y Betaflexiviridae y de estudios por mutagénesis dirigida, se determinó que la T193 y la secuencia PEST C-terminal se encuentran conservadas en todas las TGBp1s analizadas, sugiriendo que la fosforilación en la T193 de estas MPs sería un mecanismo regulatorio de la estabilidad de dichas proteínas. Por otra parte, el análisis funcional de las fosfomutantes T193 y T214 de TGBp1 determinó que la fosforilación en dichos residuos afecta negativamente la actividad supresora del PTGS de TGBp1. Los ensayos de interacción entre TGBp1 de PVX y la proteína REM determinaron que tanto el dominio N- como el C-terminal de TGBp1 son necesarios para la interacción y que la misma no es regulada por fosforilación en los residuos T193 y T214 de TGBp1. Por otro lado, este trabajo presenta las primeras evidencias que la interacción entre distintas proteínas TGBp1s y REM se encontraría conservada entre los virus que utilizan estrategias de movilización del tipo Triple Bloque de Genes (TGB). Los análisis realizados para determinar el efecto biológico de REM sobre la TGBp1 de PVX demostraron que la proteína REM no interfiere en la actividad del PTGS de esta proteína viral. Finalmente estudios de localización subcelular determinaron que la localización subcelular de TGBp1 es influenciada por la presencia de las otras proteínas virales y que a su vez varía según si la proteína se encuentra fusionada en su extremo N- o C- terminal a GFP.Potato virus X (PVX) is the type member of the Potexvirus genus. Its genome is based on a single RNA molecule encoding one viral replicase protein, three movement proteins (MPs: TGBp1, TGBp2 and TGBp3) and the capsid protein (CP). In particular, TGBp1 is a multifunctional protein required for virus cell-to-cell movement inside the host plant. Previously it has been demonstrated that TGBp1 is phosphorylated by a CK2-like kinase in T193A and T214 residues. Recent works on other plant viruses have indicated that viral protein phosphorylation by host kinases can regulate processes such us viral replication and mobilization. The aim of this work is to evaluate the role of phosphorylation in regulating the functional activities of the movement protein TGBp1 of PVX and its interaction with the protein Remorin (REM). For this aim different TGBp1 mutants have been developed by direct mutagenesis where the identified threonines have been replaced by alanine (T193A and T214A) or aspartate (T193D and T214D) residues. The virus movement function of the phosphomutants was assessed by complementation of PVX cell-to-cell movement in trans. It was shown that all mutants were non-functional for virus movement, and that phosphorylation of T193 is essential for stability of the MP by a degradation mechanism that involves a PEST sequence at the C-terminus of TGBp1. Several experimental approaches involving sequence comparison among TGBp1 homologues from viruses belonging to the Alpha and Betaflexiviridae genera and direct mutagenesis show that the T193 residue and the PEST sequence are conserved among all TGBp1 analyzed, suggesting that phosphorylation of T193 in these MPs could be a mechanism by which protein stability is regulated in several viruses. The results obtained in this work also have shown that phosphorylation of T193 and T214 of TGBp1 negatively affects the PTGS suppression activity of this MP. Two-hybrid assays and pull down experiments demonstrated that the N- and C-term domain of TGBp1 are involved in the interaction between PVX TGBp1 and REM and that this interaction is not regulated by TGBp1 phosphorylation. In addition, this work presents the first evidence that the interaction between REM and other TGBp1s could be a conserved mechanism used by different TGB-containing viruses. The studies conducted to determine the biological effect of REM on TGBp1 from PVX showed that REM protein does not interfere with PTGS- suppressing activity of TGBp1. Finally, sub-cellular localization studies demonstrated that TGBp1 localization is influenced by the presence of other viral proteins and by the use of N- or C-terminal GFP fusion proteins.Fil:Binaghi, María. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales; Argentina

Aplicación de un método in vitro para la evaluación de la disponibilidad potencial de minerales en matrices alimentarias diversas. Estimación del aporte potencial de hierro, zinc y calcio en alimentos dirigidos a grupos vulnerables de la población

Iron, zinc and calcium potential contribution was evaluated in foods aimed for vulnerable population groups: infants and young children, pregnant women and elderly people in different socio-cultural settings. Home-made diets, foods designed for social plans, commercial infant foods, regional foods and non-traditional food matrices were analyzed. Potential contribution was calculated based on total mineral content and dialyzability, which was evaluated by means of an in vitro method.\nThe effect of different promoters (citric and ascorbic acids, Na2EDTA) and inhibitors (phytates, polyphenols, calcium, milk proteins and oxalates) and the efficacy of different iron sources (ferrous sulfate, ferric bisglycinate and NaFeEDTA) were studied.\nThe potential contributions of complementary foods showed significant differences due to diverse interactions in the studied combinations and with the promoters or inhibitors present. In commercial complementary foods a reformulation would be appropriate. Regional foods provide important iron and moderate zinc and calcium amounts. \nGreen banana flours and snacks were poor mineral providers. Iron dialyzability in yerba mate infusions was very low but ascorbic acid could improve it.\nThese results would provide an adequate basis to formulate dietary recommendations for vulnerable groups.Fil: Binaghi, María Julieta. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Farmacia y Bioquímica; ArgentinaSe evaluó el aporte potencial de hierro, calcio y zinc en alimentos y/o dietas destinados a diferentes grupos vulnerables: niños entre 6 meses y 2 años, embarazadas y adultos mayores de contextos socioculturales diversos. Se analizaron dietas caseras, alimentos de planes sociales, alimentos comerciales y regionales y matrices alimentarias no tradicionales. El aporte potencial se calculó en base al contenido total y la dializabilidad mineral, evaluada mediante un método in vitro.\nSe estudió el efecto de diversos promotores (ácidos cítrico y ascórbico, Na2EDTA) e inhibidores (fitatos, polifenoles, calcio, proteínas lácteas y oxalatos) y la efectividad de distintas fuentes de hierro (sulfato ferroso, bisglicinato férrico y NaFeEDTA).\nEl aporte potencial de los alimentos infantiles mostró diferencias significativas, debido a las interacciones en las diversas combinaciones estudiadas y con los promotores o inhibidores presentes. En los alimentos complementarios comerciales sería adecuada una reformulación. Los alimentos regionales aportan cantidades importantes de hierro y moderadas de zinc y calcio. \nLas harinas de plátano verde y snacks resultaron pobres aportadores de minerales. En las infusiones de yerba mate la dializabilidad de hierro fue mínima pero el ácido ascórbico podría aumentarla.\nEstos resultados aportarían una base apropiada para formular recomendaciones relativas a dietas de grupos vulnerables