Inmunidad adaptativa y protectora contra el virus de la fiebre aftosa en bovinos : rol de las respuestas inmunes sistémica y de mucosas

Tesis para obtener el grado de Doctor en Ciencias Veterinarias, área Virología, de la Universidad de Buenos Aires, en 2018La fiebre aftosa (FA) es una enfermedad viral infectocontagiosa de curso agudo que se caracteriza por producir lesiones vesiculares en tejidos de la mucosa oronasal (incluyendo lengua, encías y paladar), ubres, espacios interdigitales y rodetes coronarios de las pezuñas de los animales infectados. Su agente etiológico, el virus de la fiebre aftosa (VFA), es un virus perteneciente a la familia Picornaviridae que afecta a animales biungulados, incluyendo por tanto a bovinos, porcinos, caprinos y ovinos domésticos, junto con numerosas especies silvestres que pueden actuar como reservorios bajo determinadas condiciones ecológicas. La virulencia, el amplio rango de huéspedes, la diversidad de variantes y la alta capacidad infecciosa y de contagio del VFA, explican su presencia y re-emergencia en diversas partes del mundo y la convierten en un problema sanitario de escala global. La enfermedad genera enormes pérdidas económicas a la industria ganadera debido al cierre obligado de los mercados externos y a pérdidas considerables en el mercado interno, asociadas a la disminución de la producción, al sacrificio y al bloqueo del movimiento de animales. En trabajos previos de nuestro grupo de investigación, se evidenciaron respuestas inmunes de anticuerpos tanto a nivel sistémico como en mucosas, observables luego de la infección con VFA, así como de la vacunación sistémica en bovinos, siendo su ocurrencia, por lo tanto, independiente de la ruta inicial de contacto con el antígeno viral. Dentro de este panorama, la contribución relativa a la inmunidad protectora de los diferentes mecanismos inmunes potencialmente implicados en la respuesta generada, es difícil de discernir. La presente tesis doctoral plantea como hipótesis de trabajo que los anticuerpos sistémicos, administrados mediante la inmunización pasiva de terneros seronegativos para VFA, son capaces de evitar la diseminación del virus luego de la infección por vía aerógena y en ausencia de otros mecanismos inmunes. Para esto, inicialmente se realizaron una serie de experimentos donde se ajustaron las condiciones para la inmunización pasiva contra el VFA en terneros. En estos procedimientos se utilizaron plasmas de bovinos vacunados con formulaciones tetravalentes comerciales anti-aftosa de serie. Los mismos fueron reunidos en una sola fracción y diferentes volúmenes de esta preparación fueron transferidos a terneros seronegativos. Una vez realizado el procedimiento, se midieron diversos parámetros de inmunidad humoral específicos contra el VFA, entre las 0 h y los 30 días post-transferencia. A partir de estos resultados, se determinó el volumen de plasma requerido para llevar a cabo la inmunización pasiva, así como los protocolos de administración y los tiempos adecuados para realizar las infecciones posteriores en los animales pasivamente inmunizados. Para el segundo experimento, se utilizaron vacunas monovalentes de la cepa O1/Campos de alta carga antigénica, con las que se inmunizaron bovinos seronegativos (n=8). Se obtuvo plasma de cuatro de estos animales a los 7 días post-vacunación (dpv) y a los 26 dpv en los cuatro restantes. Así se conformaron dos pooles de plasma inmunes (7 y 26 dpv) que diferían tanto en la composición isotípica de las inmunoglobulinas, así como en los títulos de anticuerpos totales y neutralizantes anti-VFA. En el caso del pool de plasma de 7 dpv el isotipo predominante detectado fue la IgM y el título de anticuerpos neutralizantes fue 1,6; mientras que para el pool de 26 dpv, se detectaron ambos subtipos de IgG (1 y 2) y niveles menores de IgM, con un título de anticuerpos neutralizantes de 2,7. Los animales pasivamente inmunizados se infectaron por vía oronasal y estos resultados se compararon con los obtenidos en animales vacunados e infectados a los mismos tiempos post-vacunación (7 y 26 dpv). Nuestros resultados demostraron que los anticuerpos circulantes previenen la generalización de la fiebre aftosa solo en el caso de los animales pasivamente inmunizados con plasma de 26 dpv, ya que los animales que recibieron el plasma de 7 dpv mostraron signos clínicos de la enfermedad luego de la infección aerógena. Esto indicaría que, en ausencia de otros mecanismos inmunitarios adaptativos preexistentes, los anticuerpos circulantes en sangre efectivamente son capaces de evitar el desarrollo de la enfermedad, aunque existe un umbral de título de anticuerpos por debajo del cual se desencadena la enfermedad luego de la infección oronasal. Para el caso de los animales vacunados, se obtuvo una protección total de los mismos, tanto en los infectados a los 7 como a los 26 dpv. Esto ocurrió aun cuando el animal vacunado 7 días antes de la infección presentaba, al momento del desafío, niveles de anticuerpos sistémicos neutralizantes similares a los de los animales inmunizados pasivamente con plasma de 7 dpv y que mostraron signos clínicos de fiebre aftosa post-infección. El estudio de las respuestas de anticuerpos post-infección, tanto a nivel sistémico como en mucosas respiratorias, indicó que la vacunación promovió la generación de una respuesta de anticuerpos rápida tras la exposición al virus, presentando la misma un perfil de respuesta de tipo secundaria. En ambos casos, los infectados a los 7 dpv o a los 26 dpv, mostraron rápidos cambios de los isotipos predominantes de las inmunoglobulinas VFA-específicas, así como un aumento de los títulos de anticuerpos y de la avidez en los sueros obtenidos post-infección. Interesantemente, estas observaciones se verificaron tanto a nivel sistémico como local, en linfonódulos drenantes del tracto respiratorio. En conjunto estos resultados indican que los anticuerpos circulantes pueden ser suficientes para evitar la generalización de la enfermedad en bovinos infectados por la vía oronasal, aun en ausencia de otros mecanismos activos de inmunidad específica. A su vez, la caracterización de las respuestas de anticuerpos posteriores al desafío, tanto a nivel sistémico como local, reveló que la inmunización sistémica con vacunas convencionales anti-aftosa promovió rápidamente un aumento del título de anticuerpos, así como de la avidez de los sueros inmunes y la modificación en los isotipos en las inmunoglobulinas predominantes, todos cambios asociables a respuestas anamnésicas contra el virus. Se resalta el carácter protector de que estos procesos frente al establecimiento de la enfermedad, y el hecho que los mismos se verificaron en tiempos muy cercanos a la vacunación (7 dpv) y aun cuando la infección aerógena se realizó en presencia de títulos bajos de anticuerpos neutralizantes.Foot-and-mouth disease (FMD) is an acute infectious viral disease characterized by producing vesicular lesions in tissues of the oronasal mucosa (including the tongue and palate), udders, interdigital spaces and coronary runners of the hooves of infected animals. Its etiological agent, the foot-and-mouth disease virus (FMDV), is a virus belonging to the Picornaviridae family that affects cloven-hoofed animals, including cattle, pigs, goats and domestic sheep, along with numerous wild species that can act as reservoirs under certain ecological conditions The virulence, the wide range of hosts, the diversity of variants and the high infectious and contagious capacity of FMDV, explain their presence and re-emergence in various parts of the world and make it a sanitary problem of scale global. The disease generates enormous economic losses to the livestock industry due to the forced closure of external markets and considerable losses in the domestic market, associated with the reduction of production, slaughter, and blockage of animal movement. Previous results of our laboratory described the onset of the mucosal and systemic immunity in cattle not only after FMDV aerosol infection but also after systemic vaccination, showing that the response is independent of the initial route of contact with the virus. Despite this, the contribution of each immune mechanism implicated in the immune response is not clear yet. The present work is based on the hypothesis that the systemic antibodies circulating after a passive immunization in cattle are sufficient to prevent disease generalization after oronasal infection and in absence of additional immune mechanisms. To this end, a series of experiments were initially carried out to adjust the conditions for the passive immunization against FMD in seronegative calves. In these procedures, calves sera from cattle vaccinated with commercial tetravalent formulations were used. From these results, the volume of serum required to make the passive immunization was determined, as well as the administration protocols and the time available to perform the subsequent infections in the passively immunized animals. For the final experiment, naïve animals (n=8) received one dose of a single-oil-emulsion monovalent vaccine containing FMDV O1/Campos strain. We used two different preparations of FMDV- specific immune serum, obtained at 7 and 26 days post-vaccination (dpv), differing therefore in the immunoglobulin isotype composition and seroneutralization titers. Serum 7 dpv pool had a titer of neutralizing antibodies of 1.6 and the isotype predominantly on its composition was IgM, while titer of serum 26 dpv pool was 2.7 and both subtypes- IgG1 and IgG2- were detected in the pool and in less concentration IgM. After passive immunization, animals were infected by oronasal infection with FMDV O1C strain and these results were compared with animals infected 7 and 26 days after vaccination. Our results demonstrated that systemic antibodies were enough to prevent the disease generalization only in the case of animals transferred with serum 26 dpv, since animals transferred with serum 7 dpv showed clinical symptoms of the disease after oronasal infection. This might suggest that in absence of other preexisting adaptive immune mechanisms, circulating antibodies are able to prevent the progress of the disease despite there is a threshold titer of antibodies below which the disease is triggered after oronasal infection. Animals infected after vaccination were all protected, including the animal vaccinated and infected 7 dpv even though when the neutralizing antibody titers were similar to those of the animals passively immunized with serum 7 dpv and which showed clinical symptoms after oronasal infection. The study of post-infection antibody responses, both systemic and mucosal, indicated that vaccination promoted the generation of a rapid antibody response after exposure to the virus, presenting a secondary response profile. In both cases, those infected at 7 dpv or at 26 dpv showed rapid changes of the predominant isotype of the FMDV-specific immunoglobulins, as well as an increase in antibody titers and avidity in sera obtained post-infection. Interestingly, these observations were verified both at the systemic and local level, in draining lymph nodes of the respiratory tract. Overall, these results indicate that circulating antibodies may be sufficient to prevent the generalization of the disease in bovines infected by the oronasal route, even in the absence of other active mechanisms of specific immunity. In turn, the characterization of post-challenge antibody responses, both at systemic and local level, revealed that systemic immunization with conventional anti-FMDV vaccines rapidly promoted increases in antibody titers and avidity of the immune serum, accompanied by a change of the isotype profile towards the IgG1 subclass, all changes associated with anamnestic responses against the virus. Interestingly, such protective responses occurred very early after vaccination (7 dpv) and even when the aerogenic infection was performed in the presence of low titers of FMDV-neutralizing antibodies.Instituto de VirologíaFil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentin

Inmunidad adaptativa y protectora contra el virus de la fiebre aftosa en bovinos : rol de las respuestas inmunes sistémica y de mucosas

Foot-and-mouth disease (FMD) is an acute infectious viral disease characterized by producing vesicular lesions in tissues of the oronasal mucosa (including the tongue and palate), udders, interdigital spaces and coronary runners of the hooves of infected animals. Its etiological agent,\nthe foot-and-mouth disease virus (FMDV), is a virus belonging to the Picornaviridae family that\naffects cloven-hoofed animals, including cattle, pigs, goats and domestic sheep, along with\nnumerous wild species that can act as reservoirs under certain ecological conditions The virulence, the wide range of hosts, the diversity of variants and the high infectious and contagious\ncapacity of FMDV, explain their presence and re-emergence in various parts of the world and make it a sanitary problem of scale global. The disease generates enormous economic losses to the livestock industry due to the forced closure of external markets and considerable losses in the domestic market, associated with the reduction of production, slaughter, and blockage of animal movement.\nPrevious results of our laboratory described the onset of the mucosal and systemic immunity\nin cattle not only after FMDV aerosol infection but also after systemic vaccination, showing that the response is independent of the initial route of contact with the virus. Despite this, the\ncontribution of each immune mechanism implicated in the immune response is not clear yet. The present work is based on the hypothesis that the systemic antibodies circulating after a passive\nimmunization in cattle are sufficient to prevent disease generalization after oronasal infection and in absence of additional immune mechanisms. To this end, a series of experiments were initially carried out to adjust the conditions for the\npassive immunization against FMD in seronegative calves. In these procedures, calves sera from\ncattle vaccinated with commercial tetravalent formulations were used. From these results, the\nvolume of serum required to make the passive immunization was determined, as well as the\nadministration protocols and the time available to perform the subsequent infections in the passively immunized animals. For the final experiment, naïve animals (n=8) received one dose of a single-oil-emulsion\nmonovalent vaccine containing FMDV O1/Campos strain. We used two different preparations of\nFMDV- specific immune serum, obtained at 7 and 26 days post-vaccination (dpv), differing therefore in the immunoglobulin isotype composition and seroneutralization titers. Serum 7 dpv\npool had a titer of neutralizing antibodies of 1.6 and the isotype predominantly on its composition\nwas IgM, while titer of serum 26 dpv pool was 2.7 and both subtypes- IgG1 and IgG2- were detected in the pool and in less concentration IgM. After passive immunization, animals were infected by oronasal infection with FMDV O1C strain and these results were compared with\nanimals infected 7 and 26 days after vaccination.\nOur results demonstrated that systemic antibodies were enough to prevent the disease generalization only in the case of animals transferred with serum 26 dpv, since animals transferred with serum 7 dpv showed clinical symptoms of the disease after oronasal infection. This might\nsuggest that in absence of other preexisting adaptive immune mechanisms, circulating antibodies\nare able to prevent the progress of the disease despite there is a threshold titer of antibodies below\nwhich the disease is triggered after oronasal infection. Animals infected after vaccination were all protected, including the animal vaccinated and\ninfected 7 dpv even though when the neutralizing antibody titers were similar to those of the animals passively immunized with serum 7 dpv and which showed clinical symptoms after oronasal infection. The study of post-infection antibody responses, both systemic and mucosal,\nindicated that vaccination promoted the generation of a rapid antibody response after exposure to\nthe virus, presenting a secondary response profile. In both cases, those infected at 7 dpv or at 26\ndpv showed rapid changes of the predominant isotype of the FMDV-specific immunoglobulins, as\nwell as an increase in antibody titers and avidity in sera obtained post-infection. Interestingly, these\nobservations were verified both at the systemic and local level, in draining lymph nodes of the respiratory tract. Overall, these results indicate that circulating antibodies may be sufficient to prevent the\ngeneralization of the disease in bovines infected by the oronasal route, even in the absence of other active mechanisms of specific immunity. In turn, the characterization of post-challenge antibody responses, both at systemic and local level, revealed that systemic immunization with\nconventional anti-FMDV vaccines rapidly promoted increases in antibody titers and avidity of the immune serum, accompanied by a change of the isotype profile towards the IgG1 subclass, all changes associated with anamnestic responses against the virus. Interestingly, such protective\nresponses occurred very early after vaccination (7 dpv) and even when the aerogenic infection\nwas performed in the presence of low titers of FMDV-neutralizing antibodies.Fil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Universidad de Buenos Aires. Facultad de Ciencias Veterinarias. Buenos Aires, ArgentinaLa fiebre aftosa (FA) es una enfermedad viral infectocontagiosa de curso agudo que se\ncaracteriza por producir lesiones vesiculares en tejidos de la mucosa oronasal (incluyendo\nlengua, encías y paladar), ubres, espacios interdigitales y rodetes coronarios de las pezuñas de los animales infectados. Su agente etiológico, el virus de la fiebre aftosa (VFA), es un virus perteneciente a la familia Picornaviridae que afecta a animales biungulados, incluyendo por tanto a bovinos, porcinos, caprinos y ovinos domésticos, junto con numerosas especies silvestres que\npueden actuar como reservorios bajo determinadas condiciones ecológicas. La virulencia, el\namplio rango de huéspedes, la diversidad de variantes y la alta capacidad infecciosa y de contagio del VFA, explican su presencia y re-emergencia en diversas partes del mundo y la convierten en un problema sanitario de escala global. La enfermedad genera enormes pérdidas económicas a la industria ganadera debido al cierre obligado de los mercados externos y a pérdidas\nconsiderables en el mercado interno, asociadas a la disminución de la producción, al sacrificio y\nal bloqueo del movimiento de animales. En trabajos previos de nuestro grupo de investigación, se evidenciaron respuestas inmunes de anticuerpos tanto a nivel sistémico como en mucosas, observables luego de la infección con\nVFA, así como de la vacunación sistémica en bovinos, siendo su ocurrencia, por lo tanto,\nindependiente de la ruta inicial de contacto con el antígeno viral. Dentro de este panorama, la\ncontribución relativa a la inmunidad protectora de los diferentes mecanismos inmunes potencialmente implicados en la respuesta generada, es difícil de discernir. La presente tesis\ndoctoral plantea como hipótesis de trabajo que los anticuerpos sistémicos, administrados\nmediante la inmunización pasiva de terneros seronegativos para VFA, son capaces de evitar la\ndiseminación del virus luego de la infección por vía aerógena y en ausencia de otros mecanismos\ninmunes. Para esto, inicialmente se realizaron una serie de experimentos donde se ajustaron las\ncondiciones para la inmunización pasiva contra el VFA en terneros. En estos procedimientos se\nutilizaron plasmas de bovinos vacunados con formulaciones tetravalentes comerciales anti-aftosa\nde serie. Los mismos fueron reunidos en una sola fracción y diferentes volúmenes de esta\npreparación fueron transferidos a terneros seronegativos. Una vez realizado el procedimiento, se midieron diversos parámetros de inmunidad humoral específicos contra el VFA, entre las 0 h y\nlos 30 días post-transferencia. A partir de estos resultados, se determinó el volumen de plasma requerido para llevar a cabo la inmunización pasiva, así como los protocolos de administración y los tiempos adecuados para realizar las infecciones posteriores en los animales pasivamente inmunizados.\nPara el segundo experimento, se utilizaron vacunas monovalentes de la cepa O1/Campos de\nalta carga antigénica, con las que se inmunizaron bovinos seronegativos (n=8). Se obtuvo plasma\nde cuatro de estos animales a los 7 días post-vacunación (dpv) y a los 26 dpv en los cuatro restantes. Así se conformaron dos pooles de plasma inmunes (7 y 26 dpv) que diferían tanto en\nla composición isotípica de las inmunoglobulinas, así como en los títulos de anticuerpos totales y\nneutralizantes anti-VFA. En el caso del pool de plasma de 7 dpv el isotipo predominante detectado\nfue la IgM y el título de anticuerpos neutralizantes fue 1,6; mientras que para el pool de 26 dpv,\nse detectaron ambos subtipos de IgG (1 y 2) y niveles menores de IgM, con un título de anticuerpos neutralizantes de 2,7. Los animales pasivamente inmunizados se infectaron por vía oronasal y estos resultados se compararon con los obtenidos en animales vacunados e infectados a los mismos tiempos post-vacunación (7 y 26 dpv). Nuestros resultados demostraron que los anticuerpos circulantes previenen la generalización\nde la fiebre aftosa solo en el caso de los animales pasivamente inmunizados con plasma de 26\ndpv, ya que los animales que recibieron el plasma de 7 dpv mostraron signos clínicos de la\nenfermedad luego de la infección aerógena. Esto indicaría que, en ausencia de otros mecanismos\ninmunitarios adaptativos preexistentes, los anticuerpos circulantes en sangre efectivamente son\ncapaces de evitar el desarrollo de la enfermedad, aunque existe un umbral de título de anticuerpos por debajo del cual se desencadena la enfermedad luego de la infección oronasal. Para el caso de los animales vacunados, se obtuvo una protección total de los mismos, tanto\nen los infectados a los 7 como a los 26 dpv. Esto ocurrió aun cuando el animal vacunado 7 días\nantes de la infección presentaba, al momento del desafío, niveles de anticuerpos sistémicos\nneutralizantes similares a los de los animales inmunizados pasivamente con plasma de 7 dpv y\nque mostraron signos clínicos de fiebre aftosa post-infección. El estudio de las respuestas de\nanticuerpos post-infección, tanto a nivel sistémico como en mucosas respiratorias, indicó que la vacunación promovió la generación de una respuesta de anticuerpos rápida tras la exposición al virus, presentando la misma un perfil de respuesta de tipo secundaria. En ambos casos, los infectados a los 7 dpv o a los 26 dpv, mostraron rápidos cambios de los isotipos predominantes\nde las inmunoglobulinas VFA-específicas, así como un aumento de los títulos de anticuerpos y de la avidez en los sueros obtenidos post-infección. Interesantemente, estas observaciones se\nverificaron tanto a nivel sistémico como local, en linfonódulos drenantes del tracto respiratorio.\nEn conjunto estos resultados indican que los anticuerpos circulantes pueden ser suficientes\npara evitar la generalización de la enfermedad en bovinos infectados por la vía oronasal, aun en ausencia de otros mecanismos activos de inmunidad específica. A su vez, la caracterización de\nlas respuestas de anticuerpos posteriores al desafío, tanto a nivel sistémico como local, reveló\nque la inmunización sistémica con vacunas convencionales anti-aftosa promovió rápidamente un\naumento del título de anticuerpos, así como de la avidez de los sueros inmunes y la modificación\nen los isotipos en las inmunoglobulinas predominantes, todos cambios asociables a respuestas anamnésicas contra el virus. Se resalta el carácter protector de que estos procesos frente al\nestablecimiento de la enfermedad, y el hecho que los mismos se verificaron en tiempos muy cercanos a la vacunación (7 dpv) y aun cuando la infección aerógena se realizó en presencia de títulos bajos de anticuerpos neutralizantes

Systemic Foot-and-Mouth Disease Vaccination in Cattle Promotes Specific Antibody-Secreting Cells at the Respiratory Tract and Triggers Local Anamnestic Responses upon Aerosol Infection

Foot-and-mouth disease (FMD) is a highly contagious viral disease affecting biungulate species. Commercial vaccines, formulated with inactivated FMD virus (FMDV), are regularly used worldwide to control the disease. Here, we studied the generation of antibody responses in local lymphoid tissues along the respiratory system in vaccinated and further aerosol-infected cattle. Animals immunized with a high-payload monovalent FMD vaccine developed high titers of neutralizing antibodies at 7 days postvaccination (dpv), reaching a plateau at 29 dpv. FMDV-specific antibody-secreting cells (ASC), predominantly IgM, were evident at 7 dpv in the prescapular lymph node (LN) draining the vaccination site and in distal LN draining the respiratory mucosa, although in lower numbers. At 29 dpv, a significant switch to IgG1 was clear in prescapular LN, while FMDV-specific ASC were detected in all lymphoid tissues draining the respiratory tract, mostly as IgM-secreting cells. None of the animals (n = 10) exhibited FMD symptoms after oronasal challenge at 30 dpv. Three days postinfection, a large increase in ASC numbers and rapid isotype switches to IgG1 were observed, particularly in LN-draining virus replication sites already described. These results indicate for the first time that systemic FMD vaccination in cattle effectively promotes the presence of anti-FMDV ASC in lymphoid tissues associated with the respiratory system. Oronasal infection triggered an immune reaction compatible with a local anamnestic response upon contact with the replicating FMDV, suggesting that FMD vaccination induces the circulation of virus-specific B lymphocytes, including memory B cells that differentiate into ASC soon after contact with the infectiveInstituto de VirologíaFil: Pega, Juan Franco. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Schammas, Juan Manuel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Malacari, Darío Amilcar. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Rodríguez, L.L. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Borca, Manuel Victor. USDA. Agricultural Research Service. Plum Island Animal Disease Center; Estados UnidosFil: Perez Filgueira, Daniel Mariano. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Aprendizajes y prácticas educativas en las actuales condiciones de época: COVID-19

“Esta obra colectiva es el resultado de una convocatoria a docentes, investigadores y profesionales del campo pedagógico a visibilizar procesos investigativos y prácticas educativas situadas en el marco de COVI-19. La misma se inscribe en el trabajo llevado a cabo por el equipo de Investigación responsable del Proyecto “Sentidos y significados acerca de aprender en las actuales condiciones de época: un estudio con docentes y estudiantes de la educación secundarias en la ciudad de Córdoba” de la Facultad de Filosofía y Humanidades. Universidad Nacional de Córdoba. El momento excepcional que estamos atravesando, pero que también nos atraviesa, ha modificado la percepción temporal a punto tal que habitamos un tiempo acelerado y angustiante que nos exige la producción de conocimiento provisorio. La presente publicación surge como un espacio para detenernos a documentar lo que nos acontece y, a su vez, como oportunidad para atesorar y resguardar las experiencias educativas que hemos construido, inventado y reinventando en este contexto. En ella encontrarán pluralidad de voces acerca de enseñar y aprender durante la pandemia. Este texto es una pausa para reflexionar sobre el hacer y las prácticas educativas por venir”.Fil: Beltramino, Lucia (comp.). Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Filosofía y Humanidades. Escuela de Archivología; Argentina

Interferon lambda protects cattle against bovine viral diarrhea virus infection

Interferon lambda (IFN-λ) plays an important role in inducing an antiviral state in mucosal surfaces and has been used as an effective biotherapeutic against several viral diseases. Here we performed a proof of concept study on the activity of a biologically active recombinant bovine IFN-λ (rIFN-λ) produced in eukaryotic cells against Bovine Viral Diarrhea Virus (BVDV) in cattle. We first confirmed the lack of toxicity of different concentrations of rIFN-λ in bovine peripheral blood cells and the safety of its subcutaneous application in calves in doses up to 12 IU/kg. The antiviral activity of the rIFN-λ against BVDV was assessed in calves that were inoculated with 6 IU/kg of rIFN-λ (n = 4) or mock-treated (n = 2) two days before and after challenge with a BVDV type-2 non-cytopathic strain. Mock-treated animals developed respiratory disease, shedded the virus from 4 to 7 days post-infection (dpi) and had viremia between 4 and 14 dpi. Conversely, calves treated with rIFN-λ did not develop clinical symptoms. The virus was not found in nasal secretions or sera. Only one animal had a positive viral RNA detection in serum at 7 dpi. All infected animals treated with rIFN-λ increased systemic type-I IFNs levels at 4 dpi. The antiviral treatment induced an earlier onset of the anti-BVDV neutralizing antibodies. Altogether, these results constitute the proof-of-principle of bovine IFN-λ as an antiviral biotherapeutic to protect cattle against the clinical disease caused by BVDV.Instituto de VirologíaFil: Quintana, María Eugenia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Cardoso, Nancy Patricia. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Pereyra Walter Rodrigo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Estación Experimental Agropecuaria Salta; ArgentinaFil: Barone, Lucas Jose. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Mansilla, Florencia Celeste. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Turco Cecilia Soledad. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Tecnológicas; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria (INTA). Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentin

Systemic antibodies administered by passive immunization prevent generalization of the infection by foot-and-mouth disease virus in cattle after oronasal challenge

The role of passively transferred sera in the protection against aerogenous foot-and-mouth disease (FMD) virus infection in cattle was evaluated using vaccine-induced immune serum preparations obtained at 7 and 26 days post-vaccination (dpv). We showed that circulating antibodies were sufficient to prevent disease generalization after oronasal infection in animals passively transferred with 26-dpv serum but not with the 7-dpv serum. Conversely, conventional FMD vaccination provided clinical protection at 7 dpv, promoting fast and robust antibody responses upon challenge and even though antibody titers were similar to those found in animals passively immunized with 7-dpv serum. These results demonstrate that presence of antigen-specific antibodies is critical to prevent the dissemination of the virus within the animal. Conventional FMD vaccination additionally promoted the deployment of rapid, high titer and isotype-switched antibody responses at systemic and mucosal levels after infection, thus conferring protection even in the presence of low pre-challenge antibody titers.Fil: Barrionuevo, Florencia Mariel. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Di Giacomo, Sebastián. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Bucafusco, Danilo. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; ArgentinaFil: Ayude, Andrea. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Schammas, Juan. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Miraglia, Maria Cruz. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Capozzo, Alejandra Victoria. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; ArgentinaFil: Borca, Manuel V.. United States Department of Agriculture; Estados UnidosFil: Pérez Filgueira, Daniel Mariano. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas; Argentina. Instituto Nacional de Tecnología Agropecuaria. Centro de Investigación en Ciencias Veterinarias y Agronómicas. Instituto de Virología; Argentin

Desarrollo de un banco de ítems para medir conocimiento en estudiantes universitarios

Measurement in the educational field of academic achievement of university students is considered empirical and quantitative. Hence, the main purpose of such assessments is to control educational systems and evaluation based on objective criteria (Long, Wendt, & Dunne, 2011). The aim of this article was to develop an Item Bank for General Knowledge Test composed by 20 specific domains of knowledge. Considering that an effective construction of a test requires organization and systematization of activities, progress in six domains are presented. The sample was composed by 6,794 university students. 1,526 items from different domains were evaluated. To calibrate the items, a nonlinear exploratory factorial analysis was performed. Difficulty and discrimination indices were obtained according to the classical theory of tests and the item response theory, and reliability indices as well. It was observed that 68% of the items have moderate difficulty and 32% of them have high or low difficulty. Internal consistency of the instrument showed high reliability values, up to .70. Further studies are needed in order to expand the item sample, and review items that showed inadequate indexes on discrimination, difficulty and reliability. This instrument allows measuring academic performance on an interval scale level and reducing the misclassification of students.La medición en el ámbito educativo del rendimiento académico de los estudiantes universitarios es considerada empírica y cuantitativa. De allí que el propósito principal de dichas evaluaciones consiste en el control de los sistemas educativos y la evaluación a partir de criterios objetivos (Long, Wendt, & Dunne, 2011). Este trabajo apunta a desarrollar un banco de ítems para el Test de Conocimiento General compuesto de 20 dominios específicos. Se presentan avances realizados en seis dominios (psicología, biología, historia, literatura, economía y leyes). La muestra estuvo compuesta por 6.794 estudiantes. Se evaluaron 1.526 ítems de distintos dominios. Se realizó un análisis factorial exploratorio no lineal, se obtuvieron los índices de dificultad y discriminación según la teoría clásica de los test y la teoría de respuesta al ítem; también se obtuvieron índices de fiabilidad. El 68% presenta dificultad moderada y 32% un índice de dificultad alto o bajo. Sobre los índices de confiabilidad en la mayoría de los dominios se obtuvieron valores satisfactorios superiores a ,70. Se concluye la necesidad de revisar los ítems que no cumplieron estos criterios y ampliar la muestra. Este instrumento permitirá reducir los errores de clasificación de los alumnos y medir el desempeño académico con una escala de intervalo

Development of an Item Bank to Measure Knowledge in University Students

La medición en el ámbito educativo del rendimiento académico de los estudiantes universitarios es considerada empírica y cuantitativa. De allí que el propósito principal de dichas evaluaciones consiste en el control de los sistemas educativos y la evaluación a partir de criterios objetivos (Long, Wendt, & Dunne, 2011). Este trabajo apunta a desarrollar un banco de ítems para el Test de Conocimiento General compuesto de 20 dominios específicos. Se presentan avances realizados en seis dominios (psicología, biología, historia, literatura, economía y leyes). La muestra estuvo compuesta por 6.794 estudiantes. Se evaluaron 1.526 ítems de distintos dominios. Se realizó un análisis factorial exploratorio no lineal, se obtuvieron los índices de dificultad y discriminación según la teoría clásica de los test y la teoría de respuesta al ítem; también se obtuvieron índices de fiabilidad. El 68% presenta dificultad moderada y 32% un índice de dificultad alto o bajo. Sobre los índices de confiabilidad en la mayoría de los dominios se obtuvieron valores satisfactorios superiores a ,70. Se concluye la necesidad de revisar los ítems que no cumplieron estos criterios y ampliar la muestra. Este instrumento permitirá reducir los errores de clasificación de los alumnos y medir el desempeño académico con una escala de intervalo.Fil: Cupani, Marco. Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas. Centro Científico Tecnológico Conicet - Córdoba. Centro de Investigaciones y Estudio sobre Cultura y Sociedad. Centro de Investigaciones de la Facultad de Psicología - Grupo Vinculado CIPSI; ArgentinaFil: Ghio, Fernanda Belén. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Leal Denis, Maria Florencia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Giraudo, Gimena Mariel. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Castro Zamparella, Tatiana. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Piumatti, Gisella. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Casalotti, Antonella Belén. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Ramírez, Juan Claudio. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Andrés Arranz, María. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Farías, Analía Norma. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Padilla, Natalia. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; ArgentinaFil: Barrionuevo, Leandro. Universidad Nacional de Córdoba. Facultad de Psicología; Argentin