Measuring the Interaction of Transcription Factor Nrf2 with Its Negative Regulator Keap1 in Single Live Cells by an Improved FRET/FLIM Analysis

Transcription factor NF-E2 p45-related factor 2 (Nrf2) and its principal negative regulator, Kelch-like ECH-associated protein 1 (Keap1), comprise a molecular effector and sensor system that robustly responds to perturbations of the cellular redox homeostasis by orchestrating a comprehensive cytoprotective program. Under homeostatic conditions, Nrf2 is a short-lived protein, which is targeted for ubiquitination and proteasomal degradation. Upon encounter of electrophiles, oxidants, or pro-inflammatory stimuli, the cysteine sensors in Keap1 are chemically modified, rendering Keap1 unable to target Nrf2 for degradation, and consequently leading to accumulation of the transcription factor and enhanced transcription of cytoprotective genes. A detailed understanding of the protein–protein interactions between Nrf2 and Keap1 has been achieved by use of various in vitro systems, but few assays are available to assess these interactions in the context of the living cell. We previously developed an imaging-based FLIM/FRET methodology to visualize and measure the interaction between Nrf2 and Keap1 in single cells. Here, our goal was to improve this methodology in order to increase throughput and precision, and decrease cell-to-cell variability. To eliminate the possibility of orientation bias, we incorporated a flexible linker between Keap1 and the FRET acceptor fluorescent protein tag. To ensure the correct image capture of Nrf2 fused to the FRET donor fluorescent protein tag, we matched the maturation time of the fluorescent tag to the half-life of the endogenous Nrf2, by using sfGFP as the FRET donor. Using a global binning approach increased the assay throughput, whereas including the measured instrument response function in the analysis improved precision. The application of this methodology revealed a strong covariation of the results with the expression level of the acceptor. Taking the acceptor level into account circumvented cell-to-cell variability and enhanced sensitivity of the measurements of the Keap1–Nrf2 interaction in live cells

Chronic disease in childhood and adolescence: continuity of care in the Health Care Network

OBJETIVO Enfermedad crónica en la infancia y adolescencia: continuidad del cuidado en la red de atención sanitaria. MÉTODO Investigación cualitativa realizada entre febrero y octubre de 2013 con 12 familiares, seis gestores y 14 profesionales sanitarios de distintos servicios de la red sanitaria de un municipio de Paraíba mediante las técnicas de grupo focal, entrevista semiestructurada y consulta a fichas. La triangulación de los datos y el análisis temático subsidiaron la interpretación de los datos. RESULTADOS Fueron construidas dos categorías: "Gestión de la atención sanitaria" y "(Des)continuidad del cuidado". Se advirtieron lagunas como la ausencia de registro para favorecer el seguimiento y orientar la planificación de acciones; atención puntual y desarticulada entre los servicios con fragilidad en el flujo de informaciones, que obstaculizan el seguimiento a lo largo del tiempo. CONCLUSIÓN La continuidad del cuidado en la red de atención sanitaria está fragilizada y existe la necesidad del desarrollo de estrategias que la favorezcan.OBJETIVO Analisar a continuidade do cuidado à criança/adolescente com doença crônica na rede de atenção à saúde. MÉTODO Pesquisa qualitativa realizada entre fevereiro e outubro de 2013 com 12 familiares, seis gestores e 14 profissionais de saúde de diferentes serviços da rede de saúde de um município da Paraíba através das técnicas de grupo focal, entrevista semiestruturada e consulta a prontuários. A triangulação dos dados e a análise temática subsidiaram a interpretação dos dados. RESULTADOS Foram construídas duas categorias: "Gestão da atenção à saúde" e "(Des)continuidade do cuidado". Constataram-se lacunas como a ausência de cadastro para favorecer o acompanhamento e nortear o planejamento de ações; atendimento pontual e desarticulado entre os serviços com fragilidade no fluxo de informações, que obstaculizam o seguimento ao longo do tempo. CONCLUSÃO A continuidade do cuidado na rede de atenção à saúde está fragilizada e há necessidade do desenvolvimento de estratégias que a favoreçam.abstract OBJECTIVE To evaluate the continuity of care for children and adolescents with chronic diseases in the health care network. METHODS This qualitative study was conducted between February and October 2013 with 12 families, six health managers, and 14 health professionals from different health care services in a municipality of the state of Paraíba, Brazil, using focal groups, semi-structured interviews, and medical record consultation. The data were analyzed by triangulation and thematic analysis. RESULTS Two categories were created: “health care management” and “(dis)continuity of care.” We found gaps in the system, including poor data recording aimed to facilitate follow-up and guide the planning actions as well as sporadic and discoordinate services with a limited flow of information, which hinders follow-up over time. CONCLUSION Continuity of care in the health care network is limited and creates the need to develop strategies to improve these services

Educomunicação em Tempos de Pandemia:

Os textos que compõem esta obra são oriundos do VIII Colóquio Ibero-americano de Educomunicação (VIII CIEducom) e IX Colóquio Catarinense de Educomunicação (IX CCEducom), realizados em março de 2021. Em um ano no qual o vírus SARS-CoV-2 e variantes circularam por diversos territórios, Educomunicação em tempos de pandemia: práticas e desafios foi o tema discutido nos eventos. Este livro colocado à disposição do público é um modo de compartilhar caminhos e convidar pessoas curiosas a percorrerem, por meio das palavras e recursos gráficos, desafios identificados e estratégias para o enfrentamento deste inesperado período de pandemia

Educomunicação, Transformação Social e Desenvolvimento Sustentável

Esta publicação apresenta os principais trabalhos dos GTs do II Congresso Internacional de Comunicação e Educação nos temas Transformação social, com os artigos que abordam principalmente Educomunicação e/ou Mídia-Educação, no contexto de políticas de diversidade, inclusão e equidade; e, em Desenvolvimento Sustentável os artigos que abordam os avanços da relação comunicação/educação no contexto da educação ambiental e desenvolvimento sustentável

Educomunicação e suas áreas de intervenção: Novos paradigmas para o diálogo intercultural

oai:omp.abpeducom.org.br:publicationFormat/1O material aqui divulgado representa, em essência, a contribuição do VII Encontro Brasileiro de Educomunicação ao V Global MIL Week, da UNESCO, ocorrido na ECA/USP, entre 3 e 5 de novembro de 2016. Estamos diante de um conjunto de 104 papers executivos, com uma média de entre 7 e 10 páginas, cada um. Com este rico e abundante material, chegamos ao sétimo e-book publicado pela ABPEducom, em seus seis primeiros anos de existência. A especificidade desta obra é a de trazer as “Áreas de Intervenção” do campo da Educomunicação, colocando-as a serviço de uma meta essencial ao agir educomunicativo: o diálogo intercultural, trabalhado na linha do tema geral do evento internacional: Media and Information Literacy: New Paradigms for Intercultural Dialogue