A novel proteasome inhibitor acting in mitochondrial dysfunction, ER stress and ROS production

In cancer-treatment, potentially therapeutic drugs trigger their effects through apoptotic mechanisms. Generally, cell response is manifested by Bcl-2 family protein regulation, the impairment of mitochondrial functions, and ROS production. Notwithstanding, several drugs operate through proteasome inhibition, which, by inducing the accumulation and aggregation of misfolded or unfolded proteins, can lead to endoplasmic reticulum (ER) stress. Accordingly, it was shown that Amblyomin-X, a Kunitz-type inhibitor identified in the transcriptome of the Amblyomma cajennense tick by ESTs sequence analysis of a cDNA library, obtained in recombinant protein form, induces apoptosis in murine renal adenocarcinoma (RENCA) cells by: inducing imbalance between pro- and anti-apoptotic Bcl-2 family proteins, dysfunction/mitochondrial damage, production of reactive oxygen species (ROS), caspase cascade activation, and proteasome inhibition, all ER-stress inductive. Moreover, there was no manifest action on normal mouse-fibroblast cells (NHI3T3), suggesting an Amblyomin-X tumor-cell selectivity. Taken together, these evidences indicate that Amblyomin-X could be a promising candidate for cancer therapy.Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP)Uniao Quimica Farmaceutica NacionalConselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq)Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)Inst Butantan, Lab Bioquim & Biofis, BR-05503900 São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Bioquim, São Paulo, BrazilInst Butantan, Programa Posgrad Interunidades Biotecnol, USP, IPT, BR-05503900 São Paulo, BrazilUniv São Paulo, Fac Med, Lab Oncol Expt LIM24, São Paulo, BrazilUniversidade Federal de São Paulo, Dept Bioquim, São Paulo, BrazilFAPESP: FAPESP 2010/52669-3FAPESP: CAT/CEPID - 1998/14307-9Web of Scienc

Amblyomin-X induces ER stress, mitochondrial dysfunction, and caspase activation in human melanoma and pancreatic tumor cell

During the last two decades, new insights into proteasome function and its role in several human diseases made it a potential therapeutic target. In this context, Amblyomin-X is a Kunitz-type FXa inhibitor similar to endogenous tissue factor pathway inhibitor (TFPI) and is a novel proteasome inhibitor. Herein, we have demonstrated Amblyomin-X cytotoxicity to different tumor cells lines such as pancreatic (Panc1, AsPC1BxPC3) and melanoma (SK-MEL-5 and SK-MEL-28). Of note, Amblyomin-X was not cytotoxic to normal human fibroblast cells. In addition, Amblyomin-X promoted accumulation of ER stress markers (GRP78 and GADD153) in sensitive (SK-MEL-28) and bortezomib-resistant (Mia-PaCa-2) tumor cells. The intracellular calcium concentration [Ca2+] (i) was slightly modulated in human tumor cells (SK-MEL-28 and Mia-PaCa-2) after 24 h of Amblyomin-X treatment. Furthermore, Amblyomin-X induced mitochondrial dysfunction, cytochrome-c release, PARP cleavage, and activation of caspase cascade in both human tumor (SK-MEL-28 and Mia-PaCa-2) cells. These investigations might help in further understanding of the antitumor properties of Amblyomin-X.Sao Paulo Research Foundation (FAPESP)National Council of Technological and Scientific Development (CNPq, INCTTox)Coordination of Improvement of Higher Education Personnel (CAPES)Uniao Quimica Farmaceutica NacionalButantan Inst, Biochem & Biophys Lab, Ave Vital Brazil 1500, BR-05503900 Sao Paulo, SP, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Dept Biochem, Sao Paulo, SP, BrazilUniv Sao Paulo, Inst Chem, Dept Biochem, Sao Paulo, BrazilUniv Sao Paulo, Sch Med, Expt Oncol Med Invest Lab, LIM 24, Sao Paulo, SP, BrazilUniv Fed Sao Paulo, Dept Biochem, Sao Paulo, SP, BrazilFAPESP: 2010/52669-3FAPESP: 2010/07958-7FAPESP: 2011/05969-4FAPESP: CAT/CEPID 1998/14307-9FAPESP: CETICs 2013/07467-1Web of Scienc

Risk perception of Hemolytic Uremic Syndrome

Dentro de las zoonosis de transmisión alimentaria, se destaca Escherichia coli productor de toxina Shiga debido a su impacto en salud. Esta bacteria cuyos principales reservorios son los rumiantes, llegan al hospedero susceptible mediante la contaminación de sus carnes, durante su procesamiento, transporte, comercialización y consumo. Afecta generalmente niños menores de 5 años, ocasionando desde diarreas hasta Síndrome Urémico Hemolítico (SUH) en muchos casos con necesidad de trasplante renal. Esta enfermedad es endémica en Argentina. Como parte de los estudios de exposición a factores de riesgo en esta enfermedad, hemos estudiado la percepción de riesgo de las personas en diversos contextos. Para ello desarrollamos y validamos un modelo de encuesta de conocimientos, actitudes y prácticas dirigida a personas adultas. Este instrumento fue aplicado en Ciudad Autónoma de Buenos Aires, Tierra del Fuego y Exaltación de la Cruz. Los estudios ponen de manifiesto la influencia de factores culturales-creencias en la percepción del riesgo subjetiva (individual) y la labilidad de las acciones comunicacionales aisladas en comparación a la percepción de riesgo real y colectivo. Se discute la influencia de los modelos deintervención basados en campañas o programas de promoción de salud.Among the foodborne zoonoses, Shiga toxin-producing Escherichia coli stands out due to its impact on health. This microorganism, whose main reservoirs are ruminants, reaches the susceptible host through the contamination of meat, its processing, transport, trade and consumption. It generally affects children younger than 5 years, causing variable clinical manifestations ranging from diarrhea to Hemolytic Uremic Syndrome (HUS), in which many cases required kidney transplantation. This disease is endemic in Argentina. As part of the studies of exposure to risk factors in this disease, we have studied the perception of risk of people in various contexts. To do this, we developed and validated a survey model of knowledge, attitudes and practices aimed at adults. This survey was applied in the Autonomous City of Buenos Aires, Tierra del Fuego and Exaltación de la Cruz. Studies show the influence of cultural-belief factors on the perception of subjective risk (individual) and the weakness of isolated communicative actions compared to the perception of real and collective risk. The influence of intervention models based on health promotion campaigns or programs is discussed.Fil: Broglio, Alicia Susana. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Graciano, Luciana. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Sanin, Mariana Soledad. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Blanco Crivelli, Ximena. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Cundon, Cecilia Carolina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Bonino, Maria Paz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Montalvo, Francisco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Parque Centenario. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Unidad Ejecutora de Investigaciones en Producción Animal; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Área de Parasitología y Enfermedades Parasitarias; ArgentinaFil: Degregorio, Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Berra, Yanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; ArgentinaFil: Betancor, A.. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias; Argentin

Calidad de vida relacionada con la salud en niños con y sin trastornos crónicos. Estudio multicéntrico

Los trastornos crónicos (TC) en etapas tempranas de la vida pueden influir en diferentes dimensiones de la calidad de vida relacionada con la salud (CVRS) de los niños/as.Objetivo. Comparar la CVRS de niños/as con TC confirmados, con TC declarados y sin TC. Población y método. Estudio transversal en el marco de una investigación mayor realizada en escuelas de Córdoba y Bahía Blanca, y en los hospitales Italiano y Garrahan de Buenos Aires, Argentina, en 2012. La presencia de TC fue establecida por diagnóstico médico en hospitales o por declaración de sus cuidadores en escolares.Los niños/as de 8 a 12 años respondieron el cuestionario KIDSCREEN-52 sobre CVRS, una escala de desarrollo puberal y una escala de recursos económicos familiares. Los cuidadores indicaron el nivel educativo materno. Se estimó la asociación entre TC y CVRS ajustada por sexo, edad, desarrollo puberal, nivel educativo materno y nivel socioeconómico. Participaron 670 duplas niños/as cuidadores, 13,3% (n= 89) con TC confirmados (muestras de hospitales), 14,5% (n= 97) escolares con trastornos declarados y el resto eran escolares sanos. La edad promedio fue 10,2 años (desvío estándar= 1,01); 54,8% fueron niñas. Tener TC confirmados se asoció a una mayor frecuencia de bajo bienestar físico (OR 2,61; IC 95%:1,43-4,76), mientras que la presencia de TC declarados se asoció con bajas puntuaciones en bienestar psicológico (OR 1,96; IC 95%: 1,06-3,63), autopercepción (OR 2,22; IC 95%: 1,28-3,87) y relación con los padres (OR 2,04; IC 95%:1,21-3,44).Conclusiones. Los niños/as con TC confirmados mostraron con mayor frecuencia malestar físico y los que tenían TC declarados manifestaron malestar en áreas psicosociales, en comparación con los niños/as sin trastorno.Fil: Rivera, Liliana Carolina. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Escuela de Salud Pública; ArgentinaFil: Mamondi, Verónica Anabel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Medicina. Escuela de Salud Pública; ArgentinaFil: Lavin Fueyo, Julieta. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Jouglard, Ezequiel Francisco. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Pogany, Lourdes. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Sánchez, María C.. Hospital Italiano; ArgentinaFil: Prina, Martina Violeta. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Roizen, Mariana. Gobierno de la Ciudad de Buenos Aires. Hospital de Pediatría "Juan P. Garrahan"; ArgentinaFil: Esandi, Maria Eugenia. Universidad Nacional del Sur. Departamento de Ciencias de la Salud; ArgentinaFil: Berra, Silvina del Valle. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud. Universidad Nacional de Córdoba. Instituto de Investigaciones en Ciencias de la Salud; Argentin

Sustained kidney biochemical derangement in treated experimental diabetes : a clue to metabolic memory.

The occurrence of biochemical alterations that last for a long period of time in diabetic individuals even after adequate handling of glycemia is an intriguing phenomenon named metabolic memory. In this study, we show that a kidney pathway is gradually altered during the course of diabetes and remains persistently changed after late glycemic control in streptozotocin-induced diabetic rats. This pathway comprises an early decline of uric acid clearance and pAMPK expression followed by fumarate accumulation, increased TGF-? expression, reduced PGC-1? expression, and downregulation of methylation and hydroxymethylation of mitochondrial DNA. The sustained decrease of uric acid clearance in treated diabetes may support the prolonged kidney biochemical alterations observed after tight glycemic control, and this regulation is likely mediated by the sustained decrease of AMPK activity and the induction of inflammation. This manuscript proposes the first consideration of the possible role of hyperuricemia and the underlying biochemical changes as part of metabolic memory in diabetic nephropathy development after glycemic control

The involvement of nucleotide excision repair in DNA oxidative lesions in mammals cells.

Para melhor entender o envolvimento do NER em lesões oxidativas averiguou-se os efeitos da foto-excitação do azul de metileno (MB) in vitro e in vivo. Verificou-se que MB e luz induzem muitos sítios sensíveis a enzima FPG em DNA plasmidial. Mostrou-se que MB é incorporado por fibroblastos humanos proficientes ou deficientes em NER (XP-A e XP-C) e gerou oxigênio singlete (1O2) intracelularmente. A foto-excitação do MB formou também 8-oxoG em núcleos de fibroblastos. Células mutantes XP-A e XP-C foram mais sensíveis ao tratamento e apresentaram mais danos oxidativos em seu DNA genômico do que células selvagens. Contudo, todas as células mostraram a mesma cinética de reparo das lesões formadas. Além disso, houve mais marcação de g-H2AX nas células mutantes após a foto-excitação do MB. Assim, os resultados sugerem que a excitação do MB gera danos oxidativos e quebras na molécula de DNA, tanto in vitro quanto in vivo e que as proteínas XPA e XPC podem ter algum papel na proteção desse estresse, além da sua sabida participação em reparo de lesões induzidas por luz UV.In order to study the participation of NER mechanisms in the removal of oxidative DNA lesions, we examined the effects of photoactivated methylene blue (MB) in vitro and in vivo. Plasmid DNA presents more FPG sensitive sites when MB was photoactivated than non-photoactivated. MB can be incorporated by NER-proficient or deficient cells and is able to generate singlet oxygen (1O2) inside cells. We detected also the presence of 8-oxoG in genomic DNA after treatment. XP-A and XP-C deficient cells are more sensitive to MB treatment and were found to have more oxidative DNA lesions than proficient cells. Also, there are more g-H2AX foci in mutant cells after treatment. However, there is a clear similarity in lesions repair kinetic between proficient and deficient cells. Therefore, these results suggest that photoactivated MB generates oxidative damage and DNA strand breaks both vitro and in vivo assays and that XPA and XPC proteins may also have a role in the protection of cellular oxidative stress, in addition to its participation in repair of UV-induced DNA damage

Eco-environmental Factors Related to Potential Reservoirs of Leptospira spp. in the Costanera Sur Ecological Reserve, Buenos Aires, Argentina

Las modificaciones ambientales generan entornos de interfaz en los que la transmisión de Leptospira spp. puede verse afectada. Con el objetivo de identificar y analizar variables ecoambientales asociadas a potenciales reservorios de Leptospira spp. en la Reserva Ecológica Costanera Sur (RECS) (Buenos Aires, Argentina) y áreas urbanizadas contiguas, se realizó un muestreo por conveniencia en líneas transectas, estratificado y proporcionado. Fueron capturados 170 mamíferos de 11 especies y se analizó Leptospira spp. por serología, cultivo y PCR. En áreas conservadas se registraron mayormente Didelphis albiventris y Deltamys kempi, mientras que Oligoryzomys flavescens también fue hallado en áreas degradadas y Rattus norvegicus solo en áreas degradadas. No se detectó Leptospira spp. en los mamíferos silvestres. Un perro sin tenedor responsable resultó positivo por serología. Las condiciones ambientales de la RECS sugieren un ecosistema poco propicio para Rattus, evidenciando la importancia de la conservación de áreas naturales en entornos urbanos.Environmental modifications generate interface environments in which Leptospira spp. transmission may be affected. In order to identify and analyze eco-environmental variables associated with potential reservoirs of Leptospira spp. in the Reserva Ecológica Costanera Sur (RECS) (Buenos Aires, Argentina) and adjacent urbanized areas, a stratified and proportionate transect line convenience sampling was carried out. A total of 170 mammals of 11 species were captured and analyzed for the presence of Leptospira spp. by serology, culture and PCR. In conserved areas, Didelphis albiventris and Deltamys kempi were mostly recorded, while Oligoryzomys flavescens was also found in degraded areas, and Rattus norvegicus was only found in degraded areas. Leptospira spp. were not detected in wild mammals. One dog without a responsible keeper tested positive by serology. The environmental conditions of the RECS suggest a poor ecosystem for Rattus, demonstrating the importance of the conservation of natural areas in urban environments.Fil: Berra, Yanina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Vet. en Salud Publica; ArgentinaFil: Aracena, Gaston. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Artuso, María Carolina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Petrakowski, Jessica. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; ArgentinaFil: Orozco, Maria Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires; ArgentinaFil: Degregorio, Osvaldo. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Area de Vet. en Salud Publica; Argentin

Estudio molecular para la detección de Leptospira spp. en mamíferos silvestres y domésticos en la reserva ecológica Costanera Sur, CABA

Under "One Health" concept, the health problem is approached from a holistic view linking human, animal and environmental health. Multiple pathogens circulating among animal and human populations, which can be a threatto both human and animal health. Leptospira spp. has been reported to cause infection in almost all species of mammals. In this work the human-animal-environment interface was analyzed by studying Leptospira spp. infection model in wild and domestic species in the Costanera Sur Ecological Reserve. Data were obtained through a transects, stratified stages and proportionate sampling. Urine and renal tissue were taken as appropriate and PCR diagnostic was performed. The present work has the objective to study the occurrence of leptospirosis by molecular techniques(PCR), in populations of domestic and wild animals of the RECS. At the same time, contribute to the knowledge of the impact of the contact of these populations and their potential role as reservoirs and transmitters of Leptospira spp. Which inhabit protected natural areas, modified by increasing urbanization processes, such as the RECS.A total of 140 animals belonging to 10 different species were caught:6 species of rodents, 3 species of marsupials, 1 cingulate and a total of 30canines. All analyzed samples were negative. The eco-environmental conditions of the study area posed an enabling environment for development of Leptospira spp. But we could presume that the dispersion of the populations of host (and therefore their potential reservoirs)condition the environmental burden of bacteria in different habitats, may establish a detection limit below the level of sampling and diagnostic techniques used in this research. This study is considered an approach of the knowledge of the eco epidemiology and infection risk of diseases in the human- animal - environment interface in CABA, considering Leptospira spp. as zoonotic infectious disease model, in which proposals to deepen these studies are performed.Fil: Berra, Yanina. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Área de Veterinaria en Salud Pública; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Arocena, Gastón Maximiliano. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Artuso, María Carolina. Ministerio de Agricultura, Ganadería, Pesca y Alimento. Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ercolini, Carina. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Instituto de Zoonosis Luis Pasteur; ArgentinaFil: Bruno, Antonela. Gobierno de la Ciudad Autónoma de Buenos Aires. Ministerio de Salud. Instituto de Zoonosis Luis Pasteur; ArgentinaFil: Orozco, Maria Marcela. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Oficina de Coordinación Administrativa Ciudad Universitaria. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. Instituto de Ecología, Genética y Evolución de Buenos Aires; ArgentinaFil: Degregorio, Osvaldo Jorge. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Área de Veterinaria en Salud Pública; Argentin